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UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术分析荔枝叶不同极性部位化学成分及体外降血糖活性比较

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现代食品科技 2024年

作者：梁洁陆春莲黄冬芳郑飘雪梁炎丽谢晶晶彭嘉文马玉明魏江存秦祖杰广西中医药大学药学院广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西国际壮医医院

采用超高效液相色谱-四级杆-静电场路线阱高分辨质谱法（UPLC-Q-OrbitrapHRMS）解析荔枝叶不同极性部位的化学成分；比较荔枝叶不同极性部位体外降血糖活性的强弱。PNPG法（p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside）、DNS法（3,5-dinitro s... 详细信息

采用超高效液相色谱-四级杆-静电场路线阱高分辨质谱法（UPLC-Q-OrbitrapHRMS）解析荔枝叶不同极性部位的化学成分；比较荔枝叶不同极性部位体外降血糖活性的强弱。PNPG法（p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside）、DNS法（3,5-dinitro salicylic acid）考察荔枝叶不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶活性的抑制作用。化学成分鉴定结果表明荔枝叶不同极性部位中含29个化合物，分别为有机酸类8个，黄酮及其苷类10个，原花青素类3个，含氮类5个，香豆素类1个，糖苷类1个，其他类1个；体外降血糖活性比较考察结果发现，乙酸乙酯萃取相的抑制活性最强，IC50分别为54.50、122.20μg/m L。原儿茶酸、木犀草苷、表儿茶素、山柰酚等成分可能是乙酸乙酯萃取相体外降血糖活性作用的物质基础，这为后续的荔枝叶质量控制研究奠定了前期基础。

关键词：荔枝叶不同极性部位化学成分 UPLC-Q-Orbitrap HRMS 降血糖

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荔枝叶药材质量标准研究

中国现代应用药学 2023年第14期40卷 1967-1975页

作者：黄冬芳梁洁韦金玉祁金丽曹玉嫔梁晶春安施佳刘星晨滕建北广西中医药大学南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心南宁530200 广西壮瑶药工程技术研究中心南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室南宁530200

目的建立荔枝叶药材的质量标准。方法建立荔枝叶药材的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法;按照中国药典2020年版第四部通则中相关方法,对荔枝叶药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物等项目进行测定。结果荔枝叶药材在性... 详细信息

目的建立荔枝叶药材的质量标准。方法建立荔枝叶药材的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法;按照中国药典2020年版第四部通则中相关方法,对荔枝叶药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物等项目进行测定。结果荔枝叶药材在性状、显微特征和薄层色谱方面均具有专属性特征。药材水分含量为2.66%~6.42%,总灰分含量为2.96%~4.52%,酸不溶性灰分含量为0.17%~0.94%,水溶性浸出物含量为15.38%~19.87%,醇溶性浸出物含量为24.94%~30.33%。没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、紫云英苷、槲皮素、山柰酚8种成分分别在0.003 3~0.052 0 mg·mL^(–1)、0.006 9~0.109 6 mg·mL^(–1)、0.013 0~0.208 0 mg·mL^(–1)、0.057 5~0.920 0 mg·mL^(–1)、0.013 4~0.213 6 mg·mL^(–1)、0.013 2~0.211 2 mg·mL^(–1)、0.002 9~0.045 6 mg·mL^(–1)、0.003 6~0.056 8 mg·mL^(–1)内呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率97.43%~102.97%,RSD为1.70%~2.90%。结论建立的荔枝叶药材质量标准具有很好的专属性、准确性、重现性,可用于荔枝叶药材的质量控制研究。

关键词：荔枝叶薄层色谱法高效液相色谱法质量标准

响应面法优化荔枝叶成分提取工艺及其抗炎作用研究

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饲料研究 2023年第19期46卷 73-80页

作者：祁金丽梁洁刘婷婷郑飘雪陆春莲梁炎丽曹玉嫔广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西南宁530200 中药学国家级实验教学示范中心(广西中医药大学) 广西南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心广西南宁530200 广西壮瑶药重点实验室广西南宁530200

试验旨在采用响应面法优化提取荔枝叶成分的工艺并探究其抗炎作用。以液料比、提取时间、提取溶剂浓度为考察因素,以没食子酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、紫云英苷、槲皮素、山柰酚含量的综合评分为考察指标,结合响应面法中Box-Behnken... 详细信息

试验旨在采用响应面法优化提取荔枝叶成分的工艺并探究其抗炎作用。以液料比、提取时间、提取溶剂浓度为考察因素,以没食子酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、紫云英苷、槲皮素、山柰酚含量的综合评分为考察指标,结合响应面法中Box-Behnken设计原理,优化荔枝叶成分的提取工艺。采用脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型评价荔枝叶的抗炎作用。结果表明,荔枝叶成分的最佳提取工艺参数为甲醇浓度72%、液料比18 mL/g、提取时间70 min。在此工艺条件下,荔枝叶成分的综合评分为88.99,与预测综合评分的84.53分相比误差较小。荔枝叶提取物可降低脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞导致的一氧化氮(NO)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放量;对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达也具有抑制作用;荔枝叶提取物能够上调Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达量与下调核因子κB(NF-κB)mRNA表达量。研究表明,此试验方法简单、稳定可靠,为荔枝叶成分的提取工艺研究提供了一定的参考依据。

关键词：荔枝叶响应面法单因素试验提取工艺抗炎

基于网络药理学研究荔枝叶的抗炎机制及实验验证

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世界中医药 2023年第8期18卷 1064-1071页

作者：祁金丽梁洁黄冬芳陈辉华韦金玉胡珏刘星晨黄团心广西中医药大学药学院南宁530200 广西壮瑶药工程技术研究中心南宁530200 广西优势中成药与民族药开发工程技术研究中心南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心南宁530200 广西壮族自治区食品药品检验所南宁530021

目的:采用网络药理学分析方法研究荔枝叶的抗炎作用机制,并进行体外细胞实验验证。方法:通过查阅文献查找荔枝叶化学成分,借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及SwissADME五项原则筛选出活性成分;基于Pubchem数据库、Swiss Targe... 详细信息

目的:采用网络药理学分析方法研究荔枝叶的抗炎作用机制,并进行体外细胞实验验证。方法:通过查阅文献查找荔枝叶化学成分,借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及SwissADME五项原则筛选出活性成分;基于Pubchem数据库、Swiss Target Prediction数据库预测各成分靶点;并利用Disgenet数据库获取炎症基因;采用Venny2.1.0数据库获得成分靶点与炎症基因的交集靶点作为潜在抗炎靶点,并将其输入STRING 11.0数据库获取蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图;使用DAVID 6.8数据库对抗炎靶点基因进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;采用Cytoscape 3.8.0软件构建荔枝叶“活性成分-抗炎靶点-通路”网络图。通过CCK-8法检测荔枝叶醇提物对RAW264.7细胞活性的影响;酶联免疫吸附试验法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;蛋白质印迹检测环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达。结果:从荔枝叶中筛选到9个活性成分,潜在抗炎靶点47个,127种GO生物功能,68条KEGG信号通路,涉及肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、缺氧诱导因子1(HIF-1)信号通路等与炎症相关通路。细胞实验表明荔枝叶醇提物浓度为12.5,25,50μg/mL对小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)没有毒性,可降低脂多糖诱导RAW264.7细胞导致的TNF-α、IL-6的释放量,对COX-2蛋白的表达也有抑制作用。结论:构建的“成分-靶点-通路”网络结构图揭示了荔枝叶通过多成分、多靶点、多通路协同作用达到抗炎作用,为进一步阐明荔枝叶抗炎作用机制提供理论依据。

关键词：荔枝叶抗炎网络药理学体外细胞实验中药活性成分靶点通路

植物乳杆菌对荔枝叶青贮品质及体外降解特性的影响

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草地学报 2023年第7期31卷 2232-2240页

作者：陈丹丹黄佩珊张超陈晓阳周玮张庆华南农业大学广东广州510642 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000

为探究发展荔枝叶作为青贮饲料的可行性,4种荔枝叶(‘晚埔’‘乌叶舅’‘桶仔’‘状元红’)分别用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LP)处理并设对照组。青贮3,7,14,30天后分析其发酵品质并测定30天后荔枝叶的干物质消化率和累积产... 详细信息

为探究发展荔枝叶作为青贮饲料的可行性,4种荔枝叶(‘晚埔’‘乌叶舅’‘桶仔’‘状元红’)分别用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LP)处理并设对照组。青贮3,7,14,30天后分析其发酵品质并测定30天后荔枝叶的干物质消化率和累积产气量。结果表明:添加LP降低了4种荔枝叶的pH值和大肠杆菌数量,同时减少了氨态氮产生(P荔枝叶中酵母菌数量比对照低。青贮30天后,LP处理的‘桶仔’和‘状元红’荔枝叶中霉菌数量比对照组低,且低于检测水平。添加LP增加了4种荔枝叶的体外干物质消化率;降低(P荔枝叶的发酵质量以及体外发酵特性,发展荔枝叶作为青贮原料可能是回收荔枝叶的一种可行方式。

关键词：荔枝叶植物乳杆菌发酵消化率产气量

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荔枝叶化学成分的研究

荔枝叶化学成分的研究

作者：黄绍军广西师范大学

学位级别：硕士

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是一种高价值的亚热带水果,国内研究得较多的是荔枝核的化学成分及药理作用,对于荔枝叶只有微量元素的报道。药理研究表明荔枝叶的石油醚提取物有抗炎、止痛、解暑消滞及收湿敛疮等作用。本论文主要从以下... 详细信息

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是一种高价值的亚热带水果,国内研究得较多的是荔枝核的化学成分及药理作用,对于荔枝叶只有微量元素的报道。药理研究表明荔枝叶的石油醚提取物有抗炎、止痛、解暑消滞及收湿敛疮等作用。本论文主要从以下三个方面对荔枝叶进行了研究工作: 1. 利用RP-HPLC 法,采用保留时间定性,证实了荔枝叶水提物的水解产物中含有槲皮素与山奈酚;并且通过硅胶柱层析、重结晶的方法分离得到了槲皮素与山奈酚;证实了荔枝叶中含有以槲皮素和山奈酚为甙元的黄酮甙。 2. 以荔枝叶为原料,水提物经大孔树脂吸附、80%乙醇洗脱、无水乙醇精制,得到荔枝叶总甙。再经硅胶柱层析,薄层制备,HPLC 制备和重结晶等方法从荔枝叶中分离得到了6 个化合物,经过光谱和化学方法检测,证实其中2 个以木脂素为甙元,它们是:4,4′,9′-三羟基-3,3′-二甲氧基-苯基四氢萘木脂素-9-O-β-D-吡喃核糖甙和4,4′,9′-三羟基-3,5,3′-三甲氧基-苯基四氢萘木脂素-9-O-β-D-吡喃核糖甙;另外2 个以槲皮素为甙元,它们是:槲皮素-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-β-D-半乳糖]-7-O-α-L-鼠李糖甙和槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖]甙;其余2 个以山奈酚为甙元,它们是山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-β-D-半乳糖]甙和山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖]甙。 3. 以槲皮素、山奈酚为标准品,使用HPLC 法测定了荔枝叶中总黄酮的含量,第一次提出荔枝叶中总黄酮含量与黄酮甙元含量的换算公式,并确定了换算系数为2.55。

关键词：荔枝叶化学成分分离纯化黄酮含量HPLC

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荔枝叶活性成分鉴定及其生物活性研究

荔枝叶活性成分鉴定及其生物活性研究

作者：温玲蓉华南理工大学

学位级别：硕士

荔枝叶是无患子科植物荔枝(Litchi chinensis sonn)的枝叶，全年可采，富含黄酮等多酚类物质，具有祛湿解毒的功效，可用于治疗烂疮和湿疹。目前，对于荔枝叶的化学成分及药理活性研究甚少。因此，本研究目的在于探讨荔枝叶的化学成分... 详细信息

荔枝叶是无患子科植物荔枝(Litchi chinensis sonn)的枝叶，全年可采，富含黄酮等多酚类物质，具有祛湿解毒的功效，可用于治疗烂疮和湿疹。目前，对于荔枝叶的化学成分及药理活性研究甚少。因此，本研究目的在于探讨荔枝叶的化学成分组成，并对其生物活性进行研究，为其在食品行业和医药行业的应用和开发提供一定的理论依据，以便更好地综合开发和利用我国大量的荔枝资源及发展我国传统中药。通过UPLC-ESI-Q-MS联用技术，采用负离子扫描模式对槐枝品种的荔枝核、荔枝壳和荔枝叶90%甲醇提取液进行分析，分别鉴定了24、26和29种多酚类化学成分。同时比较了三种提取物总酚、总黄酮含量以及抗氧化活性和抑菌效果，实验结果发现荔枝叶醇提物总酚、总黄酮含量以及抗氧化活性均高于荔枝核和荔枝壳;三种提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌、苏云金芽孢杆菌均有一定的抑制效果，其最小抑制浓度(MIC)为62.50μg/mL。采用有机溶剂分级、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、半制备ODS柱层析和半制备HPLC等分离方法从荔枝叶提取物的乙酸乙酯相中分离得到10个化合物。利用一维和二维核磁共振波谱和质谱等方法分别鉴定为原花青素A2(L1)、表儿茶素(L2)、木犀草素(L3)、山奈酚-3-O-β-葡萄糖苷(L4)、山奈酚-3-O-α-鼠李糖苷(L5)、槲皮素-3-O-芸香糖苷(L6)、Schizandriside(L7)、Ehletianol C(L8)、SesquipinsapolB(L9)和Sesquimarocanol B(L10)。其中化合物L810为首次从该科植物中分离得到,化合物L3、L5为首次从荔枝中分离得到，化合物L1、L2、L4和L6是荔枝叶乙酸乙酯相的主要成分。采用体外抗氧化实验方法，对荔枝叶分离得到的单体化合物DPPH自由基清除能力和过氧自由基的吸收能力进行了研究。结果表明，荔枝叶分离得到多酚化合物大多数具有较强的自由基清除活性。10个化合物中，原花青素A2和表儿茶素的自由基清除活性最强，是荔枝叶良好抗氧化活性的主要原因，其清除DPPH自由基IC50值分别为5.08和5.54μM，过氧自由基的吸收能力分别为30.41和26.85μmol Trolox/μmol sample(ORAC值)，并初步讨论了荔枝叶单体化合物自由基清除能力与化合物分子结构之间的构效关系。采用刃天青染色法测定荔枝叶不同极性萃取物和黄酮类化合物的最小抑菌浓度。结果显示，石油醚相萃取物对不同细菌均有较好的抑制作用，其MIC值为15.631.25μg/mL。黄酮类化合物中木犀草素的抑菌效果最好，其MIC值为14.06μg/mL;表儿茶素、原花青素A2和芦丁对细菌具有一定的抑制效果，MIC值均为62.5μg/mL;而山奈酚-3-O-β-葡萄糖苷和山奈酚3-O-α-鼠李糖苷在测试浓度范围内没有抑菌作用。

关键词：荔枝叶化学成分生物活性抗氧化抑菌

龙眼叶与其易淆品荔枝叶的叶形态-脉序图谱鉴别特征

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世界科学技术-中医药现代化 2013年第7期15卷 1557-1561页

作者：曾静韦郃廖月葵何报作鄂州市食品药品监督管理局鄂州436000 广西中医药大学药学院南宁530001

目的：建立龙眼叶与荔枝叶的鉴别方法。方法：采用叶形态-脉序图谱鉴别法（LMVP）和定量分析评价鉴别中药品种真伪方法的可靠性的方法（QAERM）。结果：龙眼的小叶脉序类型为真不达缘羽状脉序，二级脉在近叶缘处渐变细，少数结环，三级... 详细信息

目的：建立龙眼叶与荔枝叶的鉴别方法。方法：采用叶形态-脉序图谱鉴别法（LMVP）和定量分析评价鉴别中药品种真伪方法的可靠性的方法（QAERM）。结果：龙眼的小叶脉序类型为真不达缘羽状脉序，二级脉在近叶缘处渐变细，少数结环，三级脉为贯串型或不规则结网型；荔枝的小叶脉序类型为不达缘环结羽状脉序，二级脉走向为急转曲行结环，呈波状或之字形，三级脉为不规则结网型。以上述3组区别点为指标，鉴别的正确性（Ac）=98.1%~100%；重复性为符合率（ARO）=98.5%~100%，一致性强度（Kappa）=0.97~1.00。结论：建立的“叶形态-脉序图谱鉴别法”可准确鉴别龙眼叶及易淆品荔枝叶，该法操作简便、快速、价廉且可靠性强。

关键词：龙眼叶荔枝叶叶形态脉序图谱中药鉴定

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荔枝叶片养分标准综述及推荐的新标准

世界热带农业信息 1993年第1期 14-22,27页

作者： C.M.Menzel 熊伟建

在澳大利亚亚热帶地区的7个荔枝果园中进行了3年试验。供试荔枝品种是“大造”、“黑叶”和“淮枝”。试验期间,每月从供试植株上采集营养梢后或果穗后(开花树)的最近老熟叶片进行分析。从夏末秋初营养梢老熟至花序萌发或花序萌发后的5... 详细信息

在澳大利亚亚热帶地区的7个荔枝果园中进行了3年试验。供试荔枝品种是“大造”、“黑叶”和“淮枝”。试验期间,每月从供试植株上采集营养梢后或果穗后(开花树)的最近老熟叶片进行分析。从夏末秋初营养梢老熟至花序萌发或花序萌发后的5—8月(冬季),大多教养分的浓度稳定不变。因为季节对叶片养分浓度有影响,所以样品的选择将会影响到这些果树的N、K、Ca、Fe和B的诊断。因此,从开花枝采集叶片诊断荔枝营养状况时,建议在花序萌发后1—2周内进行。对于澳大利亚荔枝园,在花序萌发后(5—8月)采样,叶片养分标准暂定为:N,1.50—1.80％;P,0.14—0.22％;K,0.70—1.10％;Ca,0.60—1.00％;Mg,0.30—0.50％;Fe,50—100μg/g;Mn,100—250μg/g;Zn,15—30μg/gCu,10—25μg/(?),B,25—60μg/g;Na,<500μg/g;Cl,<0.25％。

关键词：荔枝园荔枝品种座果荔枝树花树荔枝果实营养状况荔枝叶荔枝种植土壤类型