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苯甲酰新乌头原碱对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖及凋亡的影响

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苯甲酰新乌头原碱对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖及凋亡的影响

作者：马凤鸣广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:探究苯甲酰新乌头原碱(benzoylmesaconine,BMA)对骨髓瘤细胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影响。方法:将对数期生长RPMI8226细胞随机分为空白对照组和BMA(13 ng.mL-1,65 ng.mL-1,130 ng·mL-1,1300 ngmL-1,13000 ng·mL-1)浓度组,用CCK8测定BMA对细胞活性的影响,根据结果计算出半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50);根据IC50将对数期生长RPMI8226细胞分为:空白对照组、阴性对照组以及BMA(520,780,1040 ng·L-1)测定BMA对RPMI增值抑制率随浓度及时间的变化;根据增值抑制率情况将对数期生长RPMI8226细胞分为空白对照组及BMA(520,780,1040 ng·mL-1)浓度组,用AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测BMA对RPMI8226凋亡率的影响随时间浓度的变化。结果:作用24小时,BMA浓度为13～13000ng.mL-1范围内,RPMI8226细胞活性随浓度增加而减小,各组P<0.05,差异有统计学意义,其IC50约为1040ng·mL-1;·BMA对RPMI8226细胞的增值抑制率随作用浓度、作用时间的增加而增大,各组P均<0.05,差异有统计学意义;RPMI8226细胞凋亡率随BMA作用浓度、作用时间的增加而增大,各组P均<0.05,差异有统计学意义。结论:BMA能抑制RPMI8226增值并促进其凋亡。

关键词：苯甲酰新乌头原碱骨髓瘤细胞8226 增值凋亡

苯甲酰新乌头原碱对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖及凋亡的影响

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四川中医 2019年第3期37卷 53-57页

作者：马凤鸣于天启广州中医药大学广东广州510000 广州中医药大学第三附属医院肿瘤血液科广东广州510000

目的:探究苯甲酰新乌头原碱(benzoylmesaconine,BMA)对骨髓瘤细胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影响。方法:将RPMI8226细胞随机分为空白对照组和BMA不同浓度组,用CCK8测定BMA对细胞活性的影响,根据结果计算出半数抑制浓度(the half ma... 详细信息

目的:探究苯甲酰新乌头原碱(benzoylmesaconine,BMA)对骨髓瘤细胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影响。方法:将RPMI8226细胞随机分为空白对照组和BMA不同浓度组,用CCK8测定BMA对细胞活性的影响,根据结果计算出半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50);根据IC50将对数期生长RPMI8226细胞分为:空白对照组、阴性对照组以及BMA不同浓度组测定BMA对RPMI增值抑制率随浓度及时间的变化;根据增值抑制率情况将对数期生长RPMI8226细胞分为空白对照组及BMA不同浓度组,用AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测BMA对RPMI8226凋亡率的影响随时间浓度的变化。结果:作用24小时,BMA浓度为13～13000ng·ml^(-1)范围内,RPMI8226细胞活性随浓度增加而减小,各组P<0.05,差异有统计学意义,其IC50约为1040ng·ml^(-1);BMA对RPMI8226细胞的增值抑制率随作用浓度、作用时间的增加而增大,各组P均<0.05,差异有统计学意义;RPMI8226细胞凋亡率随BMA作用浓度、作用时间的增加而增大,各组P均<0.05,差异有统计学意义。结论:BMA能抑制RPMI8226增值并促进其凋亡。

关键词：苯甲酰新乌头原碱骨髓瘤细胞8226 增值凋亡

LC-MS/MS法测定大鼠血浆苯甲酰新乌头原碱浓度

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青岛大学学报（医学版） 2022年第4期58卷 523-528页

作者：张祖康徐文周长凯尚新华周风彩荆凡波青岛大学药学院山东青岛266071 德州市陵城区人民医院药剂科青岛大学附属医院药学部

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS法)测定大鼠血浆苯甲酰新乌头原碱浓度的方法,并初步研究其在大鼠体内的药代动力学(药动学)行为。方法以甲基叔丁基醚液-液萃取大鼠血浆样品,采用UltimateAQ-C18column(3.0μm,2.1mm×100.0mm... 详细信息

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS法)测定大鼠血浆苯甲酰新乌头原碱浓度的方法,并初步研究其在大鼠体内的药代动力学(药动学)行为。方法以甲基叔丁基醚液-液萃取大鼠血浆样品,采用UltimateAQ-C18column(3.0μm,2.1mm×100.0mm)色谱柱进行色谱分离,柱温40℃,以流动相乙腈(A,含体积分数0.001甲酸)-体积分数0.001的甲酸溶液(B)梯度洗脱(0~0.5min,体积分数0.25A;0.5~3.5min,体积分数0.25~0.70A;3.5~4.0min,体积分数0.70A),流量0.4mL/min,进样量10μL,分别以质子数/电荷数的比值(m/z)590.5→540.4和m/z646.7→587.0为待测成分及内标的质谱检测条件。大鼠灌服5、10、20mg/kg苯甲酰新乌头原碱后,分别在0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、9.0、12.0和24.0h取样,测定其血浆中苯甲酰新乌头原碱的浓度,应用药动学数据处理软件DAS2.0计算药动学参数。结果苯甲酰新乌头原碱质量浓度为0.1~1000.0μg/L范围内线性关系良好,定量下限为0.1μg/L;苯甲酰新乌头原碱和内标的提取回收率均高于93%,日内和日间相对标准差(RSD)均苯甲酰新乌头原碱样品在室温和低温长期放置稳定性、冻融稳定性、预处理后供试液稳定性RSD分别小于10.2%、4.6%、10.9%、3.4%;苯甲酰新乌头原碱在大鼠体内吸收较快,达峰时间约2h,但是吸收较差,绝对生物利用度仅有0.76%。结论本文建立的LC-MS/MS法操作简便,稳定可靠,适用于苯甲酰新乌头原碱的药动学研究。

关键词：苯甲酰新乌头原碱血药浓度药代动力学色谱法,液相串联质谱法

SPE-HPLC测定复方羊角颗粒中苯甲酰新乌头原碱等3个单酯型生物碱的含量

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药学与临床研究 2023年第1期31卷 53-56页

作者：丁爱华魏筱谢斌陈玲玲周会芹盐城市第一人民医院药学部盐城224006 盐城市食品药品监督检验中心盐城224055

目的:建立复方羊角颗粒中苯甲酰新乌头原碱等3个单酯型生物碱的含量测定方法。方法:采用强阳离子吸附树脂MCX固相萃取小柱对复方羊角颗粒进行净化,高效液相色谱法测定,色谱柱:SVEA^(TM)C_(18)Opal(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为乙腈-... 详细信息

目的:建立复方羊角颗粒中苯甲酰新乌头原碱等3个单酯型生物碱的含量测定方法。方法:采用强阳离子吸附树脂MCX固相萃取小柱对复方羊角颗粒进行净化,高效液相色谱法测定,色谱柱:SVEA^(TM)C_(18)Opal(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为乙腈-四氢呋喃(25∶12),流动相B为0.1 mol·L^(-1)醋酸铵溶液(含0.05%冰醋酸),梯度洗脱;检测波长:235 nm;柱温:25℃;流速:1.0mL·min^(-1);进样量:20μL。结果:苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱的线性范围分别为2.27~98.61(r=1.0000)、0.61~26.53(r=1.0000)、1.00~43.50μg·m L^(-1)(r=0.999 9);平均回收率及RSD分别为93.9%及2.4%、95.0%及2.6%、91.0%及3.0%。结论:本方法可为复方羊角颗粒的质量控制提供依据。

关键词：固相萃取-高效液相色谱复方羊角颗粒单酯型生物碱苯甲酰新乌头原碱苯甲酰乌头原碱苯甲酰次乌头原碱

HPLC同时测定人血浆中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱和苯甲酰新乌头原碱的含量

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中药材 2014年第8期37卷 1407-1409页

作者：张霞陈迎平江苏省盐城市第一人民医院江苏盐城224006

目的：采用HPLC建立附子中4种生物碱类成分在人血浆中含量测定方法。方法：色谱条件为迪马钻石C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：A为乙腈-四氢呋喃（62∶38）,B为10 mmol/L醋酸铵水溶液,梯度洗脱;流速：1.0 mL/min;检测波长：2... 详细信息

目的：采用HPLC建立附子中4种生物碱类成分在人血浆中含量测定方法。方法：色谱条件为迪马钻石C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：A为乙腈-四氢呋喃（62∶38）,B为10 mmol/L醋酸铵水溶液,梯度洗脱;流速：1.0 mL/min;检测波长：240 nm;柱温：30℃。结果：新乌头碱、乌头碱、次乌头碱和苯甲酰新乌头原碱的线性范围分别为1.69~1 690μg/mL、1.58~1 582μg/mL、2.56~2 563μg/mL和3.60~3 597μg/mL（r〉0.9985）,加样回收率RSD〈4.5%。结论：该方法灵敏度高、精密度好,可用于附子中4种生物碱成分的药物动力学研究。

关键词：附子新乌头碱乌头碱次乌头碱苯甲酰新乌头原碱 HPLC

高效液相色谱法测定附桂通便颗粒中苯甲酰新乌头原碱和新乌头碱的含量

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现代医药卫生 2012年第22期28卷 3361-3362,3364页

作者：陶昌勇南京市雨花台区板桥社区卫生服务中心江苏南京210039

目的对附桂通便颗粒中苯甲酰新乌头原碱、新乌头碱进行含量测定。方法运用高效液相色谱法(HPLC),Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.015%二乙胺-乙腈溶液,线性梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长240 nm。结果苯... 详细信息

目的对附桂通便颗粒中苯甲酰新乌头原碱、新乌头碱进行含量测定。方法运用高效液相色谱法(HPLC),Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.015%二乙胺-乙腈溶液,线性梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长240 nm。结果苯甲酰新乌头原碱、新乌头碱分别在0.088 8-0.888 0μg(r=0.999 8)、0.199 0-1.990 0μg(r=0.999 8)范围内,具有良好的线性关系;平均加样回收率依次为99.11%、99.13%,相对标准偏差(RSD)分别为0.76%、1.61%。结论该方法快速、简便,重现性好,可作为该制剂的定量分析方法。

关键词：附桂通便颗粒苯甲酰新乌头原碱新乌头碱色谱法,高压液相乌头碱分析

机器学习算法构建附子线粒体功能高通量筛选模型及机制研究

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中国中药杂志 2022年第9期47卷 2509-2515页

作者：朱映黎杨弘宾吴嘉瑞孙鑫张冰北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学中药药物警戒与合理用药研究中心北京100029 Center for Molecular Science Informatics University of CambridgeCambridge CB21EW 北京中医药大学中医学院北京100029

构建线粒体功能高通量筛选机器学习模型,选择附子作为示例药物进行预测分析,选取模型筛选出来的乌头碱类化合物中得分最高的去氧乌头碱以及得分最低的苯甲酰新乌头原碱进行线粒体功能机制研究。收集来自PubChem、Tox21数据库中线粒体功... 详细信息

构建线粒体功能高通量筛选机器学习模型,选择附子作为示例药物进行预测分析,选取模型筛选出来的乌头碱类化合物中得分最高的去氧乌头碱以及得分最低的苯甲酰新乌头原碱进行线粒体功能机制研究。收集来自PubChem、Tox21数据库中线粒体功能数据,采用随机森林和提升树2种算法分别进行建模;分别使用ECFP4和Mordred描述符进行训练,使用交叉验证检验,并采用平衡准确率、总体准确率对不同组合的模型进行性能评价以得到最好模型方法与模型参数。收集TCMSP数据库中附子化合物数据,经所构建的高通量机器学习模型预测筛选后,选取去氧乌头碱、苯甲酰新乌头原碱进行线粒体膜电位、活性氧(ROS)含量水平以及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同活化因子1α(PGC-1α)蛋白表达测定。结果表明,使用提升树+Mordred算法构建的模型表现更好,交叉验证平衡准确率(BA)为0.825,测试集准确率为0.811;去氧乌头碱、苯甲酰新乌头原碱能够改变ROS含量(P乌头碱能够升高PGC-1α蛋白表达(P乌头碱与苯甲酰新乌头原碱均可影响线粒体功能,但得分更高的去氧乌头碱还能够特征性通过调节PGC-1α蛋白影响线粒体生物合成。

关键词：附子机器学习线粒体去氧乌头碱苯甲酰新乌头原碱

不同附子炮制品四逆汤化学成分及毒性差异分析

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中草药 2023年第5期54卷 1397-1410页

作者：刘洪钟凌云邓延文童恒力陈浩王硕卢兴美江西中医药大学江西南昌330004

目的比较生附片、淡附片、阴附片、阳附片4种附子炮制品入方四逆汤化学成分以及毒性差异,为临床安全用药提供科学的依据。方法分别以阴附片、阳附片、生附片、淡附片制备单味药以及四逆汤汤剂,经UPLC法检测汤剂中乌头碱、新乌头碱、次... 详细信息

目的比较生附片、淡附片、阴附片、阳附片4种附子炮制品入方四逆汤化学成分以及毒性差异,为临床安全用药提供科学的依据。方法分别以阴附片、阳附片、生附片、淡附片制备单味药以及四逆汤汤剂,经UPLC法检测汤剂中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、甘草苷、甘草酸、6-姜酚含量,通过系统聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(pricipal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对4种四逆汤进行分类分析,再经急性毒性试验和长期毒性试验比较4种附子炮制品四逆汤毒性差异。结果4种四逆汤中成分含量以及毒性大小存在显著性差异。双酯型生物碱:乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量及其总量高低排序为生附片四逆汤>阴附片四逆汤>阳附片四逆汤>淡附片四逆汤;单酯型生物碱:苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱含量及其总量高低排序为阴附片四逆汤>阳附片四逆汤>淡附片四逆汤>生附片四逆汤;在急性毒性试验中仅有生附片四逆汤可使小鼠产生轻微明显毒性反应,4种四逆汤均无致死性。经计算阴附片四逆汤、阳附片四逆汤小鼠最大给药量倍数均相当于人临床每日用药量的200倍左右,和淡附片四逆汤以及生附片四逆汤比较无差异;在长期毒性试验中,4种四逆汤对慢性心衰大鼠均不会致使肝肾损害,无肝肾毒性。结论综合分析阴附片四逆汤、阳附片四逆汤、生附片四逆汤、淡附片四逆汤中双酯型生物碱以及单酯型生物碱含量差异,并结合毒性试验结果,得出4种附子炮制品入方经典名方四逆汤均具有合理性,其中以阴附片、阳附片入方四逆汤在一定程度上更具优势,阴附片更佳。

关键词：四逆汤生附片淡附片阴附片阳附片毒性差异合理性双酯型生物碱单酯型生物碱乌头碱新乌头碱次乌头碱苯甲酰乌头原碱苯甲酰新乌头原碱苯甲酰次乌头原碱系统聚类分析主成分分析正交偏最小二乘-判别分析急性毒性长期毒性

应用高速逆流色谱技术从附子中分离制备苯甲酰新乌头原碱

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世界科学技术-中医药现代化 2009年第2期11卷 260-262页

作者：吴平丽刘雯卓超张继全沈平孃华东理工大学药学院上海200237 国家中药制药工程技术研究中心上海201203

利用高速逆流色谱技术,一次进柱即可实现从附子粗提物中分离得到苯甲酰新乌头原碱。两相溶剂系统用氯仿-甲醇-0.3mol/L盐酸三元系统,上相为固定相,下相为流动相,转速为892rpm,流速为1.2ml/min。通过ESI-MS、13C-NMR、1H-NMR鉴定,确认了... 详细信息

利用高速逆流色谱技术,一次进柱即可实现从附子粗提物中分离得到苯甲酰新乌头原碱。两相溶剂系统用氯仿-甲醇-0.3mol/L盐酸三元系统,上相为固定相,下相为流动相,转速为892rpm,流速为1.2ml/min。通过ESI-MS、13C-NMR、1H-NMR鉴定,确认了其化学结构。经HPLC分析,纯度达98%以上。

关键词：高速逆流色谱附子苯甲酰新乌头原碱