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中华危重病急救医学 2023年第8期35卷 813-817页

作者：李福星王舒周仪华龚园其南昌大学第二附属医院重症医学科江西南昌330006

目的:探讨在脓毒症模型中信号转导与转录激活因子6(STAT6)对骨骼肌细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法:将24只8周龄雄性SPF级昆明小鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、脓毒症模型组、STAT6抑制剂预处理组,每组6只。采用盲肠结... 详细信息

目的:探讨在脓毒症模型中信号转导与转录激活因子6(STAT6)对骨骼肌细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法:将24只8周龄雄性SPF级昆明小鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、脓毒症模型组、STAT6抑制剂预处理组,每组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠脓毒症模型;假手术组开腹暴露盲肠后关腹。STAT6抑制剂预处理组于制模前1 h腹腔注射AS1517499溶液10 mg/kg;假手术组及模型组腹腔注射等量生理盐水。正常对照组小鼠不予任何手术及药物干预。于制模后24 h处死小鼠取后肢肌肉组织,苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察组织病理学改变;醋酸铀-枸橼酸铅双染后,透射电镜下观察线粒体形态变化;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肌肉组织中铁死亡标志物蛋白几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)、环氧合酶-2(COX-2)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)的表达水平。结果:光镜下显示,正常对照组和假手术组小鼠骨骼肌形态结构正常;模型组骨骼肌结构疏松,肌纤维变小及萎缩,炎症细胞浸润,甚至出现肌纤维缺失;与模型组比较,STAT6抑制剂预处理组骨骼肌结构紧密,骨骼肌萎缩情况有所改善。透射电镜下显示,正常对照组和假手术组骨骼肌细胞超微形态正常;模型组骨骼肌超微形态学特征显示,细胞膜断裂和出泡,线粒体变小、膜密度增高、线粒体嵴减少或消失、线粒体外膜断裂,细胞核大小正常但缺乏染色质凝聚;与模型组比较,STAT6抑制剂预处理组肌细胞超微结构损伤有所改善。与正常对照组和假手术组比较,模型组小鼠肌肉组织中CHI3L1、COX-2、ACSL4、FTH1的蛋白表达均明显升高,GPx4蛋白表达明显下降,说明脓毒症小鼠模型骨骼肌细胞出现特征性线粒体损伤,同时铁死亡标志物蛋白表达异常;与模型组相比,STAT6抑制剂预处理组CHI3LI、COX-2、ACSL4、FTH1的蛋白表达均明显下降〔CHI3L1蛋白(CHI3L1/GAPDH):0.70±0.08比0.97±0.09,COX-2蛋白(COX-2/GAPDH):0.61±0.03比0.83±0.03,ACSL4蛋白(ACSL4/GAPDH):0.75±0.04比1.02±0.16,FTH1蛋白(FTH1/GAPDH):0.49±0.06比0.76±0.13,均P脓毒症可诱导小鼠骨骼肌细胞铁死亡;STAT6可能通过调控COX-2、ACSL4、FTH1及GPx4表达介导脓毒症小鼠骨骼肌细胞铁死亡,由此诱导脓毒症骨骼肌细胞损伤。

关键词：脓毒症所致肌病铁死亡信号转导与转录激活因子6 几丁质酶-3样蛋白1

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