检索结果-南通市图书馆

苏云金芽孢杆菌对二化螟致病力及与助剂协同作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

东北农业大学学报 2023年第1期54卷 12-20,44页

作者：于洪春任中杰王紫君裴海英东北农业大学农学院哈尔滨150030

二化螟[Chilo suppressalis(Walker)]作为水稻害虫,严重威胁我国水稻生产安全,为提高苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对二化螟杀虫效果,采用生物测定法研究Bt对二化螟致病力及与助剂协同作用。结果表明,8株Bt菌株对二化螟致... 详细信息

二化螟[Chilo suppressalis(Walker)]作为水稻害虫,严重威胁我国水稻生产安全,为提高苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对二化螟杀虫效果,采用生物测定法研究Bt对二化螟致病力及与助剂协同作用。结果表明,8株Bt菌株对二化螟致病力不同,菌株Bt64致病力最高,对1~4龄幼虫致死中浓度LC50分别为4.81×10^(5)、2.09×10^(5)、2.89×10^(6)、3.73×10^(7)芽孢·mL^(-1),对1~2龄幼虫杀虫活性显著高于3~4龄。室外条件下,菌株Bt645×10^(8)芽孢·mL^(-1)浓度对二化螟3龄初幼虫第7天防治效果达67.35%,显著高于对照商品Bt制剂防治效果;激健、八神、有机硅3种助剂与菌株Bt64混用对二化螟幼虫杀虫效果均高于菌株Bt64单用,协同增效作用表现为激健>八神>有机硅,助剂激健对菌株Bt64协同增效作用最好。室外条件下,提高菌株Bt64对二化螟防治效果达12%以上。研究结果对Bt生物农药开发和利用、提高田间Bt防治二化螟杀虫效果和减少化学农药使用量具有重要意义。

关键词：二化螟苏云金芽孢杆菌致病力虫龄助剂协同作用

苏云金芽孢杆菌晶体蛋白结构及其机制的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国热带医学 2023年第6期23卷 652-656,666页

作者：张也臧传慧刘宏美山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济宁272033

蚊虫作为媒介参与疟疾、登革热、基孔肯雅热、黄热病、寨卡和丝虫病等严重疾病的传播,对其防治一直是研究热点。目前蚊虫防治方法主要有物理防治、化学防治和生物防治。物理防治方法对环境无污染,但其见效慢,防治效果不理想;化学防治虽... 详细信息

蚊虫作为媒介参与疟疾、登革热、基孔肯雅热、黄热病、寨卡和丝虫病等严重疾病的传播,对其防治一直是研究热点。目前蚊虫防治方法主要有物理防治、化学防治和生物防治。物理防治方法对环境无污染,但其见效慢,防治效果不理想;化学防治虽然能快速消灭蚊虫,但因其高污染、高残留、且易产生抗药性等缺点而被淘汰;生物防治利用自然天敌或病原体杀死蚊子和降低其传播疾病的能力。因此,对环境友好的生物防治成了防控蚊虫的主要措施。近年来细菌性灭蚊剂在蚊虫生物防治中取得了显著进展,其中研究最广泛的细菌是苏云金芽孢杆菌。苏云金芽孢杆菌为革兰氏阳性土壤微生物,是多种鳞翅目、鞘翅目、双翅目等农业害虫的病原菌。它的菌株在芽孢形成的过程中产生多种具有杀虫活性的伴孢晶体蛋白,又称杀虫晶体蛋白(insecticide crystal proteins,ICPs)或δ-内毒素,对蚊虫的幼虫有较好的灭杀作用。本综述介绍了苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白,详细叙述了晶体蛋白的种类和结构,揭示了与受体相关的晶体蛋白作用机制。

关键词：苏云金芽孢杆菌蚊虫晶体蛋白结构机制

苏云金芽孢杆菌重组L-异亮氨酸羟化酶的酶学性质及其在4-羟基异亮氨酸合成中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2014年第8期54卷 889-896页

作者：张成林刘远薛宁王鑫鑫谢希贤徐庆阳陈宁代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室天津300457 天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室天津300457 天津科技大学生物工程学院天津300457 天津市南开中学天津300100

【目的】克隆并表达来源于苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)TCCC 11826的L-异亮氨酸羟化酶(L-isoleucine-4-hydroxylase,IDO),测定重组IDO酶学特性并构建用于4-羟基异亮氨酸(4-Hydroxyisoleucine,4-HIL)微生物转化的重组菌株,以考察该酶在4-HIL合成中的潜在应用价值。【方法】以B.thuringiensis TCCC 11826基因组为模板PCR扩增ido基因并构建该基因过表达菌株BL-IDO;采用Ni-NTA亲和层析法分离纯化重组IDO后检测其酶学特性;构建重组株菌W3110-IDO进行4-HIL的微生物转化。【结果】克隆B.thuringiensis TCCC 11826的ido基因,测序结果显示该基因含723个核苷酸,编码240个氨基酸,与已报道的B.thuringiensis 2-e-2的ido基因相似度分别为97.47%和97.91%。此IDO含有His1-X-Asp/Glu-Xn-His2基序,属于Fe2+和α-酮戊二酸依赖型羟化酶家族;酶学实验表明该酶能够特异性地催化L-异亮氨酸生成(2S,3R,4S)-4-HIL,其Km和Vm ax分别为0.18 mmol/L和2.10μmol/min/mg,最适反应温度和pH分别为35℃和7.0,该酶于35℃条件下放置5 h后仍具有85.1%的活性;在Escherichia coli W3110中过表达重组IDO,在未经优化条件下4-HIL最高转化率达89.28%。【结论】获得IDO编码基因序列(Accession No.KC884243)并首次较为系统地研究了其酶学特性,该酶反应条件温和且具有较高的活性及稳定性,在酶法或微生物转化法合成4-HIL中有较广泛的应用价值。本研究可为4-HIL及其它氨基酸衍生物的生物制造技术奠定理论基础。

关键词： 4-羟基异亮氨酸 L-异亮氨酸羟化酶酶学性质苏云金芽孢杆菌微生物转化

苏云金芽孢杆菌Vip3Aa毒素关键杀虫活性复合物的鉴定与分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苏云金芽孢杆菌Vip3Aa毒素关键杀虫活性复合物的鉴定与分析

作者：颜雅琪福建农林大学

学位级别：硕士

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)营养生长期分泌的杀虫蛋白(Vegetative insecticidal proteins,Vips)是一类不同于Bt Cry毒素的杀虫因子,其中Vip3A毒素是Vip毒素中研究最为深入的一类。此类毒素对多数鳞翅目类昆虫具有强毒... 详细信息

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)营养生长期分泌的杀虫蛋白(Vegetative insecticidal proteins,Vips)是一类不同于Bt Cry毒素的杀虫因子,其中Vip3A毒素是Vip毒素中研究最为深入的一类。此类毒素对多数鳞翅目类昆虫具有强毒性作用,已经在转基因作物和生物杀虫剂上得到广泛的应用。不过,关于Vip3A毒素的杀虫毒理机制至今仍不是很清楚。对Vip3Aa毒素分子结构解析的结果显示,Vip3Aa原毒素及其酶解活化产物在溶液中均以同源四聚体的形式存在。前期研究结果也发现Vip3Aa毒素的杀虫活性可能与其酶解活化产物中的一种特异性蛋白复合物直接相关。因此,本研究进一步对Vip3Aa毒素酶解活化形成的主要蛋白复合物进行了分离纯化和生物学功能分析。Vip3Aa原毒素经胰蛋白酶以及斜纹夜蛾(Spodoptera litura)中肠酶液水解后,均会产生多种蛋白复合物。时间梯度酶解结果显示,随着酶解时间的增加,Vip3Aa原毒素依次被水解成复合物A(Protein Complex A,PCA)、复合物B(Protein Complex B,PCB)以及其它复合物。进一步分析结果表明PCA主要由～66 k Da和～19k Da片段组成,而PCB以及其它蛋白复合物中含有～66 k Da片段却均未发现～19 k Da片段。将Vip3Aa原毒素酶解产生的PCA与PCB进行分离纯化后,分别对其杀虫生物活性进行了测定。经斜纹夜蛾中肠酶液活化或胰蛋白酶活化的PCA对斜纹夜蛾初孵幼虫的半致死浓度(LC)分别为0.36μg/m L与0.94μg/m L,可见PCA对斜纹夜蛾具有极强的杀虫活性;中肠酶液活化的PCB对斜纹夜蛾初孵幼虫的LC为3.88μg/m L,而胰蛋白酶活化的PCB对斜纹夜蛾初孵幼虫的LC>133μg/m L,说明PCB对于斜纹夜蛾的毒性作用较弱或没有毒性。病理学切片观察到PCA引起斜纹夜蛾幼虫中肠上皮细胞微绒毛大面积的脱落而PCB未引起任何细胞损伤。脂质体泄漏实验结果显示PCA和胰蛋白酶活化的Vip3Aa毒素均能够导致脂质体膜穿孔,而PCB和未活化的Vip3Aa原毒素未能导致膜穿孔现象。免疫共沉淀结果显示,相比于PCB,PCA能够与更多的斜纹夜蛾中肠刷状缘膜囊泡(Brush border membrane vesicle,BBMV)蛋白结合。上述这些实验结果表明PCA是Vip3Aa原毒素经酶解活化后形成的关键杀虫活性成分。从已有的研究结果可知,组成PCA的～19 kDa片段来自于Vip3Aa原毒素中由四个α螺旋组成的domainⅠ。为了探究domainⅠ中的α螺旋对Vip3Aa毒性作用的影响,本研究构建了四个Vip3Aa原毒素domainⅠ上α螺旋缺失的突变体。生测及脂质体泄漏实验结果显示四个Vip3Aa原毒素N端α螺旋截短的突变体均丧失了对于斜纹夜蛾幼虫的杀虫活性且均无法引起脂质体泄漏。Native-PAGE分析结果显示,失去α1螺旋后的Vip3Aa原毒素突变体经体外酶解后均无法形成具有杀虫活性的PCA,且失去杀虫活性与脂质体膜穿膜活性。上述结果证明domainⅠN端的α1螺旋是Vip3Aa毒素蛋白产生毒性作用的必要片段。综上所述,本研究明确了Vip3Aa原毒素酶解活化后产生的多种蛋白复合物中,由～66 k Da与～19 k Da片段组成的PCA是其发挥杀虫活性的关键成分;Vip3Aa毒素蛋白N端的α1螺旋与活性复合物的形成以及膜渗透作用有直接关系。上述结果不仅丰富Vip3A毒素杀虫活性核心的认识和促进Vip3Aa毒素杀虫毒理机制的诠析,而且有助于Bt杀虫蛋白在斜纹夜蛾等鳞翅目害虫防治中的应用。

关键词：苏云金芽孢杆菌 Vip3Aa 蛋白复合物膜穿孔蛋白活性核心

苏云金芽孢杆菌内毒素Cry4BLB重组表达及其灭蝇效果评估

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

苏云金芽孢杆菌内毒素Cry4BLB重组表达及其灭蝇效果评估

作者：洪宇航安徽农业大学

学位级别：硕士

在畜禽生产中,家蝇的肆虐对其造成了严重的影响,尽管化学杀虫剂已被广泛用于杀灭家蝇,但其毒副作用表现明显。此外,因家蝇具有极强的繁衍能力,使得养殖场内的家蝇种群数量难以控制,并且化学杀虫剂中含有大量难以降解的有毒成分,长期使... 详细信息

在畜禽生产中,家蝇的肆虐对其造成了严重的影响,尽管化学杀虫剂已被广泛用于杀灭家蝇,但其毒副作用表现明显。此外,因家蝇具有极强的繁衍能力,使得养殖场内的家蝇种群数量难以控制,并且化学杀虫剂中含有大量难以降解的有毒成分,长期使用过量的化学杀虫剂,已给养殖场周边环境和人畜的健康带来严重危害。生物杀虫剂作为新型杀虫剂,与化学类的杀虫药剂相比,其具有低毒、低残留、易降解、不宜产生抗药性,且还具有较强选择性等特点,对人畜的健康和生态环境均无不良影响,符合生态学发展的需求。苏云金芽孢杆菌作为一种重要的新型生物杀虫剂,因其来源广、成本低、高效、安全和无污染等特点,在国内外受到了广泛关注,因此具有良好的应用前景,对其作用机制和作用效果深入研究,是该领域研究热点之一。本论文开展苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis subsp israelensis,Bti)的内毒素Cry4BLB基因对家蝇成虫与幼虫杀灭效果的评估。试验对保存的Bti进行复苏与纯化,采用碱裂解法提取菌体基因组;采用PCR技术扩增Cry4BLB基因,构建重组质粒p ET-28a-Cry4BLB,并将其转化至Trans-1感受态细胞中,经PCR鉴定为阳性克隆后,将PCR产物送至安徽通用生物公司进行测序,并作序列分析;最终将重组质粒p ET-28a-Cry4BLB转化至Rosetta感受态细胞中,经PCR鉴定为阳性克隆后,对其进行蛋白的诱导表达,将产物经SDS-PAGE和免疫印迹技术进行鉴定;开展重组蛋白Cry4BLB抗家蝇毒杀试验,评估其对家蝇的毒杀效果。结果表明:成功地扩增出Cry4BLB基因,其大小为1947 bp,经测序后分析并未出现任何突变,其与已知报道的Bt mosquitocidal gene Cry D2(基因编号:M20242.1)的序列同源性最高,高达100%,进化树分析也显示两者在遗传距离上最为接近。将重组质粒导入Rosetta感受态细胞中,经IPTG诱导后,成功表达出目的蛋白,其大小约为77k D目的蛋白;经Western-blot分析,表明在77k D处有目的条带,与预期结果相一致;内毒素Cry4BLB蛋白对家蝇与蝇蛆毒理学分析结果显示:其对家蝇成虫的毒杀有一定的作用,其LD仅为2.831×10cfu/只;而对蝇蛆的杀灭效果较为理想,其LD高达2.018×10cfu/只。所以重组蛋白Cry4BLB对家蝇与蝇蛆有一定的杀灭效果,这为研制新型生物杀虫剂奠定了基础。

关键词：苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂内毒素杀灭蝇

苏云金芽孢杆菌Cry1Ab和Cry1C同源重组及转化大豆

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2020年第8期18卷 2591-2596页

作者：宋婷婷钱雪艳姚瑶杨佳邢国杰郭东全董英山吉林师范大学生命科学学院四平136000 吉林省农业科学院农业生物技术研究所吉林省农业生物技术重点实验室长春130033

在研究和确定Cry1Ab和Cry1C蛋白对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾协同杀虫作用的基础上,利用同源重组技术进行Cry1Ab和Cry1C之间的结构域交换获得高效融合蛋白,利用农杆菌介导的子叶节法将融合抗虫基因表达载体导入大豆中,从而获得抗虫转基因大豆... 详细信息

在研究和确定Cry1Ab和Cry1C蛋白对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾协同杀虫作用的基础上,利用同源重组技术进行Cry1Ab和Cry1C之间的结构域交换获得高效融合蛋白,利用农杆菌介导的子叶节法将融合抗虫基因表达载体导入大豆中,从而获得抗虫转基因大豆新材料。采用PCR及蛋白试纸条检测法对获得的大豆再生植株进行鉴定,测得结果初世代阳性植株为121株。对部分后代转基因植株的遗传分析表明外源基因能够稳定遗传。室内接种斜纹夜蛾鉴定表明,含有重组基因的转基因大豆对斜纹夜蛾有较强的抗性。因此,利用同源重组技术进行Cry1Aa和Cry1C之间的结构域交换,是获得高抗食叶性害虫大豆的有效途径。

关键词：大豆(Glycine max L. Merrill) 苏云金芽孢杆菌结构改造遗传转化

苏云金芽孢杆菌的分离鉴定及伴孢晶体蛋白生物毒力效果分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华北农学报 2020年第S01期35卷 355-362页

作者：刘晨王祯朱先约杨瑞倪博立甘肃烟草工业有限责任公司技术研发中心甘肃兰州730050

为发掘苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白对烟草甲幼虫生物毒力活性。以复烤片烟云烟87为供试材料,通过醋酸钠+抗生素的方法从烟叶表面分离菌株,采用生理生化指标对比和16S rDNA测序鉴定出苏云金芽孢杆菌。确定了其伴孢晶体的形态和基因型,考... 详细信息

为发掘苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白对烟草甲幼虫生物毒力活性。以复烤片烟云烟87为供试材料,通过醋酸钠+抗生素的方法从烟叶表面分离菌株,采用生理生化指标对比和16S rDNA测序鉴定出苏云金芽孢杆菌。确定了其伴孢晶体的形态和基因型,考察了Bt菌株生长周期,分析了伴孢晶体蛋白并对烟草甲幼虫的毒力活性。结果表明:①分离得到的Bt菌株能产生菱形的cry1型和球形的cry8型伴孢晶体蛋白,其伴孢晶体蛋白对3~4周龄的烟草甲幼虫有很高的毒力活性。②分别使用不同浓度晶体蛋白处理后的烟叶感染烟草甲幼虫,1 d后幼虫出现死亡现象,形态变为黑褐色,生物毒力分别随感染时间和蛋白浓度梯度的增加而逐步提高。③感染4 d后150,10 mg/L的死亡率分别达(96.67±4.22)%,(51.11±5.02)%。结果不仅表明分离得到的苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白对烟草甲幼虫具有较强的生物毒性,且为进一步利用生物性技术防治烟叶仓储害虫提供理论参考。

关键词：烟草苏云金芽孢杆菌烟草甲幼虫分离鉴定伴孢晶体蛋白毒力活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苏云金芽孢杆菌对PAHs的降解研究

生物技术通报 2019年第9期35卷 125-133页

作者：雒晓芳陈丽华夏苗苗许淑娟熊梅西北民族大学实验教学部兰州730030 西北民族大学化工学院兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030

为研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在不同温度、pH、多环芳烃(PAHs)质量下对蒽芘芴的降解性能,采用单因素实验和响应面分析结合的方法,以 PAHs 为唯一碳源,活性炭为吸附载体,利用索氏提取法测定降解吸光度值。根据 Design E... 详细信息

为研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在不同温度、pH、多环芳烃(PAHs)质量下对蒽芘芴的降解性能,采用单因素实验和响应面分析结合的方法,以 PAHs 为唯一碳源,活性炭为吸附载体,利用索氏提取法测定降解吸光度值。根据 Design Expert 8.***.6.1 软件中 Box-Behnken design 对实验结果进行分析。结果表明,温度与 pH 交互项对蒽、芘的降解影响显著,温度与 PAHs 质量交互对芴的降解影响显著。在优化实验中,蒽芘芴 3 物质在各自的优化条件下的降解率预期值分别为 92.13%、87.08%、83.56%,与实际试验值 91.60%、86.62%、82.95%相比,相对误差为±0.58%、±0.53%、±0.73%之间。3 个优化模型相对误差均在 2%以内,表明 3 个实验模型均可用于分析及预测苏云金芽孢杆菌对蒽芘芴的降解效果。

关键词：苏云金芽孢杆菌降解性能响应面分析蒽芘芴

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株研究进展

基因组学与应用生物学 2020年第10期39卷 4614-4623页

作者：周燕朱英芝姜明国广西民族大学海洋与生物技术学院广西多糖材料与改性重点实验室南宁530008

苏云金芽孢杆菌作为生物杀虫剂已有近百年历史,其杀虫谱包括从鳞翅目、鞘翅目、膜翅目、双翅目到线虫甚至是癌症细胞,对农林业生产以及医学领域研究具有非常重要的作用。全球每年死于蚊媒疾病的数目惊人。本综述首先介绍了首个被发现对... 详细信息

苏云金芽孢杆菌作为生物杀虫剂已有近百年历史,其杀虫谱包括从鳞翅目、鞘翅目、膜翅目、双翅目到线虫甚至是癌症细胞,对农林业生产以及医学领域研究具有非常重要的作用。全球每年死于蚊媒疾病的数目惊人。本综述首先介绍了首个被发现对双翅目幼虫具有杀蚊活性的苏云金芽孢杆菌以色列亚种,详细叙述了该菌株的杀虫功能、菌株特点以及含有的多种杀虫毒蛋白基因;随后概述了报道的其他杀蚊菌株和杀蚊毒蛋白;还揭示了苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株Cry/Cyt杀蚊毒蛋白的作用模式,为有关苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株的研究提供借鉴。

关键词：苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株 Bti 毒蛋白杀蚊作用模式