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药物分析杂志 1998年第S1期18卷 151-153页

作者：张阿慧杨琼巴桑央宗西安医科大学药学院 710061 北京师范大学数学系西藏药品检定所 850000

荧光法和DNA杂交法检测重组技术产品中残余DNA的比较

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药物分析杂志 2009年第7期29卷 1063-1066页

作者：王兰高凯毕华李永红饶春明中国药品生物制品检定所生化室北京100050

目的:对用于检测重组技术产品中残余DNA的荧光法及DNA杂交法进行比较性评价。方法:应用地高辛标记的DNA杂交法以及PicoGreen荧光法对3批重组人干扰素α2b中外源DNA残留量进行测定。结果:荧光法检测结果显示3批重组人干扰素α2b制品中DN... 详细信息

目的:对用于检测重组技术产品中残余DNA的荧光法及DNA杂交法进行比较性评价。方法:应用地高辛标记的DNA杂交法以及PicoGreen荧光法对3批重组人干扰素α2b中外源DNA残留量进行测定。结果:荧光法检测结果显示3批重组人干扰素α2b制品中DNA残留量分别为每人份剂量(0.695±0.021)ng、(0.664±0.021)ng、(0.916±0.017)ng,而用地高辛标记的DNA杂交实验由于阳性基因组DNA灵敏度偏低以至于结果无法判断。应用琼脂糖凝胶电泳和PicoGreen荧光法测得由生产单位提供的阳性DNA浓度明显偏低,与标示量不符,这说明阳性DNA含量偏低是本次DNA杂交实验失败的主要原因。通过对该阳性DNA重新定量后再进行DNA杂交检测,结果显示3批重组人干扰素α2b制品的DNA残留量均小于每人份剂量1ng,该结果与PicoGreen荧光法相一致。结论:荧光法具有简便、快速,自动化程度高,不受工程菌种类限制,能够精确定量等特点,优于传统的DNA杂交法,更适于重组制品残余外源DNA含量的常规检定。

关键词：荧光法 DNA杂交法残余DNA 重组生物制品质量控制

荧光法动态观察糖尿病大鼠红细胞醛糖还原酶活性

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中国老年学杂志 2005年第4期25卷 426-428页

作者：张志华叶玲刘建伟刘静解放军总医院老年医学研究所北京100853

目的比较测定醛糖还原酶(AR)活性的两种荧光法(碱终止法和酸终止法)的差异,应用其中较好的一种动态观察糖尿病(DM)大鼠红细胞AR活性。方法SD大鼠随机等分为四组正常对照组和DM20、40、60d组,用辅酶(NADPH或NADP)、DL甘油醛、磷酸缓冲液... 详细信息

目的比较测定醛糖还原酶(AR)活性的两种荧光法(碱终止法和酸终止法)的差异,应用其中较好的一种动态观察糖尿病(DM)大鼠红细胞AR活性。方法SD大鼠随机等分为四组正常对照组和DM20、40、60d组,用辅酶(NADPH或NADP)、DL甘油醛、磷酸缓冲液等组成各自的反应体系,比较碱终止法和酸终止法测定AR活性的灵敏度和重复性,择其优者测定各组大鼠红细胞AR活性。结果NADP和NADPH浓度相同时酸终止法所测荧光值较高;辅酶浓度在0～400μmol/L时标准曲线呈线性;酸终止法标准曲线的批内和批间变异系数分别为0.83%和2.28%,碱终止法为17.88%和16.69%,两法所测标本的批内和批间变异系数分别为4.25%、7.12%和1.13%、13.07%;高氯酸可消除血红蛋白对荧光的影响;DM组AR活性较正常对照增高(P法较碱终止法简便、灵敏、准确、稳定。DM大鼠红细胞AR活性增高,并随病程延长有增加的趋势;提示AR活性的动态观察有可能作为糖尿病并发症发展进程的监测指标。

关键词：醛糖还原酶荧光法糖尿病

荧光法用于葡萄糖和农产品中赭曲霉毒素A的检测

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荧光法用于葡萄糖和农产品中赭曲霉毒素A的检测

作者：谈荣江苏大学

学位级别：硕士

食品营养与安全问题关系国计民生,灵敏快捷地检测与食品安全相关的各种物质对于人类的健康生活至关重要。然而,传统的基于大型仪器或抗体的检测方法存在操作繁琐、耗时长、成本高等问题。因此,开发出简便、快速、高效准确的检测方法对... 详细信息

食品营养与安全问题关系国计民生,灵敏快捷地检测与食品安全相关的各种物质对于人类的健康生活至关重要。然而,传统的基于大型仪器或抗体的检测方法存在操作繁琐、耗时长、成本高等问题。因此,开发出简便、快速、高效准确的检测方法对保障人们健康至关重要。本文基于近年来新型纳米材料和荧光传感技术的发展,构建了三种以碳量子点(carbon quantum dots,CQDs)为荧光纳米探针的荧光检测法,用于葡萄糖和赭曲霉毒素A(OTA)的检测:(1)利用Mn O2纳米片和CQDs构建了一种新型的荧光和比色双模式检测法,实现对葡萄糖的定量检测。由于静电相互作用,CQDs吸附到Mn O2纳米片表面,发生能量转移,导致CQDs荧光猝灭;当葡萄糖被葡萄糖氧化酶(GOD)氧化时,会产生H2O2中间产物,棕色的Mn O2纳米片能够被H2O2还原并分解,产生无色的Mn2+离子,使溶液的吸光度降低;同时,CQDs游离到溶液中,使荧光信号恢复。该方法对葡萄糖的线性检测范围为:荧光法5000μM,比色法2000μM。检测限分别为2.11μM和2.18μM。该方法操作简便,灵敏度和选择性较好,利用两种信号输出手段,使检测手段多样性,提高了检测的准确性。该方法还成功用于人血清中葡萄糖的检测。(2)构建了一种基于双磁分离的荧光法,用于小麦和玉米中OTA的检测。制备了适配体功能化的磁性纳米材料(Fe3O4 NPs-Aptamer)和互补DNA功能化的氮杂石墨烯量子点(NGQDs-c DNA)。由于Aptamer和c DNA之间的杂交反应,NGQDs-c DNA能够与Fe3O4 NPs-Aptamer结合形成复合物,发生能量转移,导致NGQDs的荧光猝灭。当溶液中加入OTA后,由于OTA与Aptamer间特异性相互作用,导致核酸碱基链打开,NGQDs-c DNA被释放到溶液中,其荧光信号得到恢复。在本体系中,为了降低背景信号强度,提高检测的灵敏度,我们对复合体系进行双磁分离,分别去除未反应的NGQDs-c DNA和Fe3O4 NPs。该体系对OTA检测线性范围为10 n M000 n M,检测限为0.66 n M。该方法在实际样品检测中,具有较好的选择性和可行性。(3)采用适配体功能化的氮杂石墨烯量子点(NGQDs-Aptamer)为探针,磁性多孔碳(magnetic porous carbon,MPC)为分离载体,核酸外切酶I(Exo I)对信号进行循环放大,实现OTA的灵敏检测。由于Aptamer和MPC之间的p-p作用,NGQDs-Aptamer能够吸附到MPC上,产生能量转移,导致NGQDs荧光猝灭。当OTA存在时,由于OTA与Aptamer之间强的亲和作用,使NGQDs-Aptamer从MPC表面脱离,荧光信号恢复。由于Exo I可以分解NGQDs-Aptamer-OTA中的Aptamer,释放出OTA,使其循环参与反应,引发更多的NGQDs荧光恢复,因此进一步增强荧光信号强度。该方法对OTA的线性检测范围为10 n M000n M,检测限为2.28 n M,并成功用于检测小麦和玉米中OTA的含量。

关键词：葡萄糖赭曲霉毒素A 荧光法磁分离碳量子点核酸适配体

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荧光法在金、银分析中的应用(续)

黄金 1989年第3期10卷 50-53页

作者：王学杰叶率官浙江大学化学系

1.萃取——荧光法金和银都是有d轨道的过渡元素,因而金和银都是荧光猝灭剂。它们不仅不能象Al、Ga等主族元素那样,与非荧光的有机试剂生成荧光化合物,它们与荧光染料生成的络合物也是荧光猝灭或非荧光的。但金和银与某些荧光染料离子... 详细信息

1.萃取——荧光法金和银都是有d轨道的过渡元素,因而金和银都是荧光猝灭剂。它们不仅不能象Al、Ga等主族元素那样,与非荧光的有机试剂生成荧光化合物,它们与荧光染料生成的络合物也是荧光猝灭或非荧光的。但金和银与某些荧光染料离子生成的中性低荧光络合物可用有机溶剂萃取,而染料离子本身不被萃取,有机萃取相的荧光强度与络合物的浓度在一定范围内呈线性关系。

关键词：荧光法分析金银

荧光法监测硝普钠释放NO过程及其对微藻生长的影响

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生态毒理学报 2010年第3期5卷 362-367页

作者：刘春颖房爽赵敏白效静韩洋李培峰中国海洋大学海洋化学与理论教育部重点实验室青岛266100

以硝普钠(Sodium nitroprusside,SNP)为一氧化氮(Nitric oxide,NO)供体研究了NO对海洋微藻生长的影响.对不同浓度SNP在海水介质中释放NO的过程进行了监测;对所培养的亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)和中肋骨条藻(Skeletonema costatum)进行藻密度测定,观测NO对微藻生长的影响.结果表明:5、10和100μmol·L-1的SNP释放NO浓度大约分别为6×10-9、9×10-9和2×10-7mol·L-1左右,而释放时间分别为4、5.5和7.5h.研究表明,NO对不同微藻有明显不同的作用规律:NO持续作用下,对亚心形扁藻的最佳作用浓度在10-8mol·L-1数量级;对赤潮藻中肋骨条藻的最佳作用浓度在10-9mol·L-1数量级;赤潮藻对NO的响应比非赤潮藻更灵敏,NO可能是海洋生态系中微藻生长重要的调节因子.

关键词：一氧化氮微藻硝普钠荧光法

荧光法检测血小板摄取5-羟色胺及其热力学变化

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中国药理学与毒理学杂志 1990年第1期4卷 77-78页

作者：梁发权黄如衡军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

大量的实验已证实血小板摄取与贮存5—HT的机理与中枢5—HT神经元非常相似,而且药物抑制5—HT摄取的构效关系在两种细胞中是一致的。血小板是一个很易得到的标本,所以用血小板来研究5—HT摄取是一个较好的模型。目前国外用放射性同位素... 详细信息

大量的实验已证实血小板摄取与贮存5—HT的机理与中枢5—HT神经元非常相似,而且药物抑制5—HT摄取的构效关系在两种细胞中是一致的。血小板是一个很易得到的标本,所以用血小板来研究5—HT摄取是一个较好的模型。目前国外用放射性同位素法来研究血小板摄取5—HT。鉴于同位素标记法的固有缺点,本文用荧光技术建立了一种研究血小板摄取5—HT的快速简便方法,为研究一些中枢神经系统药物,如抗抑郁剂等的作用机理与筛选新药提供了一个有效的手段。

关键词：荧光法血小板 5-羟色胺热力学

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荧光法研究金属离子与蛋白质的作用

山西大学学报(自然科学版) 1992年第2期 163-168页

作者：马贵斌杨频刘文静翟锦山西大学化学系

本文使用荧光法系统研究了Ag(Ⅰ)、Hg(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)三种重金属离子与不同蛋白质和酶内源荧光之间的关系。结果表明,Pb(Ⅱ)、Hg(Ⅱ)与蛋白质的作用强,荧光猝灭明显。Ag(Ⅰ)与蛋白质作用较弱,并对不同的蛋白质表现的荧光变化趋势不同。并... 详细信息

本文使用荧光法系统研究了Ag(Ⅰ)、Hg(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)三种重金属离子与不同蛋白质和酶内源荧光之间的关系。结果表明,Pb(Ⅱ)、Hg(Ⅱ)与蛋白质的作用强,荧光猝灭明显。Ag(Ⅰ)与蛋白质作用较弱,并对不同的蛋白质表现的荧光变化趋势不同。并且研究了Ag(Ⅰ)对色氨酸荧光的影响,并对离子的作用进行了讨论。

关键词：荧光法蛋白质Ag(Ⅰ)、Pb(Ⅱ)、Hg(Ⅱ)离子

荧光法对山东产206种食品中维生素B_1的评价

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食品与发酵工业 1991年第5期17卷 74-75页

作者：崔航青岛医学院营养系

本文采用硫胺素荧光测定法对山东产十个类型的206种食品(粮食、果蔬、水产、蛋、奶、豆制品、畜产品、咸菜及其他)的维生素B_1(VB_1)含量进行了分析,力求对不同类型食品的VB_1含量水平有一个较全面的认识,从而为人们在日常生活中合理地... 详细信息

本文采用硫胺素荧光测定法对山东产十个类型的206种食品(粮食、果蔬、水产、蛋、奶、豆制品、畜产品、咸菜及其他)的维生素B_1(VB_1)含量进行了分析,力求对不同类型食品的VB_1含量水平有一个较全面的认识,从而为人们在日常生活中合理地调配饮食,补充人体必需的VB_1,及防止食品加工、储藏中VB_1不必要的损失方面提供一定的参考。

关键词：食品维生素B1 荧光法分析

荧光法及化学发光法在保健食品抗氧化体外实验中的应用

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中国酿造 2009年第11期28卷 130-133页

作者：文镜刘璇赵建北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室应用文理学院保健食品功能检测中心北京100191

保健食品体外抗氧化能力评价实验具有简便、快捷的特点。发射光谱法是目前常用的保健食品体外抗氧化能力检测方法。本文对发射光谱法中的荧光法及化学发光法各自原理、特点、仪器、检测方法、应用范围进行了分析比较,并举例说明了这2种... 详细信息

保健食品体外抗氧化能力评价实验具有简便、快捷的特点。发射光谱法是目前常用的保健食品体外抗氧化能力检测方法。本文对发射光谱法中的荧光法及化学发光法各自原理、特点、仪器、检测方法、应用范围进行了分析比较,并举例说明了这2种方法在保健食品抗氧化体外实验中的应用特点。

关键词：保健食品抗氧化体外实验荧光法化学发光法