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丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的腹膜间皮细胞氧化应激及损伤的影响

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丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的腹膜间皮细胞氧化应激及损伤的影响

作者：于立杰南京大学

学位级别：硕士

目的：研究丹参酮ⅡA对腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid, PDF)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)氧化应激及其损伤的影响。初步探讨丹参酮ⅡA在防治腹膜透析(Peritoneal Dialysis,PD)相关腹膜间皮细胞氧化应激损伤(oxidative stress reaction and its damage)的作用机制。方法：体外培养的HPMCs细胞株,待细胞80%融合后用1%小牛血清(FBS)培养基同步24小时,倒置显微镜观察细胞生长状态,并分为五组：A组即对照组(DMEM培养基+完全培养基);B组即腹膜透析液组(含4.25%PDF的完全培养基);C组即丹参酮组(含100μMmol/L丹参酮的完全培养基);D组即丹参酮1组(含50μ/L丹参酮ⅡA的PDF)、E组即丹参酮2组(含100μMol/LⅡA丹参酮ⅡA的PDF)。干预48小时后(PDF未加热),收集各组上清液,离心后硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝酸苯甲酸显色法于分光光度以上检测各组上清液MDA、SOD、GSH浓度,并进行比较。不同浓度丹参酮ⅡA(50μMol/L、100μMol/L、200μMol/L)干预48h后,MTT比色法于酶标仪上检测不同浓度丹参酮ⅡA干预下细胞增殖活力的改变;干预72h后(其中B组、D、E组为加热的PDF)。采用活性氧捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧水平。流式细胞仪及荧光显微镜检测线粒体膜电位的变化：荧光显微镜检测胞内钙离子浓度的变化。结果：倒置显微镜下观察对数期生长的HPMCs呈铺路石样改变,符合文献报道的HPMCs生长状态。不同浓度丹参酮ⅡA干预24小时后,组间对腹膜间皮细胞增值活性的影响无显著差异(P>0.05)。PDF干预24小时候,B组上清液丙二醛含量显著高于A、C、D组,P腹膜间皮细胞的增值活性;且可显著降低PDF干预下的HPMCs活性氧的产生及降低MDA的含量及胞内钙离子的负荷,保护SOD、GSH的活性,防止线粒体膜电位的降低,从而提示丹参酮ⅡA具有潜在阻止PDF干预下HPMCs氧化应激损伤的作用。

关键词：人腹膜间皮细胞腹膜透析液氧化应激凋亡

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不同腹膜透析液的临床应用

肾脏病与透析肾移植杂志 2006年第5期15卷 447-448页

作者：汪涛韩庆烽北京大学第三医院肾内科

以葡萄糖为渗透剂的腹膜透析(PD)液应用至今已有数十年的历史,近年来随着PD液和PD管路在设计和生产方面的不断进步,PD液相关的感染已显著下降,而葡萄糖PD液相关的其他问题则得到了越来越多的重视,如生物相容性问题,长期大量的葡萄糖接... 详细信息

以葡萄糖为渗透剂的腹膜透析(PD)液应用至今已有数十年的历史,近年来随着PD液和PD管路在设计和生产方面的不断进步,PD液相关的感染已显著下降,而葡萄糖PD液相关的其他问题则得到了越来越多的重视,如生物相容性问题,长期大量的葡萄糖接触、非生理性pH值等因素是否会导致腹膜在组织结构和生理作用上的变化;"超滤衰竭"问题,以葡萄糖为渗透剂的PD液因葡萄糖的吸收而不能达到"需要"的超滤水平;同时人们也期望通过改变腹膜透析的成分达到纠正PD相关的代谢性问题的目的,因此新型PD液的研发也自然成为近年来PD界的热点问题之一.……

关键词：血液净化腹膜透析液临床应用

比较艾考糊腹膜透析液与葡萄糖腹膜透析液对小分子溶质清除及糖脂代谢的meta分析

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比较艾考糊腹膜透析液与葡萄糖腹膜透析液对小分子溶质清除及糖脂...

作者：张维浙江大学

学位级别：硕士

目的本文的目的是比较艾考糊精腹膜透析液(ICO实验组)与葡萄糖腹膜透析液(GLU对照组)对小分子溶质清除及糖脂代谢方面的差异。方法对纳入文献进行meta分析,包含对小分子溶质的清除,空腹血糖,总胆固醇,甘油三酯等方面。结果9RCTs(553人... 详细信息

目的本文的目的是比较艾考糊精腹膜透析液(ICO实验组)与葡萄糖腹膜透析液(GLU对照组)对小分子溶质清除及糖脂代谢方面的差异。方法对纳入文献进行meta分析,包含对小分子溶质的清除,空腹血糖,总胆固醇,甘油三酯等方面。结果9RCTs(553人)被纳入研究。ICO组对肌酐(WMD=0.49;95％CI=0.34t00.64;Z=6.35;P液透析不充分的患者或肥胖、高胆固醇血症的患者可使用ICO腹膜透析液。

关键词：艾考糊葡萄糖腹膜透析液腹膜透析代谢管理

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的腹膜间皮细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

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丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的腹膜间皮细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

作者：邵秋媛南京大学

学位级别：硕士

背景及目的基质金属蛋白酶的分泌可导致细胞外基质沉积,对人体内组织纤维化包括腹膜组织纤维化发生的均起重要作用。观察丹参酮IIA磺酸钠注射液对在高糖腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid, PDF)诱导下体外培养的人腹膜间皮细胞(hum... 详细信息

背景及目的基质金属蛋白酶的分泌可导致细胞外基质沉积,对人体内组织纤维化包括腹膜组织纤维化发生的均起重要作用。观察丹参酮IIA磺酸钠注射液对在高糖腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid, PDF)诱导下体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells, HPMCs)中的基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase, MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase, MMP-9)的分泌及mRNA和蛋白表达水平的影响。方法选取人腹膜间皮细胞株进行体外培养,传代至第三代细胞的用于实验。在培养的过程中以倒置显微镜观察细胞的形态变化。将培养的细胞随机分成5组：对照组、丹参酮IIA组、PDF组、丹参酮1组(含丹参酮IIA浓度为50μM的PDF组)、丹参酮2组(含丹参酮浓度为100μM的PDF组),同步培养72小时后,用实时荧光定量PCR (Real-Time PCR)和免疫印迹法(Western Blot)分别检测MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白的表达水平并比较。结果 PDF组HPMCs的形态与对照组相比发生明显改变,在光镜下可见细胞呈现出成纤维样细胞形态。Real-Time PCR和Western Blot结果均发现,丹参酮HA能明显抑制高糖诱导的MMP-2、MMP-9高表达,添加丹参酮HA的丹参酮1、2组MMP-2及MMP-9mRNA和蛋白的表达与PDF组相比得到明显下调,但是丹参酮不同浓度组间下调程度差异不明显。结论丹参酮IIA磺酸钠注射液具有抑制PDF导致的人腹膜间皮细胞MMP-2、-9过度分泌和表达的作用,并具有潜在延缓腹膜透析相关腹膜纤维化发生的作用。

关键词：丹参酮IIA 人腹膜间皮细胞基质金属蛋白酶腹膜透析液腹膜纤维化

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新型腹膜透析液的研究进展

中国血液净化 2020年第6期19卷 403-405,409页

作者：郭红霞唐雯北京大学第三医院肾内科北京100191

腹膜透析液是腹膜透析治疗不可或缺的重要组成部分。研发能够达到充分透析治疗目的、生物相容性好、具有腹膜保护功能并可改善患者生活质量和临床结局的腹膜透析液是新型腹膜透析液研究的目的。本文就目前新型腹膜透析液的研究进展作一... 详细信息

腹膜透析液是腹膜透析治疗不可或缺的重要组成部分。研发能够达到充分透析治疗目的、生物相容性好、具有腹膜保护功能并可改善患者生活质量和临床结局的腹膜透析液是新型腹膜透析液研究的目的。本文就目前新型腹膜透析液的研究进展作一综述。

关键词：腹膜透析液艾考糊精腹膜透析糖降解产物生物相容性

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的氧化应激及腹膜间皮细胞凋亡因子表达的影响

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丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的氧化应激及腹膜间皮细胞凋亡因子表...

作者：夏阳阳南京医科大学

学位级别：硕士

背景及目的氧化应激是上调凋亡因子表达的重要因素之一，凋亡因子表达上调又可以启动细胞凋亡的发生，细胞凋亡对人体内组织纤维化包括腹膜组织纤维化的发生均起重要作用。腹膜纤维化是长期腹膜透析退出治疗的主要原因，而腹膜间皮细... 详细信息

背景及目的氧化应激是上调凋亡因子表达的重要因素之一，凋亡因子表达上调又可以启动细胞凋亡的发生，细胞凋亡对人体内组织纤维化包括腹膜组织纤维化的发生均起重要作用。腹膜纤维化是长期腹膜透析退出治疗的主要原因，而腹膜间皮细胞凋亡是导致纤维化始动的关键环节。本文观察丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA，TSN)注射液对高糖腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid，PDF)诱导体外培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells，HPMCs)氧化应激及凋亡的影响。方法选取人腹膜间皮细胞株进行体外培养，传代至第三代细胞用于实验。在培养的过程中以倒置显微镜观察细胞的形态变化。氧化应激指标检测分组：同步培养24h后分为：对照组(DEME培养基)、PDF组(4.25%PDF)、TSN组(含TSN终浓度为100μmol/L的DEME培养基)、TSN低浓度组(含TSN终浓度为50μmol/L的4.25%PDF)、TSN高浓度组(含TSN终浓度为100μmol/L的4.25%PDF)，干预48h后，收集各组上清液，离心后用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝酸苯甲酸显色法检测上清液MDA、SOD、GSH浓度，并进行比较。细胞凋亡因子检测分组：同步培养24h后分为5组：对照组(DEME培养基)、HO组(3%HO)、TSN+HO组(含TSN终浓度为50μmol/L的3%HO)、PDF组(4.25%PDF)、TSN+PDF组(含TSN终浓度为50μmol/L的4.25%PDF)，干预72h后，用实时荧光定量PCR(Real time PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测凋亡因子bax、caspase-3及抑制凋亡因子bcl-2基因和蛋白的表达水平并比较。结果加入丹参酮ⅡA的各组较PDF组MDA的含量都明显降低，SOD、GSH的含量都显著升高。但丹参酮ⅡA不同浓度组间下调程度差异不明显。加入丹参酮ⅡA后的TSN+HO组和TSN+PDF组都分别较HO组和PDF组bax、caspase-3的mRNA及蛋白的表达量减少，bcl-2的mRNA及蛋白的表达量增加。结论 TSN可能通过抑制氧化应激下调PDF诱导的HPMCs细胞凋亡因子高表达，从而延缓HPMCs的凋亡，保存HPMCs，具有潜在的抗腹膜纤维化作用。

关键词：丹参酮ⅡA 腹膜透析液氧化应激凋亡因子抑制凋亡因子

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多糖腹膜透析液的制备与质量研究

多糖腹膜透析液的制备与质量研究

作者：管运才南京大学

学位级别：硕士

腹膜透析（Peritoneal dialysis,PD）是临床上除血液透析后一种新型的肾替代疗法,它是作为肾移植及血液透析后治疗终末期肾病（End-stagerenal disease,ESRD）的又一疗法,PD还可用于治疗心力衰竭（Heartfailure,HF）,急性出血性坏死性... 详细信息

腹膜透析（Peritoneal dialysis,PD）是临床上除血液透析后一种新型的肾替代疗法,它是作为肾移植及血液透析后治疗终末期肾病（End-stagerenal disease,ESRD）的又一疗法,PD还可用于治疗心力衰竭（Heartfailure,HF）,急性出血性坏死性胰腺炎（Acute hemorrhagic necrotizing pancreatitis,AHNP）等病。它的治疗机理是利用腹膜的超滤作用,除去血液中有毒代谢产物,如肌酐,尿素氮,肿瘤坏死因子,白细胞介素,过多体液及盐离子等。除去有毒物质及过多水分及盐机理为,腹膜透析液渗透压溶质利用其高渗性在腹腔及毛细血管间形成的渗透压差,利用渗透压差,血液中有毒代谢物通过扩散作用由腹膜微小血管进入腹腔,渗透压溶质还可以通过激活腹膜间皮细胞上水通道蛋白来或通过胶体渗透运输水分,到达腹腔,在一定的时间内通过引流系统排出,再灌注,如此循环,达到净化血液作用。目前临床上用到的腹膜透析液有两类三种。第一类为小分子渗透压溶质腹膜透析液,如葡萄糖乳酸盐、氨基酸腹膜透析液。葡萄糖乳酸盐腹透液已在国内有上市品种,且有仿制药标准;氨基酸腹膜透析液,国内没有上市及注册该品种,其中氨基酸对比葡萄糖乳酸盐优势在于在具有超滤的同时能补充人体营养和调节长期腹膜透析带来的负氮平衡转变为正氮平衡。第二类为大分子腹膜透析液,如艾考糊精,该品种在国内未上市,是一种多糖为渗透压溶质的腹膜透析液,它能解决持续超滤过程中渗透压溶质反渗透问题。本论文主要就多糖腹膜透析液原料药及制剂制备工艺与质量进行研究。参照百特艾考糊精说明书要求,艾考糊精是由淀粉水解而来,为了保证其支化度满足胶体渗透压的要求,淀粉原料一般为支化度较高的蜡质玉米淀粉。在淀粉水解工艺中,对温度、酸度、水解时间进行筛选,通过凝胶渗透色谱（Gel permeation chromatograpHy,GPC）监测多糖分子量分布情况,制备成的糊精溶液通过过滤除去不溶性多糖,然后再通过超滤作用对水解过滤物进行精制。其中选取截留分子量（Molar weight cut-off,MWCO）3000 Da的膜包进行超滤,通过除去过多的小分子糖得到分子量分布均匀的糊精溶液,最后通过冷冻干燥得到腹膜透析多糖终产品。在工艺前期研究中,酸水解淀粉制备腹膜透析多糖原料易造成氯化物残留,为了解决此问题,本论文对比研究了透析、离子交换、超滤等工艺对除去氯化物效果的影响,并把氯化物降低到50ppm的标准水平;对多糖质量研究方面,如多糖纯度测定,本文对比研究了定量核磁法及比旋度法,并建立了多糖纯度测定方法,验证其方法可行性;对腹膜透析液中金属离子含量测定,本文对比研究了传统的滴定方法及原子吸收法;对多糖分子量分布测定,对比研究了单标校正及宽标校正法对测定结果影响。

关键词：腹膜透析液终末期肾病淀粉水解超滤凝胶渗透色谱

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腹膜透析液微生物培养病原学分析

现代检验医学杂志 2016年第6期31卷 92-94,97页

作者：吴友伟石红刘万静答嵘西安交通大学第一附属医院检验科

目的：回顾性分析腹膜透析液标本病原菌种类与药敏试验结果，了解腹膜透析相关感染病原菌的分布与耐药性。方法收集分析西安交通大学医学院第一附属医院2012年11月～2016年3月肾内科住院及门诊患者腹透液标本中分离培养阳性结果的病原... 详细信息

目的：回顾性分析腹膜透析液标本病原菌种类与药敏试验结果，了解腹膜透析相关感染病原菌的分布与耐药性。方法收集分析西安交通大学医学院第一附属医院2012年11月～2016年3月肾内科住院及门诊患者腹透液标本中分离培养阳性结果的病原菌种类与药敏试验结果。所有菌株均采用全自动微生物分析仪进行鉴定，并检测其对抗生素的敏感性。用 WHONET5.6软件进行数据统计分析。结果研究中共包含菌株309株，其中非重复分离菌株206株。革兰阳性细菌174株（84.47％），革兰阴性细菌28株（13.59％），真菌4株（1.94％）。革兰阳性细菌主要为葡萄球菌属、肠球菌属与链球菌属细菌，其中表皮葡萄球菌最为常见。革兰阴性细菌中大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌最为常见。真菌均为念珠菌。分离菌株中革兰阳性细菌与革兰阴性杆菌均有不同程度的耐药现象，葡萄球菌仅对利奈唑胺与万古霉素敏感率为100％，大肠埃希菌仅对美罗培南、亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦敏感率为100％。结论腹膜透析相关感染以革兰阳性细菌为主，表皮葡萄球菌为最常见的分离菌株。多重耐药现象存在广泛，提示临床合理应用抗生素至关重要。

关键词：腹膜透析液病原菌分布药敏试验

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腹膜透析液微粒控制工艺研究

黑龙江医药 1996年第4期9卷 206-207页

作者：付胜良黑龙江省医药工业研究所

腹膜透析疗法是抢救急性肾功衰竭和可析性药物中毒的有效措施,也是维持慢性肾功衰竭机体代谢的主要方法,由于其对体液的内环境影响较少,也不会出现如血液透析疗法不当引发的低血压缺血性残余肾单位损害,透析效率高,价格经济,因而临床应... 详细信息

腹膜透析疗法是抢救急性肾功衰竭和可析性药物中毒的有效措施,也是维持慢性肾功衰竭机体代谢的主要方法,由于其对体液的内环境影响较少,也不会出现如血液透析疗法不当引发的低血压缺血性残余肾单位损害,透析效率高,价格经济,因而临床应用日益广泛。

关键词：腹膜透析液微粒工艺