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河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 649-659页

作者：李思远付新成袁雪松毛立蔡旭航孙心如黄金谢玲玲王府周华张琪李基棕李彬西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095 江苏大学生命科学学院食品与生物工程学院镇江212013 河北省廊坊市农业农村局廊坊065000 贵州省种畜禽种质测定中心贵阳550018 黔西市动物疫病预防控制中心黔西551500

牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还... 详细信息

牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。

关键词：病毒性腹泻牛冠状病毒流行病学调查腹泻病原

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宠物园犬腹泻病原的分子鉴定分析

中国兽医杂志 2018年第7期54卷 59-61页

作者：张学勇简莹娜李秀萍王戈平蔡其刚王光华马利青青海大学畜牧兽医科学院省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室青海西宁810016 青海省畜牧兽医科学院青海西宁810016

通过对西宁地区宠物园18例犬腹泻病直肠粪便拭子采样,进行病原的DNA(RNA)基因组的提取,运用PCR进行分子鉴定分析,确诊引起临床症状的主要病原,以期为临床上有效防治犬腹泻提供参考。结果表明,18例样本均为犬细小病毒阳性,犬瘟热病毒阴性... 详细信息

通过对西宁地区宠物园18例犬腹泻病直肠粪便拭子采样,进行病原的DNA(RNA)基因组的提取,运用PCR进行分子鉴定分析,确诊引起临床症状的主要病原,以期为临床上有效防治犬腹泻提供参考。结果表明,18例样本均为犬细小病毒阳性,犬瘟热病毒阴性; 4例为隐孢子虫阳性,均为犬隐孢子虫(Cryptosporidium canis); 6例为贾第鞭毛虫阳性,基因型包括Giardia intestinalis assemblage B、C和D。这个宠物园的18只患犬主要是病原感染引起的腹泻,包括病毒性感染(100. 0%)和寄生虫性感染(44. 4%),可见犬只均为带毒带虫的隐性感染状态。经过分子鉴定病原后,针对性地对病毒性和寄生虫性病原,合理采用对症治疗、对因治疗和辅助支持治疗方法进行全面有效的救治预防。

关键词：犬腹泻病原分子鉴定分析

猪、禽和牛重要腹泻病原三种多重荧光PCR检测方法的建立与应用

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猪、禽和牛重要腹泻病原三种多重荧光PCR检测方法的建立与应用

作者：赵亮西藏农牧学院

学位级别：硕士

猪、牛和禽类作为重要经济动物,满足了居民对多样畜产品的消费需求。国内畜牧业迅猛发展,规模养殖场形成以畜禽生产为核心主体,规模化水平快速提升的同时,动物疫病也频发。畜禽腹泻病是养殖过程中的常见疾病,发病率高,对畜牧业经济活动... 详细信息

猪、牛和禽类作为重要经济动物,满足了居民对多样畜产品的消费需求。国内畜牧业迅猛发展,规模养殖场形成以畜禽生产为核心主体,规模化水平快速提升的同时,动物疫病也频发。畜禽腹泻病是养殖过程中的常见疾病,发病率高,对畜牧业经济活动和畜产品生产秩序构成极大威胁。由于能感染畜禽的腹泻病原种类众多,对于引起猪腹泻病的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性肠胃炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCo V),和引起禽腹泻病的沙门氏菌(Salmonella,SE)、大肠杆菌(Escherichia coli,***)和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP),以及引起牛腹泻病的牛星状病毒(bovine astrovirus,BAst V)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)这9种病原在养殖和外贸过程中具有危害性,且对应的宿主发病表现相似,均以腹泻为主要临床症状,混合感染现象时有发生,防治成为困扰畜禽养殖的一大难题。因此,建立一种快速、准确、高效、灵敏度高的病原联合诊断方法,对畜禽腹泻病原的快速检测和疫病防控具有重要意义。本研究以这9种病原作为研究对象,拟分别建立PEDV、TGEV和PDCo V三重荧光PCR方法,禽沙门氏菌、大肠杆菌和产气荚膜梭菌三重荧光PCR方法,BAst V、BVDV和IBRV三重荧光PCR方法。分别对这三种方法进行扩增程序和反应条件进行优化,将构建的方法应用于临床样品检验,并对比普通PCR方法,同时分析病原感染情况,为疫病的防控提供参考。研究结果如下:***、TGEV和PDCo V三重荧光PCR方法的建立与应用为建立PEDV、TGEV和PDCo V的三荧光PCR鉴别检测方法,试验针对PEDV ORF3基因、TGEV N基因、PDCo V ORF1ab基因保守型序列分别设计特异性引物和探针,并优化PCR扩增程序和反应条件,应用该方法对临床样品进行检测。结果显示:该方法与猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)以及猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)等无交叉反应,具有较高特异性;PEDV、TGEV和PDCo V最低检测限度(limits of detection,LOD)均达199 copies/μL,该方法的组内、组间重复性试验变异系数(CV)值均小于3%,重复性较好。应用该方法检测132份临床样品,PEDV、TGEV和PDCo V的阳性感染率分别为6.82%、0.76%、0,检验结果与普通PCR一致。2.禽沙门氏菌、大肠杆菌和产气荚膜梭菌三重荧光PCR方法的建立与应用为建立禽沙门氏菌、大肠杆菌及产气荚膜梭菌的三重荧光PCR鉴别检测方法,试验针对沙门氏菌inv A、大肠杆菌pho A、产气荚膜梭菌plc基因序列分别设计特异性引物和探针,并优化PCR扩增程序和反应条件,应用该方法对临床样品进行检测。结果显示:该方法与巴氏杆菌、新城疫病毒和鸭疫里默氏杆菌等无交叉反应,具有较高特异性;沙门氏菌、大肠杆菌和产气荚膜梭菌LOD均达66.9 copies/μL,相比检测沙门氏菌、大肠杆菌及产气荚膜梭菌的普通PCR的敏感性分别高100倍、1000倍和1000倍,具有更高敏感性;组内和组间CV值均低于3.85%,表明重复性良好;通过对80份临床样品和已鉴定的23份菌株进行检测,显示该检测方法与普通PCR和测序结果符合率为100%。*** V、BVDV和IBRV三重荧光PCR方法的建立与应用为建立BAst V、BVDV和IBRV的快速荧光检测方法,本研究针对BAst V基因组ORF1a基因、BVDV基因组多聚蛋白基因和IBRV基因组g B基因的保守区域各设计特异性引物和探针,经扩增程序和反应条件优化,进行特异性、敏感性和重复性试验,应用该方法对临床样品进行检测。结果显示:该方法可特异性扩增BAst V、BVDV和IBRV核酸,与牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)、牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)和牛巴氏杆菌(Pasteurella,Pm)等病原无交叉反应,特异性较强;对BAst V、BVDV和IBRV的LOD均为305 copies/μL,敏感性较高;BAst V

关键词：猪牛禽腹泻病原多重荧光PCR

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羔羊腹泻病原的研究进展

羔羊腹泻病原的研究进展

2017年全国养羊生产与学术研讨会暨养羊学分会第七次全国会员代表大会

作者：张璐李静刘珍珍陈凯丽宁长申张龙现菅复春河南农业大学牧医工程学院

引言我国养羊业是畜牧业的重要组成部分,近年来,我国养羊业取得了较快的发展,随着产业结构调整步伐的加快,养羊业比重不断增加,已成为推动我国农村经济发展的重要产业。羊肉是我国的肉品来源之一,我国在世界上是第一大羊肉生产国,约占... 详细信息

引言我国养羊业是畜牧业的重要组成部分,近年来,我国养羊业取得了较快的发展,随着产业结构调整步伐的加快,养羊业比重不断增加,已成为推动我国农村经济发展的重要产业。羊肉是我国的肉品来源之一,我国在世界上是第一大羊肉生产国,约占世界羊肉总产量的28.7%。故加快养羊业的发展,具有十分重要的意义和作用。然而,羊传染病、寄生虫病和普通病已经严重制约我国养羊业的健康发展,部分人畜共患性羊传染病原已经严重威胁公共

关键词：羔羊腹泻病原病毒种类寄生虫混合感染

来源： cnki会议评论

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西藏牦牛腹泻病原菌的分离鉴定

现代畜牧科技 2023年第8期 46-48页

作者：苏中华西藏自治区动物疫病预防控制中心西藏拉萨850000

为掌握引起西藏牦牛腹泻的主要细菌性病原,从西藏拉萨、林芝、山南等地区采集牦牛腹泻粪便样品进行细菌分离鉴定,分离出大肠杆菌328株、屎肠球菌61株、沙门氏菌17株、产气荚膜梭菌9株、粪肠球菌6株、芽孢杆菌3株。大肠杆菌、屎肠球菌和... 详细信息

为掌握引起西藏牦牛腹泻的主要细菌性病原,从西藏拉萨、林芝、山南等地区采集牦牛腹泻粪便样品进行细菌分离鉴定,分离出大肠杆菌328株、屎肠球菌61株、沙门氏菌17株、产气荚膜梭菌9株、粪肠球菌6株、芽孢杆菌3株。大肠杆菌、屎肠球菌和沙门氏菌在西藏牦牛腹泻症中最常见,产气荚膜梭菌数量也相对较多,应引起重视,为西藏牦牛腹泻症的防控和治疗提供参考依据。

关键词：西藏牦牛腹泻病原大肠杆菌屎肠球菌沙门氏菌

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一起牦牛腹泻病的PCR病原学诊断

畜禽业 2023年第1期34卷 64-66页

作者：白玛泽仁秦泸康罗思富肖晨冬四川省甘孜藏族自治州得荣县农牧局四川得荣627950

四川省甘孜藏族自治州理塘县某牧民家的1~3月龄犊牦牛发现腹泻为主症的疾病,传播极快,为查明发病原因,采集了犊牦牛的腹泻粪便样本11份,先用酚-氯仿法和Trizol法提取腹泻粪便的总DNA和RNA,然后用牛冠状病毒(BCoV)、牛轮状病毒(BRV)、牛... 详细信息

四川省甘孜藏族自治州理塘县某牧民家的1~3月龄犊牦牛发现腹泻为主症的疾病,传播极快,为查明发病原因,采集了犊牦牛的腹泻粪便样本11份,先用酚-氯仿法和Trizol法提取腹泻粪便的总DNA和RNA,然后用牛冠状病毒(BCoV)、牛轮状病毒(BRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)、沙门氏菌(Salmonella)和安氏隐孢子虫(***)特异的PCR方法进行检测。结果牛轮状病毒检出率为72.7%(8/11),其余病原检测均为阴性。结合临床,明确了该病例中的犊牦牛腹泻主要由牛轮状病毒(BRV)感染引起,为犊牦牛腹泻疾病的针对性防控提供了依据。

关键词：犊牦牛腹泻腹泻病原 PCR检测