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色氨酸羟化酶2基因敲除对雄性大鼠行为的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2022年第4期50卷 17-23页

作者：刘来鑫樊圃中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点试验室北京100005

【目的】探究色氨酸羟化酶2(Tph2)基因敲除对雄性大鼠焦虑、抑郁样行为和社交行为的影响,为进一步研究五羟色胺(5-HT)系统对大鼠生长发育及行为的调控机制提供参考。【方法】以SD背景的雄性大鼠为研究对象,采用高效液相色谱串联高分辨... 详细信息

【目的】探究色氨酸羟化酶2(Tph2)基因敲除对雄性大鼠焦虑、抑郁样行为和社交行为的影响,为进一步研究五羟色胺(5-HT)系统对大鼠生长发育及行为的调控机制提供参考。【方法】以SD背景的雄性大鼠为研究对象,采用高效液相色谱串联高分辨质谱检测成年野生型大鼠(WT)和Tph2基因敲除(第6外显子(98 bp)及其前128 bp序列被敲除)大鼠(Tph2^(KO))脑内中缝核5-HT含量;比较10周龄WT和Tph2^(KO)大鼠的体质量;统计旷场试验范式中WT和Tph2^(KO)大鼠进入中心区域的时间、次数,以及高架十字迷宫范式中WT和Tph2^(KO)大鼠进入开放臂和闭合臂的时间、次数,从而判断大鼠的焦虑水平;统计强迫游泳范式中WT和Tph2^(KO)大鼠静止漂浮的时间,评估大鼠的抑郁样行为;统计三室试验范式中WT和Tph2^(KO)大鼠探索陌生同龄同性别大鼠的时间及探索空室的时间,评估大鼠的基础社交水平;统计社交新奇测试范式中WT和Tph2^(KO)大鼠探索陌生大鼠的时间,评估大鼠的社交新奇认知能力。【结果】Tph2^(KO)大鼠大脑中缝核5-HT含量为19.08 nmoL/g,极显著低于WT大鼠大脑中缝核5-HT含量(2075.00 nmol/g)(P2^(KO)大鼠体质量为235.90 g/只,极显著低于WT大鼠的体质量(317.90 g/只)(P2^(KO)大鼠探索中心区域的时间为30.00 s,次数为6.50次,与WT大鼠(38.76 s,9.90次)无显著差异(P>0.05)。高架十字迷宫试验中Tph2^(KO)大鼠探索开放臂的时间为69.89 s,次数为5.40次,与WT大鼠(66.25 s,4.30次)无显著差异(P>0.05)。强迫游泳试验中Tph2^(KO)大鼠静止漂浮的时间(43.92 s)与WT大鼠(27.79 s)无显著差异(P>0.05)。社会互动试验中Tph2^(KO)大鼠社会互动时间为224.00 s,极显著高于探索空室的时间(12.57 s)(P258.00 s,极显著高于探索空室的时间(26.34 s)(P2^(KO)大鼠探索陌生鼠2的时间为73.92 s,与探索陌生鼠1的时间(59.71 s)无显著差异(P>0.05);WT大鼠探索陌生鼠2的时间为124.00 s,极显著高于探索陌生鼠1的时间(69.88 s)(P2基因敲除导致雄性大鼠大脑中缝核5-HT含量显著降低,体质量和社交新奇认知能力均显著降低。

关键词：色氨酸羟化酶2 基因敲除大鼠焦虑行为抑郁行为社交行为

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色氨酸羟化酶2基因与应激相关性的研究进展

生理科学进展 2013年第6期44卷 450-452页

作者：尹肖雯王朝昕赵旭东同济大学医学院上海200092

应激是机体对压力刺激的反应,5-HT在应激中起着重要作用。TPH2是中枢5-HT合成的关键酶,被认为是5-HT参与应激的分子机制之一。本文重点介绍近年来TPH2基因的研究进展,从TPH2基因表达的节律、基因多态性等方面探讨了TPH2与应激的关系,这... 详细信息

应激是机体对压力刺激的反应,5-HT在应激中起着重要作用。TPH2是中枢5-HT合成的关键酶,被认为是5-HT参与应激的分子机制之一。本文重点介绍近年来TPH2基因的研究进展,从TPH2基因表达的节律、基因多态性等方面探讨了TPH2与应激的关系,这些研究成果为进一步了解应激的机制提供了理论和实验基础。

关键词：应激色氨酸羟化酶2 基因多态性

色氨酸羟化酶2在去卵巢抑郁症模型大鼠中缝核中表达减少

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基础医学与临床 2010年第11期30卷 1167-1171页

作者：肖爱娇周志愉伍庆华闵建新江西中医学院基础医学院江西南昌330004

目的观察去卵巢抑郁症大鼠模型海马5-羟色胺(5-HT)含量及其合成限速酶-色氨酸羟化酶2(TPH2)表达的变化。方法雌性SD大鼠,在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d慢性不可预见性温和刺激(CUMS)制备去卵巢抑郁症大鼠模型,以行为学测试进行... 详细信息

目的观察去卵巢抑郁症大鼠模型海马5-羟色胺(5-HT)含量及其合成限速酶-色氨酸羟化酶2(TPH2)表达的变化。方法雌性SD大鼠,在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d慢性不可预见性温和刺激(CUMS)制备去卵巢抑郁症大鼠模型,以行为学测试进行评价。用高效液相色谱-电化学法((HPLC-ECD)测定海马5-HT含量;用RT-PCR技术检测中缝核TPH2 mRNA表达量;用荧光免疫组化检测中缝核TPH2蛋白表达。结果 21 d应激后,模型组大鼠直立活动得分及水平活动得分均减少,糖水消耗百分比下降;海马5-HT含量下降;中缝核TPH2 mRNA表达量及TPH2阳性神经元数量减少。结论在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d CUMS可造成去卵巢抑郁症大鼠模型;模型大鼠海马5-HT含量下降,可能是中缝核TPH2的表达减少所致。

关键词：慢性不可预见性的温和刺激 5-羟色胺色氨酸羟化酶2

色氨酸羟化酶2理性设计提高大肠埃希菌5-羟基色氨酸产量

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微生物学杂志 2024年第4期44卷 23-30页

作者：李春辉杨志彬崔金旺郝晋博田俊波胡江林吕志堂河北大学生命科学学院河北省微生物多样性研究与应用实验室河北保定071002 河北维达康生物科技有限公司河北保定072152 保定保利瑞合生物科技有限公司河北保定072152

色氨酸羟化酶(TPH)可催化色氨酸羟化为5-羟基色氨酸(5-HTP),是5-HTP生物合成过程中的关键酶。为了提高大肠埃希菌细胞工厂合成5-HTP的效率,通过酶的理性设计和定点突变技术构建了人色氨酸羟化酶2(TPH2)的系列突变体,并在高产L-色氨酸且... 详细信息

色氨酸羟化酶(TPH)可催化色氨酸羟化为5-羟基色氨酸(5-HTP),是5-HTP生物合成过程中的关键酶。为了提高大肠埃希菌细胞工厂合成5-HTP的效率,通过酶的理性设计和定点突变技术构建了人色氨酸羟化酶2(TPH2)的系列突变体,并在高产L-色氨酸且含有TPH辅酶四氢生物蝶呤(BH_(4))合成与再生模块的大肠埃希菌中表达。发现适当降低酶和色氨酸、酶和BH_(4)间结合的氢键数目有助于提高5-HTP产量;酶和底物色氨酸结合情况不变,辅酶BH_(4)与酶间氢键数目越多,5-HTP产量越低。5-HTP产量最高的细胞工厂是由突变酶V195A/V197I构建的,5-HTP产量较野生酶构建的细胞工厂产量提高54%,1 L补料摇床发酵48 h,5-HTP产量达16.17 g/L。理性设计是提高TPH2酶活,突破5-HTP合成限速步骤的有效途径,TPH2和底物色氨酸、辅酶BH_(4)间氢键连接太多或太少都不利于其催化活性的发挥。

关键词：色氨酸羟化酶2 理性设计定点突变 5-羟基色氨酸细胞工厂

色氨酸羟化酶2基因rs4570625和rs4565946与抽动秽语综合征的相关性研究

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中华神经医学杂志 2014年第5期13卷 494-498页

作者：郑萍王建华李尔珍陈倩朱彦丽吕凌云张霆首都儿科研究所附属儿童医院神经内科北京100020 首都儿科研究所附属儿童医院生物技术室北京100020 首都儿科研究所附属儿童医院分子免疫实验室北京100020

目的探讨色氨酸羟化酶2（TPH2）基因单核苷酸多态性（SNPs）与北京地区汉族抽动秽语综合征（TS）患儿发病的关系. 方法选择首都儿科研究所神经科门诊自2009年1月至2011年1月诊治的TS患儿149例作为病例组,其中112例男性患儿按耶鲁综合... 详细信息

目的探讨色氨酸羟化酶2（TPH2）基因单核苷酸多态性（SNPs）与北京地区汉族抽动秽语综合征（TS）患儿发病的关系. 方法选择首都儿科研究所神经科门诊自2009年1月至2011年1月诊治的TS患儿149例作为病例组,其中112例男性患儿按耶鲁综合抽动严重程度量表（YGTSS）评分分为轻症组（25例）、中重度组（87例）.以同期在北京市体检中心体检的125例正常儿童作为对照组.应用MassARRAY SNPs质谱基因分型法检测2组外周血基因组DNA样本TPH2基因2个SNPs（rs4570625、rs4565946）,比较各组基因型的分布及等位基因的频率;应用生物信息学方法对TPH2基因2个SNPs进行分析和功能预测. 结果病例组及对照组rs4565946位点基因型频率分布比较差异有统计学意义（P＜0.05）,TT基因型相对CC＋CT基因型频率分布比较差异有统计学意义（P＜0.05）,OR值为3.077（95％CI：1.273～7.437）.病例组男性与对照组男性比较rs4570625等位基因频率比较差异有统计学意义（P＜0.05）; TT基因型相对CC＋CT基因型频率分布比较差异有统计学意义（P＜0.05）,OR值为3.228（95％CI：1.153～9.040）.与对照组男性比较,TS男性患儿中重度组rs4570625位点等位基因频率比较差异有统计学意义（P＜0.05）.生物信息学分析发现TPH2基因rs4570625野生型T等位基因突变为G后影响了转录因子与该基因启动子的结合. 结论 TPH2基因rs4565946、rs4570625可能与北京地区汉族TS患儿的易感性有关;rs4565946 TT基因型会增加TS的发病风险;rs4570625 G等位基因与男性TS抽动症状严重程度有关.

关键词：抽动秽语综合征色氨酸羟化酶2 单核苷酸多态性

色氨酸羟化酶2基因多态性与脑卒中后焦虑的关系

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中华行为医学与脑科学杂志 2013年第12期22卷 1092-1094页

作者：王春霞肖建廷刘贤迟松青岛市精神卫生中心青岛266034 青岛大学附属医院神经内科

目的探讨色氨酸羟化酶2（THP2）~4570625和~4565946位点单核苷酸多态性在卒中后焦虑（poststrokeanxietydisorde~，PSA）发病机制中的作用。方法通过汉密尔顿焦虑量表（HAMA）将急性缺血性脑卒中患者为PSA组（112人）和对照组（246人）... 详细信息

目的探讨色氨酸羟化酶2（THP2）~4570625和~4565946位点单核苷酸多态性在卒中后焦虑（poststrokeanxietydisorde~，PSA）发病机制中的作用。方法通过汉密尔顿焦虑量表（HAMA）将急性缺血性脑卒中患者为PSA组（112人）和对照组（246人），采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术分析两组基因型及等位基因的差异。结果rs4570625G等位基因与PSA的发病增加有关（0R=1．37，P=0．049）；女性患者的GG基因型和等位基因均显著高于对照组（p=0．025和P=0．035，OR=1．721，P=0．009）。，两组间rs4565946等位基因和基因型的差异无统计学意义。G．C单倍体的患者PSA的发病危险性增加（OR=1．89，P〈0．01）。结论TPH2基因多态性可能与PSA的发病相关。

关键词：卒中焦虑色氨酸羟化酶2 单核苷酸多态性

色氨酸羟化酶2基因多态性与反社会人格障碍及其冲动行为的关联研究

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中华行为医学与脑科学杂志 2010年第9期19卷 791-794页

作者：吴岩峰郑大同谭钊安柯晓燕张建平茆正洪曾彦英南京医科大学第二附属医院南京210011 南京医科大学附属脑科医院南京210011

目的探讨色氨酸羟化酶2（Tryptophan Hydroxylase-2,TPH2）基因多态性与反社会人格障碍（Antisocial Personality Disorder,ASPD）及其冲动行为的关系.方法选取TPH2基因启动子上游多态-703G/T（rs4570625）,采用PCR-RFLP基因分型技术测定117例反社会人格障碍患者和142名健康人的TPH2基因启动子上游多态-703G/T分布,运用Barratt冲动量表（BIS-11）评估其冲动行为.结果 ASPD组TPH2-703G/T基因型和等位基因频率分布和对照组间相比差异均有显著性（分别为x2=7.73,P＜0.05;x2=5.12,P＜0.05）.基因型GG和等位基因G与ASPD间存在显著正关联[分别为比数比（OR）=1.458,95%可信区间（95%CI）=1.080～1.968;OR=1.479,95% CI=1.045～2.094].ASPD患者GG、GT、TT三组基因型间BIS总分、注意因子、运动因子差异有显著性（P＜0.05）,而无计划因子差异无显著性.两两分析显示GG基因型组BIS-11总分及各因子分[分别为（71.28±7.50）分,（19.60±3.41）分,（25.73±4.92）分,（25.95±4.77）分]均高于GT基因型组[分别为（66.23±8.06）分,（17.79±3.02）分,（23.06±3.84）分,（25.38±4.97）分]和TT基因型组[分别为（66.55±8.49）分,（18.50±3.35）分,（23.45±4.08）分,（24.97±4.90）分],其中BIS-11总分、注意因子、运动因子差异有显著性（P＜0.05）.G等位基因组BIS-11总分及各因子分[分别为（69.38±8.04）分,（18.92±3.36）分,（24.73±4.69）分,（25.73±4.82）分]均高于T等位基因组[分别为（66.41±8.22）分,（17.98±3.26）分,（23.27±3.94）分,（25.15±4.89）分],其中BIS-11总分、注意因子、运动因子差异有显著性（P＜0.05）.结论在中国汉族人群中TPH2-703G/T多态性可能与ASPD存在遗传关联,GG基因型和等位基因G可能与ASPD正关联,并且和冲动行为相关.

关键词：反社会人格障碍色氨酸羟化酶2 基因多态性冲动行为

色氨酸羟化酶2单核苷酸位点多态性和负性生活事件交互作用与抑郁症的关联研究

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中华行为医学与脑科学杂志 2018年第6期27卷 511-515页

作者：张春阳赵雪妍王琳杨秀贤邱晓惠张健杨艳杰哈尔滨医科大学公共卫生学院医学心理学教研室哈尔滨150081

目的探讨色氨酸羟化酶2（TPH2）单核苷酸多态性（rs4570625、rs11178997、rs120074175）与负性生活事件交互作用与抑郁症患病的关联。方法提取中国北方地区300例抑郁症患者（病例组）和300名健康对照者（对照组）基因组DNA，采用PCR技... 详细信息

目的探讨色氨酸羟化酶2（TPH2）单核苷酸多态性（rs4570625、rs11178997、rs120074175）与负性生活事件交互作用与抑郁症患病的关联。方法提取中国北方地区300例抑郁症患者（病例组）和300名健康对照者（对照组）基因组DNA，采用PCR技术扩增DNA片段，检测病例组及对照组的基因型。应用生活事件量表对病例组和对照组进行问卷调查。采用χ2检验分析抑郁组和对照组的等位基因和基因型的频率分布差异，广义多因素降维法（GMDR）分析基因和环境的交互作用及二元Logistic回归分析SNP位点和负性生活事件对患病风险的预测。结果调整性别和年龄后，GMDR分析发现四阶模型rs4570625、rs11178997、rs120074175与负性生活事件为最优模型，样本测试精确度为0．7838，交叉验证一致性为10／10，且对抑郁症的患病风险有统计学意义（P=0．001）；二元Logistic回归分析最优模型，发现带有rs11178997A＋等位基因（AA，AT）和rs120074175A＋等位基因（AA，AG）的个体，有负性生活事件时OR值分别为24．307（95％CI=13．007～45．427）和38．250（95％CI=21．148—69．181），显示出了较高的抑郁症患病风险。结论TPH2基因（rs11178997、rs120074175）、负性生活事件的交互作用与抑郁症患病存在一定联系。

关键词：抑郁症色氨酸羟化酶2 基因多态性负性生活事件广义多因子降维法

色氨酸羟化酶2基因rs1386494多态性与汉族人群抑郁症的关系

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广东医学 2013年第19期34卷 2987-2989页

作者：余晓仪郑洪波黄雄张春平王志杰江妙玲古智文张敏玲广州医科大学附属脑科医院门诊部广州510370 广州医科大学广州医科大学附属脑科医院MECT室广州510370 广州医科大学附属脑科医院研究所广州510370

目的探讨色氨酸羟化酶2(TPH2)基因rs1386494单核苷酸多态性与汉族人群抑郁症的关系。方法采用1∶1病例对照的研究方法,病例组选取100例汉族抑郁症患者,对照组选取100例汉族健康者,运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技... 详细信息

目的探讨色氨酸羟化酶2(TPH2)基因rs1386494单核苷酸多态性与汉族人群抑郁症的关系。方法采用1∶1病例对照的研究方法,病例组选取100例汉族抑郁症患者,对照组选取100例汉族健康者,运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测TPH2基因rs1386494单核苷酸多态性,结合汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分分析该位点基因多态性与汉族人群抑郁症的关系。结果 A等位基因在病例组中的频率明显高于对照组,差异有统计学意义(2=4.499,P=0.034);女性A等位基因在病例组中的频率明显高于对照组,差异有统计学意义(2=4.118,P=0.042);TPH2基因rs1386494多态性与抑郁症的症状及严重程度无明显相关性。结论 TPH2基因rs1386494多态性可能与汉族人群抑郁症的发病有一定程度的关联,A等位基因可能为患抑郁症尤其是女性人群患抑郁症的危险因素,G/G基因型可能为抑郁症的保护因素。

关键词：抑郁症色氨酸羟化酶2 基因多态性