检索结果-南通市图书馆

中草药 2007年第6期38卷 841-843页

作者：梅之南杨建科李效宽李芸芳中南民族大学民族药物研究所湖北武汉430074 湖北南洋药业有限公司湖北武汉430022

目的建立HPLC法测定灵丹草软胶囊中臭灵丹酸的方法。方法采用Agilent Zorbax XDB—C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相：乙腈-水（60：40），检测波长：210nm，体积流量：1．0mL／min，柱温：25℃。结果臭灵丹酸线性范围为12... 详细信息

目的建立HPLC法测定灵丹草软胶囊中臭灵丹酸的方法。方法采用Agilent Zorbax XDB—C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相：乙腈-水（60：40），检测波长：210nm，体积流量：1．0mL／min，柱温：25℃。结果臭灵丹酸线性范围为12．91～129．1μg／mL（r=0．9999），平均回收率为99．7％，RSD为2．0％。结论该测定方法简便快捷、精密度高、准确性好，可以作为灵丹草软胶囊的定量测定方法，以控制其质量。

关键词：灵丹草软胶囊臭灵丹酸高效液相色谱

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

臭灵丹酸衍生物的合成及其抗流感病毒研究

臭灵丹酸衍生物的合成及其抗流感病毒研究

引用

作者：黄邦连昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]采用有机合成方法对臭灵丹酸（Pterodontic Acid,PA）进行结构修饰并获得系列衍生物,进而采用体外细胞模型检测臭灵丹酸及其衍生物抗甲型H1N1流感病毒活性,最终阐明臭灵丹酸及其衍生物在抗流感病毒作用中的构效关系。[方法]在... 详细信息

[目的]采用有机合成方法对臭灵丹酸（Pterodontic Acid,PA）进行结构修饰并获得系列衍生物,进而采用体外细胞模型检测臭灵丹酸及其衍生物抗甲型H1N1流感病毒活性,最终阐明臭灵丹酸及其衍生物在抗流感病毒作用中的构效关系。[方法]在本研究中,采用还原、氧化、取代、缩合等化学反应对臭灵丹酸进行结构修饰:PA的羧基与胺类化合物缩合得酰胺类产物（1-31）;PA的羧基与羟基化合物脱水生成酯（32-34）,酯类化合物经氧化后得到化合物35-37;PA的双键经氧化后得到化合物38,38与氨类化合物反应生成产物39-40;38在酸性条件下（路易斯酸）反应生成化合物41;PA经氢化锂铝还原得到化合42,42与羧酸反应得到产物43-45;42经氯代得到中间体化合物46,46与胺类化合物缩合得到化合物47-49;42与烷基磺酰氯反应生成化合物50,50与叠氮化钠反应得到中间体叠氮衍生物51,51与炔烃化合物经Huisgen环加成反应生成1,2,3-三唑类衍生物52-54。所有合成的PA衍生物均为首次报道,其化学结构均通过波谱数据进行鉴定。建立体外细胞模型检测衍生物抗甲型H1N1流感病毒（PR8株）活性:采用MTT法检测衍生物的细胞毒性（TC50）,采用细胞病变法检测衍生物的抗病毒活性,用Reed-Muench法计算半数抑制浓度（IC50）,并以选择指数SI表示衍生物在抗流感病毒结果的治疗指数（SI=TC50/IC50）。[结果]在结构修饰结果中获得54个新型PA衍生物,反应过程简洁易操作,且产率较好。体外抗甲型HIN1流感病毒活性结果表明:与PA母体相比,修饰得到的衍生物能够不同程度地显示出良好的抗流感病毒活性（IC50＜12.5）,同时部分衍生物表现出较好的治疗指数（SI＞2）。与对照组相比,酰胺类衍生物表现出更好的抗病毒活性,羧基缩合成酯后,衍生物的抗流感病毒活性降低,5位、12位双键消除后活性增强,羰基还原后抗流感病毒活性没有明显变化,引入特殊基团能够明显增强衍生物的抗流感病毒活性。[结论]臭灵丹酸及其衍生物在体外抗流感病毒模型中显示出较好的活性,其中化合物10、11、17、20、28、45、49、52在体外抗甲型H1N1流感病毒活性最好（SI＞2）。研究发现:双键和羰基在PA的结构中并非不可缺少;羧基变成酯后,活性降低,毒性增加;羧基酰胺化具有增强活性和降低毒性的作用;引入杂环后,活性增强,毒性降低。引入不同的基团将很大程度地影响到衍生物的抗流感病毒能力,选择合适的官能团有助于衍生物的生物活性和理化性质进一步改善。本实验为臭灵丹酸及其衍生物的进一步研究,提供了良好的依据。

关键词：臭灵丹酸结构改造抗流感病毒

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

翼齿六棱菊中臭灵丹酸生物合成的关键基因CYP450/CPR的克隆及其功能研究

翼齿六棱菊中臭灵丹酸生物合成的关键基因CYP450/CPR的克隆及其功...

引用

作者：杨涵云南大学

学位级别：硕士

翼齿六棱菊(Laggera crispata),菊科六棱菊属植物,常见于中国西南地区。因植物全株具有浓郁的臭味且具有药效,在云南民间俗称臭灵丹。臭灵丹在中国民间有近千年的药用历史,多使用混合物入药,主治包括伤风、退热、急性扁桃体炎、流行性... 详细信息

翼齿六棱菊(Laggera crispata),菊科六棱菊属植物,常见于中国西南地区。因植物全株具有浓郁的臭味且具有药效,在云南民间俗称臭灵丹。臭灵丹在中国民间有近千年的药用历史,多使用混合物入药,主治包括伤风、退热、急性扁桃体炎、流行性腮腺炎等疾病,同时也用作香薰、精油等。臭灵丹中主要活性成分臭灵丹酸及其衍生物属于倍半萜烯类酸,目前这类化合物仍依赖传统植物有机溶剂提取方法来获取,但其具有耗时、效率低、对环境不友好等缺点。近年来,飞速涌现的合成生物学、代谢工程等生物技术在生产中具有更大应用潜力。这些技术的推广应用取决于催化元件及生物合成途径的解析。因此臭灵丹中臭灵丹酸及其衍生物的生物合成路径研究显得尤为重要。参考现有植物物种的倍半萜烯类酸途径,本文推测臭灵丹酸及其衍生物合成的关键步骤是细胞色素P450(Cytochrome P450、CYP450、P450s)羟基化作用。本研究采用转录组和代谢组联用方法,整合同源序列比对、系统发育树构建、结构基序、功能结构域、序列相似性网络及蛋白酶分子对接等生信分析方法,参照菊科及拟南芥的相关基因序列,挖掘臭灵丹中臭灵丹酸生物合成途径上的相关CYP450和CPR候选基因共计8条。在转录组和代谢组生信挖掘结果中,发现臭灵丹酸类及其衍生物的生物合成路径上的CYP450和已报道路径基本一致,皆从吉玛烯A(Germacrene A,GA)通过一个CYP450发生连续的三步氧化产生倍半萜酸,再由其他CYP450进行其他位点的氧化。研究结果:(1)从臭灵丹的转录组数据中获得了数百个CYP450序列,臭灵丹中的CYP450序列这些分布在CYP71、72、85、86超家族及51、710、74、97、711单家族中,共挖掘到臭灵丹酸类衍生物生物合成路径上的相关的CYP450候选基因5条,CPR候选基因3条;(2)通过提取臭灵丹叶片RNA,反转录c DNA,PCR扩增并克隆4条候选基因;(3)通过GC-MS的方法成功验证本工作中构建的GA模块酿酒酵母表达盒子TEF1p-Ls2GAS-TEF1t可以在酿酒酵母中通过发酵产GA的热重排产物β-榄香烯,成功构建可以随意替换CYP450和CPR候选基因的酿酒酵母表达盒子HXT7p-Ls2GAS-PRM5t,进行不同P450-CPR共转化的工作,酿酒酵母的共表达是否能够成功按照预设路线产生臭灵丹酸及其他衍生物还有待研究验证。通过对云南臭灵丹叶片转录组数据的分析对臭灵丹中的CYP450进行了家族分类,并对臭灵丹酸及其衍生物生物合成途径上的CYP450进行了挖掘,有望从云南臭灵丹中挖掘更加高效的CYP450。在GA酿酒酵母表达盒子在酿酒酵母中工作验证为臭灵丹酸类的酵母工程菌的构建奠定了基础。

关键词： CYP450/CPR 臭灵丹酸臭灵丹转录组代谢组

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

翼齿六棱菊中倍半萜合酶基因的克隆及其功能研究

翼齿六棱菊中倍半萜合酶基因的克隆及其功能研究

引用

作者：张姝云南大学

学位级别：硕士

翼齿六棱菊(Laggera crispata)俗称臭灵丹(***),是菊科六棱菊属植物中研究较多的物种,广泛分布于我国西南地区。其作为传统中草药,可治疗肝炎、支气管炎、疟疾、以及呼吸道病毒感染等疾病。目前的研究主要集中在翼齿六棱菊化学成分,其... 详细信息

翼齿六棱菊(Laggera crispata)俗称臭灵丹(***),是菊科六棱菊属植物中研究较多的物种,广泛分布于我国西南地区。其作为传统中草药,可治疗肝炎、支气管炎、疟疾、以及呼吸道病毒感染等疾病。目前的研究主要集中在翼齿六棱菊化学成分,其中占比很大的属桉烷类倍半萜,在这类倍半萜中最具代表性的为桉烷类酸中有抗病毒以及抗炎等多种活性的臭灵丹酸。臭灵丹酸作为翼齿六棱菊主要生物活性组分,是植物应对环境胁迫而产生,可用于医药。迄今为止,虽然对臭灵丹酸等少许桉烷类倍半萜的生物活性进行了相关研究,但关于该植物在环境压力作用下合成臭灵丹酸等重要活性物质的分子机制尚未见报道。本研究结合已报道的菊科其他物种的相关桉烷型倍半萜合成途径推测翼齿六棱菊中臭灵丹酸的生物合成途径,并对该途径中的吉玛烯A合酶(GAS)进行功能表征。具体研究内容包括:翼齿六棱菊叶片“3+2”模式转录组和代谢组测序及测序数据的初步分析;同源性比对、序列相似性网络、系统进化树构建及分子对接等生物信息学方法深度发掘候选倍半萜合酶基因;候选倍半萜合酶基因克隆、构建p Cold TF-目的基因重组质粒、不同宿主内低温诱导表达、体内外功能验证。主要研究结果为:通过转录组数据功能注释和差异基因表达分析筛选到了3个表达量上调较高的倍半萜合酶基因,分别为Transcript＿13601、Transcript＿11486、Transcript＿11118,其中Transcript＿13601编码吉玛烯A合酶,另外两个均编码β-石竹烯合酶;代谢组数据分析中发现了臭灵丹酸及其衍生物共4种、木香酸及其衍生物共2种、冬青酸和其他3种桉烷类倍半萜含量均上调;采用生物信息学方法深入分析挖掘到另外4个候选倍半萜合酶基因Transcript＿15915、Transcript＿11692、TRINITY＿DN18969＿c0＿g4＿i4、TRINITY＿DN18969＿c0＿g5＿i1;克隆上述获得的7个候选基因,最后在Top10宿主内鉴定了一个吉玛烯A合酶基因(Transcript＿15915),该基因可催化FPP产生吉玛烯A的重排产物β-榄香烯。本研究可为解析翼齿六棱菊植物中臭灵丹酸完整的生物合成途径提供理论基础。

关键词：翼齿六棱菊臭灵丹酸转录组倍半萜合酶基因异源表达

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

指纹图谱结合含量测定控制臭灵丹药材的质量

引用

华西药学杂志 2022年第2期37卷 181-186页

作者：孙孔春杨璨瑜王德升常柄权普惠萍吕连弟王娟沈报春昆明医科大学药学院云南省天然药物药理重点实验室昆明云南650500

目的采用HPLC指纹图谱结合含量测定控制臭灵丹药材的质量。方法建立臭灵丹药材的HPLC指纹图谱,结合含量测定结果,以此筛选出合格药材并测定抗病毒活性,以活性结果验证质控方法的合理性。结果臭灵丹药材的HPLC图谱与对照指纹图谱的相似度... 详细信息

目的采用HPLC指纹图谱结合含量测定控制臭灵丹药材的质量。方法建立臭灵丹药材的HPLC指纹图谱,结合含量测定结果,以此筛选出合格药材并测定抗病毒活性,以活性结果验证质控方法的合理性。结果臭灵丹药材的HPLC图谱与对照指纹图谱的相似度≥0.8,活性成分的含量限度为洋艾素、臭灵丹酸含量分别≥0.359 mg、6.736 mg·g^(-1),经该质控方法筛选出的药材抗病毒活性强。结论臭灵丹HPLC指纹图谱结合有效成分含量测定的质控方法,较全面地反映了臭灵丹药材中的化学成分信息。

关键词：臭灵丹高效液相色谱指纹图谱相似度有效成分洋艾素臭灵丹酸质控方法抗流感病毒活性

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：