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脑薄片实验中常见的问题及解决办法

实验科学与技术 2006年第4期4卷 71-73,94页

作者：杨润生张彩珠杨盛昌孙燕燕潘盛武广西师范大学桂林541004

在脑薄片实验中,实验是否成功,取决于脑脊液的配制、标本的制备、微电极的制作、干扰的排除以及仪器设备的质量和实验者的实验技术等各个环节,而保持脑薄片的生理活性及干扰的排除,是这些环节的关键。文中根据在脑薄片实验过程中遇到的... 详细信息

在脑薄片实验中,实验是否成功,取决于脑脊液的配制、标本的制备、微电极的制作、干扰的排除以及仪器设备的质量和实验者的实验技术等各个环节,而保持脑薄片的生理活性及干扰的排除,是这些环节的关键。文中根据在脑薄片实验过程中遇到的常见问题,提出了解决的办法。

关键词：脑薄片电生理微电极灌流干扰

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高原海拔地区脑薄片制备的影响因素

高原医学杂志 1997年第4期7卷 55-56页

作者：汤燕平白若华青海医学院生理教研室

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脑薄片制备的改进

白求恩医科大学学报 1999年第2期25卷 211-211页

作者：黄民宋洪臣孙木王绍基础医学院生理教研室长春130021 第一临床学院运动学科

在灌流的脑薄片对神经元进行电位记录技术由本世纪60年代开始创建,至今已广泛应用于多学科领域.本文作者只是就我室现有条件下因陋就简,本着少花钱也能做成实验的精神,在某些方面改进的一些体会,在此加以简要介绍,以资交流.1切片机的使... 详细信息

在灌流的脑薄片对神经元进行电位记录技术由本世纪60年代开始创建,至今已广泛应用于多学科领域.本文作者只是就我室现有条件下因陋就简,本着少花钱也能做成实验的精神,在某些方面改进的一些体会,在此加以简要介绍,以资交流.1切片机的使用1.1保证脑薄片神经元成活是实验成功与否的关键.其中进行超薄切片是首要步骤.国产价格便宜的切片机,在工艺制造上精度不高,切出的脑薄片容易挤压且厚薄不均.我们的经验是,在取材过程中做成的组织块不要过大,一般在切去2片(800～1000 μm)后即达到所需部位为好.操作者操纵推进台旋钮时手要沉稳,保持推进台不随切刀的进退而上下浮动,尽力使其保持水平推进,确保切出脑薄片的均匀厚度,以减少对神经元的损伤.

关键词：脑薄片细胞外记录缰核制备

成年大鼠视皮层(17区)神经元间的染色耦合──离体脑片研究

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生理学报 1998年第3期50卷 241-248页

作者：丁劲徐杏珍李朝义中国科学院上海生理研究所神经生物学开放实验室上海200031 中国科学院生物物理研究所视觉信息处理开放实验室北京100101 中国科学院上海生理研究所 200031

在离体脑片上，用生物胞素（biocytin）对成年大鼠视皮层神经元进行胞内注射。在标记成功的49例中，21例（42．9％）有染色耦合现象，耦合细胞的个数从2个到5个不等，平均2．8±1．1个。其中，18例为锥体-锥体神经元之间的耦合，2例为锥... 详细信息

在离体脑片上，用生物胞素（biocytin）对成年大鼠视皮层神经元进行胞内注射。在标记成功的49例中，21例（42．9％）有染色耦合现象，耦合细胞的个数从2个到5个不等，平均2．8±1．1个。其中，18例为锥体-锥体神经元之间的耦合，2例为锥体-非锥体神经元之间的耦合，1例为非锥体神经元之间的耦合。在耦合细胞中，只有5例的胞体紧靠在一起，其它细胞的胞体之间都有一定的距离，其中有1例达到了635μm。大多数情况下（19／21例），耦合细胞的胞体位于同一层次内，只有2例胞体位于不同层次。在Ⅱ／Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ层内都观察到染色耦合神经元，但以Ⅱ／Ⅲ层内发生染色耦合的比率为最高。比较了染色耦合与非耦合神经元的某些电生理特性，没有观察到在它们之间有明显的差别。

关键词：大鼠视皮层脑薄片染色耦合缝隙连接

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简易振动切片机的制作

生理学报 1989年第6期41卷 608-610页

作者：夏金辉邢宝仁顾勤华少莹第二军医大学生理教研室神经科学实验室第二军医大学生理教研室神经科学实验室上海

利用两用电动剃须刀、显微镜架等材料,我们制作了简易型振动切片机。该机切下的脑薄片,在人工脑脊液中其自发放电可维持12h以上。

关键词：振动切片机脑薄片

大鼠离体视皮层神经元短时程时间整合特性的研究

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生物物理学报 1998年第3期14卷 478-484页

作者：丁劲徐杏珍李朝义中国科学院上海生理研究所神经生物学开放实验室中国科学院生物物理研究所视觉信息处理开放实验室

用双脉冲白质电刺激研究了８７个大鼠视皮层神经元的短时程时间整合特性。第一个脉冲所引起的细胞反应对第二个反应有影响的细胞占被记录细胞总数的５５．２％，其中表现为突触作用增强的占４１．７％，表现为突触作用压抑的占５８．３... 详细信息

用双脉冲白质电刺激研究了８７个大鼠视皮层神经元的短时程时间整合特性。第一个脉冲所引起的细胞反应对第二个反应有影响的细胞占被记录细胞总数的５５．２％，其中表现为突触作用增强的占４１．７％，表现为突触作用压抑的占５８．３％。整合作用的强度决定于两个脉冲之间的时间间隔，作用形式主要表现为第二个刺激所引起的反应的幅度和时程的改变。电反应可以ＥＰＳＰ或ＩＰＳＰ为主，或由ＥＰＳＰ和ＩＰＳＰ混合组成。部分细胞的反应包含快慢两个成份，时间整合作用对不同反应成份的影响程度有明显的不同。在锥体神经元中，增强型和压抑型的比例大致相等，而非锥体神经元只显示压抑型作用。位于皮层深层的神经元有时间整合作用的比率（３７．５％）比位于浅层的神经元（６０．５％）要低得多。

关键词：大鼠视皮层脑薄片时间整合突触电位

前庭内侧核神经元膜兴奋性在大鼠出生后不同发育阶段的变化

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前庭内侧核神经元膜兴奋性在大鼠出生后不同发育阶段的变化

作者：周彦华中科技大学

学位级别：硕士

目的研究大鼠出生后一月内前庭内侧核(Medial vestibular nucleus,MVN)神经元节律性自发放电的形成和变化过程。方法应用红外微分干涉相差显微镜结合电荷耦合式感光成像系统,在可视条件下,记录大鼠出生后一月内不同日龄的体外脑片中MV... 详细信息

目的研究大鼠出生后一月内前庭内侧核(Medial vestibular nucleus,MVN)神经元节律性自发放电的形成和变化过程。方法应用红外微分干涉相差显微镜结合电荷耦合式感光成像系统,在可视条件下,记录大鼠出生后一月内不同日龄的体外脑片中MVN神经元自发放电。结果○1出生后不同日龄MVN神经元形态上逐渐成熟,但A、B两型神经元形态上无明显差异。○2出生后第1周MVN神经元稳定的自发放电已形成,但放电频率低,输入电阻大。出生后第3周和第4周放电频率迅速增加,输入电阻明显降低,最大复极电位绝对值明显降低。○3 A、B两型MVN神经元在不同日龄所占比例有所变化,出生后4天B型神经元仅占22.9%,到158天达66.6%,第225天随着A型神经元的成熟,B型神经元比例略有下降,占56.5%。○4早期幼稚A型神经动作电位形态特殊,后超极化电位(AHP)成分表现为缓慢延迟单相的特点,类似B型神经元双相AHP的晚期延迟部分。结论○1出生后各期A、B两型神经元镜下形态无显著区别。○2大鼠MVN神经元在出生后两周内膜兴奋性无明显变化,直至前庭眼反射建立后,膜兴奋性才明显增强,MVN神经元的电生理特性在出生后第3周迅速成熟。○3随着出生日龄的增长,B型神经元比例增大可能与外周前庭终器传入刺激增强有关。○4出生后一周内占绝大多数的幼稚A型神经元可能具有较强可塑性。

关键词：前庭内侧核出生后发育脑薄片膜片钳全细胞记录

蟾蜍视顶盖细胞自发活动特性──脑片灌流研究

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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广西师范大学学报（自然科学版） 1994年第1期12卷 87-93页

作者：杨盛昌唐宗湘姜世英广西师范大学生物系

采用脑薄片技术，用金属微电极对离体蟾蜍视顶盖简称（ＯＴ）进行细胞外记录，观察视顶盖ＯＴ神经元的自发放电特点及几种神经递质的影响．结果表明：在３９个ＯＴ神经元中，不规则连续放电的为２１／３９；慢速放电９／３９；阵发性排... 详细信息

采用脑薄片技术，用金属微电极对离体蟾蜍视顶盖简称（ＯＴ）进行细胞外记录，观察视顶盖ＯＴ神经元的自发放电特点及几种神经递质的影响．结果表明：在３９个ＯＴ神经元中，不规则连续放电的为２１／３９；慢速放电９／３９；阵发性排放４／３９；周期性排放５／３９．当用不同的神经递质灌流另外３５个顶盖细胞时，Ａｃｈ，５－ＨＴ和Ｇｌｕ使细胞自发活动增加，而ＮＥ，ＧＡＢＡ和Ｇｉｙ使其活动减少．

关键词：视顶盖脑薄片自发放电蟾蜍

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脑片实验及TS-1型振动切片机的制作

青海师范大学学报（自然科学版） 1997年第3期13卷 51-54页

作者：汤燕平孙大付青海医学院第一军医大学

在神经生理学的研究领域，随着实验方法的不断更新，离体研究的优越性已日渐明显，脑薄片实验的价值也得到越来越多的神经科学工作者的承认。本文介绍了脑薄片实验的特点、标本制备过程及振动切片机的制作。

关键词：脑薄片实验标本制备振动切片机