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第9届荧光方法和应用国际会议(Ⅱ)

分析试验室 2006年第10期25卷 123-124页

作者：周南上海大木桥路158-16-501 上海200032

本届大会的论文续报如下:(43) Marcelo Gehlen等, 9-氨基吖啶衍生物中激发态分子内的电荷转移;(44) Philippe Giamarchi等, 二巯基代甲酸盐的荧光性能及其在直接水分析方面的应用--利用具有暂时分辨性能的激光诱导荧光技术; (45) Letici... 详细信息

本届大会的论文续报如下:(43) Marcelo Gehlen等, 9-氨基吖啶衍生物中激发态分子内的电荷转移;(44) Philippe Giamarchi等, 二巯基代甲酸盐的荧光性能及其在直接水分析方面的应用--利用具有暂时分辨性能的激光诱导荧光技术; (45) Leticia Giestas等, 5-羧基荧光素(一种广泛应用于生物学研究的荧光探针)的光物理学鉴定.

关键词：国际会议应用荧光方法电荷转移荧光技术激光诱导分辨性能荧光性能

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超灵敏检测组蛋白乙酰化修饰酶p300和多聚（ADP-核糖）聚合酶-1的荧光方法研究

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超灵敏检测组蛋白乙酰化修饰酶p300和多聚（ADP-核糖）聚合酶-1的...

作者：任婧怡山东师范大学

学位级别：硕士

荧光技术具有特异性好、灵敏度高、操作简便等优点,已被广泛应用于药物开发、疾病诊断及生物遗传分析等多个领域。例如,荧光技术在测量生物分子的动态相互作用中具有高灵敏度和高时空分辨率。除了生物分子的定量检测外,荧光技术还可用... 详细信息

荧光技术具有特异性好、灵敏度高、操作简便等优点,已被广泛应用于药物开发、疾病诊断及生物遗传分析等多个领域。例如,荧光技术在测量生物分子的动态相互作用中具有高灵敏度和高时空分辨率。除了生物分子的定量检测外,荧光技术还可用于测量细胞或组织的生理状态。本论文中,我们构建了基于单分子荧光检测技术和荧光光谱检测技术的两种生物传感器,分别用于超灵敏检测组蛋白乙酰化修饰酶p300和多聚(ADP-核糖)聚合酶-1。具体研究内容如下:1、我们发展了基于荧光标记抗体的单分子检测方法,实现了组蛋白乙酰化修饰酶p300的乙酰转移酶(histone acetyltransferase,HAT)和巴豆酰转移酶(histone crotonyltransferase,HCT)活性的同时检测。组蛋白乙酰化修饰酶p300同时具有HAT和HCT的活性,可以催化组蛋白乙酰化/巴豆酰化,与基因表达以及一些疾病的发生有着紧密的联系。但目前开发的生物传感器侧重于检测HAT活性,对HAT和HCT活性的同时检测还缺乏可靠高效的方法。在本工作中,由于p300具有双酶活性的特征,我们以p300作为模型酶。我们合成N端生物素化的多肽序列作为p300的底物。当p300和乙酰供体乙酰辅酶A(acetyl-coenzyme A,Ac Co A)/巴豆酰辅酶A(crotonyl-coenzyme A,Cr Co A)存在的情况下,催化肽底物在相应赖氨酸残基上乙酰化/巴豆酰化。随后通过链霉亲和素-生物素的相互作用,乙酰化/巴豆酰化多肽可以与链霉亲和素包被的磁珠(magnetic beads,MBs)结合。通过抗体-抗原的特异性相互作用,Dy Light 488和Dy Light 650分别标记的抗组蛋白H3K18乙酰化抗体和抗组蛋白H3K18巴豆酰化抗体与乙酰化/巴豆酰化的多肽磁珠复合物结合,将两种酶活性信号转化为两种不同的荧光信号。随后染料标记的肽底物从游离荧光抗体中磁分离,并用去离子水洗脱,释放的荧光分子可以简单地通过单分子成像计数。通过测量Dy Light 488和Dy Light 650的荧光信号,可以同时定量检测p300的HAT和HCT活性。本方法特异性好,灵敏度高,对HAT检测限为1.75×10 n M,对HCT检测限为6.56×10 n M。此外,本方法可以准确地评价p300的HAT和HCT活性的动力学参数,并筛选抑制剂。同时本方法在临床诊断和药物发现研究中具有极大潜力。2、我们通过基于超支化扩增的荧光方法检测多聚(ADP-核糖)聚合酶-1(Poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)的活性。PARP-1可以催化多聚(ADP-核糖)(poly(ADP-ribose),PAR)聚合物的形成,它广泛参与DNA修复和复制过程,对维持基因完整性至关重要。准确、灵敏地检测PARP-1对于临床诊断至关重要。然而,目前基于静电相互作用的PAPR-1检测通常操作复杂、灵敏度低且存在假阳性。在本工作中,我们利用生物素化-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(biotin-nicotinamide adenine dinucleotide,biotin-NAD)和末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,Td T)的独特特性,通过荧光方法证明了Td T激活的无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)介导的超支化扩增可以用于PARP-1的活性检测。特异性双链DNA(double-stranded DNA,ds DNA)激活的PARP-1催化NAD或biotin-NAD的多个ADP-核糖转移到PARP-1自身,形成含有生物素的ds DNA-PARP-1-PAR聚合物的生物偶联物。随后,形成的生物偶联物被MBs捕获。捕获的ds DNA具有双3’-OH末端可通过超支化扩增,产生明显的荧光信号。本方法具有无标记、无模板、无静电相互作用、高灵敏度和高准确性检测PARP-1的优点。此外,本方法将PARP-1酶信号转化为可放大的DNA信号,而无需费力地制备和功能化纳米材料,大大缩短了检测时间。本方法可灵敏、快速地检测PARP-1,检测限为4.37×10U/μL,可应用于单个细胞的PARP-1的活性检测。同时,本方法能够筛选PARP-1抑制剂,并准确区分健康人和肺癌患者的肺组织中PARP-1的表达水平,在药物研发和临床诊断中具有巨大的潜力。

关键词：荧光方法单分子检测方法组蛋白乙酰化修饰酶p300 多聚(ADP-核糖)聚合酶-1 磁分离

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荧光方法应用于油气运移研究初探

中国海上油气（地质） 1997年第5期11卷 320-324页

作者：李友川海洋石油勘探开发研究中心，河北高碑店074010

对比研究了惠州地区和流花地区原油中芳烃或孔隙残留油的普通荧光光谱、芳烃同步荧光光谱和三维荧光光谱及其参数的差异，虽然上述三种荧光的光谱形式和所用参数不同，但所得的结果是一致的，即：惠州地区原油中轻芳烃含量低于流花地区... 详细信息

对比研究了惠州地区和流花地区原油中芳烃或孔隙残留油的普通荧光光谱、芳烃同步荧光光谱和三维荧光光谱及其参数的差异，虽然上述三种荧光的光谱形式和所用参数不同，但所得的结果是一致的，即：惠州地区原油中轻芳烃含量低于流花地区，重芳烃含量高于流花地区，说明油气运移的方向是从惠州地区指向流花地区，这与本地区地质和地化研究结果一致。

关键词：荧光方法应用油气运移研究同步荧光光谱三维荧光光谱

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用双光子荧光方法测量超短激光脉冲宽度

兵器激光 1979年第3期 1-6页

作者：邱佩华赵继然陈淑琴王文跃高福源中国科学院上海光机所

一.引言对于长的光脉冲宽度的直接测量,通常是以快速响应的光电探测器接收,用示波器显示,目前仅能做到10-10秒的脉宽的测量。为了测量1011到10-13秒以致于更短持续时间的光信号,必须采用新的测量技术。随着超短脉冲激光器的出现,测量超... 详细信息

一.引言对于长的光脉冲宽度的直接测量,通常是以快速响应的光电探测器接收,用示波器显示,目前仅能做到10-10秒的脉宽的测量。为了测量1011到10-13秒以致于更短持续时间的光信号,必须采用新的测量技术。随着超短脉冲激光器的出现,测量超短脉冲的方法得到了迅速发展。测量超短脉冲宽度的方法很多,总的可以规纳为:条纹照相法;1、2、3、4线性测量方法和非线性测量方法。条纹照相法时间分辨率可达0.2Ps,可以用来测量脉宽甚至用来研究超短脉冲的亚结构。较其它方法具有优越性,但制造工艺困难。线性测量方法

关键词：双光子吸收荧光方法光束分束器激光脉冲染料黑度光强粒子束分光器染剂脉冲特性脉冲宽度

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测定天然水中铀含量的荧光方法

铀矿地质 1973年第6期 50-54页

作者：阿伦·丹尼尔逊

本文叙述了一种测定天然水中铀含量的荧光方法。检出限量为0.3ppm。用离子交换方法预先浓集铀(浓集22倍),并将铀从样品的淬灭离子中分离出来。在1.35M 磷酸和硫酸介质中测量荧光。用波长为280nm、带宽为40nm 的辐射激发铀酰离子。从470... 详细信息

本文叙述了一种测定天然水中铀含量的荧光方法。检出限量为0.3ppm。用离子交换方法预先浓集铀(浓集22倍),并将铀从样品的淬灭离子中分离出来。在1.35M 磷酸和硫酸介质中测量荧光。用波长为280nm、带宽为40nm 的辐射激发铀酰离子。从470—510nm 扫描发射讯号。在样品溶液中加入少量的标准铀溶液以后,再次扫描荧光讯号,然后从两次读数中计算出样品中的铀含量。测定合成水样品中1.9ppm 铀的变化系数为8.5%。破坏了淋洗液中的有机质后,检出限量为0.1ppm。

关键词：离子交换 ppm 荧光方法淋出液交换反应树脂床荧光产额天然水铀含量

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用激光激发OH基荧光方法测量火焰温度

中国激光 1987年第6期 367-370页

作者：王大地蒋占魁吉林大学物理系

用YAG泵浦染料激光器,激发乙炔/空气火焰中OH基A∑+——X∏（1,0）带紫外荧光谱,并通过谱线的相对强度,计算出火焰的温度分布,与用CARS法的结果基本符合。此外还观察到火焰中局部地区非玻尔兹曼分布的现象。

关键词：火焰温度 OH 荧光方法激光激发玻尔兹曼分布

间接膜荧光方法检测呼吸道合胞病毒特异性抗体获得成功

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医学研究杂志 1985年第9期 288-289页

作者：庞力真王之梁张淑芳首都儿科研究所

自从三十年前首次分离到呼吸道合胞病毒(RSU)以来,目前已经确认RSU在世界许多地区引起婴幼儿下呼吸道感染。我们以往的研究也证明RSU是引起北京市婴幼儿尤其是6个月以下小婴儿肺炎和毛细支气管炎的主要病原体之一。但是,在RSU及其抗体... 详细信息

自从三十年前首次分离到呼吸道合胞病毒(RSU)以来,目前已经确认RSU在世界许多地区引起婴幼儿下呼吸道感染。我们以往的研究也证明RSU是引起北京市婴幼儿尤其是6个月以下小婴儿肺炎和毛细支气管炎的主要病原体之一。但是,在RSU及其抗体的检测技术方面仍存在一些问题,常规采用的补体结合试验和中和试验敏感性较低、操作繁琐,而固定细胞间接免疫荧光技术由于感染的细胞抗原需经涂片和丙酮固定等处理,常影响其特异性和敏感性。为了解决上述问题,我们参考有关文献建立了间接免疫荧光法

关键词：特异性抗体荧光方法间接免疫荧光固定细胞呼吸道合胞病毒敏感性

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测定天然水中铀含量的荧光方法

世界核地质科学 1973年第6期 50-54页

作者：阿伦·丹尼尔逊

本文叙述了一种测定天然水中铀含量的荧光方法。检出限量为0.3ppm。用离子交换方法预先浓集铀(浓集22倍)。并将铀从样品的淬灭离子中分离出来。在1.35M磷酸和硫酸介质中测量熒光。用波长为280nm、带宽为40nm的辐射激发铀酰离子。从470—... 详细信息

本文叙述了一种测定天然水中铀含量的荧光方法。检出限量为0.3ppm。用离子交换方法预先浓集铀(浓集22倍)。并将铀从样品的淬灭离子中分离出来。在1.35M磷酸和硫酸介质中测量熒光。用波长为280nm、带宽为40nm的辐射激发铀酰离子。从470—510nm扫描发射讯号。在样品溶液中加入少量的标准铀溶液以后,再久扫描荧光讯号,然后从两次读数中计算出样品中的铀含量。测定合成水样品中1.9ppm铀的变化系数为8.5％。破坏了淋洗液中的有机质后,检出限量为0.1ppm。

关键词：离子交换 ppm 荧光方法交换反应树脂床天然水铀含量荧光产额

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基于脱氧核酶检测铅离子的荧光方法研究

基于脱氧核酶检测铅离子的荧光方法研究