检索结果-南通市图书馆

作者：崔洪银河北医科大学

学位级别：硕士

目的:循环无细胞DNA(circulating cell-free DNA, cfDNA)是存在于体液中的碎裂的核酸片段。本实验利用人卵巢癌细胞株SKOV3建立荷人卵巢癌裸鼠移植模型。采用半定量PCR的方法,检测荷人卵巢癌裸鼠血清和腹水中无细胞DNA的含量,并与肿瘤... 详细信息

目的:循环无细胞DNA(circulating cell-free DNA, cfDNA)是存在于体液中的碎裂的核酸片段。本实验利用人卵巢癌细胞株SKOV3建立荷人卵巢癌裸鼠移植模型。采用半定量PCR的方法,检测荷人卵巢癌裸鼠血清和腹水中无细胞DNA的含量,并与肿瘤的重量、凋亡率进行对比,研究人卵巢癌移植瘤裸鼠模型血清及腹水中cfDNA的血流动力学改变,探讨cfDNA在卵巢上皮性癌临床诊断及病情监测中的意义。通过检测荷瘤裸鼠经化疗前后血清cfDNA水平的变化规律,并与细胞凋亡进行对比,从而为cfDNA是否可作为无创性的卵巢癌患者病情监测及疗效观察的生物学指标提供理论依据。方法:将人卵巢癌细胞株SKOV3种植于6-8周龄雌性裸鼠的皮下及腹腔中,观察裸鼠成瘤和肿瘤生长情况。分别于14天(荷瘤1组),21天(荷瘤2组)和30天(荷瘤3组)取皮下种植瘤模型血清及肿瘤,14天取腹水种植瘤模型血清和腹水。皮下种植瘤模型化疗组在种植后第30天用顺铂3mg/kg化疗1次,于化疗后第1天(化疗1组),第3天(化疗2组)和第10天(化疗3组)取血清及肿瘤。用QIAGEN微量提取试剂盒提取血清及腹水中游离的DNA片段。我们针对临床常用的诊断和监测指标血清CA125蛋白的基因序列设计了扩增产物为101bp、261bp、189bp和336bp大小的四组DNA片段引物。用半定量PCR方法扩增β-actin, CA125-DNA片段和ALU重复片段。肿瘤相关cfDNA的量用ALU247/ALU115来表示,CA125-cfDNA的相对水平用CA125 DNA/β-actin来表示。检测荷瘤1、2、3组;化疗1、2、3组和腹水组的血清及腹水组腹水中cfDNA的含量,并与相应的肿瘤重量进行对比。用TUNNEL法检测荷瘤3组及化疗1、2、3组组织细胞的原位凋亡,将其凋亡率与相应的cfDNA含量进行相关性分析。试验结果采用SPSS13.0统计软件进行独立样本t检验,单因素方差分析,和spearman相关分析进行统计学处理。结果:1各组基因片段在人卵巢癌裸鼠移植瘤模型血清及腹水中的表达情况在人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的血清及腹水中均能检测到人类特有的基因片段β-actin、ALU115、ALU247以及CA125-cfDNA中的101bp片段。其中78例卵巢癌血清标本中,有41例能检测到CA125-cfDNA的261bp基因片段,189bp片段含量很少,336bp未能检测,三个指标相应的β-actin均能检测出来。故本实验所作数据分析中的CA125-cfDNA仅就101bp片段进行比较和讨论。3AO组(种植3AO细胞株后30天取材)与SKOV3瘤负荷3组(种瘤时间相同)血清中的肿瘤相关cfDNA的含量没有显著性差异(t=0.193,P>0.05),CA125-cfDNA的含量没有显著性差异(t=-1.423,P>0.05)。腹水组荷瘤裸鼠腹水中的肿瘤相关cfDNA的含量与血清中的含量相比没有显著性差异(t=1.412,P>0.05),腹水中的CA125-cfDNA的含量与血清中的含量没有显著性差异(t=3.535,P>0.05)。(Table 1)。2各组人卵巢癌裸鼠移植瘤模型血清中cfDNA水平的变化情况及其与瘤负荷的关系分别于皮下种植SKOV3卵巢癌细胞株后14天(荷瘤1组),21天(荷瘤2组)和30天(荷瘤3组)取人卵巢癌裸鼠移植瘤模型血清中的CA125-cfDNA及肿瘤相关cfDNA,结果发现血清中的CA125-cfDNA的表达各组间有差异(F=15.191,P裸鼠血清中的CA125-cfDNA 101bp片段及肿瘤相关cfDNA与肿瘤重量呈正相关(CA125-cfDNA 101bp片段的R=0.830, P裸鼠血清CA125-cfDNA及肿瘤相关cfDNA的值在化疗后第1天达最高水平,第3天有下降趋势,但没有统计学意义,(CA125-cfDNA的P=0.932,肿瘤相关cfDNA的P=0.068,均>0.05)。在化疗第10天其值明显低于化疗前水平,差异有显著性(CA125-c

关键词：卵巢上皮性癌荷人卵巢癌裸鼠循环无细胞DNA 循环无细胞CA125-DNA 半定量PCR

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乳源免疫调节肽抗人卵巢癌的实验研究

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实用妇产科杂志 2009年第10期25卷 606-608,I0001页

作者：顾芳秦宜德董华胜王超周艳江良梁安徽医科大学安徽合肥230032

目的:通过荷人卵巢癌裸鼠模型,研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)的抑癌作用。方法:建立荷人卵巢癌裸鼠模型,皮下接种肿瘤细胞后,分别用0.9%氯化钠液(NS组),低剂量PGPIPN(2.5×10-4mg/L)(PGPIPN1组),高剂量PGPIPN(5.0×10-4mg/L)(PGPIPN2组),0.2ml隔日腹腔注射;氟尿嘧啶(5-Fu)(30mg/kg·d)(5-Fu组)通过腹腔注射。种植5周后处死裸鼠,测量荷人卵巢癌裸鼠的体重、瘤重、脾重,计算抑瘤率、脾指数,观察PGPIPN对卵巢癌肿瘤的抑制作用,并通过HE染色、DNA凝胶电泳分析技术观察PGPIPN对卵巢癌细胞及其DNA的影响。结果:荷人卵巢癌裸鼠经PGPIPN治疗后出现肿瘤体积缩小,PGPIPN2组抗瘤效果优于PGPIPN1组,同时还能改善荷人卵巢癌裸鼠的体质,提高荷人卵巢癌裸鼠的生存质量,增强SKOV3裸鼠免疫功能。组织病理学检查发现:PG-PIPN1组可见小片状瘤细胞发生凋亡,PGPIPN2组可见瘤细胞大片发生凋亡。PGPIPN组的瘤组织中提取的DNA进行琼脂糖电泳均出现特征性DNA梯形电泳条带。结论:PGPIPN有明显的抑瘤效应,可诱导人卵巢癌细胞发生凋亡。这为卵巢癌的治疗提供了新方法。

关键词：免疫调节肽荷人卵巢癌裸鼠人卵巢癌细胞细胞凋亡

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免疫调节肽抗人卵巢癌及其机制的研究

免疫调节肽抗人卵巢癌及其机制的研究

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作者：顾芳安徽医科大学

学位级别：硕士

目的通过荷人卵巢癌(SKOV3)裸鼠模型,研究乳源免疫调节肽(immunodulating peptide)的抑癌作用,并从细胞凋亡(Apoptosis)及相关基因bcl-2、caspase-3的表达情况等探讨其可能的机制。方法利用人卵巢癌细胞株(人卵巢浆液性乳头状囊腺癌,SKO... 详细信息

目的通过荷人卵巢癌(SKOV3)裸鼠模型,研究乳源免疫调节肽(immunodulating peptide)的抑癌作用,并从细胞凋亡(Apoptosis)及相关基因bcl-2、caspase-3的表达情况等探讨其可能的机制。方法利用人卵巢癌细胞株(人卵巢浆液性乳头状囊腺癌,SKOV3)建立荷人裸鼠模型。24只BALB/cAnN-nu/nu(BALB/c Nude)近交系(Inbred strain)健康雌性裸鼠被随机分为对照组(NS)、低剂量组(PGPIPN1)、高剂量组(PGPIPN2)和5-氟尿嘧啶组(5-fu),分别用生理盐水,低剂量免疫调节肽(0.25mg/ml),高剂量免疫调节肽(0.50mg/ml),5-氟尿嘧啶(30mg/kg/d)通过腹腔注射,治疗荷人卵巢癌裸鼠,五周后处死裸鼠,测量荷瘤裸鼠的体重、瘤重、脾重,计算抑瘤率、脾指数,观察其疗效,并用流氏细胞术、HE染色、免疫组化、RT-PCR、DNA分析技术、放射免疫技术(RIA),观察乳源免疫调节肽对卵巢癌细胞抑制作用,并研究其诱导细胞凋亡等作用机制。结果1.荷人卵巢癌裸鼠经免疫调节肽治疗后出现肿瘤体积缩小,高剂量免疫调节肽抗瘤效果优于低剂量组,同时还能改善荷瘤裸鼠的体质,提高荷瘤裸鼠的生存质量,增强荷瘤鼠免疫功能。2.运用放射免疫方法测定:对照组裸鼠血清中IGF-1明显高于免疫调节肽高低剂量组。3.组织病理学发现:免疫调节肽低剂量组可见小片状瘤细胞坏死和发生凋亡,高剂量组可见瘤细胞大片坏死和发生凋亡。4.低剂量组和高剂量组瘤组织中提取的DNA进行琼脂糖电泳均出现特征性DNA梯状电泳条带。5.流氏细胞仪图显示低剂量组、高剂量组呈现明显的亚二倍凋亡峰,在对照组凋亡率为3%,在低剂量组为16%,而在高剂量组为49%。6.免疫组化和RT–PCR测定显示应用免疫调节肽治疗后,促凋亡蛋白caspase-3在高剂量组中表达最高,低剂量组次之,在对照组中最低,bcl-2则在对照组表达最高,在免疫调节肽低剂量组、高剂量组表达依次降低,RT-PCR半定量检测结果与免疫组化相一致,表明免疫调节肽诱导的人卵巢癌细胞(SKOV3)凋亡过程可能与凋亡相关基因bcl-2下调、caspase-3上调有关。结论免疫调节肽有明显的抑瘤效应,可诱导人卵巢癌细胞发生凋亡。血清中IGF-1含量也发生了变化。caspase-3,bcl-2凋亡相关基因可能参与了免疫调节肽诱导的人卵巢癌细胞(SKOV3)凋亡过程,免疫调节肽通过下调bcl-2基因表达,上调caspase-3基因表达等机制诱导细胞凋亡。

关键词：免疫调节肽荷人卵巢癌裸鼠 SKOV3

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乳源免疫调节肽（PGPIPN）抗人卵巢癌的实验研究

乳源免疫调节肽（PGPIPN）抗人卵巢癌的实验研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会

作者：顾芳秦宜德董华胜王超周艳江良梁安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室

＜正＞乳源免疫调节肽是一组来源于乳蛋白的短肽（3～9个氨基酸）,从牛酪蛋白酶解产物中分离出来的六肽（Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn,PGPIPN）是最为代表性的免疫调节肽。本研究旨在探讨乳源免疫调节肽对卵巢癌细胞的抑制作用,并观察了免... 详细信息

＜正＞乳源免疫调节肽是一组来源于乳蛋白的短肽（3～9个氨基酸）,从牛酪蛋白酶解产物中分离出来的六肽（Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn,PGPIPN）是最为代表性的免疫调节肽。本研究旨在探讨乳源免疫调节肽对卵巢癌细胞的抑制作用,并观察了免疫调节肽诱导肿瘤细胞

关键词：乳源免疫调节肽荷人卵巢癌裸鼠 SKOV3 细胞凋亡流氏细胞仪

来源： cnki会议评论

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