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苦皮藤素ⅴ-BSA对家兔的免疫原性研究

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2004年第11期32卷 27-29,33页

作者：杨润亚祁志军吴文君西北农林科技大学农药研究所

　研究了苦皮藤素 (CA)分别采用混合酸酐法和碳化二亚胺法合成的苦皮藤素人工抗原CA-BSA1,CA-BSA2的免疫原性。结果表明,两种方法合成的人工抗原都具有一定的免疫原性,可诱导家兔产生抗苦皮藤素的特异性抗体,但产生的抗体浓度较低,用... 详细信息

　研究了苦皮藤素 (CA)分别采用混合酸酐法和碳化二亚胺法合成的苦皮藤素人工抗原CA-BSA1,CA-BSA2的免疫原性。结果表明,两种方法合成的人工抗原都具有一定的免疫原性,可诱导家兔产生抗苦皮藤素的特异性抗体,但产生的抗体浓度较低,用琼脂双扩散法不能检测到产生的抗体,而ELISA法可检测到苦皮藤素的特异性抗体,且检测结果表明,随免疫次数的增加,家兔体内抗苦皮藤素特异性抗体浓度也随之增加,但增加幅度并不为指数增长方式。

关键词：植物源杀虫剂苦皮藤素ⅴ 家兔免疫原性人工抗原

杀虫活性成分6β-丙氧基苦皮藤素ⅴ的微量合成

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核农学报 2008年第2期22卷 223-227页

作者：杨征敏姬志勤张继文胡兆农叶庆富吴文君西北农林科技大学农药研究所浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029

苦皮藤根皮粉经苯回流提取、大孔树脂层析和硅胶层析后获得苦皮藤素ⅴ。以正丙醇和苦皮藤素ⅴ为原料,建立了基于无水碘代反应和威廉姆逊反应的6β-丙氧基苦皮藤素ⅴ的微量合成方法,反应总收率约为17%。最终产物以HRMS、1H NMR和13C NMR... 详细信息

苦皮藤根皮粉经苯回流提取、大孔树脂层析和硅胶层析后获得苦皮藤素ⅴ。以正丙醇和苦皮藤素ⅴ为原料,建立了基于无水碘代反应和威廉姆逊反应的6β-丙氧基苦皮藤素ⅴ的微量合成方法,反应总收率约为17%。最终产物以HRMS、1H NMR和13C NMR确认为6β-丙氧基苦皮藤素ⅴ。HPLC分析表明,该产物纯度大于98%。该方法为杀虫活性成分6β-丙氧基苦皮藤素ⅴ的放射性同位素标记合成奠定了基础。

关键词：植物源杀虫剂苦皮藤素ⅴ 6β-丙氧基苦皮藤素ⅴ 微量合成法

昆虫围食膜结构、组分及与苦皮藤素V选择毒性关系的研究

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昆虫围食膜结构、组分及与苦皮藤素V选择毒性关系的研究

作者：相静波西北农林科技大学

学位级别：硕士

苦皮藤素ⅴ是从苦皮藤植物根皮中分离的一种对昆虫具有毒杀活性的化合物，可对不同昆虫表现出不同的选择毒性。围食膜是大多数昆虫中肠细胞分泌的一层非细胞性薄膜，具有多种功能。本文采用扫描电镜、透射电镜、SDS-PAGE 及生化分析... 详细信息

苦皮藤素ⅴ是从苦皮藤植物根皮中分离的一种对昆虫具有毒杀活性的化合物，可对不同昆虫表现出不同的选择毒性。围食膜是大多数昆虫中肠细胞分泌的一层非细胞性薄膜，具有多种功能。本文采用扫描电镜、透射电镜、SDS-PAGE 及生化分析等方法研究了东方粘虫和小地老虎幼虫围食膜组分、结构及与苦皮藤素ⅴ选择毒性关系，结果表明：　小地老虎围食膜中糖含量约 4.84μｇ·ｍＬ－１，蛋白质约 21.72μｇ·ｍＬ－１;东方粘虫围食膜中糖含量约 3.50μｇ·ｍＬ－１，蛋白质约 24.07μｇ·ｍＬ－１。其中小地老虎围食膜糖含量显著高于东方粘虫，而蛋白质含量低于东方粘虫;东方粘虫和小地老虎幼虫围食膜蛋白组分中蛋白质种类很多，都由十几种多肽组成。但两种试虫的围食膜蛋白组分存在差异。小地老虎和东方粘虫幼虫的围食膜都呈多层结构，比较明显的有三层，分别是粗糙层，微纤维层和精密层。小地老虎围食膜几丁质微纤丝网格的排列紧密，结构致密、并具有分布密集、整齐的糖链结构;而东方粘虫围食膜几丁质纤丝排列比较粗糙，网格孔洞较大，电子致密物显著多于小地老虎，并未见明显的糖链结构。苦皮藤素ⅴ处理后，小地老虎幼虫围食膜糖链减少、排列稀疏，但较规则;东方粘虫围食膜结构紊乱、不完整，电子致密物减少;两种试虫的围食膜的局部区域网格结构排列密集，并从原来的规则形状变成不规则排列。但苦皮藤素ⅴ处理后，对围食膜蛋白组分影响较小，仅有少部分发生解离。　以上结果表明：两种试虫围食膜组分及结构的差异可能是苦皮藤素ⅴ选择毒性的机制之一。

关键词：围食膜苦皮藤素ⅴ 选择毒性东方粘虫小地老虎

昆虫消化毒剂杠柳新苷P和苦皮藤素V对粘虫中肠跨膜电位的比较研究

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昆虫消化毒剂杠柳新苷P和苦皮藤素V对粘虫中肠跨膜电位的比较研究

作者：汪英英西北农林科技大学

学位级别：硕士

作用昆虫消化系统的杀虫剂主要是破坏中肠结构和影响消化酶系。前期研究表明,杠柳新苷P(PSP)和苦皮藤素ⅴ(CV)能破坏昆虫的中肠细胞,在中肠细胞BBMV上存在靶标蛋白。鳞翅目昆虫幼虫的中肠上皮细胞的生理特性是将K+从血淋巴主动运输到肠... 详细信息

作用昆虫消化系统的杀虫剂主要是破坏中肠结构和影响消化酶系。前期研究表明,杠柳新苷P(PSP)和苦皮藤素ⅴ(CV)能破坏昆虫的中肠细胞,在中肠细胞BBMV上存在靶标蛋白。鳞翅目昆虫幼虫的中肠上皮细胞的生理特性是将K+从血淋巴主动运输到肠腔,这是由位于杯状细胞顶膜的一个液泡型H+-ATP酶和电偶联的K+/H+交换器调节,保持跨膜电位差,从而维持鳞翅目昆虫中肠碱性化。因此,本文在建立细胞内微电极技术测定鳞翅目昆虫幼虫中肠膜电位方法的稳定系统基础上,比较研究了PSP和无活性的PSE,CV和无活性的荧光标记物CV-MIA分别对粘虫幼虫中肠膜电位的影响。主要研究结果如下:1.利用Cry1Ab建立了稳定的实验系统。1μg/头Cry1Ab活体处理粘虫中肠上皮细胞顶膜电位(Vam)值随时间迅速去极化,4 h后跨膜电位(Vtm)几乎完全消失。离体测定中Cry1A对粘虫有浓度依赖性的去极化,浓度为1、5和10μg/mL时Vam去极化率达50%的时间分别为14.7±0.2、9.8±0.4和7.6±0.6 min。不同浓度Cry1Ab对试虫中肠基膜电位(Vbm)均无影响。结果与文献报道一致,表明成功建立了稳定的细胞内电极测定中肠细胞Vam和Vbm的实验系统。2.用50μg剂量的PSP饲喂处理粘虫6龄幼虫,Vam值随时间迅速去极化,6 h后去极化为-25.1±7.2 mV,但对Vbm没有明显影响,最终导致Vtm几乎接近零。PSP作用的Vam去极化趋势与Cry1Ab蛋白类似。然而,无活性的PSE对粘虫Vam和Vbm均没有任何影响。离体测定不同浓度PSP对粘虫顶膜电位有浓度依赖性的去极化作用,但与5μg/mL Cry1Ab去极化趋势相比较缓慢,0.5 mg/mL PSE对粘虫去极化影响较小。两种化合物对试虫基膜电位均无影响。3.用25μg剂量的苦皮藤素ⅴ处理6龄粘虫,不同时间段对照组Vam电位稳定,而处理组8 h后Vam达-35.5±10.2 mV,具时间依赖性的去极化,但对Vbm没有明显影响,最终导致Vtm降低。无杀虫活性的CV-MIA对粘虫Vam和Vbm均无作用。离体测定中0.333mg/mL无活性的CV-MIA对粘虫Vam无影响,苦皮藤素ⅴ对Vam产生一个浓度依赖性去极化,但变化趋势没有PSP显著。与Cry1Ab相比较,CV电位降低的趋势较平缓。苦皮藤化合物对试虫基膜电位Vbm也没有明显影响。基于上述研究结果,分析表明PSP和CV均作用于粘虫幼虫中肠顶膜,推测对PSP和CV敏感的鳞翅目昆虫肠杯状细胞中的的V型H+ATP酶可能是它们的重要靶标。PSP和CV作用V型H+ATP酶,致使K+和H+转运故障、功能失调,引起中肠细胞内外电化学梯度崩溃,中肠细胞和肠腔内高碱性内溶物之间pH失衡,从而破坏了中肠细胞和肠腔内物质的运转及营养的吸收,最后导致死亡。

关键词：粘虫膜电位杠柳新苷苦皮藤素ⅴ V-ATP酶

苦皮藤根皮提取物中几种物质间的生物活性互作研究

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苦皮藤根皮提取物中几种物质间的生物活性互作研究

作者：张翼翾西北农林科技大学

学位级别：硕士

杀虫植物苦皮藤的活性成分主要存在于根皮中，到目前已从根皮中分离出20多个次生代谢物质，主要的杀虫活性物质是以苦皮藤素ⅴ为代表的毒杀成分和以苦皮藤素Ⅳ为代表的麻醉成分。本文进行了苦皮藤素ⅴ与苦皮藤素Ⅳ、苦皮藤素ⅴ苦皮藤... 详细信息

杀虫植物苦皮藤的活性成分主要存在于根皮中，到目前已从根皮中分离出20多个次生代谢物质，主要的杀虫活性物质是以苦皮藤素ⅴ为代表的毒杀成分和以苦皮藤素Ⅳ为代表的麻醉成分。本文进行了苦皮藤素ⅴ与苦皮藤素Ⅳ、苦皮藤素ⅴ苦皮藤素Ⅳ以及二者的混合物分别与根皮提取分离活性物质后的剩余物混用互作关系的研究，实验结果如下： 1．苦皮藤素ⅴ和苦皮藤素Ⅳ以不同的剂量比混用后，中毒试虫的表现症状不同，二者的混用比小于10：1时主要表现麻醉症状，混用比在10-20：1之间时中毒试虫先表现麻醉，过一段时间后开始痉挛、失水死亡，没有明显的兴奋症状;混用比大于20：1时，中毒试虫表现痉挛、失水死亡症状，兴奋症状没有苦皮藤素ⅴ单用时剧烈。 2．当苦皮藤素Ⅳ的剂量不变，随着混入的苦皮藤素ⅴ剂量的增加，试虫的麻醉率有一个起伏，即先增加后减少，苦皮藤素ⅴ和苦皮藤素Ⅳ的剂量比为10：1时最大，是苦皮藤素Ⅳ单用时的3.2倍;麻醉时间在二者剂量比小于10：1时一直增加，而后保持不变，麻醉时间最长时比苦皮藤Ⅳ单用长18h;当苦皮藤素ⅴ的剂量不变，随着混入的苦皮藤素Ⅳ剂量的增加，苦皮藤素ⅴ的毒杀活性逐渐增加，最大时是苦皮藤Ⅴ单用的2.4 倍。 3．苦皮藤素ⅴ和苦皮藤素Ⅳ以10：1混用后，以麻醉率为评判指标的共毒系数为 152.30，以死亡率为评判指标的共毒系数为91.72，以中毒率为评判指标的共毒系数为 134.54，二者混用有某种程度的增效作用;杂质与苦皮藤素Ⅳ以5：1混用的共毒系数为147.15，有增效作用;杂质与苦皮藤素ⅴ以4：5混用的共毒系数为67.18，有拮抗作用。苦皮藤素Ⅳ和苦皮藤素ⅴ以1：10混合后再与杂质以1：3混用的共毒系数为 59.12，有拮抗作用。 4．当苦皮藤素Ⅳ的剂量不变，苦皮藤素ⅴ和苦皮藤素Ⅳ以1：1、10：1、20：1混用时，中毒试虫体内谷氨酸的含量在10：1最低，γ—氨基丁酸的含量在10：1时最高，谷—丙转氨酶的活性和谷氨酸含量的升降趋势一致，谷氨酸脱羧酶的活性升降趋势正好与其相反;当苦皮藤素ⅴ的用量不变，苦皮藤素ⅴ和苦皮藤素Ⅳ以1：1、10：1、20： 1混用时，中毒试虫体内谷氨酸的含量，随着混入的苦皮藤素Ⅳ剂量的增加而逐渐减少， γ—氨基丁酸的含量逐渐增加，谷氨酸脱羧酶的活性逐渐增强，谷—丙转氨酶的活性逐渐减弱。

关键词：杀虫植物苦皮藤苦皮藤素Ⅳ 苦皮藤素ⅴ 互作关系

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植物源农药苦皮藤杀虫活性分子制备新技术

广东化工 2023年第11期50卷 6-8,40页

作者：龚顺泽王秦黄修福台州职业技术学院浙江台州318000

本研究报告了一种从苦皮藤(Celangulin)中制备杀虫活性化合物的新技术。目前苦皮藤素的提取主要以醇提法为主,此法提取效率低下,且活性含量低。为了解决苦皮藤素提取和制剂中存在的诸多问题,本项目以植物苦皮藤为对象,研究苦皮藤杀虫活... 详细信息

本研究报告了一种从苦皮藤(Celangulin)中制备杀虫活性化合物的新技术。目前苦皮藤素的提取主要以醇提法为主,此法提取效率低下,且活性含量低。为了解决苦皮藤素提取和制剂中存在的诸多问题,本项目以植物苦皮藤为对象,研究苦皮藤杀虫活性分子提取新技术。该技术包括超声波辅助提取、分离、纯化、结构鉴定等步骤。从苦皮藤提取物中获得了一种具有较强杀虫活性的化合物苦皮藤素ⅴ。利用NMR、MS等技术鉴定了该化合物的结构。该项新技术为苦皮藤的利用提供了一种新途径,并为农业生产提供了一种天然、高效、低毒的杀虫剂。

关键词：苦皮藤素ⅴ 制备标准曲线

西北农林科技大学学报(自然科学版)2004年第32卷总目次

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2004年第12期32卷 Z001-Z008页