检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=脑血管舒张"

共 1 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

VEGFR2介导H2S舒张大鼠脑血管作用及其机制的研究

VEGFR2介导H2S舒张大鼠脑血管作用及其机制的研究

引用

作者：陈锦花安徽医科大学

学位级别：硕士

硫化氢(Hydrogen sulfide,HS)是继一氧化氮(Nitric oxide,NO)和一氧化碳(Carbon monoxide,CO)之后的第三种气体信号分子。CSE(Cystathionine-γ-lyase,CSE)被认为是心血管系统中主要的HS产生酶,主要表达在内皮细胞、平滑肌细胞、心肌细胞中。HS对心血管系统有多种作用,包括减轻心肌缺血再灌注损伤、促进血管生成、扩张血管和调节血压等。但舒张血管的机制尚不明确。此外,HS可以断裂血管内皮生长因子受体(Vascular endothelial growth factor Receptor,VEGFR)cys1045-cys1024之间的二硫键,破坏受体的活性构象,促进内皮细胞的增殖和迁移。VEGFR(Vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR)介导了血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的大部分生物学作用,包括促进血管的生成,细胞的增殖,迁移等作用。硫化氢是否通过VEGFR发挥脑血管的舒张作用并不清楚。目的:观察HS对大鼠脑血管的舒张作用。探讨VEGFR对HS舒张脑基底动脉的作用及其机制。方法:1. 离体血管直径实验:离体血管直径实验记录大鼠BAs直径的变化:实验分为(1)溶媒对照组;(2)Na HS组;(3)VEGFR抑制剂SU5416组;(4)阳性对照VEGF组。观察Na HS(10-10mol/L)对脑血管舒张作用的影响;观察VEGFR抑制剂SU5416对脑血管舒张作用的影响;观察VEGFR激动剂VEGF对脑血管舒张作用的影响。2. 原代细胞培养:原代培养大鼠BAs平滑肌细胞,检测VSMCs中VEGFR的表达。3.转染后的细胞舒张实验:应用细胞转染技术,实验分为Blank、Mock、Negative control、VEGFRsi RNA1、VEGFRsi RNA2、VEGFRsi RNA3,筛选有效的VEGFRsi RNA序列。应用Image-Pro Plus6.0测定VSMCs舒张幅度的变化。4.在体转染后的离体血管实验:应用VEGFR在体转染技术,下调大鼠BAs中VEGFR的表达,western-blot鉴定下调后各组织中VEGFR表达水平变化。将实验分为溶媒对照组、Na HS组、VEGFRsi RNA、Negative control,观察转染后Na HS对大鼠脑血管舒张作用的影响。5.钙成像实验:将实验分为Vehicle、Na HS、SU5416+Na HS、VEGF组,检测细胞内钙离子浓度([Ca])的变化。实验结果:***抑制剂SU5416对HS介导BA舒张的影响:与溶媒对照组(Vehicle)相比,HS供体Na HS(10-10mol/L)能够浓度依赖性的舒张大鼠BAs,最大舒张率(Emax)达119%±13.7%;VEGFR抑制剂SU5416(10mol/L)预处理可显著地减弱Na HS诱导的大鼠BAs舒张,最大舒张率Emax降低为88.0%±12.7%;结果表明HS可能通过VEGFR发挥脑血管舒张作用。2. VEGF在HS介导的BA血管舒张中的作用:与溶媒对照组(Vehicle)相比,VEGFR激动剂VEGF(10-10mmol/L)能够引起CBA的舒张最大舒张率为29.6%±10.1%;当用VEGF(10mmol/L)预处理发现Na HS诱导的大鼠CBA舒张减弱。最大舒张率94.7%±6.0%,表明硫化氢舒张大鼠脑基底与VEGFR有关,并且可能是通过激活VEGFR挥血管的舒张作用。3. 血管平滑肌细胞(VSMC)上VEGFR的鉴定:原代培养SD大鼠平滑肌细胞用于鉴定VSMC上的VEGFR表达。约4天后,我们可以在显微镜下观察到组织块周围的分散细胞爬升成纺锤形或长纺锤形。两周后,细胞生长更多,并显示“高峰”和“谷”增长。通过抗α-肌动蛋白抗体的免疫细胞化学染色鉴定SMC,在细胞质中观察到长纺锤形的绿色荧光,表明原代培养的SMC是成功的。随后,使用抗VEGFR抗体的免疫化学方法鉴定SMCs上VEGFR表达,发现VEGFR在平滑肌细胞上表达,这为研究VEGFR是否参与HS介导的脑血管舒张提供了基础。4. 敲低VEGFR基因表达对HS介导的平滑肌细胞松弛的影响:使用Western bolt法检测VSMC中VEGFR蛋白的表达。与对照组相比,使用VEGFR-si RNA1可以显著下调VEGFR蛋白表达。因此,选择VEGFR-si RNA1作为VSMC中的有效干扰序列,以评估VEGFR低表达对HS介导VSMC松弛的影响。通过给予梯度浓度的外源HS供体Na HS(10-10mol/L),观察到VEGFR敲低后,VSMC的舒张

关键词：硫化氢 VEGFR2 平滑肌细胞脑血管舒张脑血管直径

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共1页 << < 1 > >>

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：