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中华耳科学杂志 2015年第1期13卷 151-155页

作者：张奕梁勇李鹏符秋养刘钊李琦张威杨衬南方医科大学南方医院耳鼻咽喉-头颈外科广州510515 广东药学院附属第二医院耳鼻咽喉-头颈外科广州510300

目的采用分子生物学技术方法探讨胆红素诱导神经母瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡和茵陈水提物(Yinchengextract,YCE)的保护机制。方法噻唑蓝(MTT)观察茵陈提取物对SH-S5Y5细胞增殖影响,Western blotting观察NF-KB蛋白核质分布,免疫荧光显微镜观察... 详细信息

目的采用分子生物学技术方法探讨胆红素诱导神经母瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡和茵陈水提物(Yinchengextract,YCE)的保护机制。方法噻唑蓝(MTT)观察茵陈提取物对SH-S5Y5细胞增殖影响,Western blotting观察NF-KB蛋白核质分布,免疫荧光显微镜观察JC-1探针标记线粒体电位变化,流式细胞仪Annexin-FITC/PI观察细胞凋亡,荧光定量PCR观察IL-1β、TNF-α变化。结果茵陈提取物浓度的时间依赖性提高胆红素对细胞增殖的抑制作用(p茵陈提取物抑制NF-KB核转移。免疫荧光显微镜观察到胆红素处理组与正常组对比线粒体膜电位明显降低(p茵陈提取物抑制线粒体膜电位降低(p茵陈提取物抑制NF-KB转录因子调控的炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α基因的表达(p<0.05)。结论胆红素明显诱导SH-S5Y5细胞凋亡,YCE能有效抑制NK-KB激活和抑制线粒体膜电位变化,呈现多靶点抑制胆红素诱导的细胞凋亡。

关键词：茵陈水提物胆红素神经母瘤细胞(SH-SY5Y) 凋亡

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茵陈水提物对多药耐药蛋白3基因突变致新生儿肠外营养相关性胆汁淤积的保护作用

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中国中西医结合急救杂志 2024年第3期31卷 308-314页

作者：杨秀芳宾淑铭李丹梁慧英陈康郑铠军丁俊彩朱侨伟施尚文陈桂灵中山市人民医院新生儿科广东中山528403 广东医科大学广东湛江524023 中山市人民医院中医科广东中山528403 中山市人民医院检验中心广东中山528403 中山市人民医院儿科广东中山528403 广东医科大学附属东莞第一医院儿科广东东莞523710

目的探讨茵陈水提物对多药耐药蛋白3(MDR3)基因突变导致的新生儿肠外营养相关性胆汁淤积(PNAC)的保护作用及可能机制。方法①将人原代培养肝细胞应用体外细胞培养、CRISPR/Cas9慢病毒感染、MDR3突变基因导入等技术处理后,比较1%脂肪乳... 详细信息

目的探讨茵陈水提物对多药耐药蛋白3(MDR3)基因突变导致的新生儿肠外营养相关性胆汁淤积(PNAC)的保护作用及可能机制。方法①将人原代培养肝细胞应用体外细胞培养、CRISPR/Cas9慢病毒感染、MDR3突变基因导入等技术处理后,比较1%脂肪乳诱导处理前(0)和处理后16、32、48 h不同时间点肝细胞上清液中肝胆生化指标〔丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、间接胆红素(IBil)、总胆汁酸(TBA)〕的水平,确定构建MDR3基因突变PNAC肝细胞模型脂肪酸诱导所需的时间。②将人原代培养肝细胞株按随机数字表法分为空白对照组、MDR3基因野生型组、MDR3基因突变组、茵陈水提物干预组。空白对照组只用培养液处理,MDR3基因野生型组应用慢病毒感染融入野生型MDR3基因和培养液培养,MDR3基因突变组应用慢病毒感染慢病毒导入MDR3(c.485T>A、c.2793insA、c.1031G>A、c.3347G>A)突变基因和培养液培养,茵陈水提物干预组应用慢病毒感染导入MDR3突变基因和培养液培养的基础上,加入100 g/L茵陈水提物预处理,然后将4组肝细胞分别加入1%脂肪乳诱导处理,处理时间为构建MDR3基因突变PNAC肝细胞模型脂肪酸诱导所需时间。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定4组肝细胞上清液中肝胆生化(ALT、AST、TBil、DBil、IBil、TBA)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测4组肝细胞编码MDR3、胆盐输出泵(BSEP)、多药耐药相关蛋白(MRP)2~4和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的三磷酸腺苷结合盒蛋白(ABCB4、ABCB11、ABCC2、ABCC3、ABCC4)和TNF基因mRNA的表达丰度。结果与空白对照组和MDR3基因野生型组比较,MDR3基因突变组在经1%脂肪乳诱导处理前和处理后16 h肝细胞上清液中肝胆生化指标(ALT、AST、TBil、DBil、IBil、TBA)水平比较差异无统计学意义,经1%脂肪乳诱导处理32 h和48 h MDR3基因突变组肝细胞上清液肝胆生化指标(ALT、AST、TBil、DBil、IBil、TBA)水平均明显升高(均P茵陈水提物干预组肝细胞在脂肪乳处理后32 h肝细胞上清液中肝胆生化指标(ALT、AST、TBil、DBil、TBA)水平均明显降低〔ALT(ng/L):148.3±2.3比164.9±7.0,AST(ng/L):2767.4±78.8比3239.4±107.1,TBi(lμmol/L):7.6±0.2比13.6±0.3,DBi(lμmol/L):1.8±0.1比5.7±0.2,TBA(μmol/L):3.4±0.2比6.7±0.1,均P茵陈水提物干预组肝细胞编码MDR3、MRP2、MRP3、MRP4的ABCB4、ABCC2、ABCC3、ABCC4基因mRNA表达丰度差异无统计学意义;TNF基因mRNA在MDR3基因突变组呈高表达(2-ΔΔCt:1.258±0.200比1.001±0.052),茵陈水提物干预组呈低表达(2-ΔΔCt:0.387±0.247比1.258±0.200),组间比较差异有统计学意义(P茵陈水提取物干预组肝细胞编码BSEP的ABCB11基因mRNA的表达丰度明显增高(2-ΔΔCt:2.955±0.479比1.333±0.529,P茵陈水提物对MDR3基因突变导致的PNAC有一定保护作用,可能与拮抗炎症反应,降低TNF基因的mRNA表达和改善编码BSEP的ABCB11基因的mRNA表达有关。

关键词：茵陈水提物多药耐药蛋白3基因肠外营养相关性胆汁淤积新生儿

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茵陈水提物对镉中毒所致小鼠肝氧化应激的保护作用

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中兽医医药杂志 2015年第5期34卷 54-56页

作者：李瑾白峰山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 山西农业大学研究生学院山西太谷030801

目的:观察茵陈水提物对镉中毒所致小鼠肝脏氧化应激的保护作用。方法:将实验小鼠随机分为对照组,镉中毒组,茵陈水提物高、低剂量组。镉中毒组采用饮水染毒(氯化镉浓度为50 mg/L),茵陈水提物高、低剂量组(40 m L/kg、20 m L/kg)均以灌胃... 详细信息

目的:观察茵陈水提物对镉中毒所致小鼠肝脏氧化应激的保护作用。方法:将实验小鼠随机分为对照组,镉中毒组,茵陈水提物高、低剂量组。镉中毒组采用饮水染毒(氯化镉浓度为50 mg/L),茵陈水提物高、低剂量组(40 m L/kg、20 m L/kg)均以灌胃给药,1次/d,30 d后采样检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活力以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)活力和丙二醛(MDA)含量。结果:茵陈水提物可明显降低镉中毒小鼠血清中ALT和AST活力,增强镉中毒小鼠肝组织中SOD、GSH-Px、GSH的活力,并降低MDA含量。结论:茵陈水提物可抑制镉中毒所致小鼠肝脏的氧化应激,对镉中毒所致小鼠肝损伤有保护作用。

关键词：茵陈水提物镉中毒氧化应激小鼠

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茵陈水提物对新生豚鼠高胆红素血症耳蜗核抗炎保护作用

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中国医学创新 2019年第9期16卷 11-14页

作者：张奕吴小海林成光艾力杨应浩冯桂明黄旭龙陈开贤钟小苑广东药科大学第二附属医院广东广州510300

目的:研究茵陈水提物对新生豚鼠高胆红素血症的耳蜗核凋亡保护作用。方法:将50只3日龄新生豚鼠随机分成5组,每组10只,除了正常组,其余各组腹腔胆红素溶液100μg/g,给药前和给药后1、4 h分别进行ABR动态监测。模型组给予2 mL等体积的生... 详细信息

目的:研究茵陈水提物对新生豚鼠高胆红素血症的耳蜗核凋亡保护作用。方法:将50只3日龄新生豚鼠随机分成5组,每组10只,除了正常组,其余各组腹腔胆红素溶液100μg/g,给药前和给药后1、4 h分别进行ABR动态监测。模型组给予2 mL等体积的生理盐水,其余分别设茵陈水提物高中低[8、4、2 g/(kg·d)]灌胃,共给药14 d,分别检查ABR值,试剂盒检测血清胆红素含量,荧光定量PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA,ELSIA检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β表达。结果:高胆红素改变ABR值主要表现在Ⅲ波、Ⅴ波、Ⅰ～Ⅲ波间延长。在模型组,炎症因子TNF-α和IL-1β基因水平和蛋白水平与正常组比较均明显升高(F=1 021.2,P=0.021)。结论:高胆红素改变ABR值的敏感变化,茵陈提取物有效预防胆红素对新生豚鼠的炎症因子升高,预防高胆红素对听觉神经的损伤。

关键词：茵陈水提物胆红素新生豚鼠 ABR TNF-α IL-1β

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