检索结果-南通市图书馆

小麦温敏雄性不育系BNS366小孢子发育和花粉育性检测方法研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

麦类作物学报 2018年第4期38卷 379-385页

作者：刘海英甄俊琦胡铁柱茹振钢李珍胡雪寒邢晨涛高远河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南科技学院小麦中心河南新乡453003

为了建立温敏雄性不育小麦BNS366小孢子发育和花粉育性的检测方法,以郑麦366作为对照,采用I2-KI法、醋酸洋红法、苏木精法和改良苯酚品红法染色观察小孢子发育过程,进行花粉可育率和自交结实率统计。结果表明,BNS366小孢子败育时期为单... 详细信息

为了建立温敏雄性不育小麦BNS366小孢子发育和花粉育性的检测方法,以郑麦366作为对照,采用I2-KI法、醋酸洋红法、苏木精法和改良苯酚品红法染色观察小孢子发育过程,进行花粉可育率和自交结实率统计。结果表明,BNS366小孢子败育时期为单核靠边期至二核期。I2-KI法能清晰反映淀粉积累情况,但郑麦366在三核期和开花期看不到细胞核,其花粉可育率极显著高于自交结实率,操作最简便。醋酸洋红法能清晰显示细胞核,郑麦366花粉可育率与自交结实率一致,能够看到内容物的积累,但不清晰,操作简便。苏木精法在单核期和二核期染色效果最好,操作较复杂。改良苯酚品红法对细胞核和内容物的染色效果均不理想。因此,观察淀粉的积累情况以I2-KI法最好,观察细胞核的变化和检测花粉育性均以醋酸洋红法最好。

关键词：小麦温敏雄性不育 BNS366 小孢子发育花粉育性检测

不同乙醇置换处理对小麦小孢子和花粉育性检测的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

麦类作物学报 2020年第8期40卷 930-937页

作者：刘海英甄俊琦茹振钢张亚娟冯必得景秀秀王莹河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南科技学院小麦中心河南新乡453003

为了探究小麦穗经FAA固定液固定后,不同乙醇置换处理对小麦小孢子花粉染色效果的差异,以温敏雄性不育系BNS366及其近等基因系郑麦366为材料,采用90%-80%-70%、70%-70%和不置换3种乙醇置换方式处理后,用I2-KI法和DAPI法分别染色对小孢子... 详细信息

为了探究小麦穗经FAA固定液固定后,不同乙醇置换处理对小麦小孢子花粉染色效果的差异,以温敏雄性不育系BNS366及其近等基因系郑麦366为材料,采用90%-80%-70%、70%-70%和不置换3种乙醇置换方式处理后,用I2-KI法和DAPI法分别染色对小孢子发育过程进行了观察,并统计了花粉可育率和自交结实率。结果表明,3种乙醇置换处理下,I2-KI法染色均可以清晰显示小孢子内淀粉积累情况,其淀粉积累区域颜色由深到浅排序为不置换>70%-70%乙醇置换>90%-80%-70%乙醇置换。在90%-80%-70%乙醇置换处理下,DAPI法染色在小孢子不同发育时期均能清晰显示细胞核状况,在BNS366的二核期和三核期有细胞质微红现象,但不影响细胞学观察;在70%-70%乙醇置换处理下,DAPI法染色细胞核清晰,在郑麦366三核期和BNS366的二核期也存在细胞质微红现象且程度略有加重,仍不影响细胞学观察;在不置换处理下,DAPI法染色郑麦366和BNS366单核期和开花期的小孢子细胞图像清晰,郑麦366三核期小孢子细胞质发白浑浊,或发红发亮,甚至部分细胞核被染成红色,核显示不清晰,BNS366二核期和三核期小孢子细胞质着红色且比70%-70%乙醇置换处理下程度加剧。三种乙醇置换处理按细胞图像清晰度排序为90%-80%-70%乙醇置换>70%-70%乙醇置换>不置换。I2-KI和DAPI染色统计的花粉可育率与其自交结实率基本一致。从小麦小孢子细胞学观察效果,兼顾经济实用和试验安全角度考虑,FAA固定后采用70%-70%乙醇置换处理较为可取。

关键词：小麦乙醇置换处理温敏雄性不育小孢子发育花粉育性检测

不同固定液对小麦小孢子发育和花粉育性检测的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

麦类作物学报 2019年第8期39卷 966-972页

作者：刘海英甄俊琦茹振钢董娜高远冯必得张丽师学珍河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南科技学院小麦研究中心河南新乡453003 河南师范大学新联学院河南新乡453007

为了明确FAA和卡诺氏固定液对小麦小孢子花粉染色效果的差异,以温敏雄性不育系BNS366及其近等基因系郑麦366为材料,采用I2-KI法、醋酸洋红法和DAPI法染色观察了小孢子发育过程,并统计了花粉可育率和自交结实率。结果表明,采用FAA固定液... 详细信息

为了明确FAA和卡诺氏固定液对小麦小孢子花粉染色效果的差异,以温敏雄性不育系BNS366及其近等基因系郑麦366为材料,采用I2-KI法、醋酸洋红法和DAPI法染色观察了小孢子发育过程,并统计了花粉可育率和自交结实率。结果表明,采用FAA固定液固定、I2-KI法染色,小孢子内淀粉积累区域染色较深,单核期和二核期醋酸洋红法与DAPI法染色细胞核清晰程度均较高;采用卡诺氏固定液固定、三核期和开花期醋酸洋红法染色,细胞核清晰度较高,二核期与三核期DAPI法细胞图像略偏红。采用两种固定液固定、I2-KI法和DAPI法染色,以及采用卡诺氏固定液固定、醋酸洋红法染色,花粉可育率均较高;采用FAA固定液固定、醋酸洋红法染色,花粉可育率偏低并与自交结实率一致。因此,从获得小孢子高清晰细胞图像角度考虑,对于I2-KI、单核期和二核期醋酸洋红及DAPI染色法来说,采用FAA固定液较好;对于三核期和开花期醋酸洋红染色法来说,采用卡诺氏固定液较好。

关键词：小麦固定液温敏雄性不育小孢子发育花粉育性检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

小麦小孢子发育及育性检测体系初探

小麦小孢子发育及育性检测体系初探

作者：甄俊琦河南师范大学

学位级别：硕士

为了建立简单、准确、快捷的小麦小孢子发育观察及花粉育性检测的技术体系,本研究以温敏雄性不育小麦BNS366及其近等基因系郑麦366为材料,采用光学显微镜法观察小孢子发育进程并调查花粉可育率,采用国内法和国际法调查自交结实率,比较了... 详细信息

为了建立简单、准确、快捷的小麦小孢子发育观察及花粉育性检测的技术体系,本研究以温敏雄性不育小麦BNS366及其近等基因系郑麦366为材料,采用光学显微镜法观察小孢子发育进程并调查花粉可育率,采用国内法和国际法调查自交结实率,比较了I-KI、醋酸洋红、苏木精、改良碳酸品红4种染色方法,FAA和卡诺氏2种固定液(I-KI、醋酸洋红、DAPI 3种染色方法),花粉取自小麦穗中部或上中下部小穗花药2种取样方法,FAA固定液固定后,90%-80%-70%、70%-70%和不置换3种乙醇置换处理,对小孢子发育和花粉育性观察效果的差异,以形成获取高辨识度显微图像的操作流程,在此基础上,比较了Image J、Image-Pro Plus和Photoshop 3种图像识别软件在开花期花粉自动计数方面应用效果的差异,以确定适合花粉育性统计的高通量图像分析方法。本研究取得的主要结果如下:***366小孢子败育时期为单核靠边期至二核期。I-KI法能清晰反映淀粉积累情况,但郑麦366在三核期和开花期看不到细胞核,其花粉可育率显著高于自交结实率(国内法),操作最简便。醋酸洋红法能清晰显示细胞核,郑麦366花粉可育率与自交结实率一致,能够看到内容物的积累但不清晰,操作简便。苏木精法在单靠期和二核期染色效果最好,操作较复杂;改良苯酚品红法对细胞核和内容物的染色效果均不理想。因此,观察淀粉的积累情况以I-KI法最好,观察细胞核的变化和检测花粉育性均以醋酸洋红法最好。2.采用FAA固定液固定、I-KI法染色,小孢子内淀粉积累区域染色较深,单核期和二核期醋酸洋红法与DAPI法染色细胞核清晰程度均较高;采用卡诺氏固定液固定、三核期和开花期醋酸洋红法染色,细胞核清晰度较高,二核期与三核期DAPI法细胞图像略偏红。采用两种固定液固定、I-KI法和DAPI法染色,以及采用卡诺氏固定液固定、醋酸洋红法染色,花粉可育率均较高;采用FAA固定液固定、醋酸洋红法染色,花粉可育率偏低并与自交结实率(国内法)一致。因此,从获得小孢子高清晰细胞图像角度考虑,对于I-KI、单核期和二核期醋酸洋红及DAPI染色法来说,采用FAA固定液较好;对于三核期和开花期醋酸洋红染色法来说,采用卡诺氏固定液较好。3.采用两种取样方法,I-KI法染色花粉可育率与国际法自交结实率均无显著差异,均高于国内法自交结实率(早播BNS366这4个指标均为零除外,下同)。不同取样方法,试验材料的醋酸洋红法花粉可育率无显著差异,早播郑麦366花粉可育率与国内法自交结实率均保持一致,且低于国际法自交结实率,晚播郑麦366和晚播BNS366花粉可育率与国际法自交结实率均保持一致,且高于国内法自交结实率。两种取样方法,试验材料的DAPI花粉可育率无显著差异,且一般与国际法自交结实率相近,高于国内法自交结实率,尤其是来自中部小穗花药的花粉。因此综合来看,从节约样品固定、置换和保存所需试剂、劳动量、降低劳动复杂程度以及可育率准确性来考虑,在实际细胞学观察中,取中部小穗中的花粉进行后续试验较为合适,可以用来预测其国际法自交结实率。从科学严谨角度考虑,研究人员也可根据需要取上中下部花粉进行花粉育性的检测工作。4.在3种乙醇置换处理下,I-KI法染色均可以清晰显示小孢子内淀粉积累情况,其淀粉积累区域颜色深浅程度排序为:不置换>70%-70%乙醇置换>90%-80%-70%乙醇置换。在90%-80%-70%乙醇置换处理下,DAPI法染色在小孢子不同发育时期均能清晰显示细胞核状况,在BNS366的二核期和三核期有细胞质微红现象,但不影响细胞学观察;在70%-70%乙醇置换处理下,DAPI法染色细胞核清晰,在郑麦366三核期和BNS366的二核期也存在细胞质微红现象且程度略有加重,仍不影响细胞学观察;在不置换处理下,DAPI法染色郑麦366和BNS366单核期和开花期小孢子细胞图像清晰,郑麦366三核期小孢子细胞质发白浑浊,或发红发亮,甚至部分细胞核被染成红色,核显示不清晰,BNS366二核期和三核期小孢子细胞质着红色且比70%-70%乙醇置换处理下程度加剧,三种乙醇置换处理按细胞图像清晰度排序为:90%-80%-70%乙醇置换>70%-70%乙醇置换>不置换。I-KI和DAPI染色统计的花粉可育率与其自交结实率(国内法)基本一致。从小麦小孢子细胞学观察效果,兼顾经济实用和试验安全角度考虑,FAA固定后采用70%-70%乙醇置换处理较为可取。5.采用3种软件进行花粉细胞快速计数均比人工手动计数法效率明显提高,但难以完全清除细胞分割存在少数不准确现象。其中Image J的处理效果最好,操作最简便,可对图片进行单张及批量处理以及写入宏代码进行花粉可育率统计,其单张图片处理结果准确,但是批量处理存在细胞自动分割不准确的问题。Image-Pro

关键词：小麦温敏雄性不育 BNS366 小孢子发育花粉育性检测