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饲粮中添加腐殖酸钠对鼠伤寒沙门菌感染肉鸡肝组织炎症和抗氧化能力的影响

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 629-639页

作者：王栋柳可欣何炎峻邓守翔刘云马卫明山东农业大学动物科技学院泰安271000 东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150030

旨在探究饲粮中添加腐殖酸钠(sodium humate,HNa)对鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium,S.Typhimurium)感染肉鸡肝组织炎症和抗氧化能力的影响。选取健康的1日龄雄性爱拔益加(AA)肉鸡320只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复8只鸡:对... 详细信息

旨在探究饲粮中添加腐殖酸钠(sodium humate,HNa)对鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium,S.Typhimurium)感染肉鸡肝组织炎症和抗氧化能力的影响。选取健康的1日龄雄性爱拔益加(AA)肉鸡320只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复8只鸡:对照组(CON组,基础饲粮)、模型组(ST组,基础饲粮)、低剂量HNa组(L-HNa组,基础饲粮+0.2 g·kg^(-1) HNa)、中剂量HNa组(M-HNa组,基础饲粮+0.4 g·kg^(-1) HNa)、高剂量HNa组(H-HNa组,基础饲粮+0.6 g·kg^(-1) HNa)。在试验第22~24天,CON组肉鸡每天灌胃1 mL PBS,ST、L-HNa、M-HNa和H-HNa组肉鸡每天灌胃1 mL 3×10^(9) CFU·mL^(-1)的S.Typhimurium,试验周期24 d。结果显示:1)与ST组相比,饲粮中添加0.6 g·kg^(-1)的HNa显著提高了肉鸡的平均日增重(P<0.05)。2)与CON组相比,ST组肉鸡肝组织表现为大量炎性细胞浸润,肝脏指数增加,饲粮中添加不同浓度的HNa均缓解了肝组织的病理学损伤(P<0.05)。3)ST组肉鸡血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)的活性显著高于CON组(P<0.05);相较于ST组,L-HNa、M-HNa和H-HNa组肉鸡血清中AKP、ALT和AST的活性显著降低(P<0.05)。4)与CON组相比,ST组肉鸡肝组织过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著降低,丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);饲粮中添加HNa缓解了S.Typhimurium感染对肉鸡肝组织抗氧化功能的损伤(P<0.05)。5)与ST组相比,饲粮中添加不同浓度的HNa显著降低了肉鸡肝组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-18、一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞分化抗原68(CD 68)的mRNA表达,显著增加了IL-10、精氨酸酶-1(ARG 1)和CD 163的mRNA表达(P<0.05)。6)与CON组相比,S.Typhimurium感染显著提高了肉鸡肝组织核因子κB(NF-κB p65)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)的蛋白表达,降低了核因子κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白表达(P<0.05);饲粮中添加HNa抑制了S.Typhimurium感染引起的肉鸡肝组织NF-κB和NLRP3信号通路的激活。综上所述,饲粮中添加HNa可以通过降低肝组织炎症反应、提高肝抗氧化功能、抑制肝NF-κB和NLRP3信号通路的激活缓解S.Typhimurium感染引起的肉鸡肝损伤。

关键词：腐殖酸钠鼠伤寒沙门菌肝组织炎症抗氧化肉鸡

腐殖酸钠对肠产毒素性大肠杆菌K88感染小鼠肠道损伤的保护作用

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动物营养学报 2022年第6期34卷 3991-4002页

作者：王栋何炎峻柳可欣邓守翔黄思琪刘云东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150030

本研究旨在探究腐殖酸钠(HNa)对肠产毒素性大肠杆菌K88(ETEC K88)感染小鼠肠道损伤的保护作用。选取健康的无特定病原体(SPF)级雌性昆明小鼠30只,随机分为3组,对照组、模型组(ETEC组)、HNa干预组(ETEC+HNa组),每组10只。对照组和ETEC组... 详细信息

本研究旨在探究腐殖酸钠(HNa)对肠产毒素性大肠杆菌K88(ETEC K88)感染小鼠肠道损伤的保护作用。选取健康的无特定病原体(SPF)级雌性昆明小鼠30只,随机分为3组,对照组、模型组(ETEC组)、HNa干预组(ETEC+HNa组),每组10只。对照组和ETEC组小鼠每天灌胃0.2 mL生理盐水,ETEC+HNa组小鼠每天灌胃0.2 mL 5%HNa;试验第8天,ETEC和ETEC+HNa组小鼠灌胃0.2 mL 5×10^(10)CFU/mL ETEC K88。试验期10 d。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察空肠病理变化,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清炎症因子含量,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测肠道屏障相关蛋白的mRNA表达,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测空肠紧密连接、黏附连接、肠道组织炎性小体和细胞凋亡相关蛋白的表达。结果表明:1)与对照组和ETEC+HNa组,ETEC组小鼠体重及空肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度显著降低(P<0.05)。2)与对照组和ETEC+HNa组相比,ETEC组小鼠血液白细胞、单核细胞、粒细胞数量及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-Lac)含量显著升高(P<0.05),血清白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量显著降低(P<0.05)。3)与对照组和ETEC+HNa组相比,ETEC组空肠闭合蛋白(Occludin)、封闭蛋白-1(Claudin-1)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和黏蛋白-2(MUC-2)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),空肠Claudin-1、ZO-1、E-cadherin和MUC-2的蛋白表达量也显著降低(P<0.05)。4)与对照组和ETEC+HNa组相比,ETEC组空肠核因子-κB(NF-κB)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达量显著升高(P<0.05),空肠B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的蛋白表达量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,ETEC组粪便大肠杆菌数量显著增加(P<0.05),粪便乳酸菌数量则显著降低(P<0.05)。与ETEC组相比,ETEC+HNa组粪便大肠杆菌显著降低(P<0.05)。由此可见,HNa可以通过抑制肠道组织炎性小体激活、肠道上皮细胞凋亡以及上调肠道屏障相关蛋白的表达缓解ETEC K88感染引起的肠道损伤。

关键词：腐殖酸钠肠产毒素性大肠杆菌K88 炎性小体肠道屏障小鼠

腐殖酸钠对白羽肉鸡营养物质表观消化率、粪便微生物及其代谢产物的影响

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畜牧兽医学报 2023年第12期54卷 5091-5100页

作者：李贞明余苗唐延天李袁飞刘志昌容庭马现永广东省农业科学院动物科学研究所、猪禽种业全国重点实验室农业部华南动物营养与饲料重点实验室、广东省畜禽育种与营养研究重点实验室、广东省畜禽肉品质量安全控制与评定工程技术研究中心广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心茂名525000 清远市弘顺农牧有限公司清远511500

旨在探究日粮添加腐殖酸钠对肉鸡营养物质表观消化率、粪便微生物数量及其代谢产物的影响。试验选取540只1日龄817白羽肉鸡,随机分为3组(每组6个重复,每个重复30只)。对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂含0.3%和0.5%腐殖酸钠的试验日粮... 详细信息

旨在探究日粮添加腐殖酸钠对肉鸡营养物质表观消化率、粪便微生物数量及其代谢产物的影响。试验选取540只1日龄817白羽肉鸡,随机分为3组(每组6个重复,每个重复30只)。对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂含0.3%和0.5%腐殖酸钠的试验日粮。试验为期42 d,试验结束前3 d,每个重复选取体重相近的2只肉鸡放入代谢笼,进行代谢试验。结果表明:1)与对照组相比,日粮添加0.5%的腐殖酸钠可显著提高肉鸡对粗蛋白、磷和灰分的表观消化率(P腐殖酸钠可显著提高肉鸡粪便中总菌和乳酸杆菌的数量,并降低大肠杆菌的数量(P腐殖酸钠可显著提高肉鸡粪便中普雷沃氏菌的数量(P腐殖酸钠可显著降低肉鸡粪便中氨态氮的含量,并提高乳酸的含量(P腐殖酸钠可显著降低肉鸡粪便中的对甲酚的含量(P腐殖酸钠可显著降低肉鸡粪便中酪胺、亚精胺、精胺和总生物胺的含量(P腐殖酸钠可显著降低肉鸡粪便中腐胺的含量(P腐殖酸钠可显著降低肉鸡粪便中酪胺和精胺的含量(P腐殖酸钠可提高肉鸡对营养物质的表观消化率,促进粪便中有益菌的生长与繁殖,提高粪便中乳酸的含量,抑制有害菌的生长与繁殖;进而降低粪便中氨态氮、对甲酚和生物胺等臭味物质的含量,达到源头减排的目的,且在本试验条件下添加0.5%的效果优于0.3%。

关键词：肉鸡腐殖酸钠表观消化率粪便微生物生物胺

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腐殖酸钠对南平建阳某建盏泥坯可塑性影响

非金属矿 2022年第6期45卷 44-45,49页

作者：卢舒舒赵靖张茂富黄美容刘克起福建林业职业技术学院交通工程系福建南平353011 苏州中材非金属矿工业设计研究院有限公司江苏苏州215151 南平武夷矿产资源发展有限公司福建南平353011

以福建南平建阳地区某建盏生产企业泥坯和腐殖酸钠为原料,考察腐殖酸钠添加量、泥坯陈腐时间对泥坯可塑性及建盏外观的影响。结果表明,当腐殖酸钠添加量达到3‰,陈腐时间为20 d时,泥坯可塑性指标达到最高,为161.55 cm·kg,同时建盏烧制... 详细信息

以福建南平建阳地区某建盏生产企业泥坯和腐殖酸钠为原料,考察腐殖酸钠添加量、泥坯陈腐时间对泥坯可塑性及建盏外观的影响。结果表明,当腐殖酸钠添加量达到3‰,陈腐时间为20 d时,泥坯可塑性指标达到最高,为161.55 cm·kg,同时建盏烧制外形更具复古美感。

关键词：泥坯腐殖酸钠建盏可塑性

联合使用腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡生长性能和肉品质的影响

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中国畜牧兽医 2023年第12期50卷 4908-4916页

作者：李贞明余苗刘志昌崔艺燕李袁飞容庭马现永广东省农业科学院动物科学研究所猪禽种业全国重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东省畜禽肉品质量安全控制与评定工程技术研究中心广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心茂名525000 清远市弘顺农牧有限公司清远511500

【目的】研究联合使用腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡生长性能和肉品质的影响。【方法】选取540只42日龄黄羽肉鸡,随机分为3组(每组6个重复,每个重复30只):对照组肉鸡饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.5%腐殖酸钠和酸化剂(0.5%组... 详细信息

【目的】研究联合使用腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡生长性能和肉品质的影响。【方法】选取540只42日龄黄羽肉鸡,随机分为3组(每组6个重复,每个重复30只):对照组肉鸡饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.5%腐殖酸钠和酸化剂(0.5%组)以及1%腐殖酸钠和酸化剂(1%组),其中腐殖酸钠和酸化剂由腐殖酸钠、柠檬酸钙和乳酸钙组成,比例是5∶4∶1。试验为期21 d,试验结束时,以重复为单位称取肉鸡的空腹重,测定肉鸡的生长性能;每个重复随机选取2只体重接近平均体重的肉鸡屠宰,测定肉鸡的屠宰性能和脏器系数;取两侧胸肌,测定肌肉抗氧化和肉品质指标。【结果】①与对照组和1%组相比,0.5%组黄羽肉鸡的终末体重(FW)、平均日增重(ADG)、胸肌率、脾脏指数、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和胸肌的pH 45 min显著提高,而料重比(F/G)、腹脂率、胸肌滴水损失和剪切力显著降低(P腐殖酸钠和酸化剂可显著提高黄羽肉鸡生长性能、屠宰性能和胸肌的抗氧化功能,并改善肉品质。

关键词：腐殖酸钠酸化剂黄羽肉鸡生长性能肉品质

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腐殖酸钠凝胶剂对大鼠皮肤创伤愈合的影响

腐殖酸钠凝胶剂对大鼠皮肤创伤愈合的影响

作者：尤振东东北农业大学

学位级别：硕士

皮肤创伤在兽医临床中是一种十分常见的疾病,皮肤出现创伤后,伤口部位血管破裂、血液渗出,可引发炎性反应甚至局部感染,严重者甚至出现毒血症、败血症等全身感染。研究表明腐殖酸钠具有抗菌、抗炎和促进伤口愈合等生物活性,但目前在兽... 详细信息

皮肤创伤在兽医临床中是一种十分常见的疾病,皮肤出现创伤后,伤口部位血管破裂、血液渗出,可引发炎性反应甚至局部感染,严重者甚至出现毒血症、败血症等全身感染。研究表明腐殖酸钠具有抗菌、抗炎和促进伤口愈合等生物活性,但目前在兽医临床上将腐殖酸钠制成凝胶剂用于创伤治疗还未见报道。本研究是将制备的腐殖酸钠凝胶剂用于大鼠皮肤创伤的治疗,并观察其对大鼠皮肤创伤愈合的治疗效果。本研究共分两部分:(一)以腐殖酸钠为主药,制备腐殖酸钠凝胶剂;(二)本实验选用24只健康SD雄性大鼠,在大鼠背部剪取直径1cm的圆形创面两个,相隔2 cm,剪取皮肤全层,深度达皮下筋膜层。随机分为空白对照组和腐殖酸钠凝胶剂组。连续观察大鼠创面愈合的状况,并通过不同时间点对创伤的肉芽组织进行HE染色,采用免疫组化技术检测创面组织中胶原蛋白沉积情况,应用实时荧光定量PCR技术,检测Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白以及与创伤愈合的相关细胞因子m RNA的表达情况。实验结果如下:所制备的腐殖酸钠凝胶剂为质地均匀,细腻的黑色腐殖酸钠凝胶剂。经动物皮肤刺激性测试,表明本研究制备的腐殖酸钠凝胶剂对皮肤无刺激性。将该自制凝胶用于大鼠创伤的治疗,证明腐殖酸钠凝胶剂可以保持创面润湿。通过对皮肤创面愈合率的计算,结果证明,在试验的第9和14天,腐殖酸钠凝胶剂组的创伤创面愈合率显著高于对照组(p腐殖酸钠凝胶剂能够加速皮肤创面的愈合。通过对创面组织HE染色,创伤后第7天,腐殖酸钠凝胶剂组相对于对照组肉芽组织中新生血管相对较多,创伤后第9天,腐殖酸钠凝胶剂组上皮化程度较高且部分已上皮化完全,大部分肉芽组织趋于成熟。免疫组织化学检测的结果显示,腐殖酸钠凝胶剂组Ⅰ型胶原蛋白表达含量在创伤后第7天、9天均高于空白对照组(P腐殖酸钠凝胶组Ⅲ型胶原蛋白表达量明显高于空白对照组(P腐殖酸钠凝胶剂组Ⅰ型胶原蛋白,Ⅲ型胶原蛋白,血管内皮生长因子,成纤维细胞生长因子,肝细胞生长因子以及转化生长因子的表达显著增加,表明腐殖酸钠凝胶剂能够提高皮肤愈合的相关生长因子的表达。综上所述:本研究成功制备了腐殖酸钠凝胶剂,该制剂对皮肤组织无刺激性。制备的腐殖酸钠凝胶剂可以促进大鼠皮肤创面的修复,加速创面愈合。并促进了皮肤Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子和转化生长因子等相关因子的表达。结果证明腐殖酸钠凝胶剂在治疗皮肤创伤愈合过程中具有良好的效果,为临床应用奠定理论基础。

关键词：创伤愈合腐殖酸钠凝胶剂胶原蛋白生长因子

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腐殖酸钠抑制CaCO3污垢的特性研究

腐殖酸钠抑制CaCO3污垢的特性研究

作者：滕秀军东北电力大学

学位级别：硕士

换热设备表面非常容易沉积污垢,污垢的出现会降低设备的换热能力,导致不必要的财产损失。本文选择CaCO污垢作为研究对象。CaCO析晶污垢在热力设备中最常见,也是最具代表性的污垢。为了更好地降低CaCO污垢沉积在换热表面产生的危害,较为... 详细信息

换热设备表面非常容易沉积污垢,污垢的出现会降低设备的换热能力,导致不必要的财产损失。本文选择CaCO污垢作为研究对象。CaCO析晶污垢在热力设备中最常见,也是最具代表性的污垢。为了更好地降低CaCO污垢沉积在换热表面产生的危害,较为经济的方法是在循环水中添加阻垢剂。腐殖酸钠具备较好的抑制CaCO污垢的特性,且无毒性、易生物降解,对生态环境零污染,合乎现阶段阻垢剂的发展趋势。本文通过实验、量子化学计算和分子动力学模拟的方法分析了腐殖酸钠对CaCO的阻垢特性。首先用p H位移法和电化学阻抗法证明了腐殖酸钠具备较好的阻垢特性。然后,通过试片称重试验探究了温度对于腐殖酸钠抑制碳酸钙污垢生长的特性。称重试验表明,腐殖酸钠的阻垢效率在0～100 mg/L的含量范畴内随浓度和温度的增加而升高,实验浓度值为100 mg/L时阻垢实际效果最好,实验温度为353K时阻垢效果最好。三种实验方法均证明腐殖酸钠对CaCO3垢具有良好的抑制效果。在实验的基础上,分子动力学模拟之前,通过量子化学计算的方法来对腐殖酸钠的分子结构进行计算分析。通过对腐殖酸钠的结构进行最优化计算,得到其电荷的分布、键长的几何匹配程度以及前线轨道能量,通过计算可以发现其对方解石中的Ca原子具有较好的分子结合能力,初步解释了腐殖酸钠的阻垢能力,并且为分子动力学模拟提供补充。实验无法清楚表述阻垢原理,为了更好地在分子水平上探寻腐殖酸钠的阻垢抑垢机理,本文选用分子动力学模拟的方法,研究腐殖酸钠与不同方解石晶面(110,104,1-10)的不同晶体结构(K,F,S)的吸附影响。首先模拟了无水情况下腐殖酸钠与方解石不同晶面的相互影响,分析了吸咐构形,官能团和结合能。对比不同生长晶面的结合能,可以发现不同晶面存有显著差别,腐殖酸钠与方解石(1-10)晶面结合能最强,次之是方解石(110)晶面,方解石(104)晶面较弱。为了更好地研究具备阻垢特性的腐殖酸钠基团,分析了腐殖酸钠和方解石钙原子的各个官能团氧分子的径向分布函数。根据模拟研究可以看到,腐殖酸钠分子结构的吸咐具体是因为分子结构链中的羧基和羟基中的O原子与方解石晶面的Ca原子成键作用。然后研究在有水分子存在的环境下腐殖酸钠与方解石晶面的具体效果,探究了不同温度和聚合度的腐殖酸钠在水分子存在下对方解石晶体的阻垢特性,并基于结合能、径向分布函数和腐殖酸钠驱替水分子的能力分析,揭示了其吸附机理。当温度升高时,结合能亦升高。当聚合度增大时,结合能伴随着聚合度的提高而升高。在径向分布函数层面,观察到在不同方解石晶面(110,104,1-10)的r=2?附近都是有非常明显的峰,而且不同晶面峰位置彼此之间相近。在三个方解石生长晶面上,峰值的大小的随温度升高而变大。在同样的温度下,腐殖酸钠对方解不同方解石晶面(110,104,1-10)的吸附随聚合度的提高而提升。最后研究了在有水分子存在情况下腐殖酸钠对游离的碳酸钙的作用。腐殖酸钠分子结构可以降低游离态碳酸钙在三个方解石晶面上的结合能,并且,对于游离态的碳酸钙第1个显著的峰出现在r=2?附近,第2个峰出现在r=4?附近,在游离碳酸钙的存在的情况下,腐殖酸钠与方解石晶面的Ca-O径向分布函数的第一个峰出现在r=2?附近,第二个峰出现在r=4?周围,但是其峰值均低于游离态的碳酸钙,方解石和方解石晶面以及游离态的碳酸钙之间形成了化学键,与此同时存在静电力和范德华力的作用。

关键词：腐殖酸钠 CaCO3污垢阻垢特性分子动力学模拟

超声预处理对腐殖酸钠体系中受抑制萤石、方解石的浮选分离的影响

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矿产综合利用 2023年第6期44卷 41-47页

作者：杨哲辉李茂林崔瑞林颖欣姚伟吴月武汉科技大学资源与环境工程学院冶金矿产资源高效利用与造块湖北省重点实验室湖北武汉430081 长沙矿冶研究院有限责任公司湖南长沙410012

这是一篇矿物加工工程领域的论文。我国萤石主要以共伴生型矿床形式存在,在浮选过程中,通常将其他有用矿物优先浮选,大量萤石存在于尾矿中。本文以浮钨尾矿中受抑制的萤石、方解石为对象,加入超声波改变两者可浮性,探究一种优化浮钨尾... 详细信息

这是一篇矿物加工工程领域的论文。我国萤石主要以共伴生型矿床形式存在,在浮选过程中,通常将其他有用矿物优先浮选,大量萤石存在于尾矿中。本文以浮钨尾矿中受抑制的萤石、方解石为对象,加入超声波改变两者可浮性,探究一种优化浮钨尾矿中萤石综合利用水平的方法。通过超声预处理受腐殖酸钠抑制矿浆39 min,萤石浮选回收率达到84.74%,此时方解石浮选回收率仅为11.47%,两者浮选回收率相差73.27%。探究超声预处理机理发现,在红外光谱检测中,萤石表面腐殖酸钠吸附强度低于方解石,超声预处理可以使萤石表面腐殖酸钠脱附,提高表面油酸钠吸附量,使zeta电位向正向移动,并且超声预处理主要影响矿物表面腐殖酸钠的含量,不影响矿物表面油酸钠的含量。若超声预处理时矿浆体系仅存在腐殖酸钠,则腐殖酸钠脱附速度更快,更有利于吸附后续添加的油酸钠。

关键词：矿物加工工程超声预处理腐殖酸钠油酸钠萤石方解石

腐殖酸钠联合头孢克肟对大肠杆菌感染小鼠肠道机械屏障的保护作用

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腐殖酸钠联合头孢克肟对大肠杆菌感染小鼠肠道机械屏障的保护作用

作者：贾昊天东北农业大学

学位级别：硕士

犊牛大肠杆菌病是奶牛生产中的常见病之一,严重影响犊牛的生长发育和成活率,给奶牛养殖业造成严重的经济损失,有效防控犊牛大肠杆菌病变得尤为重要。目前,临床上治疗犊牛大肠杆菌病以使用抗生素作为主要治疗手段,但是有容易产生耐药性... 详细信息

犊牛大肠杆菌病是奶牛生产中的常见病之一,严重影响犊牛的生长发育和成活率,给奶牛养殖业造成严重的经济损失,有效防控犊牛大肠杆菌病变得尤为重要。目前,临床上治疗犊牛大肠杆菌病以使用抗生素作为主要治疗手段,但是有容易产生耐药性的弊端。腐殖酸钠(Sodium Humate,HNa)具有抗菌、抗炎、抗腹泻、调节肠道菌群等特点,但其杀菌效果较弱;头孢克肟(Cefixime,CFM)是第三代头孢菌素,抗菌谱广,抗菌效果强,对大多数革兰氏阴性杆菌以及部分革兰氏阳性球菌有强效杀菌作用,但长期应用会引起肠道菌群紊乱以及细菌产生耐药性,因此,本研究旨在探究HNa与CFM联合应用对牛源产毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染小鼠肠道屏障的保护作用,为犊牛大肠杆菌病的防控,减少抗生素的使用及降低细菌耐药性提供理论基础。本试验选取SPF级雌性昆明幼鼠28只,随机分为4组,对照组(Con组)、模型组(ETEC组)、头孢克肟组(CFM组)、腐殖酸钠+头孢克肟组(HNa+CFM组)。Con组每天给小鼠灌腹0.2 m L生理盐水,HNa+CFM组小鼠每天灌服0.2 m L 5%HNa溶液,持续7 d;试验第8 d,ETEC组、CFM组和HNa+CFM组小鼠灌服0.2 m L含5×10CFU的ETEC K88菌液,感染12 h后,CFM组和HNa+CFM组小鼠每天灌服0.2 m L 0.4 mg/m L CFM溶液,连续给药3 d。最后一次给药12 h后,分别采集小鼠的血液、脾脏、肠道用于后续试验。采用ELISA、PCR及West blot等方法检测肠道炎症、免疫指标和肠道屏障等相关指标的变化。试验结果如下:(1)ETEC K88对小鼠的半数致死量为2.43×10CFU。小鼠感染ETEC后体重明显降低,脾指数增加,使用HNa+CFM干预后显著缓解了上述变化。(2)肠道显微结构研究结果表明,ETEC组小鼠空肠肠绒毛发生萎缩、断裂及炎性细胞聚集,空肠绒毛高度和绒毛高度与隐窝深度的比值降低(P0.05)。肠道超微结构组织切片表明,ETEC组小鼠空肠微绒毛表现为萎缩和断裂,肠上皮细胞间紧密连接断裂,HNa+CFM干预后显著缓解了ETEC感染引起的小鼠空肠的损伤。(3)与ETEC组相比,CFM组、HNa+CFM组小鼠血清以及空肠组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度显著降低(P0.05)。CFM组以及HNa+CFM组小鼠空肠s IgA浓度显著高于ETEC组(P<0.05);HNa+CFM组小鼠空肠CD4+T淋巴细胞的蛋白表达水平显著高于ETEC组和CFM组(P<0.05),HNa+CFM组小鼠空肠CD8+T淋巴细胞的蛋白表达水平显著高于ETEC组和CFM组(P<0.05)。(5)与ETEC感染组相比,CFM组、HNa+CFM组Occludin、Claudin-1、β-catenin、Mucin-1、Mucin-3相对m RNA表达量显著增加(P<0.05);CFM组和HNa+CFM组小鼠空肠组织中Claudin-1、ZO-1、Occludin、E-cadherin的蛋白表达水平相较于ETEC组显著增加(P<0.05)。与ETEC组相比,CFM组和HNa+CFM组小鼠空肠PCNA、TGF-β1和BCL-XL的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。HNa+CFM组小鼠肠道通透性指标血清中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-lac)和脂多糖(LPS)浓度显著低于ETEC组以及CFM组(P<0.05),显示HNa+CFM干预则显著缓解了ETEC感染引起的小鼠空肠的损伤。综上所述,HNa联合CFM通过保护肠道结构、提高免疫状态、抑制肠道炎症反应、调节肠道黏膜免疫和增加肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达等有效缓解了ETEC对小鼠肠道机械屏障的损伤。

关键词：牛源致病性大肠杆菌腐殖酸钠头孢克肟肠道机械屏障肠道炎症