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RAM-HPLC在线富集技术检测脑脊液中利福平的浓度

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南方医科大学学报 2015年第11期35卷 1628-1632,1637页

作者：杨晓萍张晓惠黄艳萍王荣谢华李文斌郭佑民兰州军区兰州总医院影像诊断中心甘肃兰州730050 西安交通大学第一附属医院影像中心陕西西安710061 兰州军区兰州总医院全军高原环境损伤防治重点实验室甘肃兰州730050 兰州军区兰州总医院神经内科甘肃兰州730050

目的建立大体积直接进样的限进性液相色谱（RAM-HPLC）法,实现脑脊液样品的在线直接进样富集并检测脑脊液中的利福平。方法以自制限进性填料柱为前处理柱,Luna C18为分析柱,前处理流动相为水―甲醇（95∶5,V/V）,流速为1 m L/min,分析... 详细信息

目的建立大体积直接进样的限进性液相色谱（RAM-HPLC）法,实现脑脊液样品的在线直接进样富集并检测脑脊液中的利福平。方法以自制限进性填料柱为前处理柱,Luna C18为分析柱,前处理流动相为水―甲醇（95∶5,V/V）,流速为1 m L/min,分析流动相为甲醇-乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液（60∶5∶35,V/V/V）,柱温为25℃,检测波长为254 nm。结果选择100μL为进样体积,其峰面积是进样量为20μL时的5.33倍,有效提高了HPLC的检测灵敏度。利福平在0.25~8μg/m L的浓度范围内浓度和峰面积具有良好的线性关系（r=0.9997）,LOD和LOQ分别为0.07μg/m L和0.25μg/m L,日内日间精密度均小于5%,低中高3个浓度下的空白加样回收率为87.69%~102.11%,测定给药（剂量为10 mg/kg）2 h后的人脑脊液中利福平浓度为0.29μg/m L。结论该方法简单快速,适用于脑脊液中利福平的富集检测,满足临床个体化用药指导。

关键词：大体积直接进样限进性填料高效液相色谱利福平脑脊液

寡克隆区带阳性的神经型布鲁菌病患者的临床、影像学及脑脊液特点分析

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中华医学杂志 2024年第19期104卷 1707-1712页

作者：冯慧娜刘艳茹李京红郝洪军郑州大学第一附属医院神经内科郑州450052 郑州大学第一附属医院神经内科实验室郑州450052 北京大学第一医院神经内科和神经免疫室北京100034

目的探讨寡克隆区带(OCB)阳性的神经型布鲁菌病(NB)患者的临床、影像学及脑脊液特点。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院2020年1月至2023年6月间确诊为NB的23例患者,男9例,女14例,年龄47(34,59)岁。根据血清及脑脊液IgG电泳结果将NB... 详细信息

目的探讨寡克隆区带(OCB)阳性的神经型布鲁菌病(NB)患者的临床、影像学及脑脊液特点。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院2020年1月至2023年6月间确诊为NB的23例患者,男9例,女14例,年龄47(34,59)岁。根据血清及脑脊液IgG电泳结果将NB患者分为OCB阳性组和OCB阴性组,比较两组的临床、影像学及脑脊液特点。结果23例NB中脑脊液OCB阳性者占65.2%(15/23),以Ⅱ型(14/15)为主;阴性组8例。OCB阳性组临床重型占比(11/15)、脑脊液白细胞计数升高占比(15/15)、IgG指数[M(Q_(1),Q_(3)),0.97(0.57,2.11)],24 h鞘内合成率[55.6(15.3,232.2)mg/24 h]显著高于阴性组[1/8,5/8,0.63(0.51,0.69),11.6(-1.6,17.3)mg/24 h,均P0.05)。OCB阳性组可表现为全脑(幕上合并幕下)脑实质多发病灶(5/15),但OCB阴性组均未发现幕下脑实质受累(0/8)。结论NB患者OCB阳性检出率为65.2%。OCB阳性者临床重症患者更多,神经系统鞘内体液免疫炎性反应更严重,较OCB阴性组更易出现幕下脑实质受累。

关键词：布鲁杆菌病神经系统感染脑脊液寡克隆区带免疫球蛋白病例系列研究

建立并评价基于LC-MS/MS同时测定脑脊液Aβ1-42、Aβ1-40和Aβ1-38的检测方法

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中华检验医学杂志 2023年第8期46卷 814-821页

作者：邹雨桐马晓丽禹松林李倩倩王丹晨钟健毛晨晖高晶邱玲中国医学科学院北京协和医院检验科北京100730 沃特世科技(北京)有限公司北京102600 中国医学科学院北京协和医院神经科北京100730

目的建立并验证一种基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)同时测定脑脊液Aβ1-42、Aβ1-40和Aβ1-38的检测方法,并评价该方法与3种主流检测方法间的一致性。方法方法建立、验证与一致性评价。以15N标记的β-淀粉样蛋白作为内标,采用Waters MC... 详细信息

目的建立并验证一种基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)同时测定脑脊液Aβ1-42、Aβ1-40和Aβ1-38的检测方法,并评价该方法与3种主流检测方法间的一致性。方法方法建立、验证与一致性评价。以15N标记的β-淀粉样蛋白作为内标,采用Waters MCX 96孔固相萃取板进行抽提和萃取,收集洗脱液至QuanRecovery MaxPeak 700μl收集板。在正离子模式下,基于电喷雾离子化的多反应监测模式实现脑脊液Aβ1-42、Aβ1-40和Aβ1-38的同时测定。参考CLSI C62-A和EP-15A3指南对定量限、线性、回收率、精密度、正确度等性能进行方法学评价。收集57例临床检测剩余的脑脊液样本,采用INNOTEST ELISA试剂盒及Lumipulse G和Roche Elecsys全自动化学发光检测系统测定Aβ1-42和Aβ1-40的浓度,采用Passing-Bablok和Bland-Altman法进行不同检测系统间的比对及偏倚评估。结果该方法的分析时长为8 min,测定Aβ1-42、Aβ1-40和Aβ1-38的定量限分别为0.1、0.5、0.1 ng/ml,线性范围可覆盖临床实际样本浓度分布;回收率分别为86.2%~93.8%、100.9%~103.9%和103.3%~107.1%;总不精密度分别为4.7%~7.4%、3.5%~4.6%和5.2%~10.9%;Aβ1-42有证参考物质的测定值均在允许不确定度的范围内;携带污染率均≤0.11%。此外,基于该LC-MS/MS法测定的脑脊液Aβ1-42和Aβ1-40的结果与基于INNOTEST ELISA方法和Lumipulse G及Roche Elecsys全自动生化分析仪检测的结果相关性较好,相关系数r为0.920~0.970,但测定值间存在明显不同。结论本研究建立了一种基于LC-MS/MS同时测定脑脊液Aβ1-42、Aβ1-40和Aβ1-38的检测方法,该方法准确、简便,可应用于临床检测。质谱法检测Aβ1-42和Aβ1-40,特别是Aβ1-42,与其他检测系统间的相关性较好但测定值存在显著差异,提示阿尔茨海默症经典标志物检测的一致化和标准化有待改进。

关键词：色谱法,液相串联质谱法 β-淀粉样蛋白脑脊液

脑脊液中微量的可溶型晚期糖基化终末产物受体检测方法建立与初步应用

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中国医科大学学报 2009年第3期38卷 175-177页

作者：李慧袁正伟中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室沈阳110004

目的利用电化学和纳米金颗粒相结合的技术检测脑脊液中的可溶型晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)表达水平。方法依次利用肝素和特异性抗体的层析柱纯化sRAGE蛋白,把纯化的蛋白作为标准品检测电化学和纳米金颗粒相结合技术的准确性和灵敏度... 详细信息

目的利用电化学和纳米金颗粒相结合的技术检测脑脊液中的可溶型晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)表达水平。方法依次利用肝素和特异性抗体的层析柱纯化sRAGE蛋白,把纯化的蛋白作为标准品检测电化学和纳米金颗粒相结合技术的准确性和灵敏度,建立稳定的检测方法后,检查脑脊液中sRAGE的表达。结果重组sRAGE蛋白经2次纯化后,纯度超过95%。利用电化学和纳米金颗粒相结合的技术检测标准品的标准曲线,其R2值达到了0.96。利用其检测脑脊液样本证明sRAGE确实在脑脊液中表达,其表达量在pg水平。结论sRAGE存在于脑脊液中,电化学和纳米金颗粒相结合的技术可作为更灵敏的检测方法应用于临床及科研中。

关键词：可溶性晚期糖基化终末产物受体脑脊液

脑脊液及血清tau蛋白的检测对散发性Creutzfeldt-Jakob病的诊断价值

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中华神经科杂志 2006年第2期39卷 129-130页

作者：孙瑞红林世和于雪凡赵节绪江新梅宋晓南吉林大学第一医院神经内科

脑脊液tau蛋白检测可能为散发性Creutzfeldt-Jakob病(CJD)辅助诊断指标之一[1-3].但是,国人CJD与西方不同[1],推测其含量也可能有若干区别。

关键词：散发性Creutzfeldt-Jakob病 tau蛋白蛋白检测脑脊液诊断价值血清辅助诊断指标 CJD

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脑脊液标本库的建立及其应用前景

中国神经精神疾病杂志 1999年第4期25卷 249-250页

作者：粟秀初赵钢杨毅宁第四军医大学附一院神经内科脑脊液细胞学研究室!710032

脑脊液标本库的建立是将平时临检工作中确诊的剩余脑脊液标本低温库存起来,以备日后随时应用的一项工作.自1989年我们在国内率先建立起脑脊液标本库以来,现已库存了不少异常和正常的脑脊液标本,能为日常临床医教研工作(特别是研究生和... 详细信息

脑脊液标本库的建立是将平时临检工作中确诊的剩余脑脊液标本低温库存起来,以备日后随时应用的一项工作.自1989年我们在国内率先建立起脑脊液标本库以来,现已库存了不少异常和正常的脑脊液标本,能为日常临床医教研工作(特别是研究生和进修生的培训)随时提供较多经确诊的单病种或多病种脑脊液标本,大大地节省了工作时间和加快了工作进程,有利于快出成果和早出人才,已获得了较好的社会效益和经济效益.

关键词：标本库脑脊液应用前景

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脑脊液压力与蛛网膜下腔阻滞平面的相关分析

中华麻醉学杂志 1993年第4期13卷 291-292页

作者：隋波刘树孝济南军区总医院麻醉科，250031 上海长海医院麻醉科

研究了40例下肢及下腹部择期手术的男性患者脑脊液压力与蛛网膜下腔阻滞平面的相关性，结果显示，脑脊液压力与蛛网膜下腔阻滞平面呈显著正相关。

关键词：脑脊液压力蛛网膜下腔阻滞麻醉

脑脊液与血清s100β蛋白检测对克-雅氏病诊断价值

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中国老年学杂志 2005年第4期25卷 361-363页

作者：高金立林世和赵节绪江新梅宋晓南吉林大学第一医院神经内科吉林长春130021

目的探讨脑脊液和血清中s100β蛋白含量对克雅氏病的诊断意义。方法用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)检测13例克雅氏病患者,6例阿尔茨海默病患者和18例无痴呆症状中枢神经系统疾病患者脑脊液和血清中s100β蛋白含量。结果克雅氏病组的脑... 详细信息

目的探讨脑脊液和血清中s100β蛋白含量对克雅氏病的诊断意义。方法用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)检测13例克雅氏病患者,6例阿尔茨海默病患者和18例无痴呆症状中枢神经系统疾病患者脑脊液和血清中s100β蛋白含量。结果克雅氏病组的脑脊液和血清中s100β蛋白的含量高于阿尔茨海默病组(P脑脊液和血清中s100β蛋白含量检测可以作为克雅氏病诊断指标之一。

关键词：脑脊液血清 s100β蛋白克-雅氏病

厄洛替尼治疗脑脊液检测EGFR敏感突变的肺腺癌一例

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中国肺癌杂志 2016年第1期19卷 52-56页

作者：李晓燕杨辉许华艳王沙沙高红军中国人民解放军第307医院肺部肿瘤科北京100071

背景与目的脑是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)常见的转移部位。有研究显示表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKI)可透过血脑屏障,发挥抗肿瘤作用。本例报道采用突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)检测脑脊液EGFR突变指导临床治疗的可行性,并分析TKI治疗肺癌脑转移的疗效和安全性。方法腰穿取得脑脊液标本,检测颅内压力,检验常规、生化及肿瘤标志物,查找脱落细胞,采用ARMS法检测EGFR基因突变,得到阳性结果后给予盐酸厄洛替尼(erlotinib,tarceva,特罗凯)治疗,150 mg,每天1次。按照实体瘤疗效评价标准1.1版(Response Evaluation Criteriation in Solid Tumours,RECIST v1.1)评价客观疗效,按照不良反应通用术语标准4.0版(Common Terminology Criteria for Adverse Events v4.0,CTC AE v4.0)评估用药期间发生的不良事件。结果该患者多线治疗后,颅内病灶控制欠佳,脑脊液中发现异型细胞,EGFR基因19外显子缺失突变,服用厄洛替尼4周后,颅内客观疗效为部分缓解(partial response,PR),颅外客观疗效为疾病稳定(stable disease,SD),颅内无进展生存期(progression-free survival,PFS)10.5个月,总生存期(overall survival,OS)11个月。主要不良反应为皮疹(1级)。结论脑脊液检测EGFR突变可为制定治疗策略提供理论支持,根据不同的突变状态给予小分子靶向药物联合化疗,可分别控制颅内及颅外病灶。

关键词：肺肿瘤脑转移脑脊液表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂客观有效率