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脑缺血再灌注小鼠脑内不同神经核团单胺递质及其代谢产物的变化

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中国药理学通报 2003年第11期19卷 1264-1269页

作者：炎彬邢东明孙虹金文孙立红丁怡杜力军中国医学科学院·中国协和医科大学药用植物研究所药理研究室北京100094 清华大学生物科学与技术系药物药理研究室北京100084

目的　测定脑缺血再灌注后小鼠脑内不同神经核团单胺递质及其代谢产物的动态变化。方法　阻断小鼠双侧颈总动脉 (CCAO)进行缺血再灌 ,于术后当天 (d 0 )及d 1、3、5、2 0用HPLC ECD动态检测小鼠海马 ,纹状体 ,皮层的神经递质及其代谢产... 详细信息

目的　测定脑缺血再灌注后小鼠脑内不同神经核团单胺递质及其代谢产物的动态变化。方法　阻断小鼠双侧颈总动脉 (CCAO)进行缺血再灌 ,于术后当天 (d 0 )及d 1、3、5、2 0用HPLC ECD动态检测小鼠海马 ,纹状体 ,皮层的神经递质及其代谢产物的变化。结果　与假手术对照组相比 ,脑缺血再灌注小鼠术后上述神经核团去甲肾上腺素 (NE) ,多巴胺 (DA) ,5 羟色胺 (5 HT)等神经递质及其代谢产物含量降低 ,其中海马表现尤为明显。结论　脑内多个神经系统参与了脑缺血再灌注小鼠的病理过程 ,小鼠海马对缺血损伤最为敏感。提示脑缺血再灌注后海马神经递质异常是其后期行为表现的物质基础。

关键词：脑缺血再灌注神经递质抑郁症高效液相色谱一电化学检测法(HPLC-ECD)

脑缺血再灌注小鼠M1极化的小胶质细胞分泌的可溶性Robo4对血脑屏障完整性的破坏作用

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生理学报 2022年第4期74卷 513-524页

作者：黄锦龙李宸杨亮亮高洋赵普远杨志刚复旦大学附属中山医院上海200032 国家放射与治疗临床医学研究中心上海200032

本文旨在研究缺血再灌注过程中小胶质细胞的极化对血脑屏障的调控作用和机制。构建脑缺血再灌注的小鼠模型后,小鼠外周血中IL-6、TNF-α表达明显升高,脑组织中IL-6和iNOS mRNA表达增加,iNOS的蛋白表达水平增加,小胶质细胞呈现出明显的M... 详细信息

本文旨在研究缺血再灌注过程中小胶质细胞的极化对血脑屏障的调控作用和机制。构建脑缺血再灌注的小鼠模型后,小鼠外周血中IL-6、TNF-α表达明显升高,脑组织中IL-6和iNOS mRNA表达增加,iNOS的蛋白表达水平增加,小胶质细胞呈现出明显的M1极化趋势。在体外对脑小胶质细胞Bv-2进行糖氧剥夺后复氧复糖(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理,在细胞培养上清中检测到TNF-α、IL-6表达明显上升,细胞内IL-6、iNOS和CD86 mRNA表达增加,IL-6和i NOS蛋白表达增加。RNAseq检测结果显示,诱导M1极化的Bv-2细胞和OGD/R处理的Bv-2细胞中Robo4(roundabout guidance receptor4)的表达都显著增加。进一步研究发现M1极化的Bv-2细胞和OGD/R处理的Bv-2细胞外泌可溶性Robo4蛋白(soluble roundabout guidance receptor 4,sRobo4)也显著增加,并且Robo4重组蛋白、M1极化Bv-2细胞培养上清或OGD/R处理的Bv-2细胞培养上清都能够使内皮细胞的紧密结构破坏。此外,Robo4在急性脑大血管闭塞取栓术后再灌注的患者血清中也有高表达。上述结果显示,脑缺血再灌注过程中M1极化的小胶质细胞分泌Robo4增加可能是引起血脑屏障损伤的原因之一,Robo4有可能作为血脑屏障功能保护的治疗靶点之一。

关键词：脑缺血再灌注血脑屏障脑小胶质细胞 M1极化 sRobo4

脑缺血再灌注大鼠半暗带皮质谷氨酸受体相互作用蛋白表达的增加

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解剖学报 2011年第5期42卷 578-581页

作者：李薇袁华牟翔段丽曹荣瞿丽莉中国人民解放军306医院神经内科北京100101 中国人民解放军第四军医大学西京医院康复与理疗科西安710032 中国人民解放军第四军医大学基础部神经科学研究所西安710032

目的探讨脑缺血再灌注大鼠半暗带皮质中谷氨酸受体相互作用蛋白(GRIP)表达变化的规律。方法 SD雄性大鼠,随机分为脑缺血2h后再灌注1、3、6、12、24、72h组和假手术组(每组6只大鼠),采用线栓-再通法制作大脑中动脉闭塞模型,于再灌注后相... 详细信息

目的探讨脑缺血再灌注大鼠半暗带皮质中谷氨酸受体相互作用蛋白(GRIP)表达变化的规律。方法 SD雄性大鼠,随机分为脑缺血2h后再灌注1、3、6、12、24、72h组和假手术组(每组6只大鼠),采用线栓-再通法制作大脑中动脉闭塞模型,于再灌注后相应时间点处死大鼠取脑,免疫组织化学方法观察GRIP在皮质中的表达及分布,免疫荧光双标记法观察GRIP阳性神经元与谷氨酸受体2(GluR2)阳性神经元的关系。结果假手术组大鼠皮质内罕见GRIP阳性神经元,缺血再灌注3h后大鼠半暗带皮质中GRIP阳性神经元数量明显增加,早期主要为树突阳性染色,后期主要为胞体阳性染色。免疫荧光双标记结果显示,GRIP与GluR2在皮质神经元中表现为共定位。结论脑缺血再灌注后半暗带皮质中GRIP蛋白表达增加,加速GluR2受体向突触后膜的转运,可能是保护半暗带中神经元免于α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体介导的兴奋性损伤的重要因素。

关键词：脑缺血再灌注谷氨酸受体相互作用蛋白谷氨酸受体2 免疫组织化学免疫荧光大鼠

脑缺血再灌注大鼠白细胞介素-1受体与肿瘤坏死因子-α受体变化及针刺干预的时效性研究

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中国针灸 2012年第11期32卷 1012-1018页

作者：王占奎倪光夏刘坤肖震心杨宝旺王晶王舒天津中医药大学第二附属医院针灸脑病中心天津300150 南京中医药大学南京210029 天津中医药大学第一附属医院

目的:探讨针刺治疗脑梗死介入时机及脑缺血再灌注损伤与炎性细胞因子受体的关系。方法:采用雄性健康Wistar大鼠110只,随机分为正常组10只、假手术组10只、模型组10只、非穴位针刺组40只及醒脑开窍针刺组40只。其中两个针刺组内再设缺血1... 详细信息

目的:探讨针刺治疗脑梗死介入时机及脑缺血再灌注损伤与炎性细胞因子受体的关系。方法:采用雄性健康Wistar大鼠110只,随机分为正常组10只、假手术组10只、模型组10只、非穴位针刺组40只及醒脑开窍针刺组40只。其中两个针刺组内再设缺血1h再灌注1h组、3h组、6h组、12h组4个亚组,每个亚组10只大鼠。两个针刺组分别于缺血再灌注1h、3h、6h、12h4个时间点进行针刺干预,醒脑开窍针刺组穴取"水沟""内关";非穴位针刺组取双胁下非穴点。在相应时间点断头取脑,采用实时定量聚合酶链反应及免疫印迹法检测白细胞介素-1受体(IL-1RⅠ)与肿瘤坏死因子-α受体(TNFR-Ⅰ)mRNA和蛋白变化。结果:模型组大鼠IL-1RⅠ、TN-FR-ⅠmRNA和蛋白较正常组、假手术组、醒脑开窍针刺组、非穴位针刺组明显上升(P缺血1h再灌注3h表达最弱,其次为6h、1h、12h;非穴位针刺组内IL-1RⅠ、TNFR-ⅠmRNA和蛋白各时间点间表达无显著差异,但各时间点与模型组比较有所下降(均P脑缺血再灌注IL-1RⅠ和TNFR-Ⅰ的mRNA和蛋白的表达,抑制致炎因子受体过表达而阻断凋亡信号的传导,延长脑缺血时间治疗窗,从而起到脑保护作用。在缺血超早期3h介入针刺治疗为最佳时间。

关键词：脑缺血再灌注醒脑开窍炎性细胞因子受体

脑缺血再灌注模型大鼠接受跑台运动锻炼海马反义导向分子A的表达

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中国组织工程研究 2015年第5期19卷 685-690页

作者：郭振委秦新月张广慧徐州医学院附属连云港市第一人民医院神经内科江苏省连云港市222002 重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市400042

背景:脑卒中后,运动锻炼对其神经功能的康复具有极其重要的作用,但关于卒中后大鼠运动量的研究鲜有报道。而海马与认知功能密切相关,但大鼠缺血再灌注后海马内反义导向分子A的表达的研究,国内外未见报道。目的:探索运动锻炼对脑缺血再... 详细信息

背景:脑卒中后,运动锻炼对其神经功能的康复具有极其重要的作用,但关于卒中后大鼠运动量的研究鲜有报道。而海马与认知功能密切相关,但大鼠缺血再灌注后海马内反义导向分子A的表达的研究,国内外未见报道。目的:探索运动锻炼对脑缺血再灌注后大鼠缺血侧海马内反义导向分子A表达的影响。方法:将120只SD大鼠随机等分为正常组、假手术组、模型7,14,28 d组,模型7,14,28 d组大鼠采用线栓法制作大鼠右侧脑缺血再灌注模型。各组大鼠各等分为`4个亚组:非运动亚组、低、中、高运动量亚组。低运动量组进行5 m/min,5 min;7 m/min,5 min;9 m/min,20 min跑台训练;中运动量组进行8 m/min,5 min;10 m/min,5 min;13 m/min,20 min跑台训练;高运动量组进行8 m/min,5 min;11 m/min,5 min;20 m/min,20 min跑台训练。结果与结论:非运动时,模型7 d组大鼠缺血侧海马反义导向分子A m RNA和蛋白表达水平最高,且反义导向分子A相对表达水平随时间延长而逐渐降低。与非运动相比,模型14,28 d组大鼠中运动量时缺血侧海马反义导向分子A m RNA和蛋白表达水平明显下降(P脑缺血再灌注大鼠患侧海马反义导向分子A的表达。

关键词：实验动物脑及脊髓损伤模型运动锻炼脑缺血再灌注海马

脑缺血再灌注大鼠神经细胞DNA损伤与凋亡的时空关系分析

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中华物理医学与康复杂志 2004年第12期26卷 708-711页

作者：杨渊张苏明方思羽张旻江红许康常履华华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030

目的　探讨局灶性脑缺血再灌注大鼠神经细胞DNA损伤与凋亡的时空分布演变过程及两者间的联系。方法　共选取 72只成年Wistar大鼠 ,将其随机分为正常组、假手术组、缺血 3 0min组及缺血 2h组 ;后 2组大鼠又根据再灌注时间 (再灌注 1,6,12... 详细信息

目的　探讨局灶性脑缺血再灌注大鼠神经细胞DNA损伤与凋亡的时空分布演变过程及两者间的联系。方法　共选取 72只成年Wistar大鼠 ,将其随机分为正常组、假手术组、缺血 3 0min组及缺血 2h组 ;后 2组大鼠又根据再灌注时间 (再灌注 1,6,12 ,2 4及 48h)不同 ,各细分为 5个亚组。制作大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型 (MCAO R) ,应用免疫组化法观察脑缺血组织在不同缺血再灌注时间下 ,其P5 3表达在空间及程度上的改变 ,并结合TUNEL技术观察P5 3表达与细胞凋亡的时空关系。结果　脑缺血再灌注可诱导细胞凋亡及P5 3蛋白表达增强 ,并随着缺血或再灌注时间的延长 ,凋亡细胞数量与P5 3表达均逐渐增加 ,但P5 3蛋白的表达始终早于凋亡细胞的出现 ,且P5 3阳性细胞数量始终多于凋亡细胞数量 (P 缺血可引起DNA损伤 ,DNA损伤后可诱导DNA修复 ,如修复失败则启动细胞凋亡程序。

关键词： DNA损伤成年Wistar大鼠凋亡细胞神经细胞 P53表达脑缺血再灌注细胞凋亡 DNA修复 TUNEL技术数量

脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力和海马组织CREB、C/EBP的DNA结合活性改变

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中国老年学杂志 2014年第6期34卷 1559-1561页

作者：张泓波高维娟钱涛唐敬龙李君承德医学院病理生理学教研室河北承德067000 河北中医学院河北省人民医院

目的观察脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力和海马组织环磷酸腺苷反应(cAMP)元件结合蛋白(CREB)及CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP)的DNA结合活性改变。方法采用4血管法制备大鼠缺血再灌注损伤模型,用水迷宫检测大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马... 详细信息

目的观察脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力和海马组织环磷酸腺苷反应(cAMP)元件结合蛋白(CREB)及CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP)的DNA结合活性改变。方法采用4血管法制备大鼠缺血再灌注损伤模型,用水迷宫检测大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马CA1区神经元形态改变,凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)测定CREB和C/EBP的DNA结合活性。结果水迷宫检测:与假手术组术比较,模型组大鼠逃逸潜伏期明显延长(P脑缺血再灌注损伤引起的神经元损伤和学习记忆能力下降。

关键词：脑缺血再灌注 cAMP反应元件结合蛋白 CCAAT/增强子结合蛋白 DNA结合活性

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脑缺血再灌注后炎症和自由基作用的实验研究

中国老年学杂志 2009年第6期29卷 644-646页

作者：薛晶冯加纯杨艺敏李艳华吉林大学第一医院神经内科吉林长春130021

目的动态观察大鼠脑缺血再灌注后的早期损伤。方法将100只大鼠随机分为假手术组50只、脑缺血再灌注组50只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型,脑缺血2h后再灌注0、6、12、24、48h取材,假手术组在术后相对应脑缺血再灌注组各时间点... 详细信息

目的动态观察大鼠脑缺血再灌注后的早期损伤。方法将100只大鼠随机分为假手术组50只、脑缺血再灌注组50只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型,脑缺血2h后再灌注0、6、12、24、48h取材,假手术组在术后相对应脑缺血再灌注组各时间点取材,免疫组化法测NF-κBp65、IL-1β,化学比色法测MDA、SOD,TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果与假手术组相比,大鼠大脑中动脉缺血2小时后再灌注0～12h时MDA含量逐渐增加(P缺血2后再灌注不同时间炎症反应和自由基损伤的实验动物模型,为在最佳时间点观察药物干预自由基和炎症反应提供了实验依据。

关键词：脑缺血再灌注炎症自由基

脑缺血再灌注对小鼠学习记忆的损伤及山茶花提取物的保护作用

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中国康复医学杂志 2008年第3期23卷 245-247页

作者：尹明华洪森荣江西上饶师范学院生命科学系 334001

目的:探讨山茶花提取物(ECJ)对缺血性记忆障碍的保护作用及其与炎症和血脑屏障损伤的关系。方法:小鼠分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(银杏叶提取物,EGB,35mg·kg-1,ip)和山茶花提取物治疗组(ECJ,50,15,5mg·kg-1,ip)。山茶花提... 详细信息

目的:探讨山茶花提取物(ECJ)对缺血性记忆障碍的保护作用及其与炎症和血脑屏障损伤的关系。方法:小鼠分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(银杏叶提取物,EGB,35mg·kg-1,ip)和山茶花提取物治疗组(ECJ,50,15,5mg·kg-1,ip)。山茶花提取物治疗组和阳性药物对照组分别注射山茶花提取物和银杏叶提取物,连续给药9d。给药后第7d,采用双侧颈总动脉结扎法建立重复前脑缺血再灌注模型。术后第7d用水迷宫检测小鼠学习记忆能力;用紫外分光光度计检测脑组织髓过氧化物酶(MPO)活性和伊文思蓝(EB)含量;同时测定脑组织的含水量。结果:模型组小鼠的学习记忆能力显著下降(P缺血小鼠的学习记忆能力;并使脑组织EB含量下降(P缺血再灌注引起的脑损伤,改善小鼠学习记忆能力,该作用可能与其提高脑组织抗血脑屏障损伤和抗炎症反应能力有关。

关键词：山茶花提取物脑缺血再灌注学习记忆血脑屏障炎症反应