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芍药PlSVP基因的克隆及其花期调控功能分析

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园艺学报 2022年第11期49卷 2367-2376页

作者：籍凤娇马燕亓帅郭先锋陈俊强山东农业大学林学院山东泰安271018 山东省林业科学研究院济南250014

从芍药(Paeonia lactiflora)中克隆SHORT VEGETATIVE PHASE(SVP)基因,研究其对花期的调控功能,为芍药分子育种储备重要基因资源。采用RT-PCR方法从‘大富贵’芍药中克隆了PlSVP基因,其开放阅读框包含687bp碱基,编码228个氨基酸。系统进... 详细信息

从芍药(Paeonia lactiflora)中克隆SHORT VEGETATIVE PHASE(SVP)基因,研究其对花期的调控功能,为芍药分子育种储备重要基因资源。采用RT-PCR方法从‘大富贵’芍药中克隆了PlSVP基因,其开放阅读框包含687bp碱基,编码228个氨基酸。系统进化树分析发现,PlSVP编码的蛋白与同属的牡丹PsSVP蛋白亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果表明,PlSVP主要在营养器官中表达,在根中表达量最高,其次是叶片;在生殖器官花瓣中表达量极低。将PlSVP转化入哥伦比亚型野生型拟南芥,发现转PlSVP基因的株系较野生型的抽薹、开花时间分别延迟7和15d;在拟南芥svp-41突变体中过表达PlSVP发现,其不再呈现早抽薹、早开花表型,即PlSVP基因回补了svp-41突变体的功能缺失。进一步比较研究表明,拟南芥转PlSVP基因植株中FT、SOC1、LFY、AP1等SVP下游开花促进基因的表达量均显著下调。以上结果表明,芍药PlSVP基因负调控植物开花时间,并且可能通过抑制FT、SOC1、LFY、AP1等基因表达而发挥其负调控功能。

关键词：芍药 SVP基因过表达功能互补开花

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芍药花药培养及植株再生体系的建立

植物生理学报 2022年第12期58卷 2379-2385页

作者：李艳敏高杰王慧娟符真珠袁欣赵大球张和臣河南省农业科学院园艺研究所郑州450002 扬州大学园艺与植物保护学院郑州450002

本文对芍药(Paeonia lactiflora)花药培养及植株再生影响因素进行研究,以期为芍药遗传理论研究及实际育种提供新材料和技术支持。以4个芍药品种为材料,研究了低温预处理时间、黑暗培养时间、2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响,并比较了4个... 详细信息

本文对芍药(Paeonia lactiflora)花药培养及植株再生影响因素进行研究,以期为芍药遗传理论研究及实际育种提供新材料和技术支持。以4个芍药品种为材料,研究了低温预处理时间、黑暗培养时间、2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响,并比较了4个品种愈伤组织诱导率、体胚发生率和成苗率差异。结果表明:低温预处理6~8 d及黑暗培养0~7 d能提高愈伤组织诱导率,不同品种对2,4-D浓度需求不同,‘鱼鳞红’和‘东海朝阳’以0.5 mg·L^(-1)为宜,‘大富贵’和‘粉玉奴’以1.5 mg·L^(-1)为宜;仅‘大富贵’和‘粉玉奴’获得再生植株,包括单倍体、二倍体、非整倍体植株,以及少量的三倍体和四倍体植株等多种类型。因此,选择合适低温预处理时间和黑暗培养时间有利于提高花药愈伤组织诱导率,不同品种对芍药花药离体培养效果不同。

关键词：芍药花药离体培养单倍体

DESI-MSI和UPLC分析芍药根不同组织药效成分的分布

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中国中药杂志 2022年第16期47卷 4333-4340页

作者：陈文静郑钰宁赵琳宋尚红龙飞裴照卿唐策许志刚吕光华成都中医药大学药学院四川成都611137 成都中医药大学民族医药学院四川成都611137 成都中医药大学中医药创新研究院四川成都611137 中江县万生农业科技有限责任公司四川德阳618100

中药白芍和赤芍均以根粗为佳,质量评价指标成分同为芍药苷,但是药效成分含量高低与根粗细之间的相关性不明确。为此,该研究以白芍和赤芍的基原植物芍药根为对象,研究不同组织中芍药苷等7种药效成分的分布及其含量,从木部与皮部的比例,... 详细信息

中药白芍和赤芍均以根粗为佳,质量评价指标成分同为芍药苷,但是药效成分含量高低与根粗细之间的相关性不明确。为此,该研究以白芍和赤芍的基原植物芍药根为对象,研究不同组织中芍药苷等7种药效成分的分布及其含量,从木部与皮部的比例,分析根粗细与药效成分含量的相关性,选择质量评价的指标成分。从白芍道地产区采集了9份芍药鲜根,先用解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)观察各成分在横切面上各组织中的分布,再用UPLC测定这些成分在木部和皮部的含量,并用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)选出木部与皮部之间差异最大的成分。结果表明,芍药苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、没食子酸和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖在木部分布多,含量高;而芍药内酯苷和儿茶素则在皮部分布多,含量高。芍药苷和芍药内酯苷是木部与皮部之间含量差异最大的成分,也是在这2个部位中含量最高的成分;根直径越粗,芍药苷的含量越高,而芍药内酯苷的含量越低。芍药苷与芍药内酯苷为同分异构体,药效作用各有侧重,可根据白芍、赤芍的不同用途,选择不同的指标成分,实行同药异用的质量分类评价。

关键词：芍药根药效成分分布含量测定解吸电喷雾电离质谱成像超高效液相色谱法

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芍药新品种‘江南月明’

园艺学报 2022年第S2期49卷 183-184页

作者：史小华张佳平马广莹王小斌朱开元浙江省园林植物与花卉研究所杭州311251 浙江大学农业与生物技术学院杭州310058

‘江南月明’是从芍药人工杂交后代中选育出来的新品种。株高约80cm,花茎绿色,枝条硬挺。菊花型,花瓣白色,个别花瓣有粉色条纹。花径约18 cm,可结实。4月上中旬盛花,单花花期8~12 d。抗逆性强,尤耐湿热。

关键词：芍药品种

芍药红斑病病原菌鉴定、生物学特性及有效药剂筛选

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核农学报 2023年第8期37卷 1533-1541页

作者：李培谦冯宝珍赵燕飞王琳运城学院生命科学系山西运城044000 运城学院理科实验中心山西运城044000 太原海关技术中心山西太原030000

红斑病是芍药栽培中的严重病害之一,病原菌复杂。为明确运城市芍药红斑病的病原,本研究采集舜帝公园具有红斑病症状的芍药叶片和茎秆,分离病原菌,并结合形态学特征和3种基因序列(核糖体内转录间隔区rDNA-ITS、真核延伸因子TEF-1α、RNA... 详细信息

红斑病是芍药栽培中的严重病害之一,病原菌复杂。为明确运城市芍药红斑病的病原,本研究采集舜帝公园具有红斑病症状的芍药叶片和茎秆,分离病原菌,并结合形态学特征和3种基因序列(核糖体内转录间隔区rDNA-ITS、真核延伸因子TEF-1α、RNA聚合酶II第二大亚基RPB2)联合分析进行病原鉴定。结果表明,运城市芍药红斑病原为链格孢(Alternaria alternata)和细极链格孢(A.tenuissima)。生物学特性分析结果表明,该病原菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA)上菌落生长旺盛、菌丝粗壮,菌丝生长最适温度为25~30℃,最适pH值为7~8,病原菌生长的最佳碳源为麦芽糖和可溶性淀粉,最佳氮源为NaNO_(3)、蛋白胨。室内毒力测定结果发现,7种杀菌剂对病原菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用,其中25%吡唑醚菌酯、50%咯菌腈对病原菌菌丝生长的抑制作用较强,两种杀菌剂抑制中浓度(EC_(50))均小于1.0 mg·L^(-1)。该研究结果可为山西省芍药红斑病的精准防控提供理论依据。

关键词：芍药红斑病病原鉴定毒力测定

芍药新品种‘粉罗裙’‘千重粉黛’‘笑春风’和‘碧叶粉荷’

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园艺学报 2023年第2期50卷 457-458页

作者：朱炜曹津津陈曦张葳孙榕泽朱绍才赵家庚崔雅琦王宇暄于晓南北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室北京100083

在引种试种、资源评价及杂交育种的工作基础上,历时11年从众多的芍药定向杂交后代中筛选出性状优良的‘粉罗裙’‘千重粉黛’‘笑春风’和‘碧叶粉荷’。‘粉罗裙’‘千重粉黛’属于中国芍药品种群,重瓣花,茎秆粗壮直立,株高80~90 cm,... 详细信息

在引种试种、资源评价及杂交育种的工作基础上,历时11年从众多的芍药定向杂交后代中筛选出性状优良的‘粉罗裙’‘千重粉黛’‘笑春风’和‘碧叶粉荷’。‘粉罗裙’‘千重粉黛’属于中国芍药品种群,重瓣花,茎秆粗壮直立,株高80~90 cm,适宜作为切花栽培;‘笑春风’和‘碧叶粉荷’属于杂种芍药品种群,三倍体,花期早,单瓣花,叶形奇特,株型饱满,适宜作庭院观赏栽培。

关键词：芍药杂交多倍体品种

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芍药ACS基因的克隆及其蛋白质原核表达

华北农学报 2022年第5期37卷 36-44页

作者：肖士奎李芳张文婷吕淑芳史国安吴疆范丙友河南科技大学农学院河南洛阳471023 中机十院国际工程有限公司河南洛阳471003 榆林学院信息工程学院陕西榆林719000

为了研究芍药ACS基因的功能,应用RACE技术从芍药切花品种桃花飞雪中克隆了PlACS基因cDNA序列,利用生物信息学方法对其编码的蛋白质进行了综合分析;以pET32a为骨架,构建了PlACS基因的原核表达载体,建立了PlACS蛋白高效的原核表达体系。... 详细信息

为了研究芍药ACS基因的功能,应用RACE技术从芍药切花品种桃花飞雪中克隆了PlACS基因cDNA序列,利用生物信息学方法对其编码的蛋白质进行了综合分析;以pET32a为骨架,构建了PlACS基因的原核表达载体,建立了PlACS蛋白高效的原核表达体系。结果表明,PlACS cDNA全长1752 bp(GenBank登录号JX512359),共编码492个氨基酸,具有7个保守结构域及活性位点K;分子进化分析表明,PlACS和牡丹ACS亲缘关系最近;二级结构预测发现,PlACS蛋白由α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲组成,四者比例分别为40.04%,16.26%,6.91%和36.79%;同源建模显示,PlACS蛋白以同源二聚体形式存在。PlACS蛋白最佳诱导表达条件为基因工程菌菌体密度A达0.2时,在菌液中加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,在37℃诱导2 h。PlACS重组蛋白高效原核表达体系为后续通过变复性获得有生物学活性的PlACS蛋白及其酶学功能鉴定奠定基础。

关键词：芍药 PlACS 基因克隆序列分析原核表达

芍药属植物远缘杂交亲和性及其雌蕊的生理响应机制

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江苏农业学报 2023年第3期39卷 822-830页

作者：贺丹曹健康何松林符真珠华超张明星王政河南农业大学风景园林与艺术学院河南郑州450002 河南科技学院园艺园林学院河南新乡453003 河南省农业科学院河南郑州450002

为探究不同芍药属植物远缘杂交的亲和性,筛选出亲和性较好的杂交组合,以芍药老来红(LLH)、蝶恋花(DLH)、鲁红(LH)、莲台(LT)、星光灿烂(XGCL)、遍地红(BDH)、Kansas、Venus和Peter Brand 9个品种为母本,以牡丹凤丹白(FDB)为父本进行远... 详细信息

为探究不同芍药属植物远缘杂交的亲和性,筛选出亲和性较好的杂交组合,以芍药老来红(LLH)、蝶恋花(DLH)、鲁红(LH)、莲台(LT)、星光灿烂(XGCL)、遍地红(BDH)、Kansas、Venus和Peter Brand 9个品种为母本,以牡丹凤丹白(FDB)为父本进行远缘杂交。测定授粉后不同时间(1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h)雌蕊中的保护酶[过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)]活性、胼胝质(β-1,3-葡聚糖)含量及β-1,3-葡聚糖酶活性,并对授粉后花粉粒萌发及花粉管生长情况进行荧光显微观察。结果表明,授粉后2 h观察到花粉粒开始萌发,BDH×FDB、Kansas×FDB和Peter Brand×FDB 3个组合的花粉粒萌发相对较晚。随后在花粉管的生长过程中,胼胝质不断沉积,花粉管开始出现扭曲、缠绕等现象。授粉后24 h,LLH×FDB、LH×FDB和Kansas×FDB 3个组合可以观察到花粉管进入柱头,但未进入子房。POD、SOD活性在9个组合间及同一组合授粉后不同时间表现出显著差异,当POD、SOD活性较高时,花粉粒萌发较快且花粉管正常生长。胼胝质含量及β-1,3-葡聚糖酶活性在不同组合间差异显著,高含量的胼胝质及低活性的β-1,3-葡聚糖酶会导致花粉管出现扭曲缠绕、肿胀等异常现象。国内的芍药品种中,LLH×FDB、LH×FDB组合的亲和性较好,BDH×FDB组合的亲和性最差;国外的芍药品种中,Kansas×FDB组合的亲和性相对较好,Peter Brand×FDB组合的亲和性最差。

关键词：芍药牡丹远缘杂交保护酶活性胼胝质 β-1,3-葡聚糖酶活性

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芍药新品种‘江南小新’

园艺学报 2022年第S2期49卷 181-182页

作者：史小华马广莹张佳平朱开元王小斌浙江省园林植物与花卉研究所杭州311251 浙江大学农业与生物技术学院杭州310058

‘江南小新’是从芍药人工杂交后代中选育出来的新品种。株高约60cm,花茎绿色,枝条硬挺。绣球型,花瓣白色,花径约12 cm,结实性差。4月中下旬盛花,单花花期8~12 d。抗逆性强,尤耐湿热,适宜在芍药主产区及长江中下游地区推广应用。

关键词：芍药耐湿热品种