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野蚕线粒体基因组分析及家蚕荧光茧判性机理研究

野蚕线粒体基因组分析及家蚕荧光茧判性机理研究

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作者：胡小龙苏州大学

学位级别：硕士

为了全面认识野蚕生线粒体基因组,探讨家蚕的起源,对青州野桑蚕线粒体全基因组序列进行了测定和分析,结果显示青州野桑蚕线粒体DNA长度为15,717bp,具有鳞翅目昆虫线粒体典型的基因组成和基因排列方向。COI基因具有一个4bp的假定起始密码... 详细信息

为了全面认识野蚕生线粒体基因组,探讨家蚕的起源,对青州野桑蚕线粒体全基因组序列进行了测定和分析,结果显示青州野桑蚕线粒体DNA长度为15,717bp,具有鳞翅目昆虫线粒体典型的基因组成和基因排列方向。COI基因具有一个4bp的假定起始密码子,其它蛋白质编码序列都是以ATN密码子起始的, 11个蛋白质编码基因都具有完整的终止密码子(TAA),另外2个基因的终止密码子是不完整的。所有的tRNA都具有典型的三叶草结构,有些tRNA的4个茎中有碱基不配对现象。青州野桑蚕的A+T丰富区长度为495bp,比日本野蚕(747bp)短,但与家蚕的长度相当。基于4种家蚕和4种野蚕的线粒体全基因组系统进化的分析表明家蚕起源于中国野蚕。通过MEGA BLAST搜索程序在家蚕核基因组中搜索到核线粒体假基因序列。对这些核线粒体假基因进行系统进化分析,表明家蚕是在不同的时期和区域被驯化。为了探讨家蚕茧荧光判性机理,以荧光判性品种L中家蚕为研究对象,通过薄层色谱分析了雌雄中肠内容物、中肠、血液、丝腺及茧壳中的荧光色素种类,结果显示:蚕茧的荧光色与血液、绢丝腺的荧光色具有良好的一致性,雌雄茧荧光色的差异是由于雌蚕中肠组织含有了雄蚕中肠组织中所没有的较多特异性黄色荧光色素,从而导致雌雄茧荧光色素的种类、含量不同而引起;通过液相色谱-质谱技术对雌雄中肠蛋白的Native-PAGE分离出的荧光区域进行鉴定,发现在荧光区域可较多地检测到低分子量30kD脂蛋白、肌钙蛋白、30K脂蛋白、27kD糖蛋白前体,推测这些蛋白可能是荧光色素结合候选蛋白。利用2-D电泳对荧光判性品种L中家蚕的血淋巴和中肠蛋白质组分析,结果在雄、雌蚕血淋巴中分别检测到61和15个特异蛋白点;在雄、雌蚕中肠中分别检测到153和130个特异蛋白点。研究结果为探明茧荧光判性机理提供了有价值的参考。

关键词：野蚕家蚕线粒体基因组茧荧光判性蛋白质组

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