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十味芪黄益肾方对慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证患者血清DKK1和β-CATENIN的干预作用

十味芪黄益肾方对慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证患者血清DKK1和β-C...

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作者：宋蓓蓓安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察患者血清肌酐(serum creatinine,Scr)、分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)、β-连环蛋白(β-catenin)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅲ型胶原(Co L-Ⅲ)在采用十味芪黄益肾方干预前后的表达情况,旨在探讨十味芪黄益肾方的作用机制... 详细信息

目的:观察患者血清肌酐(serum creatinine,Scr)、分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)、β-连环蛋白(β-catenin)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅲ型胶原(Co L-Ⅲ)在采用十味芪黄益肾方干预前后的表达情况,旨在探讨十味芪黄益肾方的作用机制。方法:将符合条件的68例慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证患者,按照随机数字表分为治疗组和对照组,其中治疗组34例,对照组34例。随机选取来自安徽省中医院健康体检者30例作为正常组。研究过程中,8例患者脱落(其中改行肾脏替代治疗者6例,随诊失联者2例),实际完成60例,治疗组对照组每组均为30例。治疗组与对照组均给予西医基础治疗及中药保留灌肠,治疗组加用十味芪黄益肾方,水煎服,每日1剂,煎2次,合并煎液,分早晚2次服用,疗程均为8周。检测治疗组与对照组治疗前后Scr、DKK1、β-catenin、FN和Co L-Ⅲ的水平,观察估算肾小球滤过率(estimatedglomerular filtration rate,GFR)及中医证候疗效积分的变化。正常组检测血清DKK1、β-catenin、FN和Co L-Ⅲ的含量。结果:1.治疗组临床疗效总有效率为83.33%优于对照组为70.00%(P证候疗效的总有效率为86.66%优于对照组为63.33%(P证候总积分、Scr以及e GFR水平,差异无统计学意义P>0.05;治疗8周末,两组间中医证候总积分、Scr以及e GFR水平进行统计学比较P证候总积分、Scr以及e GFR水平进行统计学比较,一方面中医证候总积分差异有统计学意义,其中治疗组P0.05。4.治疗前两组患者的血清β-catenin、FN、Co L-Ⅲ的表达高于正常组(P0.05);治疗后治疗组患者FN、Co L-Ⅲ表达低于治疗前(P0.05);对照组治疗后较治疗前四者均无差异(P>0.05);治疗组与对照组比较,治疗后FN、Co L-Ⅲ的表达低于(P0.05)。5.血清DKK1水平与中医证候积分值相关性研究分析呈负相关(P证候积分值呈正相关(P脾肾亏虚挟瘀浊证患者临床症状、改善肾功能,表明对CRF具有较好的治疗作用,这可能是通过降低CRF脾肾亏虚挟瘀浊证患者血清FN和Co L-Ⅲ水平,提高DKK1的水平,说明十味芪黄益肾方可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化,减少ECM的集聚,从而达到保护肾功能的作用。

关键词：慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证十味芪黄益肾方 DKK1 β-Catenin FN CoL-Ⅲ

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十味芪黄益肾方对慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证患者和肾纤维化大鼠TGF-β1和HGF的干预作用

十味芪黄益肾方对慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证患者和肾纤维化大鼠...

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作者：张艳楠安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过观察十味芪黄益肾方对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)脾肾亏虚挟瘀浊证患者治疗前后血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、胱抑素C(cystatin C,Cys C)、估算肾小球虑过率(estimated glomerular filtration rate,e GFR)及中医证候积分的变化情况,了解该方对CRF患者的临床疗效。方法:选取符合纳入标准的68例CRF脾肾亏虚挟瘀浊证患者,按照随机数字表随机分为治疗组和对照组,每组各34例。在随访治疗过程中共剔除8例,治疗组剔除4例,对照组剔除4例,实际完成病例60例,对照组30例,治疗组30例。两组均予西医基础治疗,治疗组在西医治疗基础上加服十味芪黄益肾方,对照组在西医治疗基础上加服尿毒清颗粒,8周为1个疗程,共观察1个疗程。分别在治疗前和治疗后检测患者血清Scr、BUN、Cys C,估算GFR,对比以上4个指标在治疗前后的变化。同时观察纳入研究患者治疗前后中医证候积分值变化情况。结果:1.中医证候疗效比较:治疗组中医证候疗效总有效率为93.3%,对照组为60%,两组比较有显著性差异(P证候积分比较:治疗前两组患者中医证候积分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组中医证候积分与治疗前比较显著降低(P证候积分低于治疗前(P证候积分差值比较有差异(P0.05);(2)治疗后两组Scr水平较治疗前有显著下降(P脾肾亏虚挟瘀浊证患者的临床症状,降低患者血清Scr、BUN、Cys C,改善肾功能;患者服用十味芪黄益肾方过程中未见出现明显药物不良反应,治疗前后安全性指标未见异常变化。目的:采用腺嘌呤灌胃复制肾纤维化大鼠模型,通过观察各组大鼠Scr、BUN、24小时尿蛋白定量(24h Upro)、24h尿量,肾组织病理形态,肾脏TGF-β1、HGF、α-SMA、FN蛋白的表达情况,观察十味芪黄益肾方对肾纤维化模型大鼠的影响,探讨其部分作用机制。方法:⑴造模及分组:60只大鼠依据体重按照随机数字表取15只作为正常组,余45只制作模型。正常组用等量蒸馏水灌胃,剩余45只大鼠用腺嘌呤灌胃共28天。造模过程中大鼠死亡2只,最后成功造成模型43只,将造模成功大鼠按照上述方法分为三组:模型组13只,缬沙坦组15只,十味芪黄益肾方组15只。⑵治疗给药:正常组及模型组给予等量蒸馏水灌胃;益肾方组将十味芪黄益肾方煎剂进行水浴浓缩成2.4 kg生药/L的水煎剂,按24g生药/kg·d大鼠体重灌胃,1天1次,2ml/次灌胃;缬沙坦组将缬沙坦胶囊溶于温水中,按照20mg/kg·d灌胃,共治疗8周。⑶指标检测:治疗完成后采集大鼠血液,检测大鼠Scr、BUN;留取大鼠24h尿液,检测24h24h Upro,测量24h尿量。处死大鼠,摘取双侧肾脏,取肾组织进行病理切片HE、Masson染色观察肾组织病理形态改变;用免疫组化法检测肾组织TGF-β1、HGF、α-SMA、FN蛋白的表达情况。结果:⑴一般状态:造模完成后至实验结束,模型组大鼠一般状态较差,饮食欠佳,多饮多尿,畏寒喜欢扎堆,毛色无光泽,尾巴潮湿冰冷,不喜活动等症状。经过8周治疗后,缬沙坦组及益肾方组大鼠上述现象均较前改善,其中益肾方组大鼠一般状态比缬沙坦组改善更加明显。⑵实验室指标:造模完成后,造模组大鼠Scr、BUN、24h Upro、24h尿量比正常组明显升高。经过8周治疗后,与正常组比较,模型组大鼠Scr、BUN、24h Upro、24h尿量升高(P<0.01);与模型组比较各治疗组上述指标明显改善(P<0.01);治疗组之间比较,益肾方组上述指标改善优于缬沙坦组(P<0.05)。⑶肾脏病理改变:正常组肾组织无病理改变;模型组肾组织小管、小球、间质严重损害;各治疗组肾脏病理损害较对照组明显减轻,其中益肾方组优于缬沙坦组;⑷免疫组化法:正常组肾组织织基本无TGF-β1、α-SM

关键词：慢性肾衰竭脾肾亏虚挟瘀浊证十味芪黄益肾方慢性肾衰竭大鼠腺嘌呤肾纤维化 TGF-β1 α-SMA FN HGF

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