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白藜芦醇通过激活去乙酰化酶1/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶信号通路影响牛脂肪细胞凋亡

动物营养学报 2017年第12期29卷 4398-4407页

作者：成海建游伟靳青刘倚帆万发春宋恩亮刘桂芬谭秀文张相伦刘晓牧山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100

本试验旨在研究植物提取物白藜芦醇(RES)对牛皮下脂肪细胞凋亡率以及去乙酰化酶1(SIRT1)/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路关键因子的mRNA和蛋白质表达量的影响。选取18月龄鲁西黄牛的皮下前体脂肪细胞,在细胞分化的第0天,更换为... 详细信息

本试验旨在研究植物提取物白藜芦醇(RES)对牛皮下脂肪细胞凋亡率以及去乙酰化酶1(SIRT1)/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路关键因子的mRNA和蛋白质表达量的影响。选取18月龄鲁西黄牛的皮下前体脂肪细胞,在细胞分化的第0天,更换为RES浓度分别为0(对照)、100、200和400μmol/L的培养液处理48 h,每组设3个重复。应用Hoechst33342染色检测细胞凋亡的形态学变化,流式细胞分析仪检测细胞凋亡率,荧光定量PCR(q PCR)和免疫印迹试验(Western-blot)分别检测SIRT1/AMPK信号通路上的关键因子SIRT1、A MPKα、叉头转录因子1(Fox O1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA和蛋白质表达量,并利用油红O染色鉴定脂肪细胞。结果表明,与对照组相比:不同浓度RES处理后的牛皮下脂肪细胞凋亡率均极显著增高(P蛋白质表达量均显著或极显著提高(P蛋白质表达量显著或极显著提高(P蛋白质表达量极显著提高(P蛋白质表达量极显著降低(P蛋白质表达量以及Bcl-2、Bax的蛋白质表达量均与对照组差异不显著(P>0.05)。由此可见,RES通过激活SIRT1/AM PK信号通路,同时激活通路下游的Fox O1,促进了牛皮下脂肪细胞的凋亡,为通过营养调控技术降低牛皮下脂肪沉积提供了一定的理论基础。

关键词：去乙酰化酶1 腺苷-磷酸激活的蛋白激酶叉头转录因子1 白藜芦醇牛脂肪细胞凋亡

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AMPK-ACC-CPT信号通路对脓毒症大鼠游离脂肪酸代谢的影响

AMPK-ACC-CPT信号通路对脓毒症大鼠游离脂肪酸代谢的影响

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作者：乔巧华浙江大学

学位级别：硕士

实验背景：腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)在真核生物细胞中广泛存在,属丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,被誉为“细胞能量调节器”。目前脓毒症时AMPK活性变化尚未清楚。实验目的：本研究旨在探讨大鼠脓毒症时AMPK活性变化与不同组织出现的游离脂肪... 详细信息

实验背景：腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)在真核生物细胞中广泛存在,属丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,被誉为“细胞能量调节器”。目前脓毒症时AMPK活性变化尚未清楚。实验目的：本研究旨在探讨大鼠脓毒症时AMPK活性变化与不同组织出现的游离脂肪酸代谢变化是否具有相关性。实验方法：wistar大鼠尾静脉注射脂多糖(LPS)建立脓毒症模型。wistar大鼠24只,随机分为6小时组、24小时组,每组再分为对照组和脓毒症亚组。测定注射LPS后6、24小时大鼠各组织游离脂肪酸含量的变化。应用western blot法检测各组大鼠心脏、肝脏、比目鱼肌、趾长伸肌组织AMPK蛋白的磷酸化水平、ACC蛋白的磷酸化水平和CPT的蛋白水平。实验结果：1)注射LPS后,6小时组心脏、肝脏游离脂肪酸含量较正常对照组增加(心肌102.2459±5.95506 vs120.1584±9.40634,肝脏77.8618±14.59484 vs104.0993±15.34602),6小时组比目鱼肌、趾长伸肌游离脂肪酸含量无明显变化,24小时组心脏、肝脏游离脂肪酸含量较正常对照组减少(心肌102.894±2.98192vs89.1406±4.70044,肝脏77.8618±14.59484 vs75.6402±3.14461),24小时组比目鱼肌、趾长伸肌游离脂肪酸含量仍无明显改变。2)6小时组心脏、肝脏、比目鱼肌、趾长伸肌AMPK磷酸化水平较正常对照组无明显变化,24小时组心脏、肝脏AMPK磷酸化水平较正常对照组增加(心肌0.6814±0.21652vs0.3380±0.11422,肝脏0.6188±0.04802vs0.5452±0.06245)。3)6小时组心脏、肝脏、比目鱼肌、趾长伸肌ACC磷酸化水平较正常对照组无明显变化,24小时组心脏、肝脏ACC磷酸化水平较正常对照组增加(心肌0.4141±.03505vs0.7036±0.07736,肝脏0.6257±0.03421vs0.8758±0.05813)。4)6小时组心脏、肝脏、比目鱼肌、趾长伸肌CPT蛋白水平较正常对照组无明显变化,24小时组心脏、肝脏CPT蛋白水平较正常对照组增加(心肌1.1005±0.11626vsl.9111±0.19417,肝脏1.3007±0.20310vs2.0715±0.22773)。实验结论：LPS可引起外周组织游离脂肪酸的动态变化,早期心脏、肝脏组织游离脂肪酸含量的增加与AMPK-ACC-CPT途径无明显相关,LPS注射后24小时心脏、肝脏组织游离脂肪酸含量的下降可能与其AMPK-ACC-CPT途径的激活相关;5mg/kgLPS注射后不引起骨骼肌游离脂肪酸含量的改变,且AMPK-ACC-CPT途径活性无改变。

关键词：脓毒症游离脂肪酸腺苷-磷酸激活的蛋白激酶乙酰辅酶A羧化酶肉毒碱棕榈酰转移酶

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