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科学通报 2003年第7期48卷 699-702页

作者：李冬海许强公衍道张秀芳赵南明王可玢匡廷云清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084 中国科学院植物研究所光合作用基础研究开放实验室北京100093

将光系统Ⅱ膜复合物与具有不同脂酰基侧链的磷脂酰胆碱(PC)重组, 然后利用氧电极、可变荧光和圆二色光谱研究在热处理过程中磷脂酰胆碱对光系统Ⅱ膜复合物的保护作用. 热处理降低了光系统Ⅱ膜复合物的放氧速率和vm/,FFⅱ 同时影响了光... 详细信息

将光系统Ⅱ膜复合物与具有不同脂酰基侧链的磷脂酰胆碱(PC)重组, 然后利用氧电极、可变荧光和圆二色光谱研究在热处理过程中磷脂酰胆碱对光系统Ⅱ膜复合物的保护作用. 热处理降低了光系统Ⅱ膜复合物的放氧速率和vm/,FFⅱ 同时影响了光系统Ⅱ膜复合物的圆二色光谱, 但是PC抑制了热处理对光系统Ⅱ膜复合物的放氧速率、vm/FFⅱ和圆二色光谱的影响. 这些结果暗示在热处理过程中, PC对光系统Ⅱ膜复合物有保护作用, 并且PC的脂酰基侧链的不饱和程度对PC的热保护能力有影响.

关键词：植物生理学光系统Ⅱ 膜复合物热处理磷脂酰胆碱保护作用放氧速率可变荧光圆二色光谱

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痢疾杆菌福氏5型M90T株毒力相关膜蛋白复合物的分离鉴定

痢疾杆菌福氏5型M90T株毒力相关膜蛋白复合物的分离鉴定

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作者：龚益熊南昌大学

学位级别：硕士

痢疾杆菌是一种革兰氏阴性病原菌,通过各种分泌系统将毒力蛋白分泌到外部环境或者直接注入宿主细胞。迄今已经发现Ⅰ型到Ⅵ型共六种类型分泌系统,都是由单个蛋白或者大分子复合物形成一个跨越细菌细胞膜的通道。由于膜蛋白复合物结构复... 详细信息

痢疾杆菌是一种革兰氏阴性病原菌,通过各种分泌系统将毒力蛋白分泌到外部环境或者直接注入宿主细胞。迄今已经发现Ⅰ型到Ⅵ型共六种类型分泌系统,都是由单个蛋白或者大分子复合物形成一个跨越细菌细胞膜的通道。由于膜蛋白复合物结构复杂、疏水性强,难以从疏水的细胞膜脂双层中完整地分离纯化,因此长期以来对其研究局限于将可能的结构蛋白一个个单独进行结构和功能研究,缺乏整体性。近年来由Shaegger等人建立并逐渐成熟的蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Blue Native PolyAcrylamide Gel Electrophoresis,BN PAGE）为复合物研究带来新的突破。在痢疾杆菌的致病过程中,毒力大质粒编码许多侵袭相关蛋白比如Ⅲ型分泌系统复合物及其分泌的毒力因子,它的缺失会导致痢疾杆菌毒性的丧失。其细胞膜上除Ⅲ型分泌系统复合物之外,不仅还有5种类型分泌系统复合物未被分离鉴定,还可能有其它一些完全未知的复合物。本研究通过蓝色非变性凝胶电泳（BN PAGE）比较痢疾杆菌福氏5型野生株M90T和大质粒缺失株M90T△T的膜蛋白复合物,发现一个野生株特有的复合物,其分子量约为290kDa,命名为M90T-290。通过第二向SDS-PAGE分离M90T-290得到6个蛋白亚基,质谱鉴定为：一个由大质粒编码的毒力蛋白apyrase（ATP-二磷酸水解酶）和5个染色体编码的蛋白,分别为ClpB、DnaK、hypothetical protein S1768、translation elongation factor Tu、glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenas。M90T-290这个复合物是通过染色体和毒力大质粒的共同调控来实现M90T的致病性。鉴定出复合物的组成蛋白后,决定用标签亲和纯化技术对复合物的组成进行了验证。将apyrase的编码基因phoN2插入表达GST标签的PGEX 6p-1载体,构建成功apyrase-GST融合表达载体,转入M90T中,命名为M90T-6p-apy;制备该转化菌的膜蛋白复合物样品,用谷胱甘肽转移酶亲和柱纯化含GST标签的蛋白,利用BN PAGE分离纯化产物。结果没有分离得到GST-apyrase融合蛋白参与形成的复合物。分析可能是GST标签本身分子量比较大,改变了apyrase的三维结构导致无法形成复合物。于是将apyrase的编码基因phoN2插入到更小的表达His标签的PET 32a载体中,构建成功apryase-His融合表达载体,转入BL21中,命名为BL-PET-apyrase。诱导表达后超声破碎裂解细菌收集上清,发现在上清中有融合蛋白。然后利用镍柱进行亲和纯化,纯化得到apyrase-His融合蛋白。本实验构建的融合载体和纯化的融合蛋白为以后的复合物的验证奠定基础。同时为了对apyrase与M90T-290复合物的功能进行初步探索,利用Red重组系统敲除M90T中apyrase的编码基因phoN2。成功构建了线性打靶片段。把线性打靶片段转入含重组酶系统的PKOBEG感受态细胞中,通过卡纳霉素抗性标记筛选发生重组的缺失突变株。可能是由于重组效率低,目前还在筛选发生有效重组的缺失突变株。

关键词：痢疾杆菌膜复合物 BN-PAGE 腺苷三磷酸双磷酸酶亲和纯化 Red重组系统

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磷脂酰胆碱和TritonX-100对光系统Ⅱ蛋白二级结构及放氧活性影响的比较(英文)

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Acta Botanica Sinica 2000年第12期42卷 1220-1224页

作者：阮翔许强毛海滨单际修公衍道1张秀芳匡廷云赵南明清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084 中国科学院植物研究所光合作用基础研究开放实验室北京100093

采用傅立叶变换红外光谱技术 (FT_IR)和氧电极研究了磷脂酰胆碱和TritonX_10 0对光系统Ⅱ膜复合物的蛋白二级结构及放氧活性的影响。结果表明 ,磷脂酰胆碱对光系统Ⅱ膜复合物的蛋白二级结构没有显著的影响 ,但能引起放氧活性的提高 ,而... 详细信息

采用傅立叶变换红外光谱技术 (FT_IR)和氧电极研究了磷脂酰胆碱和TritonX_10 0对光系统Ⅱ膜复合物的蛋白二级结构及放氧活性的影响。结果表明 ,磷脂酰胆碱对光系统Ⅱ膜复合物的蛋白二级结构没有显著的影响 ,但能引起放氧活性的提高 ,而且脂酰侧链长度不同 ,对放氧活性的促进程度也不一样。相比较而言 ,TX_10 0对膜脂的扰动却引起蛋白二级结构的明显改变 ,并能抑致放氧活性。结果说明 ,完整的膜结构对维持光合膜蛋白的稳定是非常重要的。

关键词：光系统Ⅱ 磷脂酰胆碱放氧活性膜复合物蛋白

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用氧化染料对羊毛纤维染色时细胞膜复合物的作用

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毛麻科技信息 2007年第6期 3-3页

探讨了用氧化染料对羊毛纤维染色时羊毛纤维的细胞膜复合物结构变化的影响。考察了添加抗坏血酸和EDTA染色系统所获得的染色结果．可知羊毛纤维以外的纤维未染色．氧化染料对羊毛纤维的染色与羊毛纤维固有的组织结构有关。通过探讨细胞... 详细信息

探讨了用氧化染料对羊毛纤维染色时羊毛纤维的细胞膜复合物结构变化的影响。考察了添加抗坏血酸和EDTA染色系统所获得的染色结果．可知羊毛纤维以外的纤维未染色．氧化染料对羊毛纤维的染色与羊毛纤维固有的组织结构有关。通过探讨细胞膜复合物的改性影响时（对染料等的渗透路径起作用）．可知经甲酸处理后，改性细胞膜复合物的纤维上染量降低．而且纤维的外皮层细胞未被氧化染料染色。

关键词：纤维染色羊毛纤维氧化染料膜复合物皮层细胞结构变化组织结构染色系统

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国际纺织导报 2015年第8期43卷 1-1页

作者：郭玉海浙江理工大学浙江省纤维材料和加工技术重点实验室

产业用纺织品以其独特的结构与性能被广泛应用于各个产业领域，它也是中国纺织工业转型升级的重点发展领域。过滤与分离用纺织品是产业用纺织品一个重要分支和发展领域，主要包括机织、非织造加工成型的织物类、分离膜类及其他各种织物... 详细信息

产业用纺织品以其独特的结构与性能被广泛应用于各个产业领域，它也是中国纺织工业转型升级的重点发展领域。过滤与分离用纺织品是产业用纺织品一个重要分支和发展领域，主要包括机织、非织造加工成型的织物类、分离膜类及其他各种织物，以及织物／膜复合物。

关键词：产业用纺织品产业领域纺织工业加工成型膜复合物分离膜织物非织造

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