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基于转录组研究的热带臭虫Cimex hemipterus（F.）钠离子通道基因的克隆、表达及分析

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基于转录组研究的热带臭虫Cimex hemipterus（F.）钠离子通道基因...

作者：李婷江西农业大学

学位级别：硕士

热带臭虫Cimex hemipterus(F.)隶属半翅目Hemiptera臭虫科Cimicidae,是吸食人血的无翅昆虫,它与温带臭虫C.lectularius L.因形态相似,被统称为臭虫,是重要的卫生害虫。热带臭虫在我国珠三角地区危害严重,因为抗药性的产生导致用药难以... 详细信息

热带臭虫Cimex hemipterus(F.)隶属半翅目Hemiptera臭虫科Cimicidae,是吸食人血的无翅昆虫,它与温带臭虫C.lectularius L.因形态相似,被统称为臭虫,是重要的卫生害虫。热带臭虫在我国珠三角地区危害严重,因为抗药性的产生导致用药难以消除。针对臭虫抗药性问题,开展热带臭虫抗性机理研究刻不容缓,尤其是对常用的拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机理研究尤为重要。因此,本学位论文旨在全国范围内进行臭虫样本的采集,主要以热带臭虫为研究对象进行了实验,研究结果如下:1.对深圳采集的热带臭虫野外种群进行转录组测序,进一步从热带臭虫转录组中筛选与击倒抗性基因(kdr)位点相关的钠离子通道全长基因(VGSC)。转录组测序数据质控后获得5.49 Gb数据,组装后获得21 619个unigenes,总长度为29 322 540bp,平均长度为1 356 bp。将unigenes序列分别与非冗余蛋白数据库(NR)、基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)、直系同源蛋白分组比对数据库(egg NOG)和注释蛋白数据库(Swiss-Prot)进行比对和功能注释,得到45 362个有功能注释的unigenes,预测发现10 906条编码区序列,检测到7 754个简单重复序列(SSR)位点信息和33 144个SNP位点信息,并获得8个VGSCα基因,其中4个基因具有全长序列。2.利用分子克隆技术获得热带臭虫野外抗性种群的钠离子通道蛋白全长基因序列,测定该基因在热带臭虫不同发育时期的表达模式。结果获得长度为6 360 bp的热带臭虫钠离子通道基因(Chemi Nav)c DNA全长序列,其中开放阅读框(ORF)序列长度为5 931 bp共编码编码1 976个氨基酸,该蛋白分子量为223.2 k Da,等电点为5.42。Chemi Nav在3龄若虫中表达量最高,在雄成虫时期的表达量最低,在卵期无表达。鉴定了热带臭虫钠离子通道ORF序列的典型特征:有四个跨膜区域(I～IV),每个跨膜区域由6个结构域(S1～S6)组成。并在ⅡS4和ⅡS6处发现了kdr突变位点。系统进化分析结果表明热带臭虫钠离子通道基因和温带臭虫钠离子通道基因亲缘关系最近,并与其他臭虫科昆虫钠离子通道基因聚为一支,各类群间聚类清晰。3.最后采用点滴法生物测定、区分剂量快速抗性鉴定方法和PCR检测kdr突变频率这三种方法对kdr突变的产生与臭虫对高效氯氰菊酯敏感的关系进行探究。点滴法结果表明5种杀虫剂对温带臭虫的毒性依次为吡虫啉和呋虫胺>噻虫嗪>氯虫苯甲酰胺和高效氯氰菊酯,测试的野外温带臭虫种群仅对噻虫嗪无明显抗性。热带臭虫两个野外种群对高效氯氰菊酯的抗性均远高于温带臭虫。检测的10个野外臭虫种群中全部发生了kdr位点突变,鉴定出4个突变位点。温带臭虫的4个地理种群可分为三种突变类型(A:无突变位点;B:只有L925I;C:同时有L925I和V419L)。热带臭虫的7个种群只有一种D类型:均出现M918I和L1014F这两个突变位点。突变位点存在与臭虫对高效氯氰菊酯敏感密切关联,kdr基因突变检测结果显示我国臭虫种群(Cimex spp.)广泛存在对拟除虫菊酯的抗性。

关键词：臭虫转录组钠离子通道蛋白击倒抗性基因位点突变

成都龙泉驿区某工地一起臭虫侵害情况的调查与处置

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中华卫生杀虫药械 2022年第2期28卷 125-127页

作者：刘朝发卢清平张伟何建邯成都市龙泉驿区疾病预防控制中心四川成都610100 成都市疾病预防控制中心四川成都610041

目的通过对一起建筑工地臭虫侵害情况的调查处置,为类似的臭虫侵害事件的综合防治提供参考。方法采用目测法、询问访谈法开展调查;采用综合措施进行治理。结果防治前监测到臭虫191只,防治后第7天降至55只,下降率为71.20%;第14天降至17只... 详细信息

目的通过对一起建筑工地臭虫侵害情况的调查处置,为类似的臭虫侵害事件的综合防治提供参考。方法采用目测法、询问访谈法开展调查;采用综合措施进行治理。结果防治前监测到臭虫191只,防治后第7天降至55只,下降率为71.20%;第14天降至17只,下降率为91.10%;第21天降为0,下降率为100%。第28天与第35天跟踪回访未发现臭虫。结论综合防治法是一种行之有效的臭虫防治方法,辅之以健康教育手段,可以有效地控制臭虫危害。

关键词：建筑工地臭虫处置

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臭虫的再猖獗、生物学及防治研究进展

昆虫学报 2016年第9期59卷 1021-1032页

作者：王磊王常禄许益镌曾玲华南农业大学农学院广州510642 Department of Entomology Rutgers University

由于DDT等现代杀虫剂的问世,臭虫在20世纪40-50年代以后在全球大部分地区尤其是发达国家和地区销声匿迹,但近10多年来臭虫在部分国家和地区重新出现。本文对其再猖獗原因、生物学和行为、饲养、抗药性、监测与防治策略进行了综述,旨在... 详细信息

由于DDT等现代杀虫剂的问世,臭虫在20世纪40-50年代以后在全球大部分地区尤其是发达国家和地区销声匿迹,但近10多年来臭虫在部分国家和地区重新出现。本文对其再猖獗原因、生物学和行为、饲养、抗药性、监测与防治策略进行了综述,旨在引起国人的重视,对今后臭虫的监测和防治起到抛砖引玉的作用。本文分析了近15年有关温带臭虫Cimex lectularius L.和热带臭虫C.hemipterus(F.)的研究文献。臭虫再猖獗被认为是因为它对目前使用的杀虫剂例如拟除虫菊酯类等产生抗性以及频繁的地区及国际交往等因素造成的。简单、经济和大规模臭虫种群饲养方法——人工膜饲喂法的研发为我们开展臭虫生物学和生态学研究提供了便利。控制和根除臭虫目前仍较困难,采用害虫综合治理(integrated pest management,IPM)策略,包括臭虫知识宣传、主动监测、非化学防治方法(例如:经常洗涤床上用品、蒸汽熏蒸、热处理、使用床垫罩、在家具腿下放置臭虫拦截装置)、有选择使用杀虫剂以及定期监测及反复防治等措施,可达到很好的防控效果。在我国部分地区,臭虫发生也呈上升趋势,工人宿舍和火车车厢是常见的臭虫为害环境。有必要对我国臭虫发生现状及其抗药性进行调查与监测。还应借鉴国际先进技术,研制出我国适用的、有效的监测工具和防治方法,并根据我国具体国情制定出切实可行的防治标准。同时积极开展臭虫科普宣传,做到早发现、早防治,防止臭虫再猖獗和扩散。

关键词：臭虫再猖獗生物学行为抗药性扩散害虫综合治理

2016—2022年旅客列车臭虫侵害情况分析

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铁路节能环保与安全卫生 2023年第1期13卷 28-31页

作者：侯锋兰梗耕朱德论欧洪中国铁路南宁局集团有限公司疾病预防控制所广西柳州545000

为制定旅客列车臭虫防治策略和方法提供依据,收集、整理某铁路局2016—2022年普速旅客列车臭虫侵害资料,采用统计方法分析臭虫分布情况。结果显示,2016—2022年旅客列车臭虫侵害率分别为0.31%、1.18%、2.25%、2.56%、1.61%、1.57%和0.5... 详细信息

为制定旅客列车臭虫防治策略和方法提供依据,收集、整理某铁路局2016—2022年普速旅客列车臭虫侵害资料,采用统计方法分析臭虫分布情况。结果显示,2016—2022年旅客列车臭虫侵害率分别为0.31%、1.18%、2.25%、2.56%、1.61%、1.57%和0.56%,差异有统计学意义(χ^(2)=27.22,P臭虫侵害率较2021年、2020年、2019年和2018年的臭虫侵害率低;开往华北、华东、华南和西部4个不同方向的旅客列车臭虫侵害率分别为2.29%、0.97%、1.38%和0.77%,差异有统计学意义(χ^(2)=18.31,P臭虫侵害率分别为3.74%、1.47%和1.08%,差异有统计学意义(χ^(2)=30.22,P臭虫侵害情况,可知2022年臭虫侵害率较前4年的臭虫侵害率低,华北方向列车臭虫侵害率高于其他方向列车的侵害率,A车型车辆臭虫侵害率高于其他车辆的侵害率,是旅客列车臭虫防治的重点。

关键词：臭虫旅客列车防治策略

一种野外采集臭虫种群实验室驯化饲养方法的研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2022年第2期29卷 111-115页

作者：李静阎婷周小洁佟颖曾晓芃北京市疾病预防控制中心北京100013

臭虫种群的实验室维持,尤其是野外采集臭虫的实验室驯化饲养,成为其生理、生态与防治等各类研究的基础。本研究确定了饲养环境参数,并针对野外采集臭虫种群,采用前期小白鼠饲血维持、中期混合驯化、后期纯人工饲养策略,初步建立起一种... 详细信息

臭虫种群的实验室维持,尤其是野外采集臭虫的实验室驯化饲养,成为其生理、生态与防治等各类研究的基础。本研究确定了饲养环境参数,并针对野外采集臭虫种群,采用前期小白鼠饲血维持、中期混合驯化、后期纯人工饲养策略,初步建立起一种野外采集臭虫种群的实验室驯化饲养方法,为开展臭虫相关研究奠定基础。

关键词：臭虫野外种群驯化吸血率

萜类臭虫(Cimex lectularius L.)驱避化合物的定量构效关系研究(英文)

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林产化学与工业 2012年第3期32卷 1-8页

作者：宋杰王宗德韩招久陈金珠姜志宽郑卫青商士斌密西根大学-弗林特化学与生物化学系美国弗林特48502 江西农业大学林学院江西南昌330045 南京军区军事医学研究所江苏南京210002 中国林业科学研究院林产化学工业研究所江苏南京210042

测定了一系列六元环萜类化合物对臭虫(Cimex lectularius L.)的驱避活性,利用Codessa Pro程序计算了这些化合物的结构描述符,再利用Codessa Pro程序中的最优线性回归方法计算了驱避活性与这些化合物结构描述符之间的定量构效关系。所得... 详细信息

测定了一系列六元环萜类化合物对臭虫(Cimex lectularius L.)的驱避活性,利用Codessa Pro程序计算了这些化合物的结构描述符,再利用Codessa Pro程序中的最优线性回归方法计算了驱避活性与这些化合物结构描述符之间的定量构效关系。所得到的最优定量构效关系计算模型的R2为0.924,模型所包含的4个参数分别是:FNSA3 fractional PN-SA、Min n-n repulsion for bond H-C、YZ Shadow/YZ rectangle、Max electrophilic reactivity index for atom C。通过对模型的分析讨论了臭虫化学感受器与驱避剂之间可能存在的相互作用。

关键词：定量构效关系萜类化合物臭虫 Cimex lectularius L. 最优线性回归

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臭虫与过敏性哮喘关系的临床研究

中国媒介生物学及控制杂志 1995年第1期6卷 54-57页

作者：傅完珍殷凯生王伟良黎明达王凯萍姚锦宜陈子庆南京医科大学第一附属医院呼吸科南京铁道医学院寄生虫学教研室

本文对３２０例（男性１４６例、女性１７４例）支气管哮喘病人作了１５种过敏原的皮肤试验，并对其中３６例进行了嗜碱细胞组胺释放试验（ＨＲＢＴ）和臭虫抗原特异性ＩｇＥ抗体测定。结果显示：用臭虫抗原提取液作皮肤试验阳性率达６... 详细信息

本文对３２０例（男性１４６例、女性１７４例）支气管哮喘病人作了１５种过敏原的皮肤试验，并对其中３６例进行了嗜碱细胞组胺释放试验（ＨＲＢＴ）和臭虫抗原特异性ＩｇＥ抗体测定。结果显示：用臭虫抗原提取液作皮肤试验阳性率达６３．１３％，ＨＲＢＴ阳性率９１．６３％，特异性ＩｇＥ抗体阳性率６６．１７％。本研究结果提示，温带臭虫抗原可能与南京地区过敏性哮喘患者发病有密切关系。

关键词：臭虫抗原哮喘过敏性病理

旅客列车臭虫侵害调查、应急处置与防制效果观察

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中国媒介生物学及控制杂志 2013年第1期24卷 69-71页

作者：虞海燕杨劼任聪钱俊雄殷露吴桂宇张列武舒汉春武汉铁路局武汉疾病预防控制所湖北武汉430010 武汉铁路局劳动和卫生处湖北武汉430071

目的通过对武汉一起旅客列车臭虫侵害事件的调查和应急处置,并连续观察效果,为建立旅客列车臭虫侵害的科学应急处置方法和有效防控措施提供依据。方法运用目测、针挑与药激结合法,普查旅客列车臭虫侵害情况,连续2年监测观察防制效果。... 详细信息

目的通过对武汉一起旅客列车臭虫侵害事件的调查和应急处置,并连续观察效果,为建立旅客列车臭虫侵害的科学应急处置方法和有效防控措施提供依据。方法运用目测、针挑与药激结合法,普查旅客列车臭虫侵害情况,连续2年监测观察防制效果。结果列车臭虫的总体侵害率为2.59%,侵害集中在卧铺车厢(100%),大多数窝点(66.67%)分布在下铺,藏匿部位以铺板与板壁连接处缝隙居多;针对臭虫侵害特点,采取科学的处置方法和长效防控措施,效果可靠、持久。结论旅客列车臭虫侵害为"输入"性,卧铺车厢是防控重点;应急处置应坚持"早、细、严、实"原则;建立长效工作机制,是有效防控列车臭虫侵害的治本之策。

关键词：旅客列车臭虫预防控制效果观察

全国防制蟑螂、臭虫科研专题组十年(1978～1988)工作总结

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中国媒介生物学及控制杂志 1989年第5期 44-47页

作者：胡修元江苏省暨南京市卫生防疫站

10年来,防制蟑螂、臭虫科研专题组在全国爱国卫生运动委员会办公室直接领导和全国各省、市、自治区卫生行政领导及爱卫会的关怀支持下,通过120多个单位有关专业人员共同努力,在蟑螂和臭虫的本底调查、种群分布、生态习性、与疾病的关系... 详细信息

10年来,防制蟑螂、臭虫科研专题组在全国爱国卫生运动委员会办公室直接领导和全国各省、市、自治区卫生行政领导及爱卫会的关怀支持下,通过120多个单位有关专业人员共同努力,在蟑螂和臭虫的本底调查、种群分布、生态习性、与疾病的关系、蟑螂的抗药性研究、蟑螂的动态监测、臭虫

关键词：臭虫科研专题生态习性种群分布南京市卫生防疫站防制