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脉络膜新生血管小鼠微小RNA对骨髓来源细胞表达基质金属蛋白酶的调控作用

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中华实验眼科杂志 2015年第1期33卷 10-15页

作者：吕洋侯慧媛王雨生第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所西安710032

背景基质金属蛋白酶-2（MMP-2）/MMP-13在脉络膜新生血管（CNV）生成过程中发挥重要作用,但CNV原位细胞中MMP-2/MMP-13的表达有限.骨髓来源细胞（BMCs）参与CNV生成,可能是CNV中MMP-2/MMP-13的重要来源,而微小RNA188-5p（miR188-5p）... 详细信息

背景基质金属蛋白酶-2（MMP-2）/MMP-13在脉络膜新生血管（CNV）生成过程中发挥重要作用,但CNV原位细胞中MMP-2/MMP-13的表达有限.骨髓来源细胞（BMCs）参与CNV生成,可能是CNV中MMP-2/MMP-13的重要来源,而微小RNA188-5p（miR188-5p）可能是调控BMCs表达MMP-2/MMP-13的关键节点. 目的探讨参与CNV生成的BMCs表达MMP-2/MMP-13的情况及BMCs表达的MMP-2/MMP-13是否受miR188-5p调控.方法将表达绿色荧光蛋白（GFP）的转基因雌性小鼠的骨髓细胞移植到野生型雌性C57BL/6J小鼠以建立C57BL/***嵌合体小鼠模型,流式细胞术检测嵌合度大于85％的42只小鼠纳入实验作为实验组,未进行骨髓细胞移植的野生型雌性C57BL/6J小鼠作为对照组.两组小鼠均以视网膜激光光凝法诱导CNV,两个组分别于光凝前及光凝后第1、3、5、7、10、14、28天各取3只小鼠分离视网膜脉络膜组织,采用ELISA法检测小鼠视网膜脉络膜组织匀浆中MMP-2/MMP-13质量浓度的变化;采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测上述时间点小鼠视网膜脉络膜组织中miR188-5p mRNA的相对表达量变化;采用免疫荧光染色和原位杂交技术观察上述时间点小鼠CNV区GFP阳性细胞中MMP-2/MMP-13和miR188-5p的表达情况,并进行定量分析.结果实验组C57BL/***嵌合体模型小鼠外周血单核细胞中表达GFP细胞所占比例平均为（90.67＆#177;3.02）％,符合实验要求.ELISA检测显示,对照组与实验组小鼠视网膜脉络膜匀浆中MMP-2/MMP-13的表达趋势一致,总体比较差异均无统计学意义（MMP-2：F=0.060,P=0.810;MMP-13：F=0.012,P=0.915）.ELISA和免疫荧光均显示在诱导CNV后1d,实验组和对照组MMP-2表达均快速增加,3d时表达量最高,实验组占总表达量的64.21％,随后两组MMP-2表达均下降.两组MMP-13表达量在诱导CNV后1d缓慢增加,7d时表达量最高,实验组占总表达量的79.61％,随后MMP-13总体表达下降.靶基因预测结果可显示MMP-2和MMP-13的3＆#39;非编码区有miR188-5p的互补结合位点.RT-qPCR和原位杂交检测结果均显示在诱导CNV后1d,视网膜脉络膜中miR188-5p表达量快速下降,7d时表达量最低.小鼠CNV区BMCs中miR188-5p的动态表达与BMCs中MMP-13的动态表达呈负相关（r=-0.868,P＜0.05）;CNV诱导后5d内BMCs中miR188-5p的动态表达与BMCs中MMP-2的动态表达呈负相关（r=-0.997,P＜0.05）. 结论在激光诱导的小鼠CNV模型中,MMP-2/MMP-13的表达随时间发生动态变化,BMCs对其表达的迅速上调起主要作用.CNV区BMCs中miR188-5p表达随时间变化的趋势与MMP-13相反,与在CNV形成早期MMP-2表达趋势相反.miR188-5p的调控靶基因是MMP-2/MMP-13,提示BMCs的MMP-2/MMP-13表达可能受miR188-5p调控.

关键词：脉络膜新生血管基质金属蛋白酶骨髓细胞微小RNA

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脉络膜新生血管相关信号通路研究进展

国际眼科杂志 2019年第5期19卷 762-765页

作者：邓宝娣李嘉王庭槐中山大学中山医学院生理学教研室中国广东省广州市510275 中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室中国广东省广州市510060

脉络膜新生血管(CNV)又称视网膜下新生血管,是多种眼底病的基础病理改变,也是导致黄斑区病理性损害和严重视功能障碍的常见原因。目前CNV的治疗研究多以血管内皮生长因子(VEGF)信号通路为靶向治疗,但其存在疗效不持久、需重复注射以及... 详细信息

脉络膜新生血管(CNV)又称视网膜下新生血管,是多种眼底病的基础病理改变,也是导致黄斑区病理性损害和严重视功能障碍的常见原因。目前CNV的治疗研究多以血管内皮生长因子(VEGF)信号通路为靶向治疗,但其存在疗效不持久、需重复注射以及眼内注射可能带来的副作用等问题。因此,进一步研究CNV发生发展进程中可能具有重要影响作用的信号通路,对研发治疗CNV的新药物和新技术具有十分重要的作用。本文综述目前已报道的CNV相关信号通路的研究进展,以期深入了解CNV的发生发展进程,并为相关疾病的诊疗提供新思路。

关键词：脉络膜新生血管 VEGF信号通路 Wnt信号通路 Shh信号通路 TGF-β/Smad信号通路 Notch信号通路

脉络膜新生血管性疾病中西药治疗的多焦视网膜电图及视野观察

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中国实用眼科杂志 2011年第6期29卷 551-554页

作者：蒋莉黄时洲吴乐正文峰暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院眼科深圳510080 中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室

目的探讨脉络膜新生血管性疾病患者在接受中西药治疗后的视功能改变，客观评价多焦视网膜电图（mfERG）及视野在脉络膜新生血管膜形成（choroidalneovascularization，CNV）病程监测中的应用价值。方法收集中山大学中山眼科中心2007年至... 详细信息

目的探讨脉络膜新生血管性疾病患者在接受中西药治疗后的视功能改变，客观评价多焦视网膜电图（mfERG）及视野在脉络膜新生血管膜形成（choroidalneovascularization，CNV）病程监测中的应用价值。方法收集中山大学中山眼科中心2007年至2009年经FFA及ICGA确诊湿性型AMD、特发性CNV患者接受中西药联合治疗共14例（16只眼），于治疗前、治疗后3个月、6个月分别行视力、眼底彩照、视野、多焦视网膜电图检查，分析治疗过程中的形态学和功能改变。结果治疗后6个月中心300视野平均缺损（MD）、丢失变异（LV）明显下降（P〈0．05），中心10°视野LV明显下降（P〈0．05）；治疗后6个月mfERG第3环、第5环N1波振幅密度比治疗前明显增加，其差异有统计学意义（P（3R）=0．03，P（5R）=0．021）；治疗后6个月mfERG第1环、第2环P1波振幅密度比治疗前明显增加，其差异有统计学意义（P（1R）=0．012，P（2R）=0．036）。结论中西药结合治疗对CNV患者的视功能有稳定或改善的作用。

关键词：脉络膜新生血管年龄相关性黄斑变性中西药联合治疗视野多焦视网膜电图

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脉络膜新生血管诊断方法的研究进展

眼科新进展 2019年第6期39卷 592-596页

作者：刘沛洋南炜瑾王路璐范斌吉林大学第二附属医院

脉络膜新生血管是眼底疾病中一种常见的病理改变,可见于年龄相关性黄斑变性、病理性近视、特发性脉络膜新生血管和中心性渗出性脉络膜视网膜病变等多种眼科疾病。临床中常结合荧光素眼底血管造影、吲哚菁绿血管造影、光学相干断层扫描... 详细信息

脉络膜新生血管是眼底疾病中一种常见的病理改变,可见于年龄相关性黄斑变性、病理性近视、特发性脉络膜新生血管和中心性渗出性脉络膜视网膜病变等多种眼科疾病。临床中常结合荧光素眼底血管造影、吲哚菁绿血管造影、光学相干断层扫描及光学相干断层扫描血管造影等方法辅助诊断。随着诊断技术的发展,脉络膜新生血管诊断的特异性和灵敏性均有所提高,为治疗方式的选择和治疗效果的评估提供依据,使患者可以获得更好的视力并且延长维持时间。本文将近年来临床常用脉络膜新生血管的诊断方法进行综述。

关键词：脉络膜新生血管诊断方法光学相干断层扫描血管造影

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脉络膜新生血管的治疗进展

中国实用眼科杂志 2006年第6期24卷 555-557页

作者：吕璐郭承伟山东中医药大学附属医院眼科济南250011

根据FFA的形态学特征,临床将CNV分为典型和隐匿性两种.典型CNV以边界清楚的高荧光区为特征,早期呈花边状,后期由于荧光渗漏使病灶边界不清.隐匿性CNV有纤维血管性色素上皮脱离和来源不明晚期渗漏两种.前者早期为点画状高荧光,伴不规则RP... 详细信息

根据FFA的形态学特征,临床将CNV分为典型和隐匿性两种.典型CNV以边界清楚的高荧光区为特征,早期呈花边状,后期由于荧光渗漏使病灶边界不清.隐匿性CNV有纤维血管性色素上皮脱离和来源不明晚期渗漏两种.前者早期为点画状高荧光,伴不规则RPE隆起,后期持续荧光染色或渗漏;后者则为斑点状高荧光和神经上皮层下的染料积存,不能分辨渗漏来源,也无法确定病灶边界[1]。

关键词：脉络膜新生血管治疗进展荧光渗漏色素上皮脱离形态学特征 CNV 荧光染色隐匿性 FFA 血管性

脉络膜新生血管单次光动力治疗后黄斑区视功能与形态变化

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 677-680页

作者：宫媛媛宋毅解正高吴颖吴星伟上海交通大学第一人民医院眼科上海200080

目的观察单次光动力治疗(PDT)脉络膜新生血管(CNV)后黄斑区视功能与形态变化及其相关性。方法选择17例(23眼)经典为主型CNV患者进行单次光动力治疗,于治疗前及治疗后3个月和8个月分别行视力、多焦视网膜电图(mfERG)、荧光素眼底血管造影... 详细信息

目的观察单次光动力治疗(PDT)脉络膜新生血管(CNV)后黄斑区视功能与形态变化及其相关性。方法选择17例(23眼)经典为主型CNV患者进行单次光动力治疗,于治疗前及治疗后3个月和8个月分别行视力、多焦视网膜电图(mfERG)、荧光素眼底血管造影(FFA)、相干光视网膜断层扫描(OCT)检查,观察黄斑中心的厚度以及功能改变;选择相匹配的正常30眼作为对照组。结果与对照相比,CNV患眼治疗前黄斑中心厚度增加,且mfERG的N1和P1波反应密度明显下降。PDT治疗后,视力有改善趋势,但差异无统计学意义。OCT显示治疗后黄斑区中心厚度显著减小,但治疗后8个月与治疗后3个月差异无统计学意义。mfERG显示治疗后1区P1波和2区N1波反应密度显著增加;治疗后8个月1区N1波反应密度显著增加;1区和2区的P1和N1潜伏期治疗前后差异无统计学意义。治疗后3个月视力变化与黄斑中心厚度变化有相关性(r=0.43,P=0.04),与mfERG各波的变化无相关性,1区的N1和P1波反应密度与黄斑中心厚度变化呈负相关(r=-0.43,P=0.04;r=-0.51,P=0.01)。结论对较小范围的CNV患眼单次PDT治疗可在3个月内减少黄斑区中心厚度并改善视功能,并在相对远期保持稳定。黄斑中心区和旁中心区的恢复有所不同;视功能变化与形态变化有一定相关性。

关键词：脉络膜新生血管多焦视网膜电图光动力疗法体层摄影术,光学相干

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脉络膜新生血管促进因子的研究进展

国际眼科杂志 2010年第8期10卷 1527-1529页

作者：卢秀珍毕宏生崔彦山东中医药大学第二附属医院山东中医药大学眼科研究所中国山东省济南市250002

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是危害视力的主要病变之一,为多种眼底疾病的最终结局,最终导致严重的视力丧失。脉络膜新生血管的产生与促进与血管内皮生长因子与促血管生成素有着密切的关系,我们就这两种细胞因子... 详细信息

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是危害视力的主要病变之一,为多种眼底疾病的最终结局,最终导致严重的视力丧失。脉络膜新生血管的产生与促进与血管内皮生长因子与促血管生成素有着密切的关系,我们就这两种细胞因子的来源与作用的研究进展进行综述。

关键词：脉络膜新生血管血管内皮生长因子促血管生成素

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脉络膜新生血管动物模型的建立与评估

国际眼科杂志 2009年第2期9卷 246-249页

作者：李学晶唐由之王慧娟冯俊张励中国中医科学院眼科医院中国北京市100040

目的：评价氪激光诱导棕色挪威（brown norwav，BN）大鼠脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）模型的可行性。方法：BN大鼠32只一眼行氪激光（659nm）眼底光凝，另一眼作空白对照。激光功率、光凝斑直径和曝光时间分别... 详细信息

目的：评价氪激光诱导棕色挪威（brown norwav，BN）大鼠脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）模型的可行性。方法：BN大鼠32只一眼行氪激光（659nm）眼底光凝，另一眼作空白对照。激光功率、光凝斑直径和曝光时间分别为360mW、50μm及0．05出，分别大光凝后7，14，21,28d随机选取7只大鼠行眼底照像、荧光素眼底血管造影（FFA）检查。随机选取1只大鼠行脉络膜血管铺片检食。眼球标本行组织病理切片光镜、免疫组织化学染色观察。结果：光凝后7d，CNV开始形成，21d达到高峰，14～28d CNV无明显变化。7～21d，FFA显示造影晚期荧光素渗漏及光镜下CNV厚度逐渐增加，28d时可能因瘢痕开始形成，故FFA渗漏和CNV厚度开始减少。结论：氪激光诱导BN大鼠的CNV模型是一种较为理想的模型，FFA及CNV厚度分析是CNV定虽研究的有效手段。

关键词：氪激光脉络膜新生血管动物模型

脉络膜新生血管模型大鼠视网膜核转录因子-κB p65、血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的变化

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眼科新进展 2016年第7期36卷 615-617,625页

作者：曹明芳江蕊张文贤李婧吴爽福建中医药大学附属人民医院眼科福建省福州市350004 福建中医药大学福建省福州市350100

目的观察脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型大鼠视网膜核转录因子-κB p65(nuclear transcription factor kappa-B p65,NF-κB p65)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)表达的变化。方法取BN大鼠12只,随机分为正常组、模型组,每组各6只。正常组不做任何处理,模型组以100 g·L^(-1)水合氯醛腹腔注射麻醉,复方托吡卡胺滴眼液双眼散瞳,倍诺喜行眼表麻醉,在全视网膜镜下用532 nm激光于视盘周围做视网膜光凝建立CNV模型。每周行FFA、OCT检查眼底,观察CNV生成情况。5周后处死大鼠,取大鼠视网膜用免疫组织化学法检测视网膜内NF-κB p65、VEGF、b FGF阳性表达积分光密度。结果造模5周后FFA及OCT检查可见模型组CNV形成。免疫组织化学法检测结果:正常组大鼠视网膜上NF-κB p65阳性表达的积分光密度为9264.33±1479.49,模型组的积分光密度为34 815.83±3873.61,两组比较差异有统计学意义(t=15.095,P膜上VEGF阳性表达的积分光密度为1994.93±309.00,模型组为13 318.54±1958.11,两组比较差异有统计学意义(t=13.992,P膜上b FGF阳性表达的积分光密度为1608.74±235.55,模型组为15 963.14±2034.12,两组比较差异有统计学意义(t=17.171,P膜上NF-κB p65的表达,NF-κB p65在CNV发生发展中可能起重要作用。

关键词： 532 nm激光脉络膜新生血管核转录因子-κB p65 动物实验