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四种主要草莓病毒研究进展

北方园艺 2022年第9期 122-129页

作者：李文琦付崇毅孙平平马强张磊李正男内蒙古农业大学园艺与植物保护学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院蔬菜研究所内蒙古呼和浩特010031

草莓在长时间的无性繁殖过程中极容易受到病毒侵染,进而导致生产中的病毒积累和传播,严重影响草莓的产量和品质。目前草莓病毒病的研究相对于其它植物病毒滞后,因此,对于草莓病毒病的防控研究迫在眉睫。综合国内外文献从生物学、进化、... 详细信息

草莓在长时间的无性繁殖过程中极容易受到病毒侵染,进而导致生产中的病毒积累和传播,严重影响草莓的产量和品质。目前草莓病毒病的研究相对于其它植物病毒滞后,因此,对于草莓病毒病的防控研究迫在眉睫。综合国内外文献从生物学、进化、致病机制、检测方法、病毒防治等方面综述了4种主要草莓病毒的研究进展,对促进草莓病毒的研究与防控工作有重要意义。

关键词：草莓病毒防控检测

草莓病毒种类鉴定及培育无病毒种苗的技术研究

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中国农业科学 1990年第4期23卷 43-49页

作者：王国平刘福昌薛光荣朱秋英杨振英王焕玉中国农业科学院果树研究所

本文采用指示植物小叶嫁接法鉴定,明确了我国草莓主要栽培区的病毒种类及其分布状况,提出了草莓病毒的鉴定和检测方法。利用草莓花药培养培育成12个品种的无病毒母株,建立了适合于我国情况的无病毒种苗生产体系。隔离繁育的无病毒种苗,... 详细信息

本文采用指示植物小叶嫁接法鉴定,明确了我国草莓主要栽培区的病毒种类及其分布状况,提出了草莓病毒的鉴定和检测方法。利用草莓花药培养培育成12个品种的无病毒母株,建立了适合于我国情况的无病毒种苗生产体系。隔离繁育的无病毒种苗,在17省(市)栽培取得了无病毒草莓增产7.8-45.1%的效果。

关键词：草莓病毒鉴定和检测脱毒

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草莓病毒病及其研究进展

云南大学学报（自然科学版） 2019年第6期41卷 1221-1237页

作者：苏代发童江云杨俊誉陈杉艳罗志伟沈雪梅赖泳红 Jamil Arslan 魏世杰崔晓龙云南大学生命科学学院云南昆明650091 昆明市农业科学研究院云南昆明650034

对草莓镶脉病毒(strawberry vein banding virus, SVBV)、草莓斑驳病毒(strawberry mottle virus, SMoV)、草莓皱缩病毒(strawberry crinkle virus, SCV)、草莓轻型黄边病毒(strawberry mild yellow edge virus, SMYEV)和草莓潜隐环斑病毒(strawberry latent ringspot virus, SLRSV)等5种草莓主要病毒的分类、分布及生物学特性进行了综述.在此基础上,对草莓病毒的检测方法(指示植物检测、电镜检测、血清学检测和分子生物学检测)、传播媒介(蚜虫、蓟马、粉虱、线虫和真菌)、脱毒方法(高温脱毒、化学试剂脱毒、茎尖脱毒、高温-茎尖结合脱毒和超低温脱毒)及草莓病毒病的防治(脱毒苗运用、田间管理、抗病毒品种和阻断传播媒介)等方面进行了论述,以期为草莓生产中病毒病的防治提供科学依据.

关键词：草莓病毒脱毒病毒检测防治

鸡卵黄抗体技术在5种草莓病毒快速检测中的应用

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兰州大学学报（自然科学版） 2021年第3期57卷 353-359,368页

作者：杨菊梅何永红马建忠周延峰周小春兰州大学第二医院萃英生物医药研究中心兰州730030 会宁县市场监督管理局甘肃白银730799 兰州理工大学生命科学与工程学院兰州730050

利用生物信息学技术对草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓斑驳病毒(SMV)及草莓皱缩病毒(SCV)等5种病毒抗原表位进行预测,将预测的抗原肽段及串联表位肽段的DNA片段在大肠埃希氏菌(Escherichia)BL21(DE3)进行原核表达,并将纯化后的抗原表位... 详细信息

利用生物信息学技术对草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓斑驳病毒(SMV)及草莓皱缩病毒(SCV)等5种病毒抗原表位进行预测,将预测的抗原肽段及串联表位肽段的DNA片段在大肠埃希氏菌(Escherichia)BL21(DE3)进行原核表达,并将纯化后的抗原表位肽免疫京红一号产蛋鸡.从免疫蛋鸡卵黄中分离卵黄抗体(IgY),并对其进行抗体活性、效价及灵敏度的分析.结果表明,预测到的优势抗原表位肽段分别位于5种草莓病毒外壳蛋白氨基酸序列的27-38、49-82、288-314、62-75、218-238位.5种优势抗原表位肽及其串联抗原表位肽(5S)均能在Escherichia BL21(DE3)中成功表达.5S免疫蛋鸡产生的IgY对于5种草莓病毒均具有较强的免疫活性,抗体滴度为1∶1600,检测灵敏度为10ng.本研究制备的串联抗原表位重组蛋白能诱导蛋鸡产生具有较强免疫活性的IgY抗体,可用于SMYEV、SMV及SCV等5种草莓病毒的同时检测.

关键词：草莓病毒外壳蛋白抗原表位原核表达鸡卵黄抗体

小RNA深度测序鉴定草莓病毒的研究及草莓快繁体系的优化

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小RNA深度测序鉴定草莓病毒的研究及草莓快繁体系的优化

作者：谢雪花湖南农业大学

学位级别：硕士

草莓是重要的草本果树,果实外观美丽、香气浓郁且营养丰富,口感酸甜中、柔软多汁,备受国内外市场消费者的欢迎。草莓采取无性繁殖,易感病毒病,影响草莓的产量和品质,每年我国草莓因病毒病而减产高达80%。快速、有效的草莓病毒检测鉴定... 详细信息

草莓是重要的草本果树,果实外观美丽、香气浓郁且营养丰富,口感酸甜中、柔软多汁,备受国内外市场消费者的欢迎。草莓采取无性繁殖,易感病毒病,影响草莓的产量和品质,每年我国草莓因病毒病而减产高达80%。快速、有效的草莓病毒检测鉴定技术及草莓脱毒快繁技术来对保证脱毒效果与质量及脱毒苗的数量具有重要意义。本论文以长沙市疑似病毒病症状的草莓作为试材,对草莓叶片总RNA的提取方法进行了优化,siRNA深度测序技术和RT-PCR检测技术相结合,对长沙市草莓病毒的种类进行了快速而准确的检测鉴定;以草莓组培苗为试材,对草莓组培苗快繁技术进行优化。主要研究结果如下：1、比较了Trizol UP法、Trizol Plant法、CTAB-LiCl法和RNAprep Pure Plant Kit四种方法提取草莓总RNA的效果,用RNAprep Pure Plant Kit方法提取RNA效果较好,有28S、18S和5S条带,28S条带的亮度是18S条带的1.5-2倍,且没有出现降解的二聚体,此法可有效去除多糖,提取草莓片中RNA的质量高,完整性好,产率高,可满足小RNA深度测序要求;CTAB-LiCl法能提取到RNA,只有28S和18S条带,有降解的二聚体,可满足RT-PCR试验要求,且成本明显低于RNArep Pure Kit法;TrizolUP法和Trizol Plant法未能成功提取符合要求的总RNA。2、采用小RNA深度测序技术对长沙市疑似病毒病症状的草莓叶片混合样品进行了测序和生物信息学分析,结果发现了CMV、SVBV、LySV和PRV四种病毒,E-value从小到大依次为CMV、SVBV、LySV和PRV。经RT-PCR验证,只检测出SVBV和CMV两种病毒,未检测出PRV和LySV这两种病毒。3、运用RT-PCR法对长沙地区53个草莓样品病毒感染情况进行检测,结果表明53个草莓样品,有42个样品有检测出CMV,检出率达79.25%,这是在湖南草莓植株上首次检测出CMV,在国内第二次在草莓上检测出CMV;检测出感染SVBV的样品数为10个,SVBV的检出率达18.87%,且全部为CMV、SVBV两种病毒复合侵染,,53个样品均未检测出PRV和LySV。4、对红颜草莓组培苗增殖培养基进行了优化,结果表明红颜草莓组培苗增值的最佳激素配比是6-BA 1mg/L+NAA 0.10 mg/L,增殖系数达10.91。

关键词：草莓病毒小RNA深度测序 RT-PCR 快繁

福建地区草莓病毒的分子检测和SPaV全基因组序列的获得

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福建地区草莓病毒的分子检测和SPaV全基因组序列的获得

作者：陈道福建农林大学

学位级别：硕士

草莓是经济价值较高的浆果作物。目前我国是世界上草莓栽培面积最大、产量最高的国家。我国草莓病毒病发生普遍,生产上亦无有效的防治方法,草莓病毒病的发生严重影响了我国草莓产业的发展。福建省各地均有草莓种植,但对于草莓病毒病的... 详细信息

草莓是经济价值较高的浆果作物。目前我国是世界上草莓栽培面积最大、产量最高的国家。我国草莓病毒病发生普遍,生产上亦无有效的防治方法,草莓病毒病的发生严重影响了我国草莓产业的发展。福建省各地均有草莓种植,但对于草莓病毒病的种类、地理分布及发病程度尚缺乏全面系统的研究,为此,我们选取了 4种在我国发生较为广泛且危害严重的草莓病毒（SMoV、SMYEV、SVBV和SCV）以及在我国尚未报道的5种病毒（SPaV、SCrV-3、SCrV-4、BPYV和SPV1）作为研究对象,利用RT-PCR和高通量测序技术检测各病毒在福建省草莓主栽区的发生情况,结果表明,在待测草莓样品中共检出 SMoV、SMYEV、SVBV、SPaV、SCrV-3、SCrV-4 共 6 种病毒,SMoV的检出率为19.3%（18/93）,其中检出SMoV的样品分别来自福州、漳州、三明和南平,各地检出率分别为福州69.2%（9/13）、漳州 40%（4/10）、三明 20%（2/10）和南平 30%（3/10）。SMYEV的检出率为3.2%（3/93）,其中检出SMYEV的样品来自宁德,SMYEV在宁德的检出率为15%（3/20）。SVBV的检出率为31.1%（29/93）,检出SVBV的样品来自福州、厦门、莆田、漳州、宁德和南平,各地检出率分别为福州92.3%（12/13）、厦门10%（1/10）、莆田50%（5/10）、漳州 90%（9/10）、宁德 5%（1/20）和南平 10%（1/10）。SCrV-3的检出率为2.2%（2/93）,其中检出的SCrV-3样品来自福州,SCrV-3在福州的检出率为15.4%（2/13）。SCrV-4的检出率为3.2%（3/93）,其中检出的SCrV-4样品来自福州,SCrV-4在福州的检出率为23.1%（3/13）。SPaV的检出率为3.2%（3/93）,其中检出的SPaV样品来自福州,SPaV在福州的检出率为23.1%（3/13）。SCV、BPYV和SPV1的检出率均为0。其中SPaV、SCrV-3、SCrV-4这3种病毒为我国均为首次报道。草莓病株主要表现为长势变弱、叶片小、褪绿、扭曲变形和矮化等症状。利用RT-PCR结合RACE技术获得了 SPaV福州分离物的全基因组序列,SPaV福州分离物的RNA1长度为8048 nt,与 SPaV-M1（USA:Maryland）RNA1（AY488137）核苷酸同源性为 98%,RNA2 长度为 7977 nt,与 SPaV-M1（USA:Maryland）RNA2（AY488138）核苷酸同源性为99%,本研究结果可为草莓病毒病防治策略的制定提供理论基础和科学依据,SPaV全基因组序列的获得可为构建侵染性克隆的构建奠定基础。

关键词：草莓病毒分子检测 SPaV 基因组序列

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京郊草莓病毒病调查及病毒检测技术应用

京郊草莓病毒病调查及病毒检测技术应用

作者：冉策北京农学院

学位级别：硕士

草莓病毒病发生普遍,危害严重,建立与应用重要草莓病毒的快速检测技术筛选无性繁殖材料是防治草莓病毒病的关键。本论文对北京及周边地区的草莓植株进行了田间调查,通过RT-PCR方法检测了侵染或可能侵染草莓:的黄瓜花叶病毒(Cucumber mos... 详细信息

草莓病毒病发生普遍,危害严重,建立与应用重要草莓病毒的快速检测技术筛选无性繁殖材料是防治草莓病毒病的关键。本论文对北京及周边地区的草莓植株进行了田间调查,通过RT-PCR方法检测了侵染或可能侵染草莓:的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、草莓皱缩病毒(Strawberry crinkle virus,SCV)、草莓轻型黄边病毒(Strawberry mild yellow edge virus,SMYEV)、草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)、草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)等6种病毒,共检测到除SMYEV的5种病毒,并存在复合侵染现象。对北京昌平及河北赤城的草莓种苗进行了检测,在草莓种苗繁育的不同时期检测结果不一致。通过筛选特异性引物对RT-PCR反应体系进行了优化,确定了 CMV、SMoV、SVBV优化后的检测体系。比较了 CTAB试剂盒法、改良SDS法、高盐低pH法等3种提取草莓叶片DNA的方法,并分别通过分光光度法、凝胶电泳法和PCR法检测了三种方法提取的DNA。结果表明CTAB试剂盒法简单快速,提取DNA的质量和纯度较高,能较好的用于草莓叶片中SVBV的PCR检测。通过PCR法及序列测定获得了 SVBV北京分离物的全长核苷酸序列,与Caulimovirus的不同病毒及分离物的序列进行同源性分析与系统发育树的构建,SVBV北京分离物美国分离物的同源性为84.29%,存在地理差异。对SCV的RT-LAMP反应体系进行了测定,就影响反应结果的条件进行了分析,并对反应体系的灵敏度和特异性进行了测定。此方法灵敏度高于RT-PCR,反应时间短,提高了检测效率。

关键词：草莓病毒田间调查检测方法序列分析

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草莓病毒的检测方法及症状识别

山东农业科学 1999年第1期31卷 31-33页

作者：王正华邵永春尹涛青岛市农业科学研究所

目前在草莓生产中病毒病的危害日趋严重。清楚地识别草莓病毒，在生产中有效地进行检测，掌握其侵染规律，是预防草莓病毒病，实行无病毒化栽培的一个重要环节。据有关资料报道，对草莓病毒的检测主要有４条途径，即：对栽培植株的外观... 详细信息

目前在草莓生产中病毒病的危害日趋严重。清楚地识别草莓病毒，在生产中有效地进行检测，掌握其侵染规律，是预防草莓病毒病，实行无病毒化栽培的一个重要环节。据有关资料报道，对草莓病毒的检测主要有４条途径，即：对栽培植株的外观性状直接观察分析判断；利用电子显微...

关键词：草莓病毒检测症状

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草莓病毒的简单、快速PCR检测方法

草莓病毒的简单、快速PCR检测方法