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四川省鸭和猪源鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳分型与耐药比较分析

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中国食品卫生杂志 2019年第5期31卷 441-444页

作者：雷高鹏黄玉兰吕虹黄伟峰杨小蓉四川省疾病预防控制中心

目的比较研究四川省鸭和猪源鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型与耐药特征,为分析鼠伤寒沙门菌食品来源提供支持。方法将鸭和猪源监测中分离的47株鼠伤寒沙门菌进行PFGE分型,并采用最小抑菌浓... 详细信息

目的比较研究四川省鸭和猪源鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型与耐药特征,为分析鼠伤寒沙门菌食品来源提供支持。方法将鸭和猪源监测中分离的47株鼠伤寒沙门菌进行PFGE分型,并采用最小抑菌浓度法测定9种药物敏感性。结果鸭和猪源中分离的鼠伤寒沙门菌在PFGE分型和耐药上存在差异。鸭源菌株聚集于簇I,而猪源菌株聚集于簇II。簇II菌株对氨苄西林、环丙沙星、氯霉素、庆大霉素、四环素、复方新诺明6种药物的耐药率高于簇I菌株。不同的PFGE分型鼠伤寒沙门菌在监测地区和耐药谱存在差异。SCSTm-10型菌株均分离于绵阳地区,SCSTm-11型主要分离于资阳地区。SCSTm-10型菌株对复方新诺明和环丙沙星的耐药率高于SCSTm-11型菌株。结论 PFGE分型可以获取四川省鼠伤寒沙门菌分离来源、分离地点和耐药的聚类信息,为鼠伤寒沙门菌食物中毒提供流行病学调查支持。

关键词：鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳分型细菌耐药食源性致病菌

铜绿假单胞菌的血清分型、鞭毛分型和脉冲场凝胶电泳分型

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中国兽医学报 2018年第2期38卷 341-348页

作者：高阳李璐璐骆延波胡明张印张庆刘玉庆齐静赵孝民山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）是一种重要的人畜共患病原菌，给人畜健康带来威胁。细菌分型是揭示病原菌流行规律、传播机制以及制定相应防控措施的基础。选取水貂、人和羊源PA共78株分别进行O-抗原血清分型、H-抗原鞭毛... 详细信息

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）是一种重要的人畜共患病原菌，给人畜健康带来威胁。细菌分型是揭示病原菌流行规律、传播机制以及制定相应防控措施的基础。选取水貂、人和羊源PA共78株分别进行O-抗原血清分型、H-抗原鞭毛分型以及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型。结果显示，60株水貂源PA主要流行血清型为G型（73．3%），其次为I，M，B，E型；鞭毛A型和B型分别占91．7％和8．3％。16株人源PA以血清型E型（25％）为主，其他型别G，M，I，B，D，F，H零散分布，鞭毛A，B型分别占68．8％和31．2％。2株羊源PA血清型为I型（100％），且均为鞭毛B型。PFGE分子分型共分为14个谱型，24个亚型，其中B1、F3、G1、H1这4个亚型的菌株同源性达到100％。结果表明，水貂源PA感染与血清G型和鞭毛A型高度相关（P〈0．01）；人源PA感染优势血清型为E型且与鞭毛A型显著相关（P〈0．01）；2株羊源PA感染均为血清I型和鞭毛B型；不同来源的PA菌株其PF—GE分型呈现多样化和复杂性，相同来源的菌株其PFGE谱型有的完全相同，显示同一个克隆传播的可能，有的差异很大，显示不同分子克隆传播。本试验有助于阐明山东省3种来源PA的分子流行特征，为开展PA相关风险评估、控制及疾病诊治提供依据。

关键词：铜绿假单胞菌血清分型鞭毛分型脉冲场凝胶电泳分型

脉冲场凝胶电泳分型技术应用于宋内志贺菌溯源分析

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中国卫生检验杂志 2007年第10期17卷 1750-1752页

作者：蔡炯黄薇黄剑屏金东崔志刚付齐湘杜嘉孙光中成都市疾病预防控制中心成都611130 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206 四川省大邑县疾病预防控制中心四川大邑611330 四川省崇州市疾病预防控制中心四川崇州611230

目的:分析四川省成都市2006年崇州、大邑两地相继暴发的宋内志贺菌食源性感染疫情中病人分离菌株之间,及其环境分离菌株之间的分子分型特征和遗传相关性,推断传染来源。方法:收集两地疫情暴发期间分离的宋内志贺菌株,用脉冲场凝胶电泳(P... 详细信息

目的:分析四川省成都市2006年崇州、大邑两地相继暴发的宋内志贺菌食源性感染疫情中病人分离菌株之间,及其环境分离菌株之间的分子分型特征和遗传相关性,推断传染来源。方法:收集两地疫情暴发期间分离的宋内志贺菌株,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对菌株进行分子分型,所得结果用BioNumerics V4.0软件UPGMA方法进行聚类分析。结果:共测试56株菌,用XbaⅠ酶切后PFGE可分为14个带型。其中崇州菌株38株,有26株带型完全相同(包括1株环境株);有37株菌分布于5种带型,其相似性在97%以上。大邑菌株18株,有10株带型完全相同;其余8株有7种带型,相似性较差。两地之间菌株分子分型差异明显,其相似性小于92%。结论:确证崇州、大邑两地确有宋内志贺菌食源性感染疫情的暴发,但两地之间无交叉传染关系;提示崇州的宋内志贺菌疫情是由食物凉拌菜引起;提示大邑本地有较高的宋内志贺菌流行水平和复杂的传染源。

关键词：宋内志贺菌食源性感染脉冲场凝胶电泳分型

副溶血性弧菌分离株毒力相关基因分布特征及脉冲场凝胶电泳分型

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副溶血性弧菌分离株毒力相关基因分布特征及脉冲场凝胶电泳分型

作者：王芳扬州大学

学位级别：硕士

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一种革兰氏阴性嗜盐菌,是我国沿海地区引发食源性疾病的重要病原菌,能引起散发性和地方流行性的胃肠炎暴发。副溶血性弧菌在我国沿海地区和部分内陆地区引发食物中毒的发生规模及人群暴露规... 详细信息

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一种革兰氏阴性嗜盐菌,是我国沿海地区引发食源性疾病的重要病原菌,能引起散发性和地方流行性的胃肠炎暴发。副溶血性弧菌在我国沿海地区和部分内陆地区引发食物中毒的发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势,已高居微生物性食物中毒首位。致病性副溶血弧菌能够产生耐热性直接溶血素（TDH）、TDH相关溶血素（TRH）,或两者均产生。该菌不仅通过海产品而且通过淡水产品及其他食物进行流行传播。尽管目前该菌的致病机理还不清楚,但是一些公认的与毒力相关的基因已被证实。且由于传统的生化分型和血清学分型不能有效的进行同源性分析,而基于DNA结构研究的PFGE方法在微生物鉴定中具有很好的分型力、分辨力、可重复性、可比性、灵敏性。因此本研究系统地调查了中国大陆的副溶血性弧菌,特别是高致病性菌株毒力相关基因的分布情况,并对分离株的耐药谱特征进行分析;同时应用脉冲场凝胶电泳技术（Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE）对不同来源的副溶血性弧菌分离株进行分子分型研究,以了解中国大陆副溶血性弧菌分离株的PFGE遗传谱系分布以及菌株间的同源性,并结合毒力相关基因的结果,分析分离株的毒力特征,以期为制定防治副溶血性弧菌导致食源性疾病策略提供预警、监测和控制依据。研究中,首先对2008～2010年分离自上海、浙江、福建、广东、江苏的233株副溶血性弧菌分离株进行毒力相关基因的检测,结果显示：223株分离株中,致病株（tdh+或trh+）有118株,占总菌数的52.9%,其中tdh基因携带率为48.9%,trh携带率为4.0%;高致病性菌株（tdh+和toxRS/new+）94株,占总菌数的42.2%;orf8、MTase.HU-α和VP2905在所有菌株中的概率分别为42.6%、43.0%、41.7%和43.0%。临床分离株中检出高致病株和致病株的概率要显著高于食品分离株。在94株高致病株中,orf8、MTase.HU-α和VP2905的阳性率分别为97.8%、97.8%、96.8%和96.8%,表明orf8、MTase.HU-α和VP2905可作为高致病株的独特基因。对来自江苏、浙江和上海的177份人源株和139株食源株的耐药性分析显示,在7种抗生素中,对氨苄青霉素（AM）、链霉素（SM）和卡那霉素（KM）的耐药率分别为57%、40.5%和25.3%,而对诺氟沙星（NOR）、氯霉素（CM）、复方新诺明（SXT）和四环素（TE）的耐药率仅分别为0.3%、0.3%、0.9%和1.6%,结果表明副溶血弧菌菌株的耐药性不严重。177株人源株对四环素、卡那霉素和氨苄青霉素的耐药率要高于食源株,而对链霉素、诺氟沙星、复方新诺明和氯霉素的耐药率要低于食源株。高致病株、致病株和非致病株均对链霉素、卡那霉素和氨苄青霉素出现较高的耐药率,且对三种抗生素耐药性程度不同。高致病株对多数治疗致病性弧菌感染的药物敏感,耐药现象不严重;与国际上认为高致病株具有相同的耐药谱且对氨苄青霉素全部耐药不同,本研究的高致病株对氨苄青霉素只是多数耐药,耐药率为58.4%。对141株江苏、上海、浙江、福建和广东的副溶血性弧菌分离株进行PFGE研究,结果显示可分型菌株数为119株,分型率为84.4%。经PFGE电泳获得108种带型,所得的PFGE图谱分为五种遗传谱系：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,各谱系所含菌株比率分别为14.3%、25.2%、15.1%、13.4%和31.9%,表明中国大陆的副溶血性弧菌分离株主要分布在谱系Ⅱ和Ⅴ中。不同地区分离株的PFGE分析结果显示,扬州分离株集中在Ⅱ和Ⅴ,浙江分离株集中在Ⅰ中,其余地区分离株的分布相对集中,均有各自的优势谱系。不同分离时间的PFGE分析结果显示,2006、2007、2008、2009和2010年分离株分别主要分布在谱系Ⅳ、Ⅴ、Ⅴ、Ⅰ和Ⅲ中,各年代的分离株均有各自的主要谱系。不同源分离株的PFGE分析结果显示,人源株主要分布在谱系Ⅱ和Ⅴ,食品分离株相对集中在谱系Ⅴ。这些结果说明中国大陆副溶血性弧菌分离株的分离地区、分离时间及不同宿主源与PFGE遗传谱系有一定的相关性。不同遗传谱系分离株对7种抗生素的耐药性分析显示,各谱系不存在对氯霉素、复方新诺明和诺氟沙星耐药的菌株,对四环素耐药的菌株仅分布在谱系Ⅰ和Ⅱ中,对链霉素、卡那霉素和氨苄青霉素耐药的菌株分布较均衡,无显著性差异,说明PFGE谱系与耐药性无明显相关性。分子分型研究表明,PFGE可作为研究副溶血性弧菌传播途径、分子流行病学及溯源的有力工具。对扬州地区分离株的PFGE分析结果表明,9组细菌的PFGE带型相同,遗传系数为100%,部分菌株之间同源性很高（＞80%）,提示在食品的销售、消费、运输等过程中,该菌可通过水平传播、交叉污染的方式向人类传播,引发食源性疾病。不同PFGE副溶血性弧菌的毒力相关基

关键词：副溶血性弧菌高致病株毒力相关基因耐药性脉冲场凝胶电泳分型遗传谱系

金黄色葡萄球菌肠毒素与脉冲场凝胶电泳分型分析

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中国卫生检验杂志 2020年第18期30卷 2200-2203页

作者：周伟艳郑剑高红叶硕沈玄艺许小敏宁波市疾病预防控制中心浙江宁波315010 中国科学院大学宁波华美医院浙江宁波315010

目的了解不同来源金黄色葡萄球菌(AS)携带葡萄球菌肠毒素(SE)基因种类与同源性,为防控AS性食物中毒提供依据。方法AS分离、鉴定和确认采用GB/T 4789.10方法;9种SE测定采用PCR法;PFGE分型采用CDC Pulse Net USA方法;药敏试验采用ABTGP-6... 详细信息

目的了解不同来源金黄色葡萄球菌(AS)携带葡萄球菌肠毒素(SE)基因种类与同源性,为防控AS性食物中毒提供依据。方法AS分离、鉴定和确认采用GB/T 4789.10方法;9种SE测定采用PCR法;PFGE分型采用CDC Pulse Net USA方法;药敏试验采用ABTGP-67卡法。结果63株AS检出9个SE基因型。中毒组检出a、b、d、e、h和j型6个SE;食品和院感组检出除d型外的8个SE基因,以b型检出最多,达74.60%。PFGE分型中毒组AS(包括食品分离株)其条带100%相同,食品和院感组分为12个PFGE型,有8株AS的PFGE带型与中毒组的带型相同。3种来源AS对青霉素G抗生素均有较高的耐药性。中毒组AS仅对青霉素G耐药;食品和院感组对7种抗生素耐药率超过50%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分别为12.00%和42.31%,以院感株耐药性最强,其次为食品株和中毒株。结论SE和PFGE对AS食物中毒病因关联性追踪有重要的意义,能快速查明食物中毒原因,提高食物中毒调查的查明率。

关键词：金黄色葡萄球菌检测肠毒素分布脉冲场凝胶电泳分型分析

金黄色葡萄球菌肠毒素与脉冲场凝胶电泳分型分析

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金黄色葡萄球菌肠毒素与脉冲场凝胶电泳分型分析

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型

2019年浙江省医学会医学微生物与免疫学分会学术大会

作者：周伟艳郑剑高红叶硕沈玄艺许小敏宁波市疾病预防控制中心宁波市第二人民医院

目的了解不同来源AS携带SE基因种类与同源性,为防控AS性食物中毒提供依据。方法 AS分离、鉴定和确认参用GB/T 4789.10和文献方法;9种SE测定采用PCR法;PFGE分型采用CDC Pulse Net USA方法;药敏试验采用ABTGP-67卡法。结果 63株AS检出a-j... 详细信息

目的了解不同来源AS携带SE基因种类与同源性,为防控AS性食物中毒提供依据。方法 AS分离、鉴定和确认参用GB/T 4789.10和文献方法;9种SE测定采用PCR法;PFGE分型采用CDC Pulse Net USA方法;药敏试验采用ABTGP-67卡法。结果 63株AS检出a-j型9个SE基因。中毒组检出a、b、d、e、h和j型6个SE,可带SE4-6种/株;食品和院感组检出除d型外的8个SE基因,可带5-8种/株,以b型检出最多,达47.60%。检出四种新型SE g、h、i和j。PFGE分型中毒组AS (包括食品分离株)其条带100%相同,为同一PFGE型。食品和院感组分为12个PFGE型,其中的1型,16株最多,有8株AS的PFGE带型与中毒组的带型相同。3种来源AS对青霉素G抗生素均有较高的耐药性。中毒组AS除对青霉素G耐药外,对其它抗生素无耐药性;食品和院感组对7种抗生素耐药率超过50%,耐甲氧西林金葡菌分别为12.00%和42.31%,以院感株耐药性最强,食品株第二,中毒株最弱。结论发现AS具有同时携带多种相同型或不同型SE能力。四种新型SE为本市首次检出,其超抗原性特征可增加AS感染能力,应引起我们的关注。b型SE是引起本地区AS食物中毒最主要致病因子主要流行型别,食品和院感组则是a、b型,表明不同来源AS携带SE型是有所差别,因此,检测SE可查明中毒的源头,有助于食物中毒防控。中毒组包括食品分离株AS的PFGE带型致一,说明AS无论是食物株还是病人株均为同一克隆细菌;食品和院感组AS,则不同,PFGE带型呈多样性。另外,有15.69%(8/51)食品和院感组不同时间分离AS的PFGE带型与中毒组AS相同,提示引起中毒的克隆群AS在本地区已存,反应出AS克隆群的持续存在。因此,SE和PFGE对AS食物中毒病因关联性追踪有重要的意义,能快速查明食物中毒原因,提高食物中毒调查的查明率。

关键词：金色葡萄球菌检测肠毒素分布脉冲场凝胶电泳分型分析

来源： cnki会议评论

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浙江医学 2003年第9期25卷 547-548页

作者：沈萍何剑琴俞云松钟步云孔海深浙江大学医学院附属第一医院杭州310003

鲍曼不动杆菌是引起院内感染的重要病原菌,它对多种抗菌药物耐药,临床上治疗比较困难.亚胺培南对不动杆菌有较好的抗菌活性,往往是鲍曼不动杆菌院内感染的首选抗菌药物[1].

关键词：亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药性脉冲场凝胶电泳分型

中国八省市食品来源单核细胞增生李斯特菌的脉冲场凝胶电泳分析

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中华流行病学杂志 2007年第5期28卷 464-467页

作者：祝仁发宫照龙叶长芸崔志刚金东冉陆许珂王连秀陈伟伟中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所杭州市疾病预防控制中心北京市昌平区疾病预防控制中心福建省疾病预防控制中心深圳市计量质量检测研究院 518000

目的采用国际标准化的脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析方法对单核细胞增生李斯特菌（Lm）进行基因分型,初步建立中国Lm的基因分型数据库。方法按照标准化的Lm-PFGE方法对来自国内8个省市、多种食品来源的118株Lm进行了PFGE分型。结果 118... 详细信息

目的采用国际标准化的脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析方法对单核细胞增生李斯特菌（Lm）进行基因分型,初步建立中国Lm的基因分型数据库。方法按照标准化的Lm-PFGE方法对来自国内8个省市、多种食品来源的118株Lm进行了PFGE分型。结果 118株Lm分成了39种带型,其中GX6A160004型有37株菌,占分析菌株的31．36%,是主要型别。结论初步建立了中国单核细胞增生李斯特菌用于网络监测分析（PulseNet China）的基础数据库,发现同型菌株在全国多个地区广泛存在。

关键词：单核细胞增生李斯特菌脉冲场凝胶电泳分型

山东某地区产气荚膜梭菌的分子型别与耐药特征

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中国抗生素杂志 2023年第9期48卷 1057-1063页

作者：钟佳鑫王媛媛白璐璐郑浩然周海健吴媛卢金星中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的分析山东省某地区临床及动物中分离的产气荚膜梭菌的分子型别及耐药特征。方法对山东省56株产气荚膜梭菌进行PFGE、MLST分子分型、药敏试验和耐药基因检测,比较分析同一来源菌株内部和不同来源菌株间的型别和耐药特征。结果56株产... 详细信息

目的分析山东省某地区临床及动物中分离的产气荚膜梭菌的分子型别及耐药特征。方法对山东省56株产气荚膜梭菌进行PFGE、MLST分子分型、药敏试验和耐药基因检测,比较分析同一来源菌株内部和不同来源菌株间的型别和耐药特征。结果56株产气荚膜梭菌分为53个PFGE型,有50株菌表现出独特的型别。MLST分型将其分为46个ST型,其中40种ST型仅包含一株菌。本研究中菌株均对万古霉素,美罗培南和头孢西丁表现为敏感;对甲硝唑、青霉素、莫西沙星和氯霉素的耐药率相对比较低,分别为3.57%、7.14%、8.93%和1.79%;然而,对克林霉素的耐药率高达53.57%,人类来源菌株与动物来源菌株的耐药谱呈现出较为明显的差异。基于全基因组的耐药基因分析显示,所有56株产气荚膜梭菌均携带mprF基因,其次是tetA(P)(98.21%),tetB(P)(87.5%)以及ermQ(51.79%)。结论我国山东某地区临床来源与动物来源产气荚膜梭菌耐药谱存在显著差异,同一地区的菌株分子型别具有很强的多样性。需要开展更全面的的系统监测为制定控制措施提供流行病学依据。

关键词：产气荚膜梭菌脉冲场凝胶电泳分型多位点序列分型抗菌药物敏感性耐药基因分子流行病学