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过表达及沉默细胞黏附分子1基因膀胱癌细胞株的构建

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山东医药 2016年第7期56卷 20-23页

作者：刘莉杨永姣陈业刚王尚任刘晓强陈少峰孙光天津医科大学第二医院天津300211 天津市泌尿外科研究所

目的构建过表达及沉默细胞黏附分子1(CADM1)基因的膀胱癌细胞株。方法培养并收集膀胱癌细胞株T24。1过表达CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为1、2、3组,real-time PCR扩增CADM1基因全长,与慢病毒载体p HBLV-IRES-Zs Green-PGK-puro进... 详细信息

目的构建过表达及沉默细胞黏附分子1(CADM1)基因的膀胱癌细胞株。方法培养并收集膀胱癌细胞株T24。1过表达CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为1、2、3组,real-time PCR扩增CADM1基因全长,与慢病毒载体p HBLV-IRES-Zs Green-PGK-puro进行连接(1组),并设载体对照组(2组)和空白对照(3组);经酶切及测序鉴定正确后在293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染T24细胞。2沉默CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为A、B、C、D、E组,设计3条针对CADM1基因的干扰序列(siRNA1/2/3)分别与载体p HBLV-U6-shRNA-ZsGreen-Puro进行连接(A、B、C组),D组与p HBLV-U6-Zs Green-Puro进行连接,E组为空白对照;经双酶切、PCR及测序鉴定连接载体,在293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染T24细胞。采用real-time PCR检测T24细胞中的CADM1 mRNA,Western blotting法检测CADM1蛋白。结果过表达和沉默CADM1基因的慢病毒载体及细胞株均正确构建。1、2、3组CADM1 mRNA相对表达量分别为4.84±0.02、1.12±0.03、1.00±0.00,CADM1蛋白相对表达量分别为4.53±0.03、1.05±0.04、1.00±0.01,1组CADM1 mRNA及蛋白相对表达量高于2、3组(P均膀胱癌细胞株T24。

关键词：膀胱肿瘤膀胱癌细胞株细胞黏附分子1 基因沉默

高聚生、干扰素-α-2b对不同膀胱癌细胞株量效关系及MHC-I、II类抗原表达影响的实验研究

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华西药学杂志 2001年第6期16卷 411-413页

作者：申吉泓董强刘孝东卢一平杨宇如四川大学华西医院泌尿外科四川成都610041

目的 :探讨高聚生、干扰素 α 2b对不同膀胱癌细胞株的生长以及对HLA DR及HLA ABC表达的影响。方法 :以不同膀胱癌细胞株为研究对象 ,采用细胞培养及MTT比色法 ,检测时间、浓度量效关系 ;以ID50 时的药物浓度作用于不同膀胱癌细胞株 72... 详细信息

目的 :探讨高聚生、干扰素 α 2b对不同膀胱癌细胞株的生长以及对HLA DR及HLA ABC表达的影响。方法 :以不同膀胱癌细胞株为研究对象 ,采用细胞培养及MTT比色法 ,检测时间、浓度量效关系 ;以ID50 时的药物浓度作用于不同膀胱癌细胞株 72h后 ,流式细胞仪检测高聚生、干扰素 α 2b对膀胱癌细胞株HLA DR及HLA ABC表达的影响。结果 :高聚生对膀胱癌细胞的生长表现为促进作用 ,并呈量效关系 ,干扰素 α 2b表现为抑制肿瘤细胞生长 ,随着时间延长 ,抑制作用更为显著 ;所测 3个细胞株均无HLA DR抗原表达 ,高聚生、干扰素 α 2b对HLA DR的表达均无影响 ,高聚生可下调HLA ABC的表达 ,干扰素 α 2b对HLA ABC抗原表达有较强的上调作用。结论 :高聚生对膀胱癌细胞株无直接的细胞杀伤作用 ,干扰素 α 2b对多个膀胱癌细胞株具有细胞毒作用 ,高聚生抗癌机理与提高肿瘤细胞HLA DR、ABC的表达无关 ,干扰素 α 2b可通过提高肿瘤细胞HLA

关键词：膀胱癌细胞株流式细胞术 HLA 高聚生干扰素-α-2b 膀胱癌

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膀胱癌细胞株和组织端粒酶活性研究

中华泌尿外科杂志 1998年第12期19卷 17-17页

作者：彭钧铮张元芳丁强赵琳琳潘崇贤美国芝加哥洛约那大学医学和癌症研究中心上海医科大学泌尿外科研究所中科院上海分院细胞所

为探讨端粒酶活性表达与膀胱癌的关系，采用端粒重复片段扩增方法对膀胱癌细胞株，正常膀胱组织，膀胱炎性组织，膀胱癌组织，癌旁组织的端粒酶活性表达进行研究。报告如下。材料与方法膀胱癌细胞株（Ｔ２４），Ｈｅｌａ细胞株购于中科... 详细信息

为探讨端粒酶活性表达与膀胱癌的关系，采用端粒重复片段扩增方法对膀胱癌细胞株，正常膀胱组织，膀胱炎性组织，膀胱癌组织，癌旁组织的端粒酶活性表达进行研究。报告如下。材料与方法膀胱癌细胞株（Ｔ２４），Ｈｅｌａ细胞株购于中科院上海分院细胞所。２６例经病理证实...

关键词：膀胱癌细胞株端粒酶活性

不同能量等级钬激光照射对膀胱癌细胞株T-24增殖活性与凋亡的影响

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四川医学 2007年第8期28卷 831-833页

作者：刘东亮冉隆建卢一平石海燕朱蜀侠吕健为胥艳荣霞成都363医院泌尿外科四川成都610041 四川大学华西医院四川成都610041

目的观察不同能量等级钬激光照射人膀胱癌细胞株对膀胱肿瘤细胞增殖活性的影响与诱导肿瘤细胞凋亡中的作用。方法人膀胱癌细胞株T-24细胞以不同等级低剂量钬激光直接照射48h后,应用MTT法观察细胞增殖受抑制情况以及光镜下观察细胞形态... 详细信息

目的观察不同能量等级钬激光照射人膀胱癌细胞株对膀胱肿瘤细胞增殖活性的影响与诱导肿瘤细胞凋亡中的作用。方法人膀胱癌细胞株T-24细胞以不同等级低剂量钬激光直接照射48h后,应用MTT法观察细胞增殖受抑制情况以及光镜下观察细胞形态学的改变;并根据结果选择适宜的钬激光能量值照射T-24细胞后,采用免疫荧光分析钬激光照射肿瘤细胞株后对肿瘤细胞增殖的抑制情况以及对细胞凋亡情况的影响。结果随着钬激光辐射能量的增大,细胞增殖抑制率上升,呈现出一定的剂量依赖关系。根据预试验结果选取钬激光能量值为800mJ辐射细胞株干预后48h采用普通光镜及荧光显微镜观察细胞形态均提示实验组细胞生长密度降低,与对照组细胞在形态学上差异明显,符合细胞凋亡的改变。结论体外细胞试验结果表明,采用钬激光照射人膀胱癌细胞株T-24,能够抑制肿瘤细胞增殖活性并诱发肿瘤细胞凋亡。

关键词：钬激光膀胱癌细胞株免疫荧光增殖抑制细胞凋亡

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硫化氢在膀胱癌细胞株的作用试验研究

吉林医学 2014年第14期35卷 3009-3010页

作者：钟义洋郑少波潘斌罗利民广东省广州市番禺区南村医院广东广州511442 南方医科大学附属珠江医院广东广州510515 暨南大学附属第一医院广东广州510630 广东省广州市番禺区钟村医院广东广州511495

目的：探讨硫化氢在膀胱癌细胞株中的作用与相关机制。方法：选用膀胱肿瘤T24细胞株30瓶,随机分三组,每组10瓶,一组经正常繁殖（作为对照组）,一组在繁殖的同时采用同一浓度的硫氢化钠刺激（A组）,第三组各瓶细胞分别采用0.0001-0.5 mmo... 详细信息

目的：探讨硫化氢在膀胱癌细胞株中的作用与相关机制。方法：选用膀胱肿瘤T24细胞株30瓶,随机分三组,每组10瓶,一组经正常繁殖（作为对照组）,一组在繁殖的同时采用同一浓度的硫氢化钠刺激（A组）,第三组各瓶细胞分别采用0.0001-0.5 mmol/L浓度的硫氢化钠刺激（B组）。结果：B组随着硫氢化钠浓度的增加,膀胱肿瘤T24细胞的OD（吸光度,Opticaldensity）值也在增加,在不同浓度之间对比差异有统计学意义（P〈0.05）。A组的CSE蛋白表达水平明显高于对照组,A组的CSEmRNA表达水平明显高于对照组,对比差异都有统计学意义（P〈0.05）。结论：硫化氢在膀胱癌细胞株的应用能增强肿瘤细胞的增殖,其作用的发挥与增强CSE的表达有关。

关键词：膀胱癌细胞株硫化氢胱硫醚-γ-裂解酶

干扰素结合化疗药物对膀胱癌细胞株BIU-87的抑制作用

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临床泌尿外科杂志 1998年第3期13卷 135-137页

作者：陈忠李家贵杨业金周火明同济医科大学附属同济医院泌尿外科武汉430030 同济医科大学医学分子生物学开放实验室

在离体条件下，采用噻唑蓝（MTT）染色法，观察干扰素（IFN）与丝裂霉素C（MMC）、阿霉素（ADM）、噻替哌（TSPA）和羟基喜树碱（HCPT）等化疗药物联合应用对人类膀胱癌细胞株BIU－87的抑制作用。结果在连续联合用药组，浓度为25000u／m... 详细信息

在离体条件下，采用噻唑蓝（MTT）染色法，观察干扰素（IFN）与丝裂霉素C（MMC）、阿霉素（ADM）、噻替哌（TSPA）和羟基喜树碱（HCPT）等化疗药物联合应用对人类膀胱癌细胞株BIU－87的抑制作用。结果在连续联合用药组，浓度为25000u／ml的IFN与上述药物50％抑制率（ID50－1）剂量联合使用的抑制率分别为57．4％、58．6％、55．3％和64．3％；在序贯联合用药组，将MMC、ADM的ID50－2剂量作用于细胞24h后，再使用浓度为25000u／ml的IFN，24h后两者联合使用的抑制率分别为59．4％和54．3％。认为IFN与MMC等化疗药物联合应用能够取得较好的协同作用，为临床治疗浅表性膀胱肿瘤提供了新的思路。

关键词：干扰素膀胱癌细胞株化疗药物联合应用

转染GCS基因膀胱癌细胞株的建立及其多药耐药的研究

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中华实验外科杂志 2010年第10期27卷 1545-1545页

作者：孙长成孔垂泽于泓远李军中国医科大学第一医院泌尿外科沈阳110001

我们应用转基因技术，通过将GCS基因导入膀胱癌细胞，建立GCS高表达的细胞株，检测在转染后GCS高表达的细胞株以及未经转染处理的膀胱癌细胞株中GCS表达水平之间的差异，比较两者之间的关系，探讨神经酰胺糖基化与膀胱癌MDR的关系。

关键词：膀胱癌细胞株 GCS 多药耐药转染 S基因神经酰胺糖基化转基因技术基因导入

三氧化二砷对膀胱癌细胞株BIU-87影响的研究

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中华泌尿外科杂志 2003年第11期24卷 786-786页

作者：安瑞华王岩董娟金连弘哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科 150001 中国医学科学院黑龙江省分院哈尔滨医科大学附属第一医院检验科 150001

三氧化二砷(As2O3) 用于白血病的治疗疗效确定,目前亦有诱导实体肿瘤细胞凋亡的报道[1].我们采用免疫组化和流式细胞术观察As2O3对人膀胱癌细胞系BIU-87的诱导凋亡作用.现报告如下.

关键词：三氧化二砷膀胱癌细胞株 BIU—87 研究免疫组化

肿瘤转移抑制基因nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞株的转染及表达

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华西医学 2007年第3期22卷 571-573页

作者：崔曙唐铁龙石明李响李虹川北医学院附属医院泌尿外科四川南充637000 四川大学华西临床医学院华西医院泌尿外科四川成都610041

目的:探讨nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞株的转染及表达。方法:采用已经通过基因工程技术构建的nm23-H1基因的真核表达载体,利用电穿孔基因转染技术将nm23-H1基因导入人膀胱癌T-24细胞,利用G418筛选、免疫组织化学、流式细胞方法检测nm... 详细信息

目的:探讨nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞株的转染及表达。方法:采用已经通过基因工程技术构建的nm23-H1基因的真核表达载体,利用电穿孔基因转染技术将nm23-H1基因导入人膀胱癌T-24细胞,利用G418筛选、免疫组织化学、流式细胞方法检测nm23-H1基因的转录和表达情况。结果:以电穿孔转染技术将nm23-H1基因转染T-24细胞后,经400ml/L的G418筛选后可形成抗性克隆;免疫组织化学和流式细胞结果显示转基因细胞中有nm23-H1蛋白的阳性高表达。结论:nm23-H1基因可被成功转染入人膀胱癌T-24细胞并能有效表达。

关键词： nm23-H1基因转染膀胱癌细胞株