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芪玄抑甲宁对Graves病模型药效学研究

辽宁中医药大学学报 2018年第6期20卷 5-7页

作者：刘树民甄喆王可心汪娜张娜杨智明柳长凤黑龙江中医药大学药物安全性评价中心黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150040

目的：探讨芪玄抑甲宁对Graves病动物模型的药效学作用。方法：胫前肌注重组腺病毒复制Graves病动物模型,给药后观察小鼠外观行为,酶标仪检测实验小鼠血清中血清游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素受体抗体（TRAb）的含量变化,并取甲状... 详细信息

目的：探讨芪玄抑甲宁对Graves病动物模型的药效学作用。方法：胫前肌注重组腺病毒复制Graves病动物模型,给药后观察小鼠外观行为,酶标仪检测实验小鼠血清中血清游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素受体抗体（TRAb）的含量变化,并取甲状腺组织用于病理学检查。结果：芪玄抑甲宁对小鼠的外观行为、甲状腺组织病理具有改善作用,并对血清中FT4、TRAb均有回调作用。结论：芪玄抑甲宁对Graves病动物模型具有良好的治疗效果。

关键词：芪玄抑甲宁 Graves病药效学

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芪玄抑甲宁治疗甲亢的主要药效学研究

中医药学报 2017年第5期45卷 48-51页

作者：刘树民甄喆王可心汪娜张娜杨智明柳长凤黑龙江中医药大学药物安全性评价中心黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学北药基础与应用研究教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150040

目的:研究芪玄抑甲宁对甲亢的治疗作用。方法:检测芪玄抑甲宁各剂量组对甲亢大鼠外观行为及体质量、甲状腺激素水平以及组织病理学改变等指标的变化。结果:芪玄抑甲宁各剂量组能显著降低甲亢大鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4... 详细信息

目的:研究芪玄抑甲宁对甲亢的治疗作用。方法:检测芪玄抑甲宁各剂量组对甲亢大鼠外观行为及体质量、甲状腺激素水平以及组织病理学改变等指标的变化。结果:芪玄抑甲宁各剂量组能显著降低甲亢大鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)的水平并使促甲状腺激素(TSH)的水平升高,并且可以显著改善甲亢大鼠的组织病理样的变化。结论:芪玄抑甲宁对甲亢大鼠具有良好的治疗效果。

关键词：芪玄抑甲宁甲亢药效学

基于miRNA高通量测序探讨芪玄抑甲宁改善格雷夫斯病小鼠甲状腺功能亢进的作用机制

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中南药学 2023年第2期21卷 334-341页

作者：高长久卢芳柳长凤于栋华丁崧刘树民黑龙江中医药大学研究生院哈尔滨150040 黑龙江中医药大学中医药研究院哈尔滨150040

目的基于微小RNA(miRNA)高通量测序技术,探讨芪玄抑甲宁通过调控miRNA改善格雷夫斯病(GD)甲状腺功能亢进的作用机制。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、甲巯咪唑组和芪玄抑甲宁组,前期应用重组腺病毒(Ad-TSHR289)免疫造模... 详细信息

目的基于微小RNA(miRNA)高通量测序技术,探讨芪玄抑甲宁通过调控miRNA改善格雷夫斯病(GD)甲状腺功能亢进的作用机制。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、甲巯咪唑组和芪玄抑甲宁组,前期应用重组腺病毒(Ad-TSHR289)免疫造模成功后,芪玄抑甲宁组灌胃芪玄抑甲宁50 g/(kg·d)进行干预,观察各组小鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)水平及甲状腺组织病理形态,并对对照组、模型组和芪玄抑甲宁组小鼠甲状腺组织进行miRNA测序。结果与模型组比较,芪玄抑甲宁干预4周后,小鼠血清T_(3)、T_(4)显著降低(P甲状腺滤泡大小形状比较均一,排列疏松,胶质含量相对丰富。与对照组比较,模型组共筛选出171个差异表达miRNA,其中99个miRNA下调、72个miRNA上调;与模型组比较,芪玄抑甲宁组共筛选出127个差异表达miRNA,其中61个miRNA下调、66个miRNA上调。差异表达miRNA的q RT-PCR验证结果显示,三组小鼠甲状腺组织miR-128-3p、miR-144-3p、miR-363-3p、miR-215-5p和miR-30a-5p表达与miRNA测序结果基本一致。差异表达miRNA靶基因的富集结果显示,基因本体(GO)功能主要富集于对生长因子的反应、神经元细胞体、染色质结合、DNA转录因子结合、RNA聚合酶Ⅱ结合等方面;京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路主要富集于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、甲状腺激素信号通路等途径。结论miR-128-3p、miR-144-3p和miR-363-3p可能是芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病甲状腺功能亢进的作用靶点。

关键词：芪玄抑甲宁格雷夫斯病(GD) 甲状腺功能亢进 miRNA测序生物信息学分析

基于网络药理学结合动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病的作用机制

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中国医药导报 2023年第3期20卷 9-14页

作者：高长久丁崧卢芳柳长凤于栋华刘树民黑龙江中医药大学研究生院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150040

目的通过网络药理学与动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病(GD)的作用机制。方法应用中药系统药理学数据库与分析平台和化学专业数据库查筛芪玄抑甲宁的活性成分及其靶点,从Genecards、在线人类孟德尔遗传数据库等中查筛GD相关靶点... 详细信息

目的通过网络药理学与动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病(GD)的作用机制。方法应用中药系统药理学数据库与分析平台和化学专业数据库查筛芪玄抑甲宁的活性成分及其靶点,从Genecards、在线人类孟德尔遗传数据库等中查筛GD相关靶点;将药物与疾病共有靶点导入STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选核心靶点;使用Cytoscape 3.8.2软件绘制“药物-活性成分-靶点”网络图并筛选核心成分;应用Metascape平台对核心靶点进行富集分析。选取6周龄SPF级体重(20±2)g的雌性BALB/c小鼠40只,其中10只设为正常对照组,其余30只均用重组腺病毒Ad-TSHR-289免疫3次构建GD模型。将造模成功的小鼠采用随机数字表法分为GD模型组、甲巯咪唑组、芪玄抑甲宁组,每组8只。芪玄抑甲宁组灌胃芪玄抑甲宁50 g/kg,甲巯咪唑组灌胃甲巯咪唑片3.75 mg/kg,正常对照组、GD模型组灌胃同体积的饮用水,1次/d。连续给药4周后,采用酶联免疫吸附试验检测四组血清血管内皮生长因子(VEGF)含量,免疫组织化学染色法检测四组甲状腺组织血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)的表达量。结果共得到芪玄抑甲宁活性成分63种,靶点281个,GD靶点1 489个,药物与疾病共有靶点124个。PPI获得信号转导和转录激活因子3、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、VEGFA等21个核心靶点。药物-靶点分析得到木犀草素、山柰酚、槲皮素、熊果酸、β-谷甾醇等18种核心成分。GO分析获得炎症反应、血管新生、血管形态发生等954项,KEGG分析获得MAPK、PI3K/AKT、VEGF等92条通路。动物实验显示,GD模型组血清VEGF和甲状腺组织PECAM-1表达量高于正常对照组,且芪玄抑甲宁组低于GD模型组,差异有高度统计学意义(P芪玄抑甲宁可能通过调控MAPK、PI3K/AKT、VEGF等信号通路产生抑制血管新生的作用治疗GD。

关键词：芪玄抑甲宁格雷夫斯病网络药理学血管新生作用机制

星点设计-响应面法优选芪玄抑甲宁的提取工艺

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中医药学报 2013年第3期41卷 43-47页

作者：柳长凤苗晶囡邱军强崔晓旭刘树民黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150040

目的:优选芪玄抑甲宁方中有效成分的提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数为自变量,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷和迷迭香酸得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用星点设计-响应面法选取最... 详细信息

目的:优选芪玄抑甲宁方中有效成分的提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数为自变量,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷和迷迭香酸得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用星点设计-响应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:最佳提取工艺条件为浸泡时间74.4min,加水量为13.56倍,提取时间1.165h,提取次数2次,在此条件下,芪玄抑甲宁中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷、迷迭香酸含量总和的最大估计值为0.36,与预测值相符。结论:该方法简便合理,稳定,可预测性较好。

关键词：芪玄抑甲宁星点设计响应面法

益气养阴清肝散结方对IL-17作用后的Graves病甲状腺细胞的调控影响

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益气养阴清肝散结方对IL-17作用后的Graves病甲状腺细胞的调控影响

作者：甄喆黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

目的通过含药血清对甲状腺细胞进行干预,探讨益气养阴清肝散结方芪玄抑甲宁对IL-17作用后的甲状腺细胞的调控影响。方法利用表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒,建立雌性BALB/c小鼠的免疫GD模型,取GD模型的甲状腺组织提取甲状腺细胞进行体... 详细信息

目的通过含药血清对甲状腺细胞进行干预,探讨益气养阴清肝散结方芪玄抑甲宁对IL-17作用后的甲状腺细胞的调控影响。方法利用表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒,建立雌性BALB/c小鼠的免疫GD模型,取GD模型的甲状腺组织提取甲状腺细胞进行体外原代培养,使用免疫组化法检测甲状腺球蛋白的表达以鉴定甲状腺细胞,将培养的细胞分为空白组、模型组、阳性药对照组和益气养阴清肝散结方含药血清高、中、低剂量组以及空白血清组,各给药组取相应的含药血清对甲状腺细胞进行干预后,模型组和各给药组再利用IL-17对甲状腺细胞进行作用。使用MTT法检测各组甲状腺细胞的存活率;ELISA法检测各组甲状腺细胞上清中IL-6、CXCL10的分泌;流式细胞仪检测各组甲状腺细胞中ICAM-1的表达;Real time PCR法检测各组甲状腺细胞中 IL-6、CXCL10、ICAM-1 的 mRNA 表达;Western blot 法检测各组甲状腺细胞中JNK、ERK1/2、P38以及各组细胞核中NF-κB主要亚基p65的表达;免疫荧光检测各组甲状腺细胞中NF-κB主要亚基p65的核移位情况。结果通过对造模后小鼠血清中FT4和TRAb的变化及甲状腺组织病理学的检测,确定所造模型符合临床GD病的变化情况,可以用于后续实验研究的动物模型。通过检测甲状腺球蛋白的表达,确定所培养的细胞为甲状腺细胞,且原代培养情况良好,可作为后续实验的研究基础。离体细胞水平的实验表明,益气养阴清肝散结方对甲状腺细胞上清中IL-6、CXCL10的分泌和甲状腺细胞中ICAM-1的表达具有回调作用,对MAPK、NF-κB等细胞信号通路的相关因子也有明显的干预作用。结论实验结果表明益气养阴清肝散结可能是通过调控Th17细胞的相关信号通路起到治疗GD的作用。本研究为GD的治疗提供了新策略,为研究和开发出疗效确切、作用机理和靶点明确的治疗GD的复方中药奠定了基础。

关键词：益气养阴清肝散结 GD 芪玄抑甲宁 Th17细胞 IL-17

刘树民教授治疗气阴两虚型甲状腺功能亢进症临床经验

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中医临床研究 2024年第22期16卷 77-80页

作者：张飞宇孙梦迪卢芳于栋华陈平平徐鹏王宇刘树民黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040

甲状腺功能亢进症(简称甲亢)是一种临床常见病、多发病。现代医学治疗甲亢的方案主要是口服甲巯咪唑片、放射性碘治疗和手术治疗,上述3种方法不良反应较多,后期容易出现甲状腺功能减退。刘树民教授从事内科杂病治疗30余年,擅长运用中医... 详细信息

甲状腺功能亢进症(简称甲亢)是一种临床常见病、多发病。现代医学治疗甲亢的方案主要是口服甲巯咪唑片、放射性碘治疗和手术治疗,上述3种方法不良反应较多,后期容易出现甲状腺功能减退。刘树民教授从事内科杂病治疗30余年,擅长运用中医辨证思维治疗各种疑难杂症。他认为,甲亢的病因隐匿且复杂,其基本病机为本虚标实。本虚以气阴两虚为主;标实以肝郁气滞较为常见。研究从病因病机、临床特征、治疗等方面系统分析、总结了刘树民教授运用芪玄抑甲宁为基础方治疗甲亢气阴两虚证的临证经验。建议在辨证治疗时注意以下5个要点:第一,注重疏理肝之郁气。肝气郁结是标实的主要外在表现,理气调肝为其治疗大法。第二,注重肝与心对调节情志的协同之功。肝藏血与心主血、肝藏魂与心藏神乃调节情绪、情志,维持精神、思维愉悦的关键,临证时应肝、心同调,以求情志畅达。第三,注重肝与肾的子母生化关系。肾、肝为母子之脏,肾水涵木,肾阴可滋生肝阴,以制约肝阳。第四,注重肝与脾的关系。肝和脾属五行相克,但相克太过即出现肝木乘脾土的情况,应注重肝脾之生克以求木土之平衡。第五,注意饮食。避免进食辛辣之品以防耗伤阴津及削弱中药滋阴之效。

关键词：甲状腺功能亢进症气阴两虚证芪玄抑甲宁名医经验