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分子印迹技术在致病菌检测中的应用进展

中国食品卫生杂志 2022年第4期34卷 842-847页

作者：蒋卉刘新梅冯敬敬杨军南京市食品药品监督检验院江苏南京211198

分子印迹技术是一种模拟酶-底物或抗体-抗原之间的相互作用,以目标物为模板,合成具有专一识别性能的人工受体的技术。前期研究对象多为农药、兽药等有机小分子及蛋白质类生物大分子。近年来,研究已拓展到超大“分子”——细胞,特别是细... 详细信息

分子印迹技术是一种模拟酶-底物或抗体-抗原之间的相互作用,以目标物为模板,合成具有专一识别性能的人工受体的技术。前期研究对象多为农药、兽药等有机小分子及蛋白质类生物大分子。近年来,研究已拓展到超大“分子”——细胞,特别是细菌印迹在致病菌快速检测领域应用前景广阔。本文介绍了分子印迹技术的原理、细菌印迹模板的选择及印迹聚合物的制备方法,并总结了分子印迹技术在致病菌检测中的应用,并对其应用前景做出了展望。

关键词：分子印迹技术细菌印迹致病菌检测

基于电化学阻抗谱的致病菌检测传感器的研究进展

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电化学 2023年第6期29卷 30-47页

作者：陈涛许元红李景虹青岛大学生命科学学院、生物医学工程研究院山东青岛266071 清华大学化学系生命有机磷化学及化学生物学教育部重点实验室北京100084

几千年来,致病菌对人类健康构成了巨大威胁。实现致病菌的实时监测可有效阻止致病菌的传播,从而降低对人类健康的威胁。迄今为止,已有电化学、光学、压电和量热等多种技术用于细菌的检测。其中,基于电化学阻抗技术的传感器由于其成本低... 详细信息

几千年来,致病菌对人类健康构成了巨大威胁。实现致病菌的实时监测可有效阻止致病菌的传播,从而降低对人类健康的威胁。迄今为止,已有电化学、光学、压电和量热等多种技术用于细菌的检测。其中,基于电化学阻抗技术的传感器由于其成本低、读取时间短、重现性好、设备便携等优点,在实时细菌检测中展现出了巨大的应用潜力。本文主要综述了近三年来电化学阻抗技术在细菌传感中的典型应用。众所周知,电极材料在基于电化学阻抗的传感器的构建中发挥着极其重要的作用,因为细菌生物识别元件的固定化,以及所制备的传感器的灵敏度、经济性和便携性都主要取决于电极材料。因此,为了向新入行的研究人员提供基于不同电极材料制备电化学阻抗传感器清晰的制备过程,我们尝试根据不同的电极平台对基于电化学阻抗技术的传感器进行分类。此外,还讨论了目前的难点、未来的应用方向和前景。我们希望通过本文的综述,能够为刚进入该领域的研究人员开展基于电化学阻抗技术,制备快速、灵敏、准确地检测多种致病菌的传感器研究提供指导。

关键词：电化学阻抗谱致病菌检测生物识别元件电极材料

铜基靶向纳米粒子用于食源性致病菌的检测及灭活

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食品研究与开发 2023年第12期44卷 166-172页

作者：刘鑫李蔚然王丽佳方远王晓敏天津科技大学食品科学与工程学院食品营养与安全国家重点实验室天津300457 天津中医药大学中西医结合学院天津301617

该文合成具有近红外激光响应和高光热转换性能的4-巯基苯硼酸修饰的硫化铜纳米颗粒(CuS@MPBA NPs),用于食源性致病菌检测和灭活。以常见的食源性致病菌大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aure... 详细信息

该文合成具有近红外激光响应和高光热转换性能的4-巯基苯硼酸修饰的硫化铜纳米颗粒(CuS@MPBA NPs),用于食源性致病菌检测和灭活。以常见的食源性致病菌大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)为模型菌,CuS@MPBA NPs上的4-巯基苯硼酸与致病菌表面糖类物质的顺式二醇结合,吸附在致病菌表面,形成CuS@MPBA NPs和致病菌的复合物。通过离心可将复合物与剩余的CuS@MPBA NPs分离,沉淀中的复合物在激光照射下可使溶液温度升高,对细菌进行基于温度的灵敏检测,对E.coli和S.aureus的检测范围均为10 CFU/mL~107 CFU/mL。同时,在基于温度的检测过程中,细菌可以随着温度的升高被灭活,使检测和灭活同时完成,对E.coli和S.aureus的抗菌效率高达98.3%和98.7%。

关键词：食源性致病菌光热杀菌高效抗菌致病菌检测生物传感器

集成纳米增强基底的微流控SERS芯片及其致病菌检测

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光学精密工程 2022年第14期30卷 1643-1656页

作者：李世芳何红葛闯陈李徐溢重庆大学新型微纳器件与系统技术重点学科实验室&光电技术与系统教育部重点实验室重庆400044 重庆大学化学化工学院重庆400044 重庆大学光电工程学院重庆400044 重庆大学肿瘤医院癌症转移与个体化治疗转化研究重点实验室重庆400030

针对致病菌快速高效的辨识和检测一直是生命科学、医疗诊断、食品安全和环境监测等领域备受关注的热点。微流控芯片分析技术为细菌等微生物的研究和检测提供了新的、高效的途径和平台,将表面增强拉曼散射(Surface En⁃hanced Raman Scatt... 详细信息

针对致病菌快速高效的辨识和检测一直是生命科学、医疗诊断、食品安全和环境监测等领域备受关注的热点。微流控芯片分析技术为细菌等微生物的研究和检测提供了新的、高效的途径和平台,将表面增强拉曼散射(Surface En⁃hanced Raman Scattering,SERS)光谱检测技术与其结合,成为了具有突出优势的致病菌快速鉴别和检测途径。本文针对基于微流控芯片的SERS分析技术及其应用进行综述,首先对各种SERS增强基底材料进行了介绍和性能比较;然后,系统综述了在微流控芯片上集成SERS基底的方法和技术,分别探讨了在微流控通道中注入纳米金属溶胶的外部注入法,在微流控芯片检测区构建固体纳米结构的内嵌法和在微流控通道中原位制备纳米结构基底的原位制作法;最后,对集成SERS检测技术的微流控芯片分析方法在致病菌定性鉴别和定量检测方面的应用进展予以了综述和展望。

关键词：表面增强拉曼散射纳米增强基底微流控芯片致病菌检测

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基于生物发光及光学校准的致病菌检测系统

光电子．激光 2014年第9期25卷 1759-1764页

作者：胡春华杨中娟滨州学院光电工程系山东滨州256603 河南理工大学物理化学学院河南焦作454003

为提高食品中致病菌快速检测的准确性,设计了一种基于三磷酸腺苷（ATP,adenosine 5′-triphosphate）生物发光反应动力学数据拟合以及光学校准的食品致病菌检测系统。采用与ATP生物发光波长相同的LED模拟生物发光,对检测样品的光吸收及... 详细信息

为提高食品中致病菌快速检测的准确性,设计了一种基于三磷酸腺苷（ATP,adenosine 5′-triphosphate）生物发光反应动力学数据拟合以及光学校准的食品致病菌检测系统。采用与ATP生物发光波长相同的LED模拟生物发光,对检测样品的光吸收及散射进行校准,从而减小食品颜色及浊度的干扰。采用光电倍增管（PMT）连续记录ATP生物发光强度数据,基于生物发光反应动力学方程自动对发光强度数据拟合,减小系统噪声并提高仪表的测量范围。研究了基于LED的光学校准算法,基于ATP生物发光动力学研究了数据拟合算法,进而设计实现了致病菌检测系统。对金黄色葡萄球菌样品的检测结果表明,本文系统与传统培养计数方法相关性达到0.98,检测致病菌范围为102~108 CFU/mL,对单一样品测量的精密度为5.05%。本文系统设计为生物发光在食品安全检测领域的实际应用提供了新的思路,具有重要实际意义。

关键词：三磷酸腺苷(ATP)生物发光致病菌检测 LED光学校准反应动力学数据拟合

基于PCR技术对奶牛乳房炎主要致病菌的检测

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中国畜禽种业 2023年第10期19卷 170-174页

作者：茆骏安徽省马鞍山市博望区农业农村水利局安徽马鞍山243000

该文针对引起奶牛乳房炎的4种主要致病菌(大肠杆菌、金黄葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌)建立了PCR检测技术,采集奶牛乳房炎病原菌样本并进行菌落的筛选和鉴定,从鉴定出的葡萄球菌、链球菌、大肠菌和假单胞菌中提取DNA,通过比对... 详细信息

该文针对引起奶牛乳房炎的4种主要致病菌(大肠杆菌、金黄葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌)建立了PCR检测技术,采集奶牛乳房炎病原菌样本并进行菌落的筛选和鉴定,从鉴定出的葡萄球菌、链球菌、大肠菌和假单胞菌中提取DNA,通过比对基因序列,筛选出具有高度保守性的基因片段作为PCR的引物,设计PCR反应体系,对提取的DNA进行扩增。之后进行琼脂糖凝胶电泳,检测PCR产物的大小和数量。对PCR产物进行序列分析和比对,进一步确认其种属。结果显示该PCR检测方法可以特异性检测出这4种病菌,并对送检的30份临床乳样检测中阳性检出率高于细菌分离检测,证明检测方法在实际应用中的可靠性和有效性。

关键词： PCR技术奶牛乳房炎致病菌检测

一次性使用卫生用品中致病菌的检测和质量控制

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中国医疗器械信息 2023年第23期29卷 23-25,166页

作者：钟静杨立峰杨文润邓颖敏广东省医疗器械质量监督检验所广东广州510663

目的:通过参加国家市场监督管理局组织的一次性口罩能力验证,评估实验室综合检测能力,进而提升一次性口罩的产品质量安全。方法:依据《一次性使用卫生用品中致病菌的检测参试指导书》及GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录... 详细信息

目的:通过参加国家市场监督管理局组织的一次性口罩能力验证,评估实验室综合检测能力,进而提升一次性口罩的产品质量安全。方法:依据《一次性使用卫生用品中致病菌的检测参试指导书》及GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录B的相关条款进行检测,在菌株分离上采用辅助检测方法:增加金黄色葡萄球菌、假单胞菌属显色培养基的划线,目的增加对目标菌的分离和准确鉴定。采用标准要求用传统生化鉴定方法对血平板、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基分离出来的可疑菌落进行生化鉴定,同时也对辅助检测方法显色平板分离出来的可疑菌落进行传统鉴定,对难判定的假单胞菌属显色培养基生长的可疑菌落再增加全自动生化鉴定仪进行生化鉴定。结果:传统方法鉴定结果与全自动生化鉴定仪鉴定的结果一致,国家市场监督管理局于2020年及2022年共组织了2次一次性口罩能力验证实验,本实验室能力验证结果评价均为满意,实验室的检测能力获得认可。结论:本实验室一次性口罩能力验证的检测方法及质量控制策略是可行的,值得推荐。

关键词：一次性使用卫生用品致病菌检测质量控制

免疫分离技术在生鲜乳致病菌检测中的研究进展

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中国农业科学 2015年第S1期 49-57页

作者：兰欣怡刘慧敏郑楠李发弟王加启湖南农业大学动物科技学院农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心(北京) 甘肃农业大学动物科技学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部奶产品质量安全风险评估实验室(北京)

生鲜乳作为原料乳,其微生物含量是影响生鲜乳新鲜度和产品货架期的重要因素,对生产优质乳及乳制品具有重要意义。生鲜乳中可能存在的金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特菌、沙门氏菌及大肠杆菌等致病菌严重威胁公共健康。建立快速灵敏高特... 详细信息

生鲜乳作为原料乳,其微生物含量是影响生鲜乳新鲜度和产品货架期的重要因素,对生产优质乳及乳制品具有重要意义。生鲜乳中可能存在的金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特菌、沙门氏菌及大肠杆菌等致病菌严重威胁公共健康。建立快速灵敏高特异性的检测方法对于保护公共健康非常重要。目前,国内外主要通过传统培养法、ELISA、LAMP及qPCR等方法开展生鲜乳中主要致病菌检测相关研究。上述检测方法对未经前增菌的样品检测灵敏度较低,极大限制了生鲜乳样品中主要致病微生物的快速检测。免疫磁分离技术可以在短时间内高效富集样品中的目的菌,与现代检测技术相结合,可以缩短检测周期,提高检测灵敏度。该方法已广泛应用于金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特菌、沙门氏菌、大肠杆菌、禽分枝杆菌、空肠弯曲杆菌、幽门螺旋杆菌、结肠炎耶尔森杆菌及沙眼衣原体等病原微生物的分离检测。免疫磁珠技术与分光光度计、显色培养基和荧光定量PCR、荧光免疫层析、胶体金试纸条、real time PCR相结合极大的缩短了大肠杆菌的检测和分析时间。该技术与显色培养基、比浊分析法、免疫荧光检测和环等温介导技术相结合可实现金黄色葡萄球菌的快速检测。其与qPCR、酶联免疫法、荧光显色成像及环介导等温扩增技术相结合极大提高了沙门氏菌的检测效率。其与流式细胞仪、选择性培养基及荧光定量PCR相结合可有效的缩短单核增生李斯特菌的分离检测时间。然而该技术在生产及应用上还存在检测成本高、适用性受限等一些问题。文章就免疫分离技术在生鲜乳中主要致病菌检测方面的研究进展进行了综述,并在此基础上分析了该技术在生鲜乳致病菌检测方面存在的问题及发展方向,为该技术的应用发展提供一定的参考。

关键词：免疫分离技术生鲜乳致病菌检测

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NASBA技术在致病菌检测中的应用

中华微生物学和免疫学杂志 2013年第4期33卷 310-313页

作者：贺尔娜蔡挺张顺宁波大学医学院 315211 宁波市第二医院急诊科 315010 宁波大学医学院干细胞实验室 315211

细菌感染性疾病的发病率呈上升趋势，并且严重感染患者治疗延迟与死亡率升高密切相关。快速、准确检测致病菌是治疗和预防感染性疾病的关键。传统的细菌培养联合药物敏感试验检测周期长，灵敏度有限。PCR技术弥补了以上不足，但有DNA污... 详细信息

细菌感染性疾病的发病率呈上升趋势，并且严重感染患者治疗延迟与死亡率升高密切相关。快速、准确检测致病菌是治疗和预防感染性疾病的关键。传统的细菌培养联合药物敏感试验检测周期长，灵敏度有限。PCR技术弥补了以上不足，但有DNA污染引起假阳性的可能,

关键词：致病菌检测 NASBA 细菌感染性疾病应用药物敏感试验 PCR技术感染患者细菌培养