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荧光相关谱技术及其应用

激光生物学报 2005年第1期14卷 69-75页

作者：陈同生邢达华南师范大学激光生命科学研究所中国广东广州510631

基于对处于平衡态少量荧光分子集合的强度涨落进行时间平均的技术 ,荧光相关谱 (fluorescencecorrela tionspectroscopy ,FCS)技术最近已经应用于细胞环境过程的研究。FCS优秀的灵敏特性为我们实时测量许多参数提供了途径 ,而且具有快... 详细信息

基于对处于平衡态少量荧光分子集合的强度涨落进行时间平均的技术 ,荧光相关谱 (fluorescencecorrela tionspectroscopy ,FCS)技术最近已经应用于细胞环境过程的研究。FCS优秀的灵敏特性为我们实时测量许多参数提供了途径 ,而且具有快速的时间特性和高空间分辨率。测量的参数包括扩散速率、局部浓度、聚合状态和分子间的相互作用。荧光互相关谱 (fluorescencecross correlationspectroscopy,FCCS)进一步扩展了FCS技术的应用 ,包括在活细胞中的广泛应用。本文介绍了FCS技术的原理。

关键词：荧光相关谱单分子分子聚合动力学特性

荧光相关谱与微流控芯片联用的单分子检测技术

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荧光相关谱与微流控芯片联用的单分子检测技术

第三届全国微全分析系统学术会议

作者：毕睿张普敦董朝青任吉存上海交通大学化学化工学院上海交通大学化学化工学院上海交通大学化学化工学院上海交通大学化学化工学院

＜正＞荧光相关谱（Fluorescence Correlation Spectroscopy,FCS）是通过测定溶液中微区内（通常＜10- 15L）的发光粒子由于随机扩散或化学反应而产生的荧光强度变化,并对所得荧光强度波动函数进行统计分析,从而获得粒子的浓度、化学动... 详细信息

＜正＞荧光相关谱（Fluorescence Correlation Spectroscopy,FCS）是通过测定溶液中微区内（通常＜10- 15L）的发光粒子由于随机扩散或化学反应而产生的荧光强度变化,并对所得荧光强度波动函数进行统计分析,从而获得粒子的浓度、化学动力学参数等相关信息的一种技术;具有检测灵敏度高、检测时间短、对平衡态溶液分子不干扰等特点。我们已经建立了一套FCS单分子检测装置,并已进行了一些研究,取得了较好的结果。

关键词：荧光相关谱微流控芯片单分子检测

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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基于双光子激发的荧光相关谱测量

激光生物学报 2003年第6期12卷 421-425,430页

作者：刘亚丰陈同生骆清铭曾绍群华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室中国湖北武汉430074

本文利用多光子激发激光扫描显微镜的部分光路和探测器,建立了双光子荧光相关谱系统(Two-PhotonFluorescenceCorrelationSpectroscopy,简称TP-FCS)。利用TP-FCS系统观察到了"光子爆发"现象,实现了染料分子的双光子激发,测量出若丹明B染... 详细信息

本文利用多光子激发激光扫描显微镜的部分光路和探测器,建立了双光子荧光相关谱系统(Two-PhotonFluorescenceCorrelationSpectroscopy,简称TP-FCS)。利用TP-FCS系统观察到了"光子爆发"现象,实现了染料分子的双光子激发,测量出若丹明B染料分子在蔗糖溶液中的扩散系数。实验证明该系统具有操作简便、可靠性高、费用低廉等特点,可实现单分子检测。

关键词：双光子激发荧光相关谱光子爆发单分子检测

OmpT在Tween-20胶束中折叠的单分子研究（英文）

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物理化学学报 2019年第5期35卷 546-554页

作者：卜佩璇何晨晖赵新生北京大学化学与分子工程学院化学生物学系分子动态与稳态结构国家重点实验室北京分子科学国家研究中心北京100871 北京大学生物动态光学成像中心北京100871 北京大学生命科学学院北京100871

本文用单分子探测研究了外膜蛋白OmpT在Tween-20与十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)胶束中的折叠。我们制备了单分散的OmpT,观察到OmpT在不同浓度尿素的Tween-20和DDM胶束中的折叠与去折叠。OmpT在Tween-20胶束中形成的折叠态与其在DDM中折... 详细信息

本文用单分子探测研究了外膜蛋白OmpT在Tween-20与十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)胶束中的折叠。我们制备了单分散的OmpT,观察到OmpT在不同浓度尿素的Tween-20和DDM胶束中的折叠与去折叠。OmpT在Tween-20胶束中形成的折叠态与其在DDM中折叠形成的天然OmpT结构相似,但稳定性和酶活性均低于天然OmpT。与此相比,在Tween-20中OmpA只在低浓度尿素中折叠,OmpC不折叠。荧光相关光谱(FCS)结果表明折叠的外膜蛋白与去垢剂胶束形成复合体。在β桶折叠机器(BAM)复合体存在时,OmpT比OmpA和OmpC的折叠更加高效。三种外膜蛋白在Tween-20和BAM复合体存在下的折叠结果表明,OmpT比OmpA与OmpC更容易折叠。人们猜测不同性质的外膜蛋白与BAM复合体作用的方式不同,本文的研究结果为这种猜测提供了支持。由于Tween-20常被用于防止单分子实验中的非特异性吸附,本文的结果也提醒人们要注意蛋白与Tween-20相互作用对实验结果的影响。

关键词：单分子FRET 荧光相关谱 OmpT折叠 Tween-20 DDM

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双光子激发光漂白的荧光相关谱分析

光电子．激光 2003年第11期14卷 1223-1226页

作者：刘亚丰陈同生骆清铭曾绍群华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室湖北武汉430074

对基于双光子激发(TPE)的荧光相关谱(FCS)分析的理论公式进行了修正,引入了光漂白修正因子(θ)。修正公式不仅消除了光漂白因素对粒子动态信息测量结果的影响,而且还可以同时获得光漂白寿命。分别采用修正公式和原公式拟合了蔗糖溶液中... 详细信息

对基于双光子激发(TPE)的荧光相关谱(FCS)分析的理论公式进行了修正,引入了光漂白修正因子(θ)。修正公式不仅消除了光漂白因素对粒子动态信息测量结果的影响,而且还可以同时获得光漂白寿命。分别采用修正公式和原公式拟合了蔗糖溶液中若丹明(RB)的实验结果。结果表明:修正公式能够更好地定量描述实验结果,并且可以获得不同激发条件下的光漂白寿命。

关键词：双光子激发荧光相关谱光漂白修正公式 TPE FCS

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相关谱技术在生物大分子检测上的应用

相关谱技术在生物大分子检测上的应用

作者：李军锋华南师范大学

学位级别：硕士

相关谱技术是一种统计方法,它通过对时间序列的涨落信号作相关运算(自相关和互相关),从而得到引起涨落过程的参数,例如扩散系数,浓度,结合和分离常数等。目前应用广泛的两种相关谱技术包括:光子散射相关谱技术(photon scattering correl... 详细信息

相关谱技术是一种统计方法,它通过对时间序列的涨落信号作相关运算(自相关和互相关),从而得到引起涨落过程的参数,例如扩散系数,浓度,结合和分离常数等。目前应用广泛的两种相关谱技术包括:光子散射相关谱技术(photon scattering correlation spectroscopy, PSCS)和荧光相关谱技术(fluorescence correlation spectroscopy, FCS)。参与改进了本实验室自行研制的小型低强度激光光子散射相关谱仪。与现有的同类型仪器相比,该仪器采用双层折射率样品匹配池,从而可以减小杂散光的干扰;采用带梯度折射率透镜的单模光纤接收、传输散射光信号提高了散射光的收集传输效率;用低强度的激光避免了对样品的辐射损伤,同时可以使激光器和系统集成在一起,整个系统小型实用。用标准的不同粒径的聚苯乙烯球检验了自行设计的系统,系统的测量范围从几个纳米到一个微米都很精确。利用光子散射相关谱技术研究了牛血清白蛋白分子的扩散系数在不同强度离子溶液中随着蛋白分子浓度变化的规律。结果表明在低离子强度环境中蛋白的扩散系数随蛋白的浓度增加而增加,随着离子强度的逐步增大,蛋白分子的扩散系数随其浓度的增加而减小。利用平均势场理论的两体硬球相互作用模型解释了蛋白分子的相互作用变化规律:随着离子强度的增加,离子氛厚度减小,蛋白分子间的相互作用由排斥变为吸引,蛋白开始聚集。根据扩散系数随蛋白浓度变化的斜率与离子浓度变化的相关性,回归出了蛋白相互作用参数,蛋白所带的有效电荷Z=-9.0e、Hamaker常量=2.8KBT。这项工作说明了光子散射相关谱技术是研究蛋白分子相互作用的一种有效技术。参与了从德国Zeiss公司进口的荧光相关谱仪的组装工作。与现有的同类型仪器相比,该仪器采用双通道探测,不仅可以同时进行自相关荧光谱测量,还可以进行荧光互相关光谱测量;该仪器装有三个激光器光源,一个氩离子激光器和两个氦氖激光器,可以提供五种波长的激光,从而扩大了染料分子的选择余地;该仪器测量时间短,灵敏度高,平均10秒钟1个样品,可以检测到单个荧光分子;该仪器完全由计算机控制,操作简单。

关键词：相关谱技术光子散射相关谱荧光相关谱牛血清白蛋白蛋白相互作用单分子检测转基因检测

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光谱学光谱分析、光谱测量

中国光学 2005年第4期 12-13页

O433．4 2005042487 高电荷态离子轰击Au固体表面激发的特征光谱线= Characteristic spectral lines induced by the impact of highly charged ion on Au solid surface[刊,中]／张小安(咸阳师范学院物理系,陕西,咸阳(712000)),任惠娟…／／光子学报,-2004,33(11),-1404-1408 报道了高电荷态离子129X6/e+和129X30/e+轰击金属Au 表面激发的200-1000 nm波段光谱的实验结果。

关键词：部分相干光光谱比光谱分析高电荷态离子光谱测量光子学表面激发实验结果荧光相关谱空间相干度

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激光应用激光生物学

中国光学 2004年第5期 30-31页

Q631 2004053426 双光子激发光漂白的荧光相关谱分析=Effect of photobleaching on fluorescence correlation spectroscopy in twophoton excitation microscopy[刊,中]/刘亚丰(华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室,湖北,武汉(... 详细信息

关键词：磁作用激光光漂白光电子重点实验室双光子激发荧光相关谱生物医学光子学孤立子氦氖激光照射钝顶螺旋藻