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齿龈内阿米巴的连续培养与致病性研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第2期18卷 84-87页

作者：陈金富刘光英温旺荣陈超福建医科大学寄生虫学教研室福州350004 福建医科大学临床微生物学教研室福州350004 福建医科大学附属口腔医院福州350004

[目的 ]建立齿龈内阿米巴 (Entamoeba gingivalis,E.g.)的连续培养方法和研究虫体的致病性。 [方法 ]比较不同培养条件下虫体生长繁殖情况 ,调查人群感染 E.g.情况及观察感染 E.g.与唾液中酸性磷酸酶含量的关系 ,大鼠实验观察 E.g.感染... 详细信息

[目的 ]建立齿龈内阿米巴 (Entamoeba gingivalis,E.g.)的连续培养方法和研究虫体的致病性。 [方法 ]比较不同培养条件下虫体生长繁殖情况 ,调查人群感染 E.g.情况及观察感染 E.g.与唾液中酸性磷酸酶含量的关系 ,大鼠实验观察 E.g.感染与牙周脓肿的关系 ,E.g.体外实验观察甲硝唑的杀虫效果。 [结果 ]虫体最适培养条件为 :改良的 L ES培养基中加含 2 0 %小牛血清的 L ocke液、青霉素、链霉素和米粉 ,p H6 .7于 35℃培养 ,第4天虫体繁殖达高峰 ,可存活 12 0～ 16 8h;E.g.检测阳性的牙周病患者其酸性磷酸酶和脂质过氧化的终产物(MDA)含量高于阴性者 ,牙周脓肿患者 E.g.感染率高于健康人群。E.g.可致大鼠牙周脓肿 ,甲硝唑与绣球花叶(SBF)杀 E.g.有良效。 [结论 ]E.g.在改良的 L ES培养基中生长良好 ,当宿主免疫力低下时 E.g.

关键词：龄龈内阿米巴培养牙周脓肿致病性研究

养殖鲟鱼出血症病原鲁氏耶尔森菌的分离鉴定和致病性研究

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海洋与湖沼 2014年第3期45卷 123-129,561页

作者：李绍戊王荻冯娟卢彤岩中国水产科学研究院黑龙江水产研究所哈尔滨150070 中国水产科学研究院南海水产研究所广州510300 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室广州510300

鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)是鲑鳟鱼类和温水性鱼类肠炎红嘴病的主要病原,可引起病鱼体表出血、肠道肿胀发炎等临床症状。本研究从患出血症施氏鲟(Acipenser schrenckii)中分离到一株致病性菌株(YR-H01),生理生化鉴定和16S rRNA基... 详细信息

鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)是鲑鳟鱼类和温水性鱼类肠炎红嘴病的主要病原,可引起病鱼体表出血、肠道肿胀发炎等临床症状。本研究从患出血症施氏鲟(Acipenser schrenckii)中分离到一株致病性菌株(YR-H01),生理生化鉴定和16S rRNA基因序列分析表明YR-H01株为鲁氏耶尔森菌。人工感染该菌后发病鱼表现为肛门红肿、外突明显,部分鱼鳍基部和下颌处有出血现象,内脏器官不同程度出血,且从组织中再分离的细菌特性与原感染菌相同。腹腔注射后该菌株对施氏鲟的半致死浓度为7.2×106CFU,且攻毒剂量越大,临床病症出现越快。病理组织切片显示,该菌感染鲟鱼后肝细胞发生明显病变,淋巴细胞侵润,肝索结构消失,细胞肿胀,核空泡变性或核仁边缘化。

关键词：耶尔森菌属鲟鱼养殖施氏鲟淋巴细胞致病性研究生化鉴定鲑鳟鱼类出血症系统发育学分析菌株

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鸭新型疱疹病毒的致病性研究

中国预防兽医学报 2003年第2期25卷 136-139页

作者：黄瑜李文杨程龙飞彭春香庄向生福建省农科院畜牧兽医研究所福建福州350013

本研究分别探讨了F株鸭新型疱疹病毒对番鸭、半番鸭、鹅和SPF鸡的致病性。经实验室人工感染试验表明该株病毒可导致雏番鸭、雏半番鸭发病、死亡 ,对雏番鸭的致死率为 2 5 %～ 6 6 .7% ,对雏半番鸭的致死率为 2 0 % ,且死亡鸭表现出与自... 详细信息

本研究分别探讨了F株鸭新型疱疹病毒对番鸭、半番鸭、鹅和SPF鸡的致病性。经实验室人工感染试验表明该株病毒可导致雏番鸭、雏半番鸭发病、死亡 ,对雏番鸭的致死率为 2 5 %～ 6 6 .7% ,对雏半番鸭的致死率为 2 0 % ,且死亡鸭表现出与自然感染该病的病死雏番鸭、雏半番鸭相同的病变 ,自致死鸭脏器中重新分离到原攻击病毒 ;人工感染幸存鸭大多腹泻、生长发育明显受阻、体况消瘦。通过同居感染雏番鸭试验结果表明 ,该病毒不易经空气传播。对雏鹅、SPF雏鸡的人工感染试验结果可见 ,该病毒对雏鹅。

关键词：鸭新型疱疹病毒致病性研究

猫杯状病毒FCV2021QD3株的分离鉴定和致病性研究

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中国动物传染病学报 2024年

作者：蔡青秀王雷丛雁方于春梅蒋贻海戴建君青岛蔚蓝生物股份有限公司国家动物用保健品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

为了解青岛地区猫杯状病毒（FCV）流行、变异特点和致病性，本研究采集65份疑似FCV感染宠物猫眼鼻咽拭子进行分离鉴定和同源性分析。结果显示：样本FCV阳性率为16.9%，与疫苗株的核苷酸同源性较低，为69.5%～75.4%。分离得到一株FCV命名... 详细信息

为了解青岛地区猫杯状病毒（FCV）流行、变异特点和致病性，本研究采集65份疑似FCV感染宠物猫眼鼻咽拭子进行分离鉴定和同源性分析。结果显示：样本FCV阳性率为16.9%，与疫苗株的核苷酸同源性较低，为69.5%～75.4%。分离得到一株FCV命名为FCV2021QD3，经电镜观察病毒粒子呈球形、无囊膜，符合FCV形态特征；动物回归试验可模拟FCV自然发病历程，引起体温升高、食欲减退、精神不振、眼/鼻分泌物增加、口腔溃疡等症状，剖检肺部出血有实变，病理切片显示病变主要在肺、鼻、喉头、舌等部位。研究结果为FCV感染的防控提供科学依据，获得了可靠的检验用强毒株，为疫苗、治疗性抗体等产品的研制和评价奠定基础。

关键词：猫杯状病毒分离鉴定遗传进化致病性研究

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犬冠状病毒的进化和致病性研究进展

中国兽医杂志 2020年第2期56卷 59-63页

作者：刘玉秀黄柏成习向锋田克恭国家兽用药品工程技术研究中心河南洛阳471000

长期以来,人冠状病毒(Human Coronavirus,HCoV)因仅在健康人群中引起轻度症状而一直未被重视。直到2003年严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome,SARS)疫情的暴发[1],其病原SARS冠状病毒(SARS-CoV)高传播力和高致死率,... 详细信息

长期以来,人冠状病毒(Human Coronavirus,HCoV)因仅在健康人群中引起轻度症状而一直未被重视。直到2003年严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome,SARS)疫情的暴发[1],其病原SARS冠状病毒(SARS-CoV)高传播力和高致死率,才引起人类对动物冠状病毒作为直接和间接人兽共患病潜在病原的兴趣。

关键词：人兽共患病犬冠状病毒严重急性呼吸综合征致病性研究动物冠状病毒 SARS冠状病毒传播力轻度症状

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竹鼠志贺氏菌的分离及致病性研究

湖南师范大学自然科学学报 2019年第2期42卷 42-46页

作者：江华超项勋高辉郑小惠段纲常华云南农业大学动物医学院中国昆明650201

对云南某竹鼠养殖场发病死亡竹鼠进行肠道致病菌分离培养,经培养基分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定、16S r DNA扩增以及测序分析,结果表明该致病菌为志贺氏菌。将纯化的菌株进行小鼠致病性研究和药敏试验分析,结果显示该菌对小鼠具有很... 详细信息

对云南某竹鼠养殖场发病死亡竹鼠进行肠道致病菌分离培养,经培养基分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定、16S r DNA扩增以及测序分析,结果表明该致病菌为志贺氏菌。将纯化的菌株进行小鼠致病性研究和药敏试验分析,结果显示该菌对小鼠具有很强的致病作用,经病理切片观察发现该菌会引发多种器官及肠道充血或出血,该菌对喹诺酮类药物和头孢类药物高度敏感。

关键词：竹鼠志贺氏菌分离鉴定药敏试验致病性研究

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猫杯状病毒的进化与致病性研究进展

中国兽医杂志 2021年第2期57卷 62-65页

作者：王洁廖均乐钱鹏陈亚磊刘玉秀习向峰范伟张渊魁张许科田克恭河南农业大学动物医学院河南郑州450002 国家兽用药品工程技术研究中心河南洛阳471000 兆丰华生物科技(南京)有限公司江苏南京211102

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是猫上呼吸道疾病主要病原之一,对宠物猫的生命和野生猫科动物的生物多样性产生严重威胁。目前FCV仅有1个血清型,该病毒RNA依赖RNA聚合酶的低保真度和高错误率使FCV在复制中有较高的基因可塑性,在免... 详细信息

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是猫上呼吸道疾病主要病原之一,对宠物猫的生命和野生猫科动物的生物多样性产生严重威胁。目前FCV仅有1个血清型,该病毒RNA依赖RNA聚合酶的低保真度和高错误率使FCV在复制中有较高的基因可塑性,在免疫压力下能较快发生突变,由此造成的免疫逃避是引起猫杯状病毒疫苗免疫失败的主要原因之一。过去50多年,猫杯状病毒在免疫压力下随着时间推移突变出多种可引起猫不同临床特征的新毒株,从传统的引起口腔溃疡和上呼吸道症状的毒株,逐渐突变出现引起猫严重下呼吸道症状如肺炎的高致病性毒株、引起猫跛行的毒株和引起猫毒性系统性疾病的毒株等。FCV基因型众多,对临床诊断和预防带来全新挑战。本文对FCV病原学、病毒进化和致病机理等研究进行综述,对临床多变的FCV的诊断和预防进行思考,以期为FCV的防控提供理论参考。

关键词：猫杯状病毒上呼吸道疾病免疫逃避宠物猫致病性研究主要病原血清型猫科动物

一株鸭坦布苏病毒的全基因组测定及致病性研究

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一株鸭坦布苏病毒的全基因组测定及致病性研究

作者：崔熙尧山东农业大学

学位级别：硕士

鸭坦布苏病毒病自2010年初流行以来,已经成为危害我国养鸭业的主要疾病之一。产蛋鸭发病后表现为持续性产蛋率低下,加之继发感染,死淘率可达到15%-20%。本研究从山东某鸭养殖场无菌采集有疑似坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)感染症状的... 详细信息

鸭坦布苏病毒病自2010年初流行以来,已经成为危害我国养鸭业的主要疾病之一。产蛋鸭发病后表现为持续性产蛋率低下,加之继发感染,死淘率可达到15%-20%。本研究从山东某鸭养殖场无菌采集有疑似坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)感染症状的病鸭,开展了以下研究:根据保守序列设计的特异性引物,采用RT-PCR技术,通过病毒分离、鉴定的方法,获得鸭坦布苏病毒;通过设计相互覆盖TMUV cDNA全长的引物,分段扩增、测序、拼接获得了TMUV分离株全长基因组序列;通过对200日龄樱桃谷产蛋鸭人工致病的动态病理学观察,证明病毒的主要靶器官为卵巢,明确了病毒感染产蛋鸭的卵巢病变产生时间、病变程度、以及与病毒载量的关系;将采集的病料组织剪碎、研磨、离心、过滤除菌后,接种于9日龄健康鸭胚,收集尿囊液按照常规病毒分离方法进行盲传。该病毒在鸭胚传代过程中,盲传至3代以后,病毒液可导致鸭胚于3-4d内死亡,并使鸭胚胚体水肿、出血,胚肝水肿、坏死。经病毒理化性质鉴定,病毒的核酸类型为RNA,病毒为有囊膜病毒,不耐酸,对氯仿、乙醚等有机溶剂敏感,符合黄病毒成员的基本生物学特征。对收集的尿囊液经RT-PCR检测,其他几种常见鸭源病原如鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)、鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)、鸭乙型肝炎病毒(Duck Hepatitis B Virus,DHBV)、鸭源禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)检测均为阴性。根据TMUV-WR株NS3-NS4片段保守序列设计的特异性引物通过RT-PCR方法扩增出疑似目的条带(300 bp),经测序、比对后发现,与已公布的黄病毒科黄病毒属恩他耶病毒IPDIA分离株核苷酸(GenBankNO:NC18705)相似性为75.3%,与国内己公布的TMUV分离株相比,同DK/TH/CU-1株(GenBankNO:KR061333.1)同源性最高,为95%,同GX/1/12株(GenBankNO:KP719117.1)同源性最低,为91%。成功获得一株源于山东地区的鸭坦布苏病毒,命名为SDT1,为开展后续研究奠定科学基础。通过设计相互覆盖TMUV cDNA全长的引物,分段扩增、测序、拼接获得了分离株全长基因组序列。全基因组序列分析结果表明,SDT1分离株全长10992 nt,含有一个开放阅读框(ORF),编码一个长为2625 aa的多聚蛋白,预测的多聚蛋白切割位点与其他TMUV成员一致,共编码10个功能蛋白。黄病毒代表成员以及坦布苏病毒分离株的进化树分析表明,SDT1分离株属于黄病毒属恩他耶家族成员,SDT1分离株与其他TMUV成员在全基因組核苷酸和氨基酸相似性分别为95%-98%,98.4%-99.6%。与国内其他分离株相比,SDT1分离株同其他分离株的平均进化距离(0.0299)高于其他毒株之间的平均进化距离(0.0163),本研究丰富了鸭坦布苏病毒库。选取30只200日龄的产蛋櫻桃谷鸭进行了回归动物实验,实验之前,RT-PCR方法排除鸭坦布苏病毒自然感染,其中20只以0.5ml(TCID50)每只的剂量经胸部肌肉接种鸭坦布苏病毒作为攻毒组,10只通过注射等量PBS溶液分笼饲养作为阴性对照组。结果发现,攻毒感染后出现明显的食欲下降、不愿走动,精神萎靡、共济失调,死亡时呈角弓反张等神经症状。攻毒组均发病,发病率为100%;对照组无明显临床症状。RT-PCR结果发现,能够从感染鸭的血液、卵巢、肝脏、大脑组织中检测到DTMUV。通过连续病理组织学观察发现,卵巢病变最为显著,卵泡充血、出血,卵泡颗粒细胞坏死,卵巢内异嗜性白细胞浸润;肝脏出血、淤血,大量肝细胞变性、坏死,肝小叶结构紊乱,同时存在有较多新生肝细胞。

关键词：鸭坦布苏病毒病毒分离鉴定全基因组测定致病性研究

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坦布苏病毒对樱桃谷育成鸭的致病性研究

坦布苏病毒对樱桃谷育成鸭的致病性研究

作者：路云建山东农业大学

学位级别：硕士

自2010年4月以来,我国多个地区肉鸭、蛋鸭养殖区暴发了一种以蛋鸭产蛋量下降和雏鸭神经症状为特征的急性传染病,研究表明该病是由一种新型黄病毒——坦布苏病毒(Tembusu virus,简称TMUV)感染引起的。TMUV感染发病迅速、发病率和死亡率较... 详细信息

自2010年4月以来,我国多个地区肉鸭、蛋鸭养殖区暴发了一种以蛋鸭产蛋量下降和雏鸭神经症状为特征的急性传染病,研究表明该病是由一种新型黄病毒——坦布苏病毒(Tembusu virus,简称TMUV)感染引起的。TMUV感染发病迅速、发病率和死亡率较高,传播速度快、流行范围广,严重威胁我国水禽产业的健康发展,造成了巨大的经济损失。本研究利用实验室分离的鸭源坦布苏病毒,人工感染不同周龄育成鸭,研究不同周龄育成鸭对TMUV的易感性,旨在为坦布苏病毒的防控提供理论依据。本试验将350只樱桃谷后备鸭随机分为14组,每组25只后备鸭,1～7组为试验组,分别于7、10、12、14、16、18和21周龄人工静脉接种TMUV AHQY株病毒液(1.265x105 ELD50),8～14组为对照组,分别于上述对应时间接种相同剂量的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)。攻毒后连续观察20d,每天采集泄殖腔和咽喉棉拭子样品,观察并记录发病情况,分别于攻毒后第2 5、8、12、16和20d随机剖杀试验组和对照组鸭各4只,观察并记录感染鸭的临床症状和剖检变化。无菌采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏和脑等器官进行病理组织学、免疫组织化学研究,利用建立的荧光定量RT-PCR方法检测感染鸭的排毒规律和各组织中病毒含量,血清中和试验测定血清中特异性抗体水平,ELISA方法检测血液中细胞因子含量。结果显示,7周龄和21周龄鸭感染TMUV后,部分鸭出现明显症状,而其它周龄组鸭感染TMUV后症状不明显。剖检变化显示,7、18和21周龄组感染鸭呈现不同程度的脑膜充血、出血,心肌水肿、松软,肝脾肿大、出血,病理组织学结果显示,脑小胶质细胞增生,内脏器官细胞肿胀、变性和坏死并伴有炎性细胞浸润,而14～16周龄感染鸭剖检变化和组织微观病变较轻微。免疫组化结果显示,7周龄和21周龄组感染鸭组织中阳性细胞着色深且分布广,14和16周龄组感染鸭组织中阳性细胞少。荧光定量结果显示,7、10和21周龄组感染鸭肾脏、肝脏、脑和卵巢中检测到的病毒拷贝数较多,而14和16周龄组感染鸭上述器官检测到的病毒拷贝数较少;7和21周龄感染组泄殖腔和咽喉拭子样品可以检测到较多的病毒拷贝数,而14和16周龄组感染鸭棉拭子样品中检测到病毒含量较少。感染后第8d所有存活鸭均可产生阳性抗体,14周龄感染鸭的血清中和抗体水平要显著高于其它周龄感染鸭。人工感染第16和18周龄育成鸭的细胞因子含量与对照组相比差异不显著。结论:TMUV对育成鸭的致病性与感染周龄存在部分相关性,7～10周龄、18～21周龄育成鸭对TMUV较易感,而14～16周龄育成鸭对TMUV的抵抗力较强。

关键词：坦布苏病毒樱桃谷育成鸭周龄致病性研究