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纳秒脉冲处理A375细胞裸鼠皮下移植瘤的疗效评估

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高电压技术 2013年第1期39卷 117-121页

作者：姚陈果郭飞董守龙彭巧唐均英重庆大学输配电装备及系统安全与新技术国家重点实验室重庆400030 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

ns脉冲电场可以诱发肿瘤细胞的结构和功能发生一系列变化,使其在临床肿瘤治疗中展现出巨大的应用前景。目前,受限于检测评估手段,相关动物实验研究尚不充分。将ns脉冲(电场强度20kV/cm、脉宽200ns、重复频率5Hz、2 000个脉冲)作用于A37... 详细信息

ns脉冲电场可以诱发肿瘤细胞的结构和功能发生一系列变化,使其在临床肿瘤治疗中展现出巨大的应用前景。目前,受限于检测评估手段,相关动物实验研究尚不充分。将ns脉冲(电场强度20kV/cm、脉宽200ns、重复频率5Hz、2 000个脉冲)作用于A375裸鼠皮下移植瘤,采用荧光活体成像方法定量研究ns脉冲的抑瘤效果,同时用相机随访观察局部疤痕的转归情况。与对照组荧光增加相比,处理组荧光强度逐渐减弱(检验水准P荧光完全消失;随着时间的推移,治疗区域局部疤痕逐渐变浅,并在第2次处理后22d完全消失。实验结果表明,ns脉冲可以实现局部肿瘤组织的完全切除,且能实现皮肤疤痕的有效转归。

关键词： ns脉冲电场(nsPEF) 肿瘤细胞裸鼠皮下移植瘤荧光活体成像抑瘤效果疤痕转归

猫爪草提取物离子敏感型原位凝胶肺部药物释放及局部安全性初步评价

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中草药 2016年第7期47卷 1163-1168页

作者：胡春晖青海大学医学院药学系青海西宁810001

目的对制备的猫爪草提取物离子敏感型原位凝胶（RTRE-ISG）进行肺部滞留性、安全性及局部药物浓度的评价。方法以海藻酸钠作为辅料,猫爪草提取物（70%乙醇）作为溶剂,在室温下磁力搅拌使其充分溶胀,制备得到RTRE-ISG。大鼠通过气管介入... 详细信息

目的对制备的猫爪草提取物离子敏感型原位凝胶（RTRE-ISG）进行肺部滞留性、安全性及局部药物浓度的评价。方法以海藻酸钠作为辅料,猫爪草提取物（70%乙醇）作为溶剂,在室温下磁力搅拌使其充分溶胀,制备得到RTRE-ISG。大鼠通过气管介入给药后,测定肺部灌洗液中的炎症因子和致纤维化因子水平,筛选出相对安全的处方;再采用Cy5.5作为荧光染料,借助小动物活体成像系统对RTRE-ISG肺部滞留性进行评价;最后运用改良肺泡灌洗技术,对大鼠肺部进行灌洗,测定局部药物浓度。结果 1%海藻酸钠RTRE-ISG在肺部安全性较好,荧光活体成像技术显示其可在肺部滞留120~144 h,肺部局部药物浓度的测定显示1%海藻酸钠RTRE-ISG在5 h释放达到峰值为5.24μg/m L,144 h药物浓度为0.08μg/m L。结论 RTRE-ISG在肺部可滞留120 h以上,可为中药治疗肺结核提供一种新型的缓释制剂。

关键词：猫爪草离子敏感型原位凝胶肺部安全性荧光活体成像肺泡灌洗技术介入疗法

125I-AIBZM纳米脂质体脑显像剂的研究

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125I-AIBZM纳米脂质体脑显像剂的研究

作者：李光慧复旦大学

学位级别：硕士

许多中枢神经系统疾病如帕金森病、阿尔茨海默病等,与脑内神经递质多巴胺异常有关,因此了解多巴胺的变化对此类中枢神经疾病的诊疗、预后观察及疾病机理研究有重要意义。通过放射性脑受体显像技术可以了解多巴胺受体信息,进而推断多巴... 详细信息

许多中枢神经系统疾病如帕金森病、阿尔茨海默病等,与脑内神经递质多巴胺异常有关,因此了解多巴胺的变化对此类中枢神经疾病的诊疗、预后观察及疾病机理研究有重要意义。通过放射性脑受体显像技术可以了解多巴胺受体信息,进而推断多巴胺的信息变化。苯甲酰胺类衍生物125碘-(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯酰胺(125I-AIBZM)与多巴胺D2受体亲和力很高,但是125I-AIBZM脂溶性小,不易通过血脑屏障,从而限制了该化合物作为脑显像剂的应用。本课题目的在于通过以下两种途径,提高标记化合物125I-AIBZM入脑量。1结构改造。对标记化合物125I-AIBZM的标记前体化合物(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯甲酰胺(ABZM)进行结构改造。通过化学合成,将化合物ABZM对位上氨基改造成二甲氨基,得到化合物(S)-4-二甲氨基-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-2-甲氧基苯甲酰胺(DMABZM),意在提高其脂溶性。采用Iodogen法对化合物DMABZM进行放射性125I标记,得到放射性标记化合物125I-DMAIBZM,标记率为74%,放化纯度达99%。生物体内分布实验,重点观察放射性标记化合物125I-DMAIBZM在小鼠、大鼠脑组织的分布。小鼠脑组织分布实验中,在纹状体与小脑的分布比值(纹状体／小脑)可达6.5,说明125I-DMAIBZM与纹状体结合有较高的特异性和亲和力。在大鼠体内分布实验中,125I-DMAIBZM在大鼠脑组织的分布高于123I-AIBZM文献报道值,但与临床上常用的123I-BZM还有一定差距。2纳米脂质体载药系统。采用乳铁蛋白纳米脂质体载药系统,将小分子放射性化合物125I-AIBZM主动靶向到脑,提高入脑量。125I-AIBZM的制备采用Iodogen法,标记率99%。采用成膜水化法制备空白脂质体(L),水化后的脂质体通过高压均质机(微型挤压器)进行过膜整粒,得到形状规则、分布均匀、粒径大小在100 nm左右的空白脂质体,连接靶头后得到乳铁蛋白脂质体(Lf-L),透射电镜观察连接靶头乳铁蛋白前后,脂质体性质变化不明显。载药脂质体的制备采用硫酸铵梯度主动载药法。热实验前,选用标记前体化合物ABZM进行载药冷实验,证明化合物ABZM可通过硫酸铵梯度法主动包载到空白脂质体中,并利用标准曲线法对ABZM-脂质体进行包封率测定,结果为20.42%。根据冷实验方法,对小分子放射性标记化合物125I-AIBZM进行主动载药热实验,包封率：125I-AIBZM-脂质体(125I-AIBZM-L)为39.29%。125I-AIBZM-Lf-脂质体(125I-AIBZM-Lf-L)为35.2%。通过载药脂质体泄漏实验对其稳定性进行考察：125I-AIBZM-L、125I-AIBZM-Lf-L在pH=7.4的PBS溶液中,能稳定存在较长时间(72 h泄漏百分率60%),这说明两种脂质体泄漏情况很相近,连接靶头乳铁蛋白对载药脂质体稳定性无明显影响。对乳铁蛋白脂质体连接百分比测定采用凝胶电泳放射自显影的方法,测量结果为80.2%。对Lf-L脑靶向性的验证,本课题实验将荧光素DIR包载到脂质体中制备成DIR-脂质体(DIR-L)、DIR-Lf-脂质体(DIR-Lf-L),进行荧光活体成像,结果显示DIR-Lf-L具有明显的脑靶向性。药动学实验显示125I-AIBZM-L与125I-AIBZM-Lf-L大鼠体内血循环时间比125I-AIBZM明显延长,这利于125I-AIBZM-Lf-L脑靶向性的实现。最后进行125I-AIBZM-Lf-L、125I-AIBZM-L、125I-AIBZM小鼠体内分布实验,对各药物同时相入脑量进行比较,结果125I-AIBZM制备成脂质体后入脑量有显著提高,特别是125I-AIBZM-Lf-L,入脑量在0.5 h达到峰值,%ID／g为1.61,比同时相的125I-AIBZM-L (0.65)、125I-AIBZM (0.09)显著增加。125I-AIBZM-Lf-L明显提高了125I-AIBZM入脑量。

关键词： 125I 多巴胺D2受体入脑量乳铁蛋白脂质体硫酸铵梯度法凝胶电泳放射自显影荧光活体成像

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利福平微球—原位凝胶复合缓释载体的研究

利福平微球—原位凝胶复合缓释载体的研究

作者：胡春晖北京协和医学院

学位级别：硕士

本研究的目的在于建立经纤维支气管镜肺部介入治疗的药物缓释载体,以期达到提高药物在肺部的滞留性,使药物缓慢、持续的释放,达到减少给药次数,提高患者顺应性的目的。本文首先系统地考察了模型药物利福平(Rifampicin:RFP)的理化性质,... 详细信息

本研究的目的在于建立经纤维支气管镜肺部介入治疗的药物缓释载体,以期达到提高药物在肺部的滞留性,使药物缓慢、持续的释放,达到减少给药次数,提高患者顺应性的目的。本文首先系统地考察了模型药物利福平(Rifampicin:RFP)的理化性质,具体研究了利福平的水溶性、油/水分配系数,对光、湿稳定性以及利福平的溶液稳定性,根据实验结果,较为系统地研究了影响利福平溶液稳定性的因素,并筛选出1%EDTA-2Na+1%Na2SO3作为抗氧化剂,保证其水溶液在24h内稳定,为下一步评价制剂特性的研究提供依据。其次以聚乳酸-羟基乙酸(poly(lactic-co-glycolic acid):PLGA)为辅料,采用乳化-液中干燥法制备了1μm和140μm两种粒径的RFP-PLGA微球,其载药量分别是(2.47±0.12)%、(26.28±0.80)%,包封率分别为(4.54±0.18)%、(69.63±3.64)%,通过粒径分布、差示扫描热量法、电子扫描显微镜对微球进行表征,体外释药实验显示1μm微球11天释放较完全,140μm微球30天释放35%。制备了温度敏感型、离子敏感型、温度-离子双敏型原位凝胶,通过凝胶黏度、体外溶蚀率、体内滞留时间等因素对处方进行优化后,采用凝胶溶液直接高压灭菌的方法,制得了无菌原位凝胶系统。通过对家兔肺部安全性初步评价,筛选出在制备的几种原位凝胶体系中安全性最好的离子敏感型原位凝胶系统。本文最后制备了RFP-PLGA微球与离子敏感型原位凝胶的复合缓释载体,采用荧光活体成像技术对复合缓释载体的体内滞留性进行评价,结果显示1μmRFP-PLGA微球-离子敏感型原位凝胶复合缓释载体在小鼠体内的滞留时间为21-28天。进一步采用改良后的肺泡灌洗技术(broncho alveolar lavage:BAL)提取肺部局部游离药物,高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography:HPLC)法测定大鼠肺部药物浓度,评价药物在体释放行为。结果显示复合缓释载体在体内给药后5h药物浓度达到峰值(48.60±15.67)mg·mL-121天时的药物浓度(0.81±0.14) mg·mL-1,较好地达到了课题设定的目标,复合缓释载体的Beagle犬肺部安全性试验显示,Beagle犬肺部未见异常,安全性良好。

关键词：利福平微球原位凝胶复合缓释载体荧光活体成像肺泡灌洗术介入治疗

桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物-原位凝胶复合系统的制备与评价

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中国现代应用药学 2012年第2期29卷 142-147页

作者：冯瀚洲胡春晖朱春燕中国医学科学院＆北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193

目的制备桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物原位凝胶复合给药系统,提高桉叶油的水溶解度,同时达到滞留病灶部位且缓慢释放的效果。方法采用水溶液搅拌法制备桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物,以海藻酸钠制备空白离子敏感型原位凝胶,将两者结合... 详细信息

目的制备桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物原位凝胶复合给药系统,提高桉叶油的水溶解度,同时达到滞留病灶部位且缓慢释放的效果。方法采用水溶液搅拌法制备桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物,以海藻酸钠制备空白离子敏感型原位凝胶,将两者结合后对复合给药系统的体外溶蚀及体内滞留性进行评价。结果桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物的含油率为(6.45±0.16)%,包合率(77.42±1.78)%。体外溶蚀实验表明,包合物原位凝胶复合系统的平均溶蚀率为(44.62±2.07)*** 2.h 1。体外溶蚀实验结果表明,复合系统在24 h溶蚀完全;荧光活体成像系统检测体内滞留性实验结果表明,复合系统可在裸鼠肺部滞留12 h以上。结论桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物原位凝胶复合系统可达到局部滞留并缓慢释放药物的目的。

关键词：桉叶油羟丙基-β-环糊精包合物海藻酸钠原位凝胶体外溶蚀荧光活体成像

绿色荧光蛋白-荧光素酶标记的人源化非小细胞肺癌原位动物模型建立方法

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广西医学 2023年第18期45卷 2223-2227,2243页

作者：续畅刘泽洲张灿白玥安志静钟晓松首都医科大学附属北京世纪坛医院药物及医疗器械临床试验机构北京市100038 河北省廊坊市广阳区解放道办事处宏泰社区卫生服务中心河北省廊坊市065000 首都医科大学附属北京世纪坛医院临床基因与细胞工程中心北京市100038

目的采用绿色荧光蛋白-荧光素酶(GL)标记的人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞建立人源化NSCLC原位动物模型。方法制备GL逆转录病毒液。将上述病毒液转染至处于对数生长期的人类NSCLC细胞株(H460细胞)后进行流式分选,从而构建稳定的GL阳性H46... 详细信息

目的采用绿色荧光蛋白-荧光素酶(GL)标记的人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞建立人源化NSCLC原位动物模型。方法制备GL逆转录病毒液。将上述病毒液转染至处于对数生长期的人类NSCLC细胞株(H460细胞)后进行流式分选,从而构建稳定的GL阳性H460细胞(H460-GL细胞)。将15只Nod-Scid小鼠随机分为低剂量组(n=5)、中剂量组(n=5)、高剂量组(n=5),分别以H460-GL细胞1.0×10^(4)个/20μL、1.0×10^(6)个/20μL、1.0×10^(8)个/20μL的密度进行小鼠肺组织原位注射。实验期间观察各组小鼠的一般情况及存活情况。每周通过荧光活体成像观察各组小鼠体内肿瘤的成活、生长情况。造模后第35天处死成瘤小鼠,取肺组织进行病理组织学观察。结果(1)大部分小鼠出现呼吸系统肿瘤相关症状;濒死期小鼠胸腔内均出现不规则形状的白色肿瘤组织,且其与周围肺组织及心脏粘连严重。(2)造模后第22天开始各组小鼠逐渐死亡,于造模后第35天低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠的存活率分别为80%(4/5)、20%(1/5)、0。(3)在低剂量组中,于造模后第14天仅有1只小鼠出现H460-GL细胞荧光,造模第28天的成瘤率为60%(3/5),且成瘤小鼠体内的荧光强度大小不一;在中剂量组、高剂量组中,所有小鼠在造模后第7天均出现H460-GL细胞荧光,且荧光均逐渐增强,在造模后第14天、第21天成瘤小鼠体内的荧光强度相似且较为均匀。结论该造模方法可获得稳定的人源化NSCLC原位动物模型,且操作简便、易于复制,可在动物体内模拟人类NSCLC发生、发展、转移过程,并能实时观察肿瘤大小与转移路径。

关键词：非小细胞肺癌原位动物模型人源化绿色荧光蛋白-荧光素酶逆转录病毒荧光活体成像

藏药砂生槐子总生物碱生物黏附迷你肠溶片的制备与体内外评价

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中医药导报 2018年第9期24卷 31-35页

作者：胡春晖党云洁孙梦娟张发斌青海大学医学院青海西宁810001 河北医科大学河北石家庄050001

目的:制备藏药砂生槐子总生物碱的生物黏附迷你肠溶片,以期达到增加药物在肠道的滞留时间和缓释的目的。方法:通过前期单因素考察确定对溶出率影响较大的因素,以L_9(3~3)正交试验确定3 mm迷你片芯的最优处方,并对其进行肠溶包衣。评价... 详细信息

目的:制备藏药砂生槐子总生物碱的生物黏附迷你肠溶片,以期达到增加药物在肠道的滞留时间和缓释的目的。方法:通过前期单因素考察确定对溶出率影响较大的因素,以L_9(3~3)正交试验确定3 mm迷你片芯的最优处方,并对其进行肠溶包衣。评价迷你片芯的生物黏附力和体外溶性行为,采用小动物活体成像技术考察制剂在动物体内的滞留情况。结果:片芯的最佳处方为含药淀粉与黏附材料之比为5∶1,填充剂为PVP,海藻酸钠与卡波姆934的比例为2∶1,肠溶迷你片的溶出试验表明累计释放率达到80%以上。体内外生物黏附性实验证明其具有一定的生物黏附力。结论:生物黏附迷你肠溶片在胃肠道能够有效滞留且累计释放率较好,达到了实验设计的预期目标,为藏药砂生槐子总生物碱肠溶片的制备以及生物黏附片的制备提供了一定的参考价值。

关键词：砂生槐子总生物碱生物黏附迷你肠溶片荧光活体成像