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显微镜检淀粉粒及草酸钙结晶在鉴定真伪黄芪的意义

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时珍国药研究 1997年第5期8卷 54-54页

作者：陈绍勇福建省永安市立医院

黄芪及其常见的伪品横切面用显微镜检淀粉粒和草酸钙结晶。结果发现：黄芪含淀粉粒，不含草酸钙结晶，而常见的伪黄芪无此特征。

关键词：黄芪伪黄芪淀粉粒草酸钙结晶

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中药材的炮制对草酸钙结晶影响的试验研究

基层中药杂志 2002年第3期16卷 28-28页

作者：黄海欣河南省南阳市药品检验所河南南阳473061

目的　观察中药材的炮制对草酸钙结晶的影响。方法　对含有草酸钙结晶的中药材用白矾水溶液在不同温度和不同浓度下浸泡试验。结果　中药材中的草酸钙结晶在白矾水溶液中可逐渐消失 ,随温度升高 ,白矾水溶液的浓度增大 ,时间延长 ,其结... 详细信息

目的　观察中药材的炮制对草酸钙结晶的影响。方法　对含有草酸钙结晶的中药材用白矾水溶液在不同温度和不同浓度下浸泡试验。结果　中药材中的草酸钙结晶在白矾水溶液中可逐渐消失 ,随温度升高 ,白矾水溶液的浓度增大 ,时间延长 ,其结晶消失的速度加快。结论 :药材中的草酸钙结晶 ,在加工炮制过程中发生变化或消失。

关键词：草酸钙结晶中药材白矾炮制方法

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尿酸盐不影响人尿中草酸钙结晶的形成

国外医学.泌尿系统分册 1984年第3期 127-127页

作者：张声滨

新鲜人尿标本用固定的尿酸酶处理以降低尿酸盐浓度。加入尿酸盐以产生低、正常和高尿酸盐之尿标本。各标本在pH5.3情况下被迅速蒸发到标准的渗克分子浓度,借助半定量显微镜法或全定量放射性同位素技术来测定所产生的草酸钙结晶。

关键词：草酸钙结晶尿酸盐

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用草酸钙结晶鉴别药材的真伪

包头医学 2009年第2期33卷 98-98,96页

作者：乌兰包头市蒙中医院药剂科内蒙古包头014040

目的:通过药材中所含草酸钙结晶鉴定几种药材的真伪。方法:挑选含有草酸钙结晶的,几种药材的真伪品粉末在显微镜下观察进行比较。结果:很容易能够鉴别出一些药材的真伪。结论:此方法简单易行,准确率高,值得推广。

关键词：草酸钙结晶鉴定

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芭蕉芯和维生素B6对小鼠草酸钙结晶的抑制作用

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广西医科大学学报 1996年第3期 8-8页

作者：邓耀良李山吴闯莫曾南杨占斌陈坚广西医科大学第一附属医学

芭蕉芯和维生素Ｂ６对小鼠草酸钙结晶的抑制作用邓耀良李山吴闯莫曾南杨占斌陈坚广西医科大学第一附属医学中华泌尿外科杂志１９９６，１７（２）：１０３观察了维生素Ｂ６和芭蕉芯提取液对实验性高草酸尿症小鼠体内草酸钙结晶形成的抑... 详细信息

芭蕉芯和维生素Ｂ６对小鼠草酸钙结晶的抑制作用邓耀良李山吴闯莫曾南杨占斌陈坚广西医科大学第一附属医学中华泌尿外科杂志１９９６，１７（２）：１０３观察了维生素Ｂ６和芭蕉芯提取液对实验性高草酸尿症小鼠体内草酸钙结晶形成的抑制作用。结果发现：湿肾组织钙含量各...

关键词：草酸钙结晶抑制作用基因互作小鼠小家鼠维生素

白芍水提物对肾结石大鼠纤维化、排石效果及Klotho蛋白的影响

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中国老年学杂志 2024年第12期 2940-2945页

作者：何灿谭硕李明亮李信刘锋王建喜长沙市第三医院

目的探讨白芍水提物对肾结石大鼠纤维化、排石效果及Klotho蛋白的影响。方法将60只大鼠按照随机数字方法分为正常组、模型组、西药组、白芍水提物低、中及高剂量组，每组各10只。除正常组，其余大鼠均建立草酸钙结石大鼠模型，建模成... 详细信息

目的探讨白芍水提物对肾结石大鼠纤维化、排石效果及Klotho蛋白的影响。方法将60只大鼠按照随机数字方法分为正常组、模型组、西药组、白芍水提物低、中及高剂量组，每组各10只。除正常组，其余大鼠均建立草酸钙结石大鼠模型，建模成功后，白芍水提物低、中及高剂量组分别灌胃1.2、2.4及3.6 g/ml的白芍水提物，西药组灌胃0.6 g/ml的枸橼酸钾，正常组及模型组灌胃等体积的生理盐水。采用全自动分析仪检测尿液及血液中钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P）含量，计算24 h尿量；苏木素-伊红（HE）染色及Von-Kossa染色观察肾组织病理形态、晶体沉积程度；形态分级评分法计算肾组织节结晶评分；免疫组化检测肾组织转化生长因子（TGF）-β1/SMAD同源物（Smad）3;Western印迹检测肾组织Klotho及成纤维细胞生长因子（FGF）-23蛋白表达。结果与正常组相比，模型组24 h尿量、Mg2+明显降低，尿液中Ca2+、P3+升明显高，血液中尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、Ca2+、P3+明显升高，Mg2+明显降低（P草酸钙结晶评分、TGF-β1、Smad3蛋白明显升高，Klotho及FGF-23蛋白明显降低；与模型组相比，西药组、白芍水提物低、中及高剂量组草酸钙结晶评分、TGF-β1、Smad3蛋白明显降低，Klotho及FGF-23蛋白明显升高，白芍水提物呈剂量依赖性，白芍水提物高剂量组与西药组以上指标无显著差异（P>0.05）。结论白芍水提物对草酸钙结石大鼠具有改善作用，可通过抑制TGF-β1、Smad3表达改善肾组织纤维化，可减轻钙质沉积，促进结石排除，伴随剂量依赖性，研究机制可能与上调Klotho活性相关。

关键词：肾结石白芍水提物 Klotho 肾纤维化草酸钙结晶

草酸钙晶体诱导自噬加重肾小管上皮细胞间质转分化的进程

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中国中西医结合肾病杂志 2022年第6期23卷 482-487,I0002页

作者：李璐张陵艳谌卫丁家荣赵婷婷郭志勇海军军医大学长海医院肾内科上海200433

目的:在体内外模型中研究草酸钙晶体诱导的肾脏自噬和上皮间质转分化(epithelial mesenchymal transition,EMT)以及自噬在EMT中的作用。方法:(1)将20只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组。检测小鼠血肌酐及尿素氮水平;取肾组织做免疫... 详细信息

目的:在体内外模型中研究草酸钙晶体诱导的肾脏自噬和上皮间质转分化(epithelial mesenchymal transition,EMT)以及自噬在EMT中的作用。方法:(1)将20只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组。检测小鼠血肌酐及尿素氮水平;取肾组织做免疫组化及westernblot检测。(2)应用一水草酸钠刺激HK2细胞株构建细胞模型,予雷帕霉素、3MA干预后检测细胞活性、自噬及EMT蛋白表达情况。结果:(1)造模组小鼠肾脏皮髓质交界处可见大量草酸钙晶体,伴随肾小管上皮细胞损伤;肾组织westernblot检测提示:LC3B、Beclin-1、α-SMA蛋白表达显著升高,E-cadherin表达显著下调(P草酸钠处理HK2细胞后由鹅卵石样变成梭形,伴随细胞损伤,成时间和剂量依赖性;(3)一水草酸钠作用12 h后自噬及EMT蛋白表达升高,24 h到达高峰,随着时间延长逐渐下降,且细胞损伤加重;加予雷帕霉素处理后,α-SMA及Vimentin的表达进一步增加,细胞死亡程度加重。结论:自噬参与并加重早期草酸钙结晶肾损伤EMT的进程;通过抑制自噬可以改善草酸钙结晶肾损伤程度。

关键词：草酸钙结晶自噬上皮间质转分化肾小管上皮细胞

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广金钱草保护草酸钙致HK-2细胞损伤的活性成分筛选及机制研究

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广金钱草保护草酸钙致HK-2细胞损伤的活性成分筛选及机制研究

作者：李明慧广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:广金钱草在临床和药理实验中被证实具有显著治疗肾结石的作用,但其具体药效物质基础和作用机制尚未完全明确。因此本文拟通过分析广金钱草在大鼠肾脏内分布的原型成分及代谢产物,利用一水草酸钙(COM)致人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK... 详细信息

目的:广金钱草在临床和药理实验中被证实具有显著治疗肾结石的作用,但其具体药效物质基础和作用机制尚未完全明确。因此本文拟通过分析广金钱草在大鼠肾脏内分布的原型成分及代谢产物,利用一水草酸钙(COM)致人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)损伤模型筛选药效成分,并进一步探讨其保护机制。此外利用体外草酸钙模型,探讨广金钱草药效成分对草酸钙成核、聚集、黏附的影响。方法:1.广金钱草在大鼠肾组织中的分布研究通过给正常SD大鼠灌胃广金钱草,于给药后0.5 h,1h,2 h,4 h,6 h取肾脏,匀浆后甲醇沉淀蛋白,取上清液利用UPLC-Q-TOF-MS技术,检测广金钱草化学成分在大鼠肾脏中分布的原型及代谢产物,并且分析其代谢途径。2.广金钱草保护COM致HK-2细胞损伤的活性成分筛选采用COM致HK-2细胞损伤模型,通过MTT法检测细胞活力,对广金钱草总黄酮(TFDS)以及其中8个黄酮单体(夏佛塔苷、异夏佛塔苷、维采宁-2、异牡荆苷、异荭草苷、芹菜素、木犀草素、染料木素)进行筛选。采用试剂盒检测细胞上清液中LDH释放量、细胞内SOD酶活力、细胞内ROS产生量。3.广金钱草药效成分与NLRP3炎症小体相关蛋白的关系以GAPDH为内参对照,运用Western blot检测不同处理组HK-2细胞中NLRP3炎症小体相关蛋白(NLRP3、Caspase-1、HMGB1)的表达水平。4.广金钱草药效成分对草酸钙结晶形成过程的影响采用体外草酸钙结晶动力学模型,以枸橼酸钾为阳性对照,考察广金钱草药效成分对体外草酸钙成核、聚集的影响。不同成分预处理细胞后加入COM黏附HK-2细胞,显微镜下观察并统计不同处理组细胞黏附COM的情况。成果:1.通过对口服广金钱草后的大鼠肾组织分布的原型成分及代谢产物研究,检测到原型成分5个,分别为:维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷、染料木素。此外还检测到代谢成分20个,主要代谢途径有葡萄糖结合、甲基化、葡萄糖醛酸化。2.实验采用100 μg/mL COM处理细胞24 h作为模型组。加入TFDS以及不同单体成分与细胞共同培养24 h,与模型组相比,TFDS及4个黄酮单体(异荭草苷、芹菜素、染料木素、木犀草素)干预后的细胞活力显著上升,均可减少细胞上清液中LDH释放量,提高细胞内SOD的活性,减少模型细胞ROS产生量,提示广金钱草防治肾结石作用的机制之一是保护细胞损伤、提高细胞抗氧化应激能力。***造模后细胞内NLRP3炎症小体相关蛋白(NLRP3、Caspase-1、HMGB1)表达均升高,而给予TFDS及4个黄酮单体(异荭草苷、芹菜素、染料木素、木犀草素)干预后,其表达均有不同程度的回调。提示广金钱草药效成分可能通过调节NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平,从而减轻机体炎症,保护受损细胞。4.枸橼酸钾、TFDS和4个黄酮单体(异荭草苷、芹菜素、染料木素、木犀草素)均对草酸钙的成核和聚集有抑制作用。不同成分预处理后,黏附于HK-2细胞上的COM的量较模型组显著减少。结论:广金钱草中有5个成分可分布在肾脏,分别是维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷、染料木素,此外肾组织上还分布了 20个代谢产物。TFDS以及芹菜素、异荭草苷、木犀草素、染料木素可保护COM致HK-2损伤细胞,其中包括提高细胞活力,保护细胞膜完整性,提高细胞抗氧化应激能力,并且可调控NLRP3炎症小体相关蛋白的表达。此外,TFDS及4个药效单体可抑制草酸钙结晶的成核、聚集、黏附。

关键词：广金钱草草酸钙结晶药效物质基础黄酮炎症因子

去乙酰化酶SIRT3在草酸钙肾结石形成中的作用和机制研究

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去乙酰化酶SIRT3在草酸钙肾结石形成中的作用和机制研究

作者：刘敏第二军医大学

学位级别：硕士

目的通过动物和细胞实验检测草酸钙晶体作用下肾小管上皮细胞SIRT3的表达变化,及其对氧化应激和细胞凋亡的影响,阐明SIRT3对草酸钙肾结石形成的影响及机制。方法构建草酸钙肾结晶小鼠模型,设置实验组和阴性对照组,Von Kossa染色检测小... 详细信息

目的通过动物和细胞实验检测草酸钙晶体作用下肾小管上皮细胞SIRT3的表达变化,及其对氧化应激和细胞凋亡的影响,阐明SIRT3对草酸钙肾结石形成的影响及机制。方法构建草酸钙肾结晶小鼠模型,设置实验组和阴性对照组,Von Kossa染色检测小鼠肾脏钙盐沉积情况。通过两组小鼠肾脏组织的基因表达谱分析和文献回顾,筛选出差异表达关键基因Sirt3,并用q PCR和Western blot实验验证其表达水平。免疫组化检测两组小鼠肾脏组织SIRT3蛋白表达,HE染色和TUNEL实验检测两组小鼠肾脏组织凋亡的情况,检测两组小鼠肾脏组织活性氧的含量,ELISA实验检测两组小鼠血液和尿液中肌酐、尿素氮以及中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白水平。构建草酸钙肾结晶细胞模型(TCMK-1细胞),分别用0μg/ml、10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml浓度的一水草酸钙晶体刺激细胞24小时、48小时及72小时,流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死率的变化,检测细胞ROS含量的变化,Western blot检测细胞SIRT3蛋白表达的变化。通过质粒过表达细胞SIRT3,设置对照组细胞,使用1000μg/ml浓度的一水草酸钙晶体刺激细胞72小时后,检测细胞活性氧的含量,流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死率。结果成功构建草酸钙肾结晶小鼠模型,实验组的12只小鼠均成功诱导出肾脏结晶。基因芯片分析结果显示草酸钙肾结晶小鼠和对照组间共有2425个差异表达基因,q PCR验证部分基因表达差异,结果显示草酸钙肾结晶小鼠肾脏组织内Sirt3、Nlrp6表达下调,Il 1beta、Nfκb 1、Stat3、Il 6表达上调;线粒体相关差异基因筛选显示草酸钙肾结晶小鼠肾脏组织Sirt3表达显著降低;Western blot实验显示草酸钙肾结晶小鼠肾脏组织内SIRT3蛋白表达明显降低。免疫组化实验显示草酸钙肾结晶小鼠肾小管上皮细胞SIRT3蛋白表达较对照组显著降低;HE染色显示草酸钙肾结晶小鼠肾脏皮质和髓质细胞呈现明显损伤及凋亡性改变,TUNEL实验显示草酸钙肾结晶小鼠肾脏组织皮质(45.6±10.2 vs.12.4±1.6,p草酸钙肾结晶小鼠肾脏组织SIRT3蛋白表达明显降低,伴有促凋亡蛋白Bax表达增加,抑制凋亡蛋白Bcl-2表达降低;ROS检测显示草酸钙肾结晶小鼠肾脏组织中ROS含量明显高于阴性对照组(41530 RFU vs.16440 RFU,p草酸钙肾结晶小鼠血液肌酐值(80.45±31.73 vs.29.72±16.48μmol/L,p草酸钙肾结晶小鼠血液尿素氮值(30.46±9.44 vs.5.89±2.38 mmol/L,p草酸钙肾结晶小鼠血液中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白值与对照组小鼠无显著差异(273.45±17.45 vs.275.92±30.53 mmol/L,p>0.05),而尿液中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白值显著高于对照组小鼠(239.54±19.42 vs.121.52±34.61μmol/L,p草酸钙肾结晶细胞模型中,草酸钙结晶诱导的细胞凋亡和坏死、活性氧增加具有浓度和时间依赖性;草酸钙结晶下调TCMK-1细胞SIRT3的表达具有浓度和时间依赖性。过表达SIRT3后,与对照组比较,TCMK-1细胞凋亡率(8.6±0.2%vs.5.3±0.4%,p草酸钙肾结晶通过下调肾小管上皮细胞去乙酰化酶SIRT3的表达,促进肾小管上皮细胞氧化应激水平升高、细胞凋亡和坏死增加,进一步促进草酸钙晶体在肾脏的沉积。

关键词：草酸钙结晶细胞凋亡氧化应激 SIRT3