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作者：梅莹莹北京中医药大学

学位级别：硕士

本论文分为六章:第一章为基于药物体系的连翘饮药物提取工艺研究;第二章为基于药物体系的连翘饮药物大孔吸附树脂分离富集工艺研究;第三章为基于总成分含量的连翘饮药物制备物质量表征研究;第四章为基于有效指标性成分含量的连翘饮药物... 详细信息

本论文分为六章:第一章为基于药物体系的连翘饮药物提取工艺研究;第二章为基于药物体系的连翘饮药物大孔吸附树脂分离富集工艺研究;第三章为基于总成分含量的连翘饮药物制备物质量表征研究;第四章为基于有效指标性成分含量的连翘饮药物制备物质量表征研究;第五章为基于药学-药效的连翘饮药物制备物质量表征关联分析研究;第六章为总结与讨论。第一章基于药物体系的连翘饮药物提取工艺研究本论文在前期实验的基础上,以药物体系所体现的自然性、协同性、亲和性为线索发现与确定连翘饮抗菌药物体系。并根据药物体系药物的理化性质,选择总酚、总环烯醚萜及具有代表性的有效指标性成分(栀子苷、连翘酯苷A、甘草酸、升麻素、连翘苷)导向建立连翘饮药物的制备工艺。采用四因素三水平正交试验设计,以总酚、总环烯醚萜及有效指标性成分(栀子苷、连翘酯苷A、甘草酸、升麻素、连翘苷)的提取量为指标,对提取溶剂、提取次数、提取时间、溶剂倍量四个因素进行了考量,系统优选连翘饮药物提取工艺参数,并结合实际生产,确定最佳提取工艺为A2B3C3D2,即D2倍量A2乙醇回流提取B3次,每次C3小时。以最佳提取工艺制备三批样品,三批提取工艺验证结果为:平均出膏率为31.18%,总酚平均含量为22.55%,平均提取率为97.45%,总环烯醚萜平均含量为5.00%,平均提取率为91.74%,栀子苷平均含量为3.58%,平均提取率为95.17%,连翘酯苷A平均含量为0.32%,平均提取率为82.55%,甘草酸平均含量为1.19%,平均提取率为74.01%,连翘苷平均含量为0.11%,平均提取率为86.17%,升麻素平均含量为0.12%,平均提取率为94.70%。表明本连翘饮药物提取工艺稳定、可行。第二章基于药物体系的连翘饮药物大孔吸附树脂分离富集工艺研究对连翘饮药物大孔吸附树脂分离富集工艺进行了研究。以总酚和总环烯醚萜的最大吸附量和吸附-解吸率为考察指标,优选出用于富集纯化连翘饮抗菌药物的大孔吸附树脂;再分别对上样条件、除杂条件、总环烯醚萜部位洗脱条件及总酚部位洗脱条件等参数进行考量。最终建立了连翘饮药物大孔吸附树脂分离富集工艺:连翘饮复方饮片,D2倍量A2乙醇加热回流提取B3次,每次C3小时,合并提取液,减压回收乙醇、浓缩至原提取液的五分之一(60℃),加水分散,制成浓度为N1的上样液,D型大孔树脂,湿法装柱,径高比为J2,上样量与树脂体积比为B3,动态吸附,吸附流速为V2,吸附结束后,用SB3倍水洗脱除杂,水洗流速为SV2,然后用TC2乙醇洗脱,流速为TV3,洗脱MBV,收集TC2乙醇洗脱液,减压回收乙醇、浓缩、真空干燥,即得总环烯醚萜部位。再用FC4乙醇洗脱,流速为FV3,洗脱NBV,收集FC4乙醇洗脱液,减压回收乙醇、浓缩、真空干燥,即得总酚部位。三批工艺验证结果为:TC2乙醇洗脱部位平均出膏率为4.12%,总环烯醚萜平均含量为34.22%,平均转移率为87.95%;栀子苷平均含量为25.55%,平均转移率为92.18%;FC4乙醇洗脱部位平均出膏率为6.29%,连翘酯苷A平均含量为1.55%,平均转移率为71.84%;甘草酸平均含量为4.84%,平均转移率为60.88%;升麻素平均含量为0.56%,平均转移率为87.12%;连翘苷平均含量为0.54%,平均转移率为81.89%。TC2乙醇洗脱部位中总酚平均含量为35.09%,FC4乙醇洗脱部位中总酚平均含量为64.71%,2个洗脱部位总酚平均总转移率为77.58%。表明本连翘饮药物制备工艺稳定、可行。第三章基于总成分含量的连翘饮药物制备物质量表征研究基于药物体系,首次建立了连翘饮药物制备物总酚成分的可见分光光度定量分析方法。对三氯化铁-铁氰化钾显色条件进行考察,对显色反应进行方法学考察,以连翘酯苷A为对照品,建立连翘酯苷A的线性回归方程为Y=0.1307X+0.2721,r=0.9996(n=9)。表明连翘酯苷A在0.1512-4.6872μg/mL范围内吸光度(Abs)与浓度(μg/mL)具有良好的线性关系,平均加样回收率为98.37%,RSD=2.58%(n=6)。本方法准确、可靠、稳定性好,可作为基于总酚成分含量的连翘饮药物制备物的质量表征方法。并应用所建立的总酚含量测定方法基于总酚成分含量对连翘饮稀醇提取物、连翘饮TC2乙醇洗脱部位、连翘饮FC4乙醇洗脱部位及连翘饮复方饮片进行质量表征。测得三批连翘饮TC2乙醇洗脱部位中总酚的平均含量为34.75%,RSD=2.45%,连翘饮FC4乙醇洗脱部位中总酚的平均含量为64.71%,RSD=1.55%,连翘饮稀醇提取物总酚的平均含量为22.55%,RSD=2.57%,连翘饮复方饮片总酚的平均含量为7.11%,RSD=0.56%。以栀子苷含量折算出具有相同紫外吸收的同类物质的总含量,即栀子苷类成分的含量

关键词：分离富集工艺连翘饮提取工艺药物体系药物制备物药学-药效关联分析质量表征

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女贞子系列制备物药物质量表征研究

女贞子系列制备物药物质量表征研究

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作者：杨书娟北京中医药大学

学位级别：硕士

文献综述对女贞子的基原鉴别、性状鉴别、化学成分、药理作用4个方面的研究现状,神经系统疾病(偏头痛、AD、失眠)的发病机制、临床治疗药物的研究现状,女贞子及其有效成分基于上述3种疾病的药理作用进行了系统阐述。在上述参考文献中未... 详细信息

文献综述对女贞子的基原鉴别、性状鉴别、化学成分、药理作用4个方面的研究现状,神经系统疾病(偏头痛、AD、失眠)的发病机制、临床治疗药物的研究现状,女贞子及其有效成分基于上述3种疾病的药理作用进行了系统阐述。在上述参考文献中未见女贞子相关制备物在神经系统疾病的作用机制和有效物质基础方面的相关报道。目的:获得女贞子在不同病理模型下的最佳制备物药物形式,确定其有效物质基础;获得女贞子制备物药物的药学质量表征方法和女贞子制备物药物的质量控制门径。方法:以药物体系导向药物创新,基于课题组前期药物体系导向制备工艺的研究基础,以关联神经疾病的不同病理状态下的药效为指标,利用紫外可见分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、特征图谱技术等手段对女贞子系列制备物进行定性定量分析,并对女贞子系列制备物的药学与药效质量表征进行系统的关联分析。对基准饮片和14批女贞子饮片的成分类型总含量和指标性成分含量进行关联分析,综合精准评价出饮片质量的优良度,指导如何筛选女贞子饮片来制备更好的制备物以获得治疗相应病理疾病的最佳药效与最佳药物。结果:第一部分女贞子系列制备物药学质量表征研究引用课题组李娟学位论文中的制备工艺,取女贞子粗粉7kg投料,通过提取、碱转化、大孔树脂富集制备得到4个女贞子制备物。分别得到非转化提取物(FZT)、非转化富集物(FZF)、碱转化提取物(ZT)、碱转化富集物(ZF),课题组前期制备了纯化物(CH),并对女贞子各制备物进行了预试实验。优化了课题组周文娟学位论文第四章第一节香草醛-高氯酸显色法并测定女贞子系列制备物总萜含量。以H为对照品表征总萜含量,其在0.0044～0.0219g/mL的浓度范围内与吸光度呈现良好的线性关系,平均加样回收率为98.88%,RSD为2.90%。方法学实验结果表明本方法准确、稳定,运用此方法测定了制备物FZT、FZF、ZT、ZF、CH中总萜含量分别约为 Z15%～Z14%、Z10%～Z11%、Z8%～Z7%、Z5%～Z6%、Z1%～Z3%。优化了课题组周文娟学位论文第四章第三节中三氯化铁-铁氰化钾显色法测定女贞子系列制备物总酚含量。以A为对照品表征总酚含量,其在0.001116～0.00558mg/mL的浓度范围内与吸光度呈现良好的线性关系,平均加样回收率为101.05%,RSD为2.65%。方法学实验结果表明本方法准确、稳定,运用此方法对各制备物FZT、FZF、ZT、ZF、CH中总酚的含量进行了测定,其总酚含量分别约为f13%～f14%、f12%～f10%、f7%～f8%、f5%～f6%、f1%～f3%。首次建立了 HPLC同时测定女贞子药物中7个有效指标性成分含量的测定方法,B的线性回归方程为:Y=883894X+1337(r=0.9999),线性范围是0.0618μg～1.854μg,平均加样回收率为101.15%,RSD为2.20%;A的线性回归方程为:Y=285631X-26612(r=0.9999),线性范围是0.505μg～20.2μg,平均加样回收率为100.61%,RSD为1.64%;C的线性回归方程为:Y=694994X-8050(r=0.9998),线性范围是0.051μg～2.04μg,平均加样回收率为102.93%,RSD为1.91%;D的线性回归方程为:Y=1385037X+2446(r=0.9999),线性范围是0.121μg～2.904μg,平均加样回收率为99.51%,RSD为2.02%;E的线性回归方程为:Y=1545488X-16426(r=0.9999),线性范围是0.0315μg～5.28μg,平均加样回收率为101.38%,RSD为1.96%;F的线性回归方程为:Y=1633549X-5736(r=0.9998),线性范围是0.0422μg～0.525μg,平均加样回收率为98.55%,RSD为2.46%;G的线性回归方程为:Y=1134978X+408486,(r=1.0000)线性范围是0.612μg～51.0μg,平均加样回收率为97.53%,RSD为1.33%。方法学考察结果表明,本方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,加样回收率符合定量测定要求,测定结果可靠准确,可用于女贞子系列制备物多有效指标性成分含量的质量表征。根据考察的方法,测定了女贞子各制备物多有效指标性成分含量,FZT、FZF、ZT、ZF、CH 中 B 的含量分别约为b13%～b15%、b10%～b12%、b7%～b9%、b4%～b6%、b1%～b3%,A 含量分别约为 a13%～a15%、a10%～a12%、a7%～a9%、a4%～a6%、a1%～a3%,C 分别约为 c13%～c15%、c10%～c12%、c7%～c9%、c4%～c6%、c1%～c3%;FZT、FZF中D含量分别约为d4%

关键词：女贞子质量表征药学-药效关联分析

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银荷方药物质量控制体系研究

银荷方药物质量控制体系研究

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作者：杨元北京中医药大学

学位级别：硕士

银荷方为王永炎院士的临床经验方,由银杏叶、三七、人参、荷叶组成,具有益气通阳,活血通络的功效,主治冠心病,心气不足,心血淤阻证。本课题组前期对银荷方进行了制备工艺研究,建立了银荷方提取工艺和富集工艺,并开展了药效实验关联考量... 详细信息

银荷方为王永炎院士的临床经验方,由银杏叶、三七、人参、荷叶组成,具有益气通阳,活血通络的功效,主治冠心病,心气不足,心血淤阻证。本课题组前期对银荷方进行了制备工艺研究,建立了银荷方提取工艺和富集工艺,并开展了药效实验关联考量研究,结果表明银荷方富集物组合物活血止血作用最强。本论文主题为银荷方药物质量控制体系研究,即进行制备物、组合物与组方药味关联质量控制研究,并结合不同配比的组合物药效考量,通过药学-药效学关联分析,确定具备最佳活血止血作用的药物组合形式与最佳药物质量存在形式,从而建立银荷方药物质量控制体系。本论文共分六章。第一章文献综述对银荷方各组方药味的研究现状进行综述。综述了组方药味的化学成分及药理作用,共引用文献45篇,经文献分析确定出本论文立题。第二章银荷方药物质量控制方法研究采用分光光光度法,建立了制备物及组合物中总酚、总萜、总氨基酸、总生物碱、总内酯含量测定方法。采用HPLC法,建立了制备物及组合物指标性成分qn、kl、in、pr、gg、gr、gb、ne的含量测定方法。建立了系列富集物HPLC特征图谱定性质量控制方法。采用分光光度法,建立了组方药味中总氨基酸、总酚、总生物碱、总萜、总内酯含量测定方法。采用HPLC法,建立了三七中三七素、槲皮素、山奈酚及异鼠李素的含量测定方法及三七酚类成分特征图谱定性质量控制方法;建立了银杏叶中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量测定方法;建立了荷叶中金丝桃苷、异槲皮苷及荷叶碱的含量测定方法及特征图谱定性质量控制方法。第三章银荷方制备物及组合物质量控制研究本章为第二章所建立的质量控制方法的应用,测定了制备物及组合物各有效成分含量及特征图谱,并对制备物及组合物进行了 TLC定性鉴别。测定了富集物Ⅰ中总酚、总氨基酸、三七素的含量。测定了富集物Ⅱ中总酚及qn的含量;建立了富集物Ⅱ HPLC特征图谱,特征图谱应有6个特征峰,以qn为参照物,其中1个峰应与参照峰保留时间相同,与qn参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.540、0.614、0.676、0.776、1.000、1.046（按出峰时间排序）。测定了富集物Ⅲ中总酚、总生物碱、总内酯、总萜、qn、kl、in、pr、gg、gr、gb及ne的含量。建立了富集物Ⅲ HPLC特征图谱,特征图谱Ⅰ（203nm）应有25个特征峰,以pr、gg、gr、gb为参照物,其中4个峰应与参照峰保留时间相同,与gg参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.149、0.209、0.225、0.267、0.296、0.309、0.363、0.400、0.425、0.481、0.529、0.549、0.598、0.621、0.872、0.887、1.000、1.025、1.056、1.152、1.176、1.248、1.323、1.546、1.666（按出峰时间排序）;特征图谱Ⅱ（270nm）应有8个特征峰,以qn、kl、in为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与qn参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为23.449、27.581、29.602、36.195、38.023、39.800、45.884、47.629（按出峰时间排序）。对富集物Ⅲ进行了 T LC定性鉴别。测定了制备比例组合物中总酚、总生物碱、qn、kl、in、pr、gg、gr、gb及ne的含量。对制备比例组合物进行了 TLC定性鉴别。第四章银荷方药味质量控制研究采用第二章所建立的测定方法,测定了不同批次组方药味中各成分含量及特征图谱,并进行关联分析,筛选出关联度较高的药材或饮片。测定了不同批次三七中总酚、总生物碱、总氨基酸、总萜、三七素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量,并进行了关联分析,筛选出关联度较高的药材;测定了三七HPL C特征图谱,特征图谱应有9个特征峰,以槲皮素、山奈酚、异鼠李素为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与槲皮素参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为 0.1606、0.1941、0.5177、0.6495、1.0000、1.1360、1.1528、1.3990、1.4486（按出峰时间排序）。对三七进行了 TLC定性鉴别。测定了不同批次银杏叶中总酚、总内酯、槲皮素、山奈酚、异鼠李素含量,并进行了关联分析,筛选出关联度较高的饮片。测定了银杏叶HPLC特征图谱,特征图谱应有11个特征峰,以槲皮素、山奈酚、异鼠李素为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与槲皮素参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.129、0.177、0.468、0.540、0.627、0.760、0.774、1.000、1.045、1.207、1.253（按出峰时间排序）。对银杏叶进行了 TLC定性鉴别。测定了不同批次荷叶中总酚、总生物碱、金丝桃苷

关键词：银荷方活血止血配伍药效药学-药效关联分析质量控制

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基于抗心肌缺血作用的金花葵制备物药物质量表征分析

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世界科学技术-中医药现代化 2017年第3期19卷 522-528页

作者：谭立孔静冯朵刘璐吕珊张元元石任兵北京中医药大学中药学院/国家中医药管理局中药经典名方有效物质发现重点实验室北京100102 北京市教委中药质量控制技术工程中心北京100102

目的:优选金花葵最佳药物制备物形式,为金花葵抗心肌缺血药物的研究开发提供科学依据。方法:建立HPLC-PDA法测定金花葵制备物有效指标性成分的含量。抗心肌缺血作用考察采用垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型。对金花葵制备物进行基于... 详细信息

目的:优选金花葵最佳药物制备物形式,为金花葵抗心肌缺血药物的研究开发提供科学依据。方法:建立HPLC-PDA法测定金花葵制备物有效指标性成分的含量。抗心肌缺血作用考察采用垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型。对金花葵制备物进行基于药学、药效的药物质量表征及关联分析。结果:所建立HPLC含量测定方法通过方法学验证,平均加样回收率在97.04%-102.44%之间;金花葵3种制备物均表现出不同程度的抗心肌缺血作用,其中富集物抗心肌缺血作用最强,而得率最低、药物用量最小,为金花葵抗心肌缺血药物最佳制备物形式。结论:基于药物体系架构的金花葵制备物富集物,有关药物成分的含量较高、相对比值较为合理,呈现优质药物质量表征。因此,基于药物体系导向药物制备,有针对性地提高有关药物成分含量、探寻其最佳组成比例是提升中药药物药效的关键。

关键词：金花葵制备物抗心肌缺血质量表征药学-药效关联分析

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