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解淀粉芽胞杆菌SJ1606产脂肽粗提物协同代森锰锌对2种植物病菌的抑制效果

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安徽农业大学学报 2024年第2期51卷 223-229页

作者：王猛吴含段海明孟祥涛李之硕安徽科技学院农学院凤阳233100

为探明微生物源脂肽粗提物、代森锰锌及二者的复配剂对黄瓜枯萎病菌和葡萄白腐病菌的抑制效果,采用菌丝生长速率法、Horsfall法和Wadley公式法检测了脂肽粗提物和代森锰锌对2种病菌的抑制率和增效比。脂肽粗提物对黄瓜枯萎病菌的EC_(50)... 详细信息

为探明微生物源脂肽粗提物、代森锰锌及二者的复配剂对黄瓜枯萎病菌和葡萄白腐病菌的抑制效果,采用菌丝生长速率法、Horsfall法和Wadley公式法检测了脂肽粗提物和代森锰锌对2种病菌的抑制率和增效比。脂肽粗提物对黄瓜枯萎病菌的EC_(50)为1.93μL·mL^(-1),对葡萄白腐病菌的EC_(50)为5.54μL·mL^(-1),代森锰锌对黄瓜枯萎病菌的EC_(50)为74.37 mg·L^(-1),对葡萄白腐病菌的EC_(50)为48.45 mg·L^(-1)。Horsfall法得出脂肽与代森锰锌混配体积比为8∶2对黄瓜枯萎病菌具显著的增效活性,体积比为1∶9对葡萄白腐病菌具有显著增效活性。通过Wadley公式法得出混配组合对黄瓜枯萎病菌理论EC_(50)为1298.78 mg·L^(-1),实际EC_(50)达472.48 mg·L^(-1),增效比(SR)为2.75;对葡萄白腐病菌理论EC_(50)值为481.41 mg·L^(-1),实际EC_(50)值187.32 mg·L^(-1),增效比(SR)为2.57。结果为2种不同病害的持续防控、化学药剂的减施增效和抗菌脂肽的合理应用提供支撑。

关键词：黄瓜枯萎病葡萄白腐病脂肽粗提物代森锰锌混配

微生物源脂肽粗提物对克菌丹和代森锰锌增效活性

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安徽科技学院学报 2022年第1期36卷 38-43页

作者：余利王锦程谢亚杰黄伟东段海明安徽科技学院农学院安徽凤阳233100

目的:阐明解淀粉芽孢杆菌产脂肽粗提物提高克菌丹和代森锰锌对玉米大斑病菌抑制活性。方法:采用Wadley公式法,测定对玉米大斑病菌抑制活性。结果:脂肽粗提物和克菌丹、代森锰锌对玉米大斑病菌的EC_(50)分别为0.23μL/mL、5.78μg/mL和8... 详细信息

目的:阐明解淀粉芽孢杆菌产脂肽粗提物提高克菌丹和代森锰锌对玉米大斑病菌抑制活性。方法:采用Wadley公式法,测定对玉米大斑病菌抑制活性。结果:脂肽粗提物和克菌丹、代森锰锌对玉米大斑病菌的EC_(50)分别为0.23μL/mL、5.78μg/mL和8.04μg/mL;脂肽粗提物与克菌丹和代森锰锌质量比为1∶100和1.5∶100时具有较强的增效活性,增效系数SR达1.78和1.74。结论:可为玉米大斑病的可持续防控提供参考和借鉴。

关键词：玉米大斑病解淀粉芽孢杆菌脂肽粗提物代森锰锌增效作用

解淀粉芽孢杆菌SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯协同对玉米小斑病菌的抑制效果

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2020年第4期46卷 432-436页

作者：段海明李可文安徽科技学院农学院安徽凤阳233100

运用对峙培养法测定解淀粉芽孢杆菌SJ06菌株对玉米小斑病菌的拮抗活性;采用菌丝生长速率法测定发酵上清液、脂肽粗提物对玉米小斑病菌的抑菌活性,以及SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯复配的协同抑菌活性。结果表明:对峙培养SJ06对玉米小斑... 详细信息

运用对峙培养法测定解淀粉芽孢杆菌SJ06菌株对玉米小斑病菌的拮抗活性;采用菌丝生长速率法测定发酵上清液、脂肽粗提物对玉米小斑病菌的抑菌活性,以及SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯复配的协同抑菌活性。结果表明:对峙培养SJ06对玉米小斑病菌的抑制率为71.43%;SJ06发酵上清液和脂肽粗提物对病菌的EC50值分别为0.88μL/mL和0.23μL/mL,吡唑醚菌酯对病菌的EC50值为1.10μg/m L;SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯复配对玉米小斑病菌的毒性比均大于1,说明复配对病菌的抑制效果均为增效作用,其中,复配体积比为4∶6时毒性比为1.21,增效作用最强。

关键词：解淀粉芽孢杆菌玉米小斑病脂肽粗提物吡唑醚菌酯协同作用

拮抗黄曲霉大花杓兰内生细菌的筛选及抑菌研究

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食品与发酵工业 2023年

作者：付亚娟许笑晴范佳宁樊双虎韩卉侯晓强廊坊市生物样品分析及农残检测重点实验室河北省食药用菌资源高值利用技术创新中心廊坊师范学院生命科学学院

为获得对黄曲霉菌丝生长具有良好抑菌活性的细菌资源，该研究以31株大花杓兰内生细菌为对象，通过平板对峙法和菌丝生长速率法筛选拮抗黄曲霉的内生细菌；菌丝生长速率法测定无菌发酵液对黄曲霉抑菌活性的稳定性；PCR扩增芽孢杆菌脂肽... 详细信息

为获得对黄曲霉菌丝生长具有良好抑菌活性的细菌资源，该研究以31株大花杓兰内生细菌为对象，通过平板对峙法和菌丝生长速率法筛选拮抗黄曲霉的内生细菌；菌丝生长速率法测定无菌发酵液对黄曲霉抑菌活性的稳定性；PCR扩增芽孢杆菌脂肽合成酶基因和多聚酮合酶基因；酸沉醇提制备芽孢杆菌脂肽粗提物，牛津杯法评估其对黄曲霉的抑菌活性。结果显示，3株大花杓兰内生芽孢杆菌（CmR-1n、CmR-3a、CmR-4b）对黄曲霉有较好抑菌活性；CmR-1n对黄曲霉的抑菌效果最好，平板拮抗率为57.88%，而CmR-1n无菌发酵液对黄曲霉的抑菌率达63.31%；芽孢杆菌CmR-1n无菌发酵液具有较好的耐热性、耐酸碱性、抗紫外线性和储藏稳定性；CmR-1n基因组含有表面活性素基因Srf、伊枯草菌素基因Itu和丰原素基因（fenB和fenD），且体外抑菌实验证实CmR-1n脂肽粗提物甲醇液对黄曲霉菌丝生长的抑制率达62.58%。推测芽孢杆菌CmR-1n合成的脂肽可能是抑制黄曲霉的主要活性物质，使其在黄曲霉防治领域具有一定的应用潜力。

关键词：大花杓兰内生芽孢杆菌黄曲霉脂肽粗提物抑菌活性

解淀粉芽孢杆菌gfj-4发酵上清液及与化学杀菌剂混配对玉米大斑病病菌的抑制作用

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华南农业大学学报 2018年第5期39卷 74-81页

作者：段海明程红李林玉余利黄伟东余海兵安徽科技学院农学院安徽凤阳233100

【目的】探究解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens菌株gfj-4次级代谢产物及与化学杀菌剂的复配剂对玉米大斑病病菌Exserohilum turcicum的抑制活性。【方法】采用菌丝生长速率法,测定了种子液培养时间、发酵时间对抑菌物质产生的... 详细信息

【目的】探究解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens菌株gfj-4次级代谢产物及与化学杀菌剂的复配剂对玉米大斑病病菌Exserohilum turcicum的抑制活性。【方法】采用菌丝生长速率法,测定了种子液培养时间、发酵时间对抑菌物质产生的影响以及发酵上清液、脂肽粗提物、发酵上清液与7种化学杀菌剂混配对病菌的抑制效果。【结果】解淀粉芽孢杆菌gfj-4种子液最佳培养时间为6 h,最适发酵时间为72 h;发酵上清液和脂肽粗提物对病菌的EC_(50)分别为0.32和0.11μL·mL^(-1)。玉米大斑病菌对苯醚甲环唑、戊唑醇、腐霉利和腈菌唑的敏感性较高,其中苯醚甲环唑对病菌的EC_(50)达0.10μg·mL^(-1);代森锰锌和福美双对病菌的EC_(50)分别为12.03和12.08μg·mL^(-1),而丙森锌对病菌的抑制活性较差,EC_(50)为24.73μg·mL^(-1)。生防菌gfj-4发酵上清液和苯醚甲环唑混配主要表现为相加作用,其中以体积比3∶7混配的毒性比最高,为1.28;发酵上清液与代森锰锌、丙森锌都以体积比2∶8混配的毒性比最高,分别为1.28和1.67。【结论】解淀粉芽孢杆菌gfj-4及其与苯醚甲环唑、丙森锌的混配剂在农药减量增效方面具有重要的利用价值。

关键词：解淀粉芽孢杆菌次级代谢产物玉米大斑病发酵上清液脂肽粗提物化学杀菌剂

马铃薯早疫病拮抗细菌的筛选、鉴定及抑菌物质研究

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西南农业学报 2021年第6期34卷 1234-1241页

作者：于水清杨毅清张岱庞民好杨志辉朱杰华河北农业大学植物保护学院河北保定071000

【目的】为获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株,研究其抑菌活性物质对马铃薯早疫病菌的影响。【方法】利用平板对峙法对生防菌进行筛选,通过形态学特征和分子生物学的方法对生防菌进行鉴定,并检测其分泌生防作用相关的酶的能力。通... 详细信息

【目的】为获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株,研究其抑菌活性物质对马铃薯早疫病菌的影响。【方法】利用平板对峙法对生防菌进行筛选,通过形态学特征和分子生物学的方法对生防菌进行鉴定,并检测其分泌生防作用相关的酶的能力。通过扫描电镜观察生防菌次级代谢产物对早疫病菌丝影响,利用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)技术对生防菌次级代谢产物的活性成分进行鉴定,结合琼脂扩散法进一步验证活性成分。【结果】将筛选得到的生防菌株鉴定为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),命名为C16。菌株C16能分泌淀粉酶和表面活性素,具有固氮能力,发酵液和脂肽粗提物能显著抑制马铃薯早疫病菌丝的生长,发酵液的抑菌圈可达31.5 mm, 10 mg/mL脂肽粗提物的抑菌带可达12.67 mm。早疫病菌分别与发酵液和脂肽粗提物共培养后,经扫描电镜观察发现,菌丝扭曲变形,表面产生褶皱,以及出现囊泡化等现象。对脂肽粗提物进行成分分析,发现其含有表面活性素Surfactin和伊枯草素Iturin两种物质,通过琼脂扩散法测定两种活性物质的抑菌活性,发现伊枯草素Iturin为主要抑菌活性成分。【结论】本研究筛选获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株为贝莱斯芽胞杆菌C16,其主要抑菌物质为伊枯草素Iturin。本研究结果为利用微生物菌剂防治马铃薯早疫病提供了备选菌种资源,同时为菌株C16的开发利用奠定了基础。

关键词：马铃薯早疫病芽胞杆菌生防因子脂肽粗提物高效液相色谱

枯草芽孢杆菌对猪疱疹病毒1型体内外拮抗作用研究

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枯草芽孢杆菌对猪疱疹病毒1型体内外拮抗作用研究

作者：王美玲吉林农业大学

学位级别：硕士

猪疱疹病毒1型是多种哺乳动物共患的伪狂犬病的病原。主要引起母猪生殖障碍、公猪不育、仔猪大量死亡、呼吸困难、瘙痒及神经症状,给畜牧业带来极大的威胁,造成了较大的经济损失。近些年来,变异毒株的出现,使得伪狂犬病的防治变得越发... 详细信息

猪疱疹病毒1型是多种哺乳动物共患的伪狂犬病的病原。主要引起母猪生殖障碍、公猪不育、仔猪大量死亡、呼吸困难、瘙痒及神经症状,给畜牧业带来极大的威胁,造成了较大的经济损失。近些年来,变异毒株的出现,使得伪狂犬病的防治变得越发困难。枯草芽孢杆菌作为一种微生态制剂在自然界中普遍存在且安全,可以抑制多种细菌和真菌,但对于枯草芽孢杆菌抗病毒作用的报道较少。因此,本文进行了此方面的研究,希望为枯草芽孢杆菌更广泛地应用于畜牧业生产提供依据。研究经16S rDNA和气相色谱鉴定了一株枯草芽孢杆菌CCBS-1,可以抑制金黄色葡萄球菌及大肠杆菌,从其发酵液中经硫酸铵沉淀法提取蛋白粗提物,甲醇抽提法提取脂肽粗提物,并测定其浓度。将发酵液和两种粗提物用于体外抑制猪疱疹病毒1型试验,经安全浓度测定、阻断、抑制和杀灭等试验,发现发酵液和蛋白粗提物分别在0.042mg/mL和0.167mg/mL浓度下对猪疱疹病毒1型有抑制作用,0.111mg/mL浓度下的脂肽对猪疱疹病毒1型具有杀灭作用。以昆明鼠为试验动物进行枯草芽孢杆菌体内抗病毒试验。选取18g2g昆明鼠34只,10只用于安全试验测定,其余随机分为3组,设置PBS对照组(PBS组)、枯草芽孢杆菌预防组(BS组)和猪疱疹病毒1型攻毒组(PRV组);预饲喂7d后BS组1.2×108CFU/只/d剂量灌胃枯草芽孢杆菌,PBS组与PRV组灌胃相同剂量的PBS,连续饲喂14天;每隔1d称重1次,试验第7d时分别对PBS组和BS组昆明鼠尾静脉采血,试验14d后PBS组和BS组随机选取4只鼠眼球取血后无菌取脾脏及胸腺进行免疫器官指数的测定,然后取脾细胞依次进行淋巴细胞转化率检测、CD3+CD4+及CD3+CD8+T细胞亚群细胞数量检测、IgG非特异性抗体检测、IL-4、IFN-γ分泌水平检测和NK细胞活性检测,用收集到7d和14d的血清分别进行抗体及IL-4和IFN-γ水平测定,最后对剩余PRV组及BS组鼠进行106.70 TCID50猪疱疹病毒1型脑部攻毒试验,昆明鼠死后及时取脑组织制作病理切片。结果表明:(1)饲喂枯草芽孢杆菌对昆明鼠体重的影响表明BS组体重明显升高;(2)对于昆明鼠胸腺指数和脾脏指数而言,BS组的胸腺指数极显著高于PBS组,但其脾脏指数与PBS组差异不显著;(3)两组非特异性抗体水平都呈上升趋势,14d较7d BS组非特异性抗体水平有所增长,且极显著高于PBS组;(4)BS组在非特异性刺激剂作用下刺激指数高于PBS组;(5)BS组CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞数量与PBS相比差异显著;(6)BS组NK细胞活性显著高于PBS组,NK细胞活性提高25%左右;(7)BS组血清和细胞上清中IL-4和IFN-γ含量都显著高于PBS组;(8)BS组攻毒保护率提高25%;(9)病理切片中攻毒组具有明显的水肿、出血及炎性浸润等现象。从以上研究结果可知,枯草芽孢杆菌CCBS-1株的发酵液成分对猪疱疹病毒1型具有一定的抑制作用,该菌可提高实验鼠的体液免疫和细胞免疫能力,对伪狂犬病具有一定的预防作用。

关键词：枯草芽孢杆菌猪疱疹病毒1型脂肽粗提物蛋白粗提物免疫性能

杜仲内生拮抗细菌对小麦赤霉病抑制活性的研究

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杜仲内生拮抗细菌对小麦赤霉病抑制活性的研究