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苹果组培苗不定根发生过程中mRNA差异显示表达及生根移栽体系优化研究

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苹果组培苗不定根发生过程中mRNA差异显示表达及生根移栽体系优化...

作者：田河河北农业大学

学位级别：硕士

试验以苹果矮化砧木组培苗M为试材，应用mRNA差异显示技术，初步建立了苹果矮化砧木生根过程中的相关基因筛选体系。同时以M为试材，建立了蛭石替代琼脂生根体系。以苹果组培苗SH、SH为试材研究了生根组培苗移栽过程中环境因素对幼苗生... 详细信息

试验以苹果矮化砧木组培苗M为试材，应用mRNA差异显示技术，初步建立了苹果矮化砧木生根过程中的相关基因筛选体系。同时以M为试材，建立了蛭石替代琼脂生根体系。以苹果组培苗SH、SH为试材研究了生根组培苗移栽过程中环境因素对幼苗生长的影响，主要研究结果如下： 1、苹果组培苗mRNA差异显示PCR优化后结果：退火温度为45℃，20μL PCR体系为：稀释10倍的模板cDNA2μL，Taq酶2.0U，上游随机引物和下游锚定引物1:1配比，浓度分别为2.5μmol·L，dNTPs加入量为125μmol L。采用优化后的PCR程序及体系，用8个上游随机引物和3个下游锚定引物共计24对引物对样品进行PCR扩增，有11对引物可扩增出条带，其中9对引物得到了较好的扩增结果，主带清晰，扩增的带型差异明显，共计扩增出41条差异基因，其中38个特异表达基因，2个在诱导后上调表达基因，1个在诱导后下降表达的基因。 2、将组培苗在含有0.6mg·LIBA的琼脂生根培养基中诱导7d～9d后，扦插于蛭石培养基中，生根率均达94%以上，显著高于琼脂培养基处理，且侧根数量显著大于诱导11d～13d和琼脂培养基处理。蛭石培养基中添加20g·L蔗糖，生根率达95.18%，生根条数、侧根数和根长显著优于未添加蔗糖处理。基质水分含量也明显影响生根，50%～90%水分条件下，生根率均在96%以上，显著高于琼脂培养基，生根条数各处理间无差异，侧根数以50%～60%含水量最高，达6.69和6.46，显著高于其他处理，根长以琼脂培养基最大，为2.89cm。经100mg·LIBA速蘸处理后，扦插于含有20g·L蔗糖、60%含水量的蛭石培养基中，生根率显著提高，达到100%，生根数目、根长、侧根数目得到了大幅度提高，根系质量得到明显的改善。 3、采用建立的蛭石生根培养体系，进行组培苗瓶外生根研究。结果表明组培苗在含有0.6mg·LIBA的琼脂生根培养基中诱导4d，移至温室炼苗5d后直接扦插于蛭石基质中，4～5d浇灌一次不含蔗糖的1/2MS营养液，组培苗生根率、生根条数和根长与瓶内生根培养无明显差异，但侧根数目显著提高，同时大大缩短了育苗时间。 4、生根组培苗在培养室培养8d，移至温室锻炼17d后移栽，组培苗生长量明显增加，为最佳时间组合。组培苗在培养室培养8d，温室锻炼11d、17d、25d三个处理中，也以17d为最佳炼苗时间，移栽组培苗株高、叶片数、单株叶面积和单叶片面积均有明显提高。以草炭土与蛭石1:2或1:1配比为移栽基质，组培苗移栽成活率较高，分别达90.77%和88.24%，显著高于草炭土与蛭石2:1配比;同时草炭土与蛭石1:1配比处理还可有效提高幼苗生长量。草炭土经灭菌处理后，组培苗单株叶面积及单叶片面积显著增加，苗木生长更健壮。基质中添加0.1%枯草芽孢杆菌对幼苗生长量未见显著作用。浇灌供试营养液40d后可见移栽幼苗生长量显著大于对照，综合效果以MS营养液促苗效果最佳。

关键词：苹果组培苗不定根 mRNA差异显示生根移栽

苹果组培苗多代保存过程中生长特性及生长节奏调控技术研究

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苹果组培苗多代保存过程中生长特性及生长节奏调控技术研究

作者：王晨河北农业大学

学位级别：硕士

本研究以苹果(Malus domestica Borkh.)品种金矮生、乔纳金、富士和嘎拉试管苗为试材,对不同继代次数苹果组培苗的芽增殖能力、生根能力和叶片再生能力进行研究,以确定长期继代保存的苹果组培苗的生长繁殖能力是否发生变化;通过改变培... 详细信息

本研究以苹果(Malus domestica Borkh.)品种金矮生、乔纳金、富士和嘎拉试管苗为试材,对不同继代次数苹果组培苗的芽增殖能力、生根能力和叶片再生能力进行研究,以确定长期继代保存的苹果组培苗的生长繁殖能力是否发生变化;通过改变培养温度、增加培养基的渗透压或在培养基中加入生长抑制剂等处理,延缓苹果组培苗生长,以延长继代间隔时间、减少继代次数;同时对延缓生长和恢复生长后的苹果组培苗SOD、POD酶活性及MDA含量进行了测定,以检测苹果组培苗逆境下延缓生长的生理代谢变化,为确定苹果组培苗适宜的种质保存时间,筛选适合的延缓生长方法提供依据。试验结果表明: 1.苹果组培苗在继代5代以内时,继代增殖倍数、生根和叶片不定芽再生能力均较低,不适合进行快速繁殖和离体再生。 2.苹果种质保存组培苗继代13次以后,其芽增殖能力,生根能力和叶片再生能力均稳定在较高水平,经20年左右100多次(富士200多次)继代培养保存后,4个品种器官生长、繁殖能力无明显变化。 3.低温条件抑制试管苗生长效果明显,苹果试管苗适宜的低温处理为接种后在25℃条件下缓苗5～10d再移至3～8℃培养,这样可保存试管苗1～1.5年继代一次,茎尖成活率达100%。 4.提高培养基琼脂、蔗糖浓度或添加甘露醇都能提高培养基渗透压,抑制试管苗生长,且随着浓度增加,抑制作用愈发明显,但琼脂、甘露醇处理中有部分茎尖死亡;综合比较,60/L蔗糖处理延缓试管苗生长效果较好。同一处理下品种间有差异,富士延缓生长的效果好于乔纳金。 5.在室温下添加B、CCC、PP、ABA等生长抑制剂的处理中,以80m/LB效果较好,不但存活率高,而且试管苗的生长状况较好。 6.在培养基中提高蔗糖、琼脂浓度,添加甘露醇增加渗透压,或者在培养基中添加B、CCC、PP、ABA等生长抑制剂,均能使乔纳金和富士的试管苗SOD、POD活性提高,MDA含量降低。不同处理的不同浓度对保护酶活性和MDA含量影响不同。对恢复生长后的试管苗生理活性测定表明,当代SOD、POD活性和MDA含量就恢复到处理前水平。

关键词：苹果组培苗多代保存生长特性节奏调控

水分胁迫对苹果组培苗^(14)C-光合产物运输和分配的影响

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中国农业大学学报 2005年第5期10卷 44-48页

作者：李天红李绍华王晶中国农业大学农学与生物技术学院北京100094 中国科学院植物研究所北京100093 中国农业科学研究院原子能研究所北京100094

通过调节PEG(6000)溶液的渗透势模拟不同程度水分胁迫条件,研究其对“红富士”苹果组培苗14C-光合产物运输和分配的影响。结果表明,1)水分胁迫使饲喂叶中14C-光合产物输出百分率显著下降:试验结束时对照14C-光合产物输出率为轻度胁迫(PE... 详细信息

通过调节PEG(6000)溶液的渗透势模拟不同程度水分胁迫条件,研究其对“红富士”苹果组培苗14C-光合产物运输和分配的影响。结果表明,1)水分胁迫使饲喂叶中14C-光合产物输出百分率显著下降:试验结束时对照14C-光合产物输出率为轻度胁迫(PEG渗透势为-0.75 MPa)的1.42倍、中度胁迫(PEG渗透势为-1.5 MPa)的3.41倍、重度胁迫(PEG渗透势为-2.5 MPa)的10.18倍;且轻度和中度胁迫使叶片14C-光合产物的输出在24 h内分别达到48 h的94.22%和93.95%,显著高于对照(55.65%),在时间上表现得更为集中。2)正常水分条件下,苹果叶片输出14C-光合产物的89.43%运往地上部,仅10.57%运往根部,重度胁迫则使高达64.78%的14C-光合产物运往地下部;地上部、特别是茎尖对光合产物的竞争能力(14C-分配系数,K)由对照的3.42显著下降至不同程度水分胁迫处理后的1.30~0.48,其对光合产物的竞争能力显著下降;而地下部、特别是细根14C-分配系数由对照的0.16增加至0.82~1.26,其获取光合产物的能力显著增强。

关键词：苹果组培苗水分胁迫 ^14C-光合产物运输分配

生长延缓剂延长苹果组培苗继代间隔的保护酶机制

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河北农业大学学报 2011年第5期34卷 32-36页

作者：常腾飞王彦立王晨师校欣杜国强河北农业大学园艺学院河北保定071001 河北农业大学农村发展学院河北保定071001

以‘富士’(Malus domestica‘Fuji’)、‘乔纳金’(M.‘Jonagold’)苹果试管苗为试材,研究了比久(丁酰肼,B9)、矮壮素(CCC)、多效唑(PP333)等生长延缓剂处理下苹果组培苗延缓生长以及恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的变化,以期为筛... 详细信息

以‘富士’(Malus domestica‘Fuji’)、‘乔纳金’(M.‘Jonagold’)苹果试管苗为试材,研究了比久(丁酰肼,B9)、矮壮素(CCC)、多效唑(PP333)等生长延缓剂处理下苹果组培苗延缓生长以及恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的变化,以期为筛选苹果组培苗延缓生长种质保存的适宜方法提供理论依据。结果表明:生长延缓剂可提高试管苗SOD、POD活性,降低MDA含量,效应依处理浓度不同而异,分别在B9100～120 mg/L、CCC 50～75mg/L、PP3333～4 mg/L时达显著差异水平。恢复生长当代试管苗的SOD活性、POD活性以及MDA含量处理间表现相同。说明保护酶在一定程度上可减轻逆境对植物的伤害,延缓衰老。2品种相比,‘富士’试管苗SOD、POD活性及MDA含量变化对处理响应较快,且延缓保存效果优于‘乔纳金’。

关键词：生长延缓剂苹果组培苗 SOD活性 POD活性 MDA含量

植物生长调节剂对苹果组培苗延缓生长保存的效应

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中国农学通报 2009年第2期25卷 89-92页

作者：王晓蔓王晨师校欣杜国强河北农业大学园艺学院河北保定071001

以富士、乔纳金、金矮生、嘎拉组培苗为试材,在继代培养基中加入不同浓度的比久、矮壮素、多效唑及脱落酸,研究了植物生长延缓剂和生长抑制剂对苹果组培苗种质延缓生长保存的效应。结果表明:比久、矮壮素均有明显抑制苹果组培苗生长的作... 详细信息

以富士、乔纳金、金矮生、嘎拉组培苗为试材,在继代培养基中加入不同浓度的比久、矮壮素、多效唑及脱落酸,研究了植物生长延缓剂和生长抑制剂对苹果组培苗种质延缓生长保存的效应。结果表明:比久、矮壮素均有明显抑制苹果组培苗生长的作用,且茎尖存活率高,试管苗生长状况较好,转入常规继代培养基当代即可恢复生长,可用于苹果种质资源的离体保存,比久适宜的浓度为80mg/L,矮壮素为75mg/L左右;多效唑处理虽能明显抑制苹果试管苗生长,但易使有些品种试管苗玻璃化,可选择性应用;脱落酸作用过于剧烈,绝大部分处理苗死亡,不宜在苹果种质保存中使用。

关键词：苹果组培苗种质保存延缓生长生长调节剂

培养基蔗糖浓度对苹果组培苗扩繁和生根的影响

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山西果树 2006年第5期 11-12页

作者：郭韩玲赵亚丽梁建军陕西省果树良种苗木繁育中心陕西铜川727031

在苹果组培苗生根前一代继代扩繁和生根时适当提高蔗糖浓度,可以提高苹果组培苗的生根率和移栽成活率,生根前一代扩繁培养时蔗糖的适宜浓度范围为30g/L^40g/L,生根培养时的蔗糖适宜浓度为20g/L^25g/L。

关键词：苹果组培苗生根前一代生根糖值

培养基渗透压对延缓生长的苹果组培苗生理代谢指标影响

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中国农学通报 2008年第6期24卷 222-225页

作者：王晨师校欣杜国强黄瑞虹河北农业大学园艺学院河北保定071001

以富士、乔纳金苹果试管苗为试材,研究了不同渗透压处理下苹果组培苗延缓生长以及恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的变化,以期为筛选苹果组培苗延缓生长种质保存的适宜方法提供依据。结果表明:在延缓生长保存期间,随培养基中蔗糖、琼... 详细信息

以富士、乔纳金苹果试管苗为试材,研究了不同渗透压处理下苹果组培苗延缓生长以及恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的变化,以期为筛选苹果组培苗延缓生长种质保存的适宜方法提供依据。结果表明:在延缓生长保存期间,随培养基中蔗糖、琼脂浓度提高,添加甘露醇,试管苗SOD、POD活性逐渐升高,而MDA含量呈下降趋势,依品种不同分别在蔗糖浓度达到50～60g/L、琼脂浓度达到10～14g/L、甘露醇浓度达到30～40g/L时达显著差异水平。恢复生长当代试管苗的SOD活性、POD活性以及MDA含量处理间表现相同。研究认为添加50～60g/L的蔗糖适宜苹果试管苗延缓生长法种质保存。

关键词：渗透压苹果组培苗 POD活性 SOD活性 MDA含量

VA菌根菌促进苹果组培苗吸收磷素机理的研究初报

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VA菌根菌促进苹果组培苗吸收磷素机理的研究初报

河北省果树学会第十三届学术年会

作者：齐国辉郗荣庭河北农业大学园艺系

应用“三室盆栽系统”研究VA菌根菌促进富士苹果组培苗对磷吸收的机理。将苹果幼苗根系和VA菌根各自吸收的磷进行定量测定,并检测三室结构中中室和边室土壤酸性、中性、碱性磷酸酶活性。结果表明,在两侧边室土壤中施入全磷量相同的情况... 详细信息

应用“三室盆栽系统”研究VA菌根菌促进富士苹果组培苗对磷吸收的机理。将苹果幼苗根系和VA菌根各自吸收的磷进行定量测定,并检测三室结构中中室和边室土壤酸性、中性、碱性磷酸酶活性。结果表明,在两侧边室土壤中施入全磷量相同的情况下,接种VA根菌后,对吸收利用难溶性磷和可溶性磷两者差异不显著,但植株茎叶和根系中磷浓度及磷总量均显著高于对照。表明VA菌根能够较好地利用难溶性磷肥;中室和边室磷酸以边室施难溶性磷肥的最高,证明菌根分泌磷酸酶有利于植株对难溶性磷的吸收。

关键词： VA菌根苹果组培苗难溶性磷肥磷酸酶

来源： cnki会议评论

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暗培养对热处理过程中苹果组培苗的影响

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