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去细胞化兔腱骨界面生物支架的制备与性能评价

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去细胞化兔腱骨界面生物支架的制备与性能评价

作者：迪力胡玛尔·艾力中南大学

学位级别：硕士

目的:1.制备具有完整纤维软骨移行区细胞外基质(extracellular matrix,ECM)微环境的兔去细胞化腱骨界面生物支架(decellularized tendonfibrocartilage-bone composites,d TFBC);2.检测兔d TFBC的理化性质,力学性能是否较未经去细胞化处理的兔腱骨界面生物支架(tendon-fibrocartilage-bone composites,TFBC)改善。方法:1.将新西兰大白兔作为实验动物,获取其肌腱-纤维软骨-骨复合物;2.通过将反复冻融与酶消化相结合,制备兔d TFBC;3.通过HE染色、Masson染色及番红O-固绿染色进行组织学观察、扫描电镜、DNA含量测定、糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)及胶原含量,测定评估兔d TFBC的理化性质;4.通过原子力显微镜检测兔d TFBC的杨氏模量,探讨力学形变能力及力学性能。5.所有数据使用SPSS统计分析软件及Graph Pad Prism数据图形处理软件进行绘图可视化分析。结果:1.我们成功获取了兔肌腱-纤维软骨-骨复合物,并成功制备d TFBC;2.我们所制备的兔d TFBC与兔TFBC相比,在HE染色、Masson染色及番红O-固绿染色中均未见明显细胞及细胞核残留,肌腱区DNA含量显著下降(P0.05)、胶原纤维排列有序,腱骨界面过渡良好,ECM微环境状态符合预期构想,但软骨区GAG含量显著下降(P腱骨界面生物支架使用。图18幅,表1个,参考文献59篇

关键词：组织工程肩袖损伤腱骨界面去细胞化兔腱骨界面生物支架细胞外基质微环境

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腱骨界面的机械刺激与生物力学分析

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第6期 50-56页

作者：董丞泽梁军波绍兴文理学院医学院浙江绍兴312000 浙江省台州医院骨科浙江台州317000

腱骨界面是肌肉骨骼系统的重要组成部分,它是桥接肌腱和骨的复杂纤维软骨组织,可以帮助肌肉收缩力有效地转移到骨骼,实现肌肉和骨骼之间的有效负荷转移,从而引起关节运动。腱骨愈合是运动医学中的常见问题。为了探索腱骨愈合的机制,有... 详细信息

腱骨界面是肌肉骨骼系统的重要组成部分,它是桥接肌腱和骨的复杂纤维软骨组织,可以帮助肌肉收缩力有效地转移到骨骼,实现肌肉和骨骼之间的有效负荷转移,从而引起关节运动。腱骨愈合是运动医学中的常见问题。为了探索腱骨愈合的机制,有许多研究者在动物模型中追溯腱骨界面形成的细胞学来源,并探索影响腱骨界面形成和愈合的机械负荷因素。在这篇综述中,我们重点介绍了与腱骨界面形成、愈合相关的力学生物学相关的新兴领域,以及影响这一重要过渡组织形成和适应的机械负荷特点和新兴的信号通路。

关键词：腱骨界面生物力学愈合修复治疗

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关节滑液对重建韧带腱-骨愈合的影响

中国矫形外科杂志 2010年第11期18卷 932-936页

作者：周宪华孙磊解放军第88医院全军骨科中心山东泰安271000

[目的]观察关节滑液对关节内韧带重建术后腱-骨愈合的影响。[方法]6个月龄健康雌性新西兰大白兔40只,体重2.5～3.5kg/只,随机分为4组。采用自体带血供半腱肌转移建立胫骨隧道-肌腱界面模型。右侧胫骨隧道不与关节腔相通,无关节滑液浸入... 详细信息

[目的]观察关节滑液对关节内韧带重建术后腱-骨愈合的影响。[方法]6个月龄健康雌性新西兰大白兔40只,体重2.5～3.5kg/只,随机分为4组。采用自体带血供半腱肌转移建立胫骨隧道-肌腱界面模型。右侧胫骨隧道不与关节腔相通,无关节滑液浸入;左侧胫骨隧道与关节腔相通,有关节滑液浸入。1组于术后8周取材行生物力学测试,其余3组分别于术后2、4、8周取材,行HE、Masson染色,观察组织形态学改变及界面组织愈合情况。[结果]术后2周,无关节滑液组和有关节滑液组腱骨界面无显著差异,被肉芽组织填充。术后4周,无关节滑液组成纤维细胞和成软骨细胞增生明显,胶原纤维合成明显增多,明显优于有关节滑液组。术后8周,有关节滑液组腱骨界面由结缔组织连接,但连接仍不够紧密,胶原纤维大量合成,不规则排列。无关节滑液组腱骨界面连接紧密,胶原纤维致密,排列规则。界面组织细胞计数比较结果显示各时间组和各组内时间段无关节滑液组与有关节滑液组比较均有显著差异(P腱骨愈合有负面影响,不利于重建韧带的腱骨愈合,提示阻止关节滑液进入骨隧道可能对改进前交叉韧带重建的临床效果有益。

关键词：关节滑液带血供半腱肌韧带重建腱骨界面腱骨愈合

体外冲击波促进兔ACL重建后腱骨愈合的实验研究

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中国矫形外科杂志 2008年第4期16卷 292-295页

作者：石斌刘玉杰李志超邬晓勇朱娟丽眭翔张锦佳陈琳解放军总医院骨科北京100853 解放军总医院骨科研究所北京100853

[目的]观察采用体外冲击波(extracorporeal shock waves,ESW)治疗对ACL重建后腱骨愈合的影响。[方法]采用趾长伸肌肌腱建立兔ACL重建动物模型,2～3个月龄雌雄不限健康新西兰大白兔18只随机分为2组,ESW组ACL重建术后24h给予冲击波治疗,... 详细信息

[目的]观察采用体外冲击波(extracorporeal shock waves,ESW)治疗对ACL重建后腱骨愈合的影响。[方法]采用趾长伸肌肌腱建立兔ACL重建动物模型,2～3个月龄雌雄不限健康新西兰大白兔18只随机分为2组,ESW组ACL重建术后24h给予冲击波治疗,对照组ACL重建术后不给予冲击波处理,术后2、4、8周处死动物取标本做HE和Masson三色染色观察组织愈合病理学改变,血管墨汁灌注观察愈合组织新生血管含量。[结果]ESW组术后4周腱骨界面成纤维细胞和成软骨细胞增生活跃,胶原纤维合成明显增多、排列规则。术后8周腱骨界面由致密结缔组织连接,胶原纤维大量合成,呈垂直纵向规则排列,部分区域出现胶原纤维-纤维软骨组织-骨组织的移行带改变,形成类似韧带直接止点样结构。腱骨界面组织愈合较对照组迅速。术后4周和8周腱骨界面新生血管的含量ESW组显著高于对照组(P=0.028,P=0.008)。[结论]体外冲击波治疗可显著促进兔ACL重建后早期腱骨愈合。

关键词：体外冲击波(ESW) 腱骨界面腱骨愈合血管墨汁灌注

rhBMP-2对兔肩袖损伤重建术后腱-骨愈合的组织学及生物力学研究

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中国矫形外科杂志 2010年第10期18卷 828-831页

作者：付国建靳安民张力李森王鹏程许勇赵卫东南方医科大学附属珠江医院骨科中心广州510282 南方医科大学生物力学实验室广州510515

[目的]评价重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)对兔肩袖损伤重建术后的修复效果。[方法]48只8个月龄雄性新西兰大白兔双侧冈上肌腱行急性损伤后重建其在肱骨大结节上的止点,术后随机分为3组,每组16只,32侧,实验组在腱骨界面注射以纤维蛋白... 详细信息

[目的]评价重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)对兔肩袖损伤重建术后的修复效果。[方法]48只8个月龄雄性新西兰大白兔双侧冈上肌腱行急性损伤后重建其在肱骨大结节上的止点,术后随机分为3组,每组16只,32侧,实验组在腱骨界面注射以纤维蛋白胶为载体的rhBMP-2;实验对照组仅填充纤维蛋白胶;空白对照组术后不给予任何干预。于术后8周取出各组8侧肩袖标本行组织形态学检查,分别于术后2、4、8周分批随机取出各组8侧肩袖标本行生物力学测试。[结果]组织学分析表明,术后8周实验组腱骨界面出现有明显的Sharpey′s纤维连接,出现类似直接止点的四层结构。而实验对照组及空白对照组腱骨界面以结缔组织为主,出现部分Sharpey′s纤维结构及新骨形成。生物力学测试显示,术后各组腱骨界面的抗拉强度及刚度均随着康复时间的延长而不断增强,而且各个时间点实验组腱骨界面的抗拉强度及刚度均显著高于实验对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P腱骨界面的抗拉强度及刚度,促进腱骨界面形成类似直接止点的特有结构,可很好的修复肩袖损伤。

关键词：骨形态发生蛋白腱骨界面肩袖损伤生物力学组织学

促进膝关节前交叉韧带重建术后腱骨愈合方法的研究进展

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中国现代医学杂志 2021年第23期31卷 49-56页

作者：辜刘伟周霖庹伟刘德森薛晓凯曹洪十堰市人民医院创伤骨科湖北十堰442000 十堰市人民医院显微骨科湖北十堰442000 十堰市人民医院骨关节科湖北十堰442000 十堰市人民医院创伤中心湖北十堰442000

前交叉韧带是维持膝关节稳定性的重要结构之一。目前,前交叉韧带损伤的发病率越来越高,前交叉韧带重建术是其治疗的首要手段,术后腱骨界面的良好生长是患者早期康复及预后功能恢复的关键。该文综述近年来国内外促进腱骨愈合因素的相关研... 详细信息

前交叉韧带是维持膝关节稳定性的重要结构之一。目前,前交叉韧带损伤的发病率越来越高,前交叉韧带重建术是其治疗的首要手段,术后腱骨界面的良好生长是患者早期康复及预后功能恢复的关键。该文综述近年来国内外促进腱骨愈合因素的相关研究,发现如骨膜覆盖、生长因子、富血小板血浆和中药等治疗都取得了不错的效果,但很多技术仍然处于动物实验阶段,且其具体作用机制、作用时机及用法用量等都没有明确的标准。

关键词：前交叉韧带前交叉韧带重建术腱骨愈合腱骨界面

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对膝关节前交叉韧带术后腱骨愈合的研究进展

中国现代医学杂志 2021年

作者：辜刘伟周霖庹伟刘德森薛晓凯曹洪湖北省十堰市人民医院创伤骨科湖北省十堰市人民医院显微骨科湖北省十堰市人民医院骨关节科湖北省十堰市人民医院创伤中心

前交叉韧带(ACL)是维持膝关节稳定性的重要结构之一，而目前，ACL损伤的发病率越来越高，ACL重建术是治疗ACL损伤的首要手段，且术后腱骨界面的良好生长是患者早期康复及预后功能恢复的关键，对近年来国内外对促进腱骨愈合因素的相关研... 详细信息

前交叉韧带(ACL)是维持膝关节稳定性的重要结构之一，而目前，ACL损伤的发病率越来越高，ACL重建术是治疗ACL损伤的首要手段，且术后腱骨界面的良好生长是患者早期康复及预后功能恢复的关键，对近年来国内外对促进腱骨愈合因素的相关研究进行整理和分析，发现有很多促进腱骨愈合的研究（如骨膜覆盖、生长因子、富血小板血浆和中药等）都取得了不错的效果，但在很多技术任然处于动物实验阶段，且具体作用机制、作用时机及用法用量等都未有一个明确的标准。

关键词：前交叉韧带重建术腱骨愈合腱骨界面

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关节滑液对重建韧带腱—骨愈合的影响

关节滑液对重建韧带腱—骨愈合的影响

作者：周宪华泰山医学院

学位级别：硕士

目的比较有关节滑液(synovialfluid SF)与无关节滑液状态下腱—骨愈合的组织形态与生物力学,探讨关节滑液对腱—骨愈合的影响,为改进交叉韧带重建手术方式提供理论依据。方法 1.实验处理以新西兰兔40只(封闭群)为实验动物,随机分为4... 详细信息

目的比较有关节滑液(synovialfluid SF)与无关节滑液状态下腱—骨愈合的组织形态与生物力学,探讨关节滑液对腱—骨愈合的影响,为改进交叉韧带重建手术方式提供理论依据。方法 1.实验处理以新西兰兔40只(封闭群)为实验动物,随机分为4组,每组10只。取其自体带血供半腱肌为移植物,于胫骨上段作韧带重建。双膝均接受手术,左膝为有关节滑液组,右膝为无关节滑液组,术后4组动物分别笼养2、4、8、8周。 2.观察指标 2.1组织学观察第1、2、3组笼养达预定时间后处死,取胫骨上段骨髓道标本,10%多聚甲醛固定、10% EDTA脱钙、包埋、切片后HE染色及Masson特殊组织化学染色,观察界面组织形态学变化。 2.2界面细胞数分析第1、2、3组HE染色切片IPP细胞计数观察成纤维细胞密度及组织学情况 2.3生物力学测试第4组于术后g周处死,取标本用858Mini BionixⅡ型生物力学测试机测量最大拉力负荷、断点统计及拉力位移曲线。 3.统计学分析采用SPSS 12.0软件,进行单因素方差分析、配对t检验等统计分析。结果 1.术后对骨髓道界面组织切片进行HE染色、Masson染色的观察对比结果各时间点组无关节滑液组与有关节滑液组界面组织学表现有差别(P腱骨愈合相对于同时间组内有关节滑液组组织成熟度好。 2.HE染色组织切片成纤维细胞密度各时间段无关节滑液组腱骨界面HE染色组织切片成纤维细胞密度均高于有关节滑液组,两组比较有显著统计学差异(P腱-骨界面。 2.无关节滑液的腱骨愈合生物力学性能优于有关节滑液的腱骨愈合。 3.无关节滑液的腱骨愈合组织结构成熟度优于有关节滑液环境下的腱骨愈合。 4.关节滑液干扰、抑制腱骨愈合。 5.ACL重建时,如能避免关节滑液渗入骨髓道,有可能改进腱骨愈合,提高手术效果。

关键词：关节滑液自体带血供半腿肌韧带重建腱骨界面腱骨愈合

肌筋膜补片移植治疗巨大肩袖撕裂的大鼠模型实验研究

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肌筋膜补片移植治疗巨大肩袖撕裂的大鼠模型实验研究

作者：印伟湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨肌筋膜补片移植治疗巨大肩袖撕裂术后腱骨界面最大载荷,成纤维细胞及细胞外基质等成分变化,肩峰下滑囊中IL-1β、IL-6和TNF-α三种细胞因子变化。方法:8周龄SPF级雄性SD大鼠50只,其中5只作为正常组,15只行单侧单纯冈上肌腱离断... 详细信息

目的:探讨肌筋膜补片移植治疗巨大肩袖撕裂术后腱骨界面最大载荷,成纤维细胞及细胞外基质等成分变化,肩峰下滑囊中IL-1β、IL-6和TNF-α三种细胞因子变化。方法:8周龄SPF级雄性SD大鼠50只,其中5只作为正常组,15只行单侧单纯冈上肌腱离断术,组内再按2周、4周、6周时间顺序分为3小组,每组5只大鼠,余下大鼠分为肌筋膜补片移植组与单纯缝合组,每组15只大鼠,再按干预后2周、4周、6周分为3小组,每组5只大鼠。造模成功后1周对直接缝合组及补片组行直接缝合及肌筋膜补片移植手术,手术干预后2周、4周、6周,取大鼠肱骨上端至冈上肌腱肌腹处组织作为检测标本进行病理组织学观察及生物力学检测,完整取出大鼠肩峰下滑囊行ELASA检测,观察IL-1β、IL-6和TNF-α三种细胞因子在SAB中变化情况。结果:单纯冈上肌腱离断组无1例冈上肌腱自愈,与正常组相比,补片缝合组干预后2周、4周、6周腱骨界面最大载荷均稍低于正常组,存在统计学意义(p腱骨界面最大载荷也低于正常组,差异有显著统计学意义(p腱骨界面最大载荷均明显优于补片缝合组,有统计学意义(p腱骨界面仍存在间隙,炎症细胞较补片组多;4周后两组仍有炎症细胞浸润,但较前明显减少,两组间无明显差异,腱骨界面可见排列紊乱的成纤维细胞生成,补片缝合组腱腱界面可见大量成纤维细胞增生及部分排列不规整的肌纤维,肌纤维间隙可见细胞外基质生成,腱骨界面成纤维细胞及细胞外基质生成较直接缝合组稍多;6周时,实验组腱骨及腱腱界面紧密结合,无间隙,腱骨界面成纤维细胞排列较前整齐,腱腱界面的肌纤维也较前排列规整,组织间隙存在大量细胞外基质,直接缝合组腱骨界面成纤维细胞较前排列整齐,部分肌纤维生成,组织间隙被细胞外基质填充。与正常组相比,单纯离断组、直接缝合组及补片缝合组干预后2周、4周时肩峰下滑囊IL-1β、IL-6和TNF-α三种炎症因子的表达均明显增高(p0.05)。结论:肌筋膜补片移植治疗巨大肩袖撕裂能降低腱骨间的张力,促进腱骨界面愈合,促进细胞增殖分化及细胞外基质分泌,诱导胶原纤维形成,从而提供早期稳定性。补片移植组与单纯缝合组均能降低肩峰下滑囊中IL-1β、IL-6和TNF-α表达,但补片移植组三种炎症因子浓度下降速度较直接缝合组更快。

关键词：肩袖巨大撕裂补片移植腱骨界面肩峰下滑囊,细胞因子