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木瓜苷通过抑制NF-κB P65/TNF-α通路活性减轻小鼠脑缺血再灌注诱导的组织损伤

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浙江大学学报（医学版） 2019年第3期48卷 289-295页

作者：马竞何文龙高重阳余瑞云薛鹏牛永超新乡市中心医院神经内科河南新乡453000 新乡市中心医院全科医学科河南新乡453000 新乡市中心医院磁共振室河南新乡453000

目的:探究木瓜苷对小鼠脑缺血再灌注诱导的脑组织损伤的治疗作用和机制。方法:选择8周龄健康C57BL/C小鼠50只,分别设置手术对照组、模型对照组、木瓜苷组,其中木瓜苷组按给药剂量不同分别设置木瓜苷30、60、90 mg/kg 组,木瓜苷采用灌胃... 详细信息

目的:探究木瓜苷对小鼠脑缺血再灌注诱导的脑组织损伤的治疗作用和机制。方法:选择8周龄健康C57BL/C小鼠50只,分别设置手术对照组、模型对照组、木瓜苷组,其中木瓜苷组按给药剂量不同分别设置木瓜苷30、60、90 mg/kg 组,木瓜苷采用灌胃方式给药。HE染色观察脑组织细胞形态;Zea-Longa 5分评分法评估神经功能;TUNEL染色检测细胞凋亡;ELISA法检测氧化应激和炎症因子水平;蛋白质印迹法检测关键通路分子和神经功能分子。结果:与手术对照组比较,模型对照组小鼠脑组织损伤严重,细胞发生严重凋亡、氧化应激,炎症反应剧烈,炎症和凋亡促进因子NF-κB P65和TNF-α表达水平升高,并伴随神经功能因子髓鞘相关糖蛋白(MAG)和少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)表达水平下降(均 P 脑缺血再灌注损伤的治疗效果最好。

关键词：木瓜/化学皂苷类/药理学脑缺血/药物疗法再灌注损伤/药物疗法细胞凋亡氧化性应激炎症 NF-κB/代谢肿瘤坏死因子α/代谢

抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路对慢性脑缺血小鼠认知功能的改善和机制

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浙江大学学报（医学版） 2017年第4期46卷 405-412页

作者：张斌斌吴美玲刘露娜竺杨彬开洁静曾玲晖浙江大学城市学院医学院浙江杭州310015

目的:探索哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素在慢性脑缺血中的作用及机制。方法:6周龄的ICR小鼠通过右颈总动脉结扎诱导慢性脑缺血模型,采用蛋白质印迹法检测造模后不同时期(1、3、6、24 h,3、7 d,2、4、6周)小鼠大脑皮层和... 详细信息

目的:探索哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素在慢性脑缺血中的作用及机制。方法:6周龄的ICR小鼠通过右颈总动脉结扎诱导慢性脑缺血模型,采用蛋白质印迹法检测造模后不同时期(1、3、6、24 h,3、7 d,2、4、6周)小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR信号通路mTOR、S6K和S6蛋白表达及其磷酸化水平。造模24 h后腹腔注射雷帕霉素(3.0 mg/kg),经FluoroJade B染色观察细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测mTOR信号通路的变化和对细胞自噬的影响,并采用Morris水迷宫和Y迷宫试验测定小鼠学习记忆功能。结果:模型小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR信号通路被异常激活,从6 h开始一直持续到6周,表现为mTOR、S6K和S6蛋白磷酸化增加。雷帕霉素可逆转由慢性脑缺血所致的mTOR信号通路激活,并显著减少细胞凋亡(146.1±16.3与84.5±9.6,P脑缺血所导致的Beclin1和LC3-Ⅱ蛋白的表达。Morris水迷宫和Y迷宫试验结果显示,雷帕霉素组较模型组平台潜伏期缩短[(11.1±2.3)s与(8.1±1.8)s,P脑缺血所致的学习记忆功能下降,其机制可能与抑制细胞凋亡和自噬相关。

关键词：西罗莫司/药理学蛋白激酶类/生理学信号传导/生理学自噬细胞凋亡脑缺血/药物疗法记忆/药物作用疾病模型动物

西洛他唑鼻腔给药对小鼠慢性脑缺血损伤的保护作用

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浙江大学学报（医学版） 2011年第2期40卷 169-175页

作者：张琦叶夷露李青张纬萍姜莉莉魏尔清俞月萍浙江医学高等专科学校药理教研室浙江杭州310053 浙江大学医学院药理学系浙江杭州310058 温州医学院药学院浙江温州325035

目的:观察西洛他唑鼻腔给药对小鼠慢性脑缺血损伤的保护作用。方法:以大脑中动脉栓塞(MCAO)诱导小鼠局灶性脑缺血,分别于术后1、4、7 h给予西洛他唑(鼻腔给药或腹腔注射给药),从第2天起,每天2次,持续到缺血后14 d。缺血后1、3、7、14、2... 详细信息

目的:观察西洛他唑鼻腔给药对小鼠慢性脑缺血损伤的保护作用。方法:以大脑中动脉栓塞(MCAO)诱导小鼠局灶性脑缺血,分别于术后1、4、7 h给予西洛他唑(鼻腔给药或腹腔注射给药),从第2天起,每天2次,持续到缺血后14 d。缺血后1、3、7、14、21、28、35 d进行神经症状评分和斜板试验,并记录小鼠的生存率。实验结束后,测定脑损伤体积和神经元数量。结果:西洛他唑鼻腔给药0.3 mg/kg能显著提高小鼠MCAO术后35 d的生存率。西洛他唑鼻腔给药(0.3、1mg/kg)和西洛他唑腹腔给药(10 mg/kg)能改善缺血后神经症状评分,降低脑梗死体积,减轻脑萎缩,并不同程度地增加缺血侧不同脑区的神经元密度。结论:西洛他唑鼻腔给药对小鼠慢性缺血性脑损伤具有保护作用,可作为脑缺血治疗的一种新方法。

关键词：脑缺血/药物疗法脑缺血/病理学四唑类/治疗应用疾病模型,动物西洛他唑鼻腔给药

急性缺血性卒中患者静脉溶栓后24小时血压变异与血流再灌注的相关性研究

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浙江大学学报（医学版） 2015年第6期44卷 603-610,617页

作者：刘克勤陈清梦严慎强张圣楼敏浙江大学医学院附属第二医院神经内科浙江杭州310009 杭州市第一人民医院神经内科浙江杭州310006

目的：明确急性缺血性卒中患者静脉溶栓后24h血压变异对脑组织再灌注以及3个月后神经功能结局的影响。方法：连续收集2009年6月至2014年9月期间在浙江大学医学院附属第二医院行多模式MRI检查或CT灌注扫描，接受静脉溶栓治疗的急性缺血... 详细信息

目的：明确急性缺血性卒中患者静脉溶栓后24h血压变异对脑组织再灌注以及3个月后神经功能结局的影响。方法：连续收集2009年6月至2014年9月期间在浙江大学医学院附属第二医院行多模式MRI检查或CT灌注扫描，接受静脉溶栓治疗的急性缺血性卒中患者的临床、影像、溶栓后24h内动态血压监测资料，评估溶栓后24h再灌注情况及3个月改良Rankin评分。记录血压均值和变异指标，后者包括标准差（sd）、连续变异度（SV）、上升变异（sv-rise）和下降变异（sv-drop）。采用二元logistic回归分析血压变异指标对再灌注及神经功能结局的影响。结果：最终纳入188例患者，其中114例（60．6％）达到再灌注，74例（39．4％）未达到再灌注。二元logistic回归分析提示，静脉溶栓后24h内收缩压连续变异（SBPsv），尤其是上升变异（SBPsv—rise）较大者不易达到再灌注（SV：OR=0．421，95％CI：0．187—0．950，P=0．037；sv—rise：OR=0．311，95％凹：0．137～0．704，P=0．005）。同时，静脉溶栓后24hSBPsv—rise高者不易达到早期神经功能恢复（OR=0．372，95％CI：0．166～0．832，P=0．016）；SBPsv、SBPsv-rise和SBPsv—drop是溶栓治疗3个月后患者神经功能不良结局的独立危险因素（SV：OR=6．381，95％a：2．132～19．096，P=0．001；SV．rise：OR=5．615．95％CI：2．152～14．654，P〈0．001；sv．drop：OR=3．009，95％CI：1．263～7．169，P=0．013）。结论：急性缺血性卒中患者早期收缩压变异越大越不利于脑组织再灌注和早期神经功能恢复，并与静脉溶栓治疗后3个月患者神经功能不良结局有关。

关键词：卒中/药物疗法急性病脑缺血/药物疗法组织型纤溶酶原激活物/治疗应用血栓溶解疗法血压再灌注脑

5-脂氧酶在全脑缺血海马CA1神经元损伤中的作用

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浙江大学学报（医学版） 2013年第1期42卷 61-66页

作者：陈文健李成檀赵建波张晓燕韩华阳魏尔清张丽慧杭州师范大学医学神经生物学市级重点实验室基础医学部药理学教研室浙江杭州310036 浙江大学医学院药理学系浙江杭州310058

目的:观察全脑缺血后海马神经元损伤中5-脂氧酶(5-LOX)的表达变化,并探讨5-LOX选择性抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用。方法:在双侧颈总动脉阻断结合降压药诱导大鼠全脑缺血模型,Western blot方法检测脑缺血损伤中5-... 详细信息

目的:观察全脑缺血后海马神经元损伤中5-脂氧酶(5-LOX)的表达变化,并探讨5-LOX选择性抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用。方法:在双侧颈总动脉阻断结合降压药诱导大鼠全脑缺血模型,Western blot方法检测脑缺血损伤中5-LOX的表达改变;免疫组织化学及免疫荧光双标染色方法观察5-LOX的分布特征。应用5-LOX选择性抑制剂zileuton(10、30、50 mg/kg,缺血前后2 h灌胃给药,以后每日2次,共3 d)观察脑缺血后海马神经元的损伤变化。结果:大鼠全脑缺血后3～14 d,海马CA1神经元产生迟发性神经元死亡;海马5-LOX表达在全脑缺血后1～7 d增高,并于3 d达高峰;在海马CA1区,5-LOX主要表达在神经元胞浆,脑缺血后5-LOX发生核移位现象。5-LOX抑制剂zileuton(30和50 mg/kg)能减少全脑缺血后海马CA1神经元的死亡。结论:5-LOX参与大鼠全脑缺血诱导的海马神经元损伤,5-LOX抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤有保护作用。

关键词：羟基脲/治疗应用脂氧合酶抑制剂/药理学脑缺血/药物疗法海马/细胞学神经元/细胞学疾病模型,动物

既往抗血小板治疗对合并颅内微出血急性缺血性卒中患者静脉溶栓的安全性分析

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浙江大学学报（医学版） 2015年第6期44卷 618-624页

作者：严慎强毛颖盈钟根龙张圣楼敏浙江大学医学院附属第二医院神经内科

目的：本研究旨在探讨既往抗血小板药物使用对合并颅内微出血患者静脉溶栓后发生出血转化以及预后的影响。方法：连续分析2009年6月至2015年6月期间在浙江大学医学院附属第二医院神经内科接受重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓治疗的急... 详细信息

目的：本研究旨在探讨既往抗血小板药物使用对合并颅内微出血患者静脉溶栓后发生出血转化以及预后的影响。方法：连续分析2009年6月至2015年6月期间在浙江大学医学院附属第二医院神经内科接受重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓治疗的急性缺血性卒中患者临床资料，纳入溶栓前行磁敏感序列检查的患者，收集其既往抗血小板药物使用记录；根据ECASSII标准评估溶栓后出血转化情况，随访3个月改良Rankin量表（mRS）评分。结果：最终纳入分析449例患者，平均年龄（66．8±12．9）岁，女性151例（33．6％），男性298例（66．4％），发病至溶栓时间为（229．0±103．7）min，溶栓前美国国立卫生研究院卒中量表评分为10（5-15）分；共172例（38．3％）合并颅内微出血，63例（14．0％）既往使用抗血小板药物。Logistic回归分析提示，既往抗血小板药物治疗不增加合并颅内微出血患者静脉溶栓后血肿型出血转化风险（OR=0．809；95％CI：0．201。3．262：P=0．766），也不增加其3个月神经功能结局不良（mRS≥3）的比例（OR=1．517：95％CI：O．504—4．568；P=0．459）。而对于合并多发微出血（i〉3）的患者，既往使用抗血小板药物增加其梗死外出血转化风险（OR=9．737；95％CI：1．364。69．494；P：0．023），但对神经功能结局无显著影响（OR=1．697：95％CI：0．275。10．487；P=0．569）。结论：目前没有证据显示需要将既往抗血小板药物使用作为合并颅内微出血患者静脉溶栓的禁忌，而合并多发颅内微出血的患者需要更大样本的研究。

关键词：卒中/药物疗法急性病脑缺血/药物疗法组织型纤溶酶原激活物/治疗应用血栓溶解疗法输注静脉内预后血小板聚集抑制剂

活血化瘀系列方对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

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浙江大学学报（医学版） 2003年第6期32卷 502-506页

作者：胡海涛黄鉴政刘华浙江大学医学院附属第二医院浙江杭州310009

目的 :探讨活血化瘀系列方 (活血汤、活血益气汤、活血养阴汤 )对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 :采用大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型 ,缺血 6 0 min,再灌注 3d。观察药物对脑缺血再灌注引起的神经功能缺损... 详细信息

目的 :探讨活血化瘀系列方 (活血汤、活血益气汤、活血养阴汤 )对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 :采用大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型 ,缺血 6 0 min,再灌注 3d。观察药物对脑缺血再灌注引起的神经功能缺损症状及病理损伤的影响 ,检测脑组织一氧化氮合酶 (NOS)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性的变化和丙二醛 (MDA)含量的变化 ,免疫印迹分析 NMDA受体亚单位蛋白 NR1和内皮型 NOS(e NOS)的表达。结果 :活血化瘀系列方及尼莫地平能显著改善神经功能缺失症状 ,减小梗死体积和脑水肿面积 ,减少神经元损伤 (P脑缺血再灌注损伤有保护作用 ,其机制可能与降低脑组织内 NOS活性 ,降低 NR1的表达 ,减少 MDA含量和增加 SOD活性有关。

关键词：脑缺血/药物疗法再灌注损伤/预防和控制活血化瘀系列方缺血再灌注损伤一氧化氮合酶丙二醛超氧化物歧化酶 NMDA受体

氟桂利嗪对脑海马迟发性神经元死亡沙土鼠空间分辨学习能力的影响

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中国临床康复 2005年第20期9卷 145-147,i0002页

作者：胡志云姜长斌尹林张文娣大连医科大学附属第二医院神经内科辽宁省大连市116027 大连医科大学附属第一医院神经内科辽宁省大连市116011

目的:氟桂利嗪是通过血脑屏障的细胞钙超载阻滞剂。探其对迟发性神经元死亡发生后沙土鼠空间分辨学习的影响及对脑海马CA1区神经元的保护作用。方法:实验于2004-03/06在大连医科大学基础医学院生理实验室完成。将健康雄性蒙古沙土鼠56... 详细信息

目的:氟桂利嗪是通过血脑屏障的细胞钙超载阻滞剂。探其对迟发性神经元死亡发生后沙土鼠空间分辨学习的影响及对脑海马CA1区神经元的保护作用。方法:实验于2004-03/06在大连医科大学基础医学院生理实验室完成。将健康雄性蒙古沙土鼠56只随机分3组:假手术组(n=8),缺血再灌注组(n=24),氟桂利嗪组(n=24),后两组又分为缺血5min后再灌注2d及7d组和Y迷宫组3个亚组,每亚组8只动物。缺血再灌注组和氟桂利嗪组夹闭双侧颈总动脉制备缺血再灌注模型,假手术仅暴露双侧颈总动脉,不夹闭。氟桂利嗪组术后胃灌氟桂利嗪5mg/kg,1次/d,直至处死前1d;其他两组胃灌生理盐水0.5mL。术后第4天利用Y迷宫检测动物空间分辨学习能力,包括学习获得所需天数及条件反射次数。实验沙土鼠脑组织结构变化及细胞内显微结构变化以免疫组织化学染色法及电镜技术桧测观察。结果:经补充56只动物进入结果分析。①Y迷宫学习获得所需天数:缺血再灌注组多于假手术组和氟桂利嗪组(5.88±0.99,2.00±0.76,2.13±0.64,P0.05)。②Y迷宫学习获得条件反射次数:3组间无差异(P>0.05)。③术后7d脑海马CA1区存活神经元数:缺血再灌注组少于假手术组和氟桂利嗪组犤(8.95±2.29),(65.04±8.09),(42.13±5.90)个/视野,P脑缺血5min造成海马CA1区神经元选择性迟发性死亡,同时产生空间分辨学习能力的可逆性损害。5mg/kg的氟桂利嗪治疗性用药在一定程度上可以阻止迟发性神经元死亡,同时对学习、记忆等高级神经功能具有保护性作用。

关键词：脑缺血/药物疗法迷宫学习记忆氟桂利嗪

银杏叶提取物对脑组织及脑神经细胞活性的保护作用

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中国临床康复 2006年第23期10卷 146-148页

作者：朱尚峰金跃春南宁市第一人民医院药剂科广西壮族自治区南宁市530022

目的:银杏叶提取物主要成分黄酮苷、萜烯内酯和单体内酯等对心血管系统,脑循环,血液及神经等方面作用机制和疗效已基本肯定,现就银杏叶提取物对脑组织及神经损伤保护作用的研究进行综述。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1994-01/2... 详细信息

目的:银杏叶提取物主要成分黄酮苷、萜烯内酯和单体内酯等对心血管系统,脑循环,血液及神经等方面作用机制和疗效已基本肯定,现就银杏叶提取物对脑组织及神经损伤保护作用的研究进行综述。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1994-01/2004-12期间的相关文章,检索词为“Ginkgobilobaextract”,限定文章语言种类为英文;同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1995-01/2003-12期间的相关文章,检索词为″银杏叶提取物″,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,纳入银杏叶提取物作用于脑细胞及神经细胞的相关药理机制,临床运用及其有效成分,对脑缺血缺氧,水肿的保护以及大脑皮质层的记忆功能丧失和脑部病变引起的帕金森病的防治相关的文献。排除标准:综述类文献和重复研究。资料提炼:共收集到44篇关于银杏叶提取物对脑组织及神经损伤保护作用的文献,纳入为银杏叶提取物作用于脑细胞及神经细胞的相关药理机制,临床运用及其有效成分,对脑缺血缺氧,水肿的保护以及大脑皮质的记忆功能丧失和脑部病变引起的帕金森病的防治相关的文献19篇。排除综述类文献和重复研究25篇。资料综合:①银杏叶提取物对脑血栓的保护性作用:银杏叶提取物可明显抑制缺血再灌注损伤所致的组织纤溶酶原激活因子抑制因子Ⅰ的升高,调节纤维蛋白溶酶过程,防止血栓形成。②银杏叶提取物对脑缺血缺氧、水肿的保护作用:银杏叶提取物中黄酮苷、萜烯内脂和单体具有多种药理活性,对脑缺血缺氧、水肿保护作用与抗血小板活化因子、抗自由基和改善脑血管循环的作用密切相关。③银杏叶提取物对大脑记忆力的影响:银杏叶提取物主要是通过促进大脑海马胆碱的再摄取,减少M型胆碱受体和α2肾上腺素受体及递质的丢失,从而发挥改善学习和记忆能力的功能。④银杏叶提取物对帕金森病的防治作用:其机制是通过保护残存的损伤侧黑质神经元,使得纹状体多巴胺的减少得以控制,并保持在一定的水平;银杏内脂抑制纹状体多巴胺的代谢,从而升高多巴胺的水平。⑤银杏叶提取物对脑神经的保护作用:银杏叶提取物可能通过抑制神经细胞一氧化氮的产生、抑制嗜中性粒细胞所介导的炎症反应、直接对抗谷氨酸受体等保护脑神经。结论:银杏叶提取物和单体的研究在动物实验和心血管疾病的运用性研究上取得了广泛的成果,对于激活脑组织及神经损伤的细胞,改善脑血管循环,治疗和预防脑部某些疾病有一定的作用。

关键词：银杏植物提取物/药理学脑缺血/药物疗法神经元