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PI3K/Akt信号传导通路在替莫唑胺诱导脑胶质瘤细胞耐药中的作用研究

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临床和实验医学杂志 2016年第2期15卷 118-121页

作者：秦晋辉李军涛平煤神马医疗集团总医院神经外科河南平顶山467000

目的观察替莫唑胺耐药脑胶质瘤细胞中激活磷脂酰肌醇3激酶/PKB蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路活化情况,并对PI3K/Akt信号传导通路在替莫唑胺诱导脑胶质瘤细胞耐药中的作用机制进行探讨。方法采用Western blot方法检测耐药脑胶质瘤细胞... 详细信息

目的观察替莫唑胺耐药脑胶质瘤细胞中激活磷脂酰肌醇3激酶/PKB蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路活化情况,并对PI3K/Akt信号传导通路在替莫唑胺诱导脑胶质瘤细胞耐药中的作用机制进行探讨。方法采用Western blot方法检测耐药脑胶质瘤细胞(U251/TMZ)和非耐药脑胶质瘤细胞中PI3K/Ak信号传导通路的活化情况。采用PI3K/Akt信号传导通路特异性阻断剂LY294002阻断U251/TMZ中PI3K/Akt信号传导通路,检测替莫唑胺对U251/TMZ细胞活性的影响。采用Western blot方法检测LY294002作用后,U251/TMZ细胞中Bcl-2、MDR1、Topo Ⅱ、ARF和p53等蛋白表达变化情况。结果耐药脑胶质瘤细胞中PI3K/Akt信号传导通路活化情况显著增强(P脑胶质瘤细胞的抑制率明显高于对照组(P脑胶质瘤细胞的形成,其机制可能与PI3K/Akt信号传导通路对耐药相关基因Bcl-2、MDR1和Topo Ⅱ及抑癌基因ARF和p53的表达调控有关。

关键词：脑胶质瘤细胞耐药 PI3K/Akt蛋白替莫唑胺敏感性

^(60)Coγ线照射联合Tamoxifen体外抑制脑胶质瘤细胞的生长研究

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苏州大学学报（医学版） 2004年第6期24卷 801-804页

作者：宁萍刘芬菊黄辉陈剑苏州大学放射医学与公共卫生学院江苏苏州215007

目的探讨Tamoxifen(TAM)和60C0γ线照射对脑胶质瘤细胞的增殖及凋亡影响。方法用3H-TdR掺入法测定TAM单用以及和60Coγ线联用对脑胶质瘤细胞的抑制作用,用激光共聚焦显微镜观察TAM和60Coγ线照射对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。结果TAM对... 详细信息

目的探讨Tamoxifen(TAM)和60C0γ线照射对脑胶质瘤细胞的增殖及凋亡影响。方法用3H-TdR掺入法测定TAM单用以及和60Coγ线联用对脑胶质瘤细胞的抑制作用,用激光共聚焦显微镜观察TAM和60Coγ线照射对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。结果TAM对脑胶质瘤细胞的生长有明显的抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性;TAM与60Coγ线联用具有显著的协同作用,TAM能诱导细胞凋亡,在激光共聚焦显微镜下表现为核固缩或核碎裂,可见凋亡小体。结论60Coγ线和TAM联用在体外能有效地抑制脑胶质瘤细胞的生长。

关键词： Tamoxifen 脑胶质瘤细胞 ^60Coγ线照射

调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响

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中国医学科学院学报 2001年第6期23卷 599-602页

作者：胡永生张庆林田志刚魏海明张建华李刚庞琦王成伟金澎孙汭山东大学第二医院神经外科济南250033

目的研究外源性细胞因子调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分别将IFN-γ+IL-4单抗或IL-4+IFN-γ单抗与脑胶质瘤细胞共同孵育,半定量RT-PCR方法观察Th1/Th2类细胞因子基因表达的变化,并用MTT方法检测其对脑胶质瘤细胞生长... 详细信息

目的研究外源性细胞因子调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分别将IFN-γ+IL-4单抗或IL-4+IFN-γ单抗与脑胶质瘤细胞共同孵育,半定量RT-PCR方法观察Th1/Th2类细胞因子基因表达的变化,并用MTT方法检测其对脑胶质瘤细胞生长情况的影响。结果脑胶质瘤细胞Th2类细胞因子的表达明显强于Th1类(P脑胶质瘤细胞的增殖并呈剂量依赖性关系(P细胞因子的表达有所增强,促进脑胶质瘤细胞的增殖,也呈剂量依赖性关系(P细胞因子或细胞因子单抗可以调节Th1/Th2平衡,逆转Th2优势,影响脑胶质瘤细胞的生长。

关键词：脑胶质瘤细胞细胞因子 Th1/Th2 逆转录聚合酶链反应 MTT 脑肿瘤

大蒜素在替莫唑胺诱导脑胶质瘤细胞耐药中的作用及其机制研究

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浙江医学 2021年第24期43卷 2631-2633,2639页

作者：陈景南王承杜杭根浙江中医药大学附属第二医院神经外科杭州310005

目的探讨大蒜素在替莫唑胺(TMZ)诱导脑胶质瘤细胞耐药中的作用及其机制。方法将耐药胶质瘤细胞系U87/TMZ随机分为4组,分别加入0、10、25、50 mg/L的大蒜素培养24 h;采用Western blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/抗蛋白激酶(AKT)相关蛋... 详细信息

目的探讨大蒜素在替莫唑胺(TMZ)诱导脑胶质瘤细胞耐药中的作用及其机制。方法将耐药胶质瘤细胞系U87/TMZ随机分为4组,分别加入0、10、25、50 mg/L的大蒜素培养24 h;采用Western blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/抗蛋白激酶(AKT)相关蛋白表达、抗基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)1及抗基质金属蛋白酶(MMP)-2等相关蛋白表达,MTT法检测细胞凋亡率;加入50μM抑制剂LY294002处理细胞1 h,收集细胞并检测细胞凋亡率。结果随着大蒜素浓度的增加,抗磷酸化蛋白激酶(p-AKT)蛋白表达量明显降低(P细胞凋亡率均明显升高(均P细胞凋亡率逐渐升高(P脑胶质瘤细胞对TMZ耐药与PI3K/AKT信号传导通路活化有关,大蒜素能够增强脑胶质瘤细胞对TMZ的敏感性,其作用机制是通过阻断PI3K/AKT信号传导通路,上调TIMP1、TIMP2表达并下调MMP-2、MMP-9表达,从而改变TIMP/MMP平衡,发挥治疗作用。

关键词：大蒜素替莫唑胺脑胶质瘤细胞耐药磷脂酰肌醇3激酶抗蛋白激酶

miR-21海绵吸附载体在脑胶质瘤细胞中的应用

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中华神经外科疾病研究杂志 2014年第1期13卷 9-12页

作者：陈波陈丹祎徐文中陕西省商洛市中心医院神经外科陕西商洛726000 河南科技大学大学第二附属神经外科河南洛阳471000

目的探讨微小RNA-21(miR-21)海绵吸附载体在脑胶质瘤细胞中发挥的作用。方法采用microRNA(miRNA)海绵技术构建人源miR-21(has-miR-21)反义片段(miR-21AS),并串联重复8个构建至真核表达载体(pCMV),转染脑胶质瘤细胞U251,实时荧光定量聚... 详细信息

目的探讨微小RNA-21(miR-21)海绵吸附载体在脑胶质瘤细胞中发挥的作用。方法采用microRNA(miRNA)海绵技术构建人源miR-21(has-miR-21)反义片段(miR-21AS),并串联重复8个构建至真核表达载体(pCMV),转染脑胶质瘤细胞U251,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRTPCR)检测miR-21的表达,四甲基偶氨唑盐(MTT)实验检测细胞增殖能力,并检测miR-21肿瘤密切相关靶基因肿瘤抑制基因原肌球蛋白1(tumor suppressor gene tropomyosin 1,TPM1)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)、生长素β受体(transforming growth factor-beta,TGF-β)、人MutS蛋白同基因2(Human mutS homolog2,hMSH2)、程序性细胞死亡4基因(programmed cell death protein 4,PDCD4)的表达。结果 U251细胞转染重组pCMV-miR-21AS质粒后显著下调了miRNA-21的水平,也显著降低了细胞增殖能力,显著提高了TPM1、PTEN、TGF-β、hMSH2、PDCD4的mRNA水平。结论构建的miR-21海绵吸附载体可显著下调miR-21水平,从而降低肿瘤细胞学效应,为肿瘤miRNA基因治疗提供理论基础。

关键词：微小RNA-21 海绵吸附载体脑胶质瘤细胞

LncRNA-UCA1对MMP2/MMP9对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响

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脑与神经疾病杂志 2021年第7期29卷 439-442页

作者：陈亮秦军雷军荣冯驰王璐十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)神经外科湖北442000 十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)重症医学科湖北442000

目的探讨长链非编码RNA-尿路上皮癌相关蛋白1(LncRNA-UCA1)对基质金属蛋白酶2/基质金属蛋白酶9(MMP2/MMP9)对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响。方法选择人脑胶质细胞瘤U251细胞并分为空白对照组、阴性对照组、UCA1干扰组,培养48 h后进行... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA-尿路上皮癌相关蛋白1(LncRNA-UCA1)对基质金属蛋白酶2/基质金属蛋白酶9(MMP2/MMP9)对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响。方法选择人脑胶质细胞瘤U251细胞并分为空白对照组、阴性对照组、UCA1干扰组,培养48 h后进行后续实验;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞LncRNA-UCA1表达水平;细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK8)和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡水平;划痕实验和细胞侵袭实验(transwell)检测细胞迁移、侵袭能力;qRTPCR检测MMP2/MMP9 mRNA表达水平;蛋白质印迹检测MMP2/MMP9蛋白表达。结果两UCA1表达水平在空白对照组、阴性对照组和UCA1干扰组中分别为(1.00±0.06)、(1.01±0.07)和(0.54±0.09),UCA1干扰组UCA1表达水平显著低于空白对照组和阴性对照组(F=40.304,P 细胞增殖水平、迁移和侵袭能力均受到显著抑制,而U251细胞凋亡水平显著升高(P 细胞MMP2、MMP9基因蛋白及mRNA表达水平(P 细胞增殖、侵袭和迁移,并促进U251细胞凋亡。

关键词：长链非编码RNA-人尿道上皮癌抗原1 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 脑胶质瘤细胞生物学行为

脑瘤散对脑胶质瘤细胞GFAP及Bax/Bcl-2的影响

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天津中医药 2013年第6期30卷 356-358页

作者：李竹庭周洁刘海晔天津中医药大学第二附属医院天津300150

[目的]观察脑瘤散加环磷酰胺(CTX)对荷瘤鼠体内G422脑胶质瘤细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。[方法]将G422脑胶质瘤细胞株按4 mL∶1 g的比例在组织研磨器中研磨成匀浆,接种于小鼠右前肢腋下皮下,每只接种0.2 mL。将60只小鼠于接... 详细信息

[目的]观察脑瘤散加环磷酰胺(CTX)对荷瘤鼠体内G422脑胶质瘤细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。[方法]将G422脑胶质瘤细胞株按4 mL∶1 g的比例在组织研磨器中研磨成匀浆,接种于小鼠右前肢腋下皮下,每只接种0.2 mL。将60只小鼠于接种后次日按体质量分层随机分配法分为3组,每组20只,模型组给予脑瘤散加CTX,阳性对照组给予CTX,空白对照组只注射生理盐水。给药11 d后处死动物,取肿瘤标本固定后切片,免疫组织化学染色测定GFAP的含量,IDA-高清晰度数码显微图象分析系统检测阳性细胞的平均光密度及平均灰度,同时计数阳性细胞数。免疫组织化学染色测定Bax,Bcl-2表达蛋白含量,统计其阳性细胞率。[结果]模型组、阳性对照组的GFAP表达较空白组明显增加,模型组与阳性对照组之间差异明显,差异有统计学意义。实验组Bcl-2蛋白的表达明显低于西药组和空白组,实验组Bax蛋白的表达明显高于西药组和空白组。[结论]脑瘤散与CTX联合应用,使肿瘤细胞的损伤加重,导致细胞坏死凋亡,其机制可能与上调Bax蛋白的表达,同时Bcl-2蛋白表达下降,从而促使G422脑胶质瘤细胞凋亡有关。

关键词：脑瘤散脑胶质瘤细胞胶质纤维酸性蛋白 Bax基因 Bcl-2基因

Tamoxifen对人脑胶质瘤细胞SHG-44辐射敏感性的影响

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中国辐射卫生 2009年第1期18卷 15-16页

作者：宁萍刘芬菊江家贵姜建平苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

目的研究tamoxifen(TAM,三苯氧胺)对人脑胶质瘤细胞SHG-44辐射敏感性的影响。方法以60Co为辐射源,细胞接受0、1、3、5、7、9Gy的γ射线照射,3H-TdR掺入法检测脑胶质瘤细胞DNA合成。人体外周血中T、B淋巴细胞分别由植物血凝素(PHA)和脂多... 详细信息

目的研究tamoxifen(TAM,三苯氧胺)对人脑胶质瘤细胞SHG-44辐射敏感性的影响。方法以60Co为辐射源,细胞接受0、1、3、5、7、9Gy的γ射线照射,3H-TdR掺入法检测脑胶质瘤细胞DNA合成。人体外周血中T、B淋巴细胞分别由植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)刺激后,同法测定TAM对T、B淋巴细胞转化的影响。结果TAM使SHG-44细胞的剂量-效应曲线发生改变,且向左移,D0值下降。当TAM浓度在2～8μmol/L时对T、B细胞转化无明显抑制作用,与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论TAM能提高人脑胶质瘤细胞SHG-44对60Coγ射线的辐射敏感性,且在2～8μmol/L浓度时对外周血T、B免疫细胞的增殖无影响。

关键词：三苯氧胺脑胶质瘤细胞辐射增敏淋巴细胞

锌指基因1对脑胶质瘤细胞增殖及凋亡能力的影响

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神经损伤与功能重建 2020年第10期15卷 597-598页

作者：郑励力孙青芳上海交通大学附属瑞金医院神经外科上海200025

目的:研究过锌指基因1(JAZF1)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡能的影响及其信号通路。方法:体外培养脑胶质瘤细胞株,分为对照组、空载组和过表达组;分别于无血清的RPMI 1640培养基中,加入Adv-JAZF1-GFP或空载体Adv-GFP,对照组不予转染腺病毒。... 详细信息

目的:研究过锌指基因1(JAZF1)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡能的影响及其信号通路。方法:体外培养脑胶质瘤细胞株,分为对照组、空载组和过表达组;分别于无血清的RPMI 1640培养基中,加入Adv-JAZF1-GFP或空载体Adv-GFP,对照组不予转染腺病毒。MTT法检测细胞活力,使用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)、腺瘤性结肠息肉病相关基因(APC)、Bax和Bcl-2蛋白表达量。结果:对照组和空载组细胞活力和凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),过表达组细胞活力低于其他2组、细胞的凋亡率高于其他2组(均P0.05),过表达组β-actenin、GSK-3β、APC和Bax蛋白表达低于其他2组,Bcl-2蛋白表达高于其他2组(P脑胶质瘤细胞的增殖,促进脑胶质瘤细胞的凋亡。

关键词：脑胶质瘤细胞增殖凋亡周期分布