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高效液相色谱-电喷雾质谱法分离和鉴别枯草芽孢杆菌产生的脂肽类化合物

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色谱 2008年第3期26卷 343-347页

作者：陈华王丽袁成凌郑之明余增亮中国科学院离子束生物工程学重点实验室安徽合肥230031

枯草芽孢杆菌JA因产生多种脂肽类化合物而具有广阔的开发前景。JA发酵液经过离心、酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到脂肽类化合物的粗提物。将粗提物溶于流动相,采用反相高效液相色谱分离,对收集的洗脱峰组分进行电喷雾质谱(ESI-MS)分析。根... 详细信息

枯草芽孢杆菌JA因产生多种脂肽类化合物而具有广阔的开发前景。JA发酵液经过离心、酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到脂肽类化合物的粗提物。将粗提物溶于流动相,采用反相高效液相色谱分离,对收集的洗脱峰组分进行电喷雾质谱(ESI-MS)分析。根据质荷比推断JA菌株产生的脂肽类化合物属于3个家族,分别为surfactin,iturin和fengycin,是枯草芽孢杆菌合成的重要生物表面活性素。对一级质谱中的主成分进行串联质谱分析,进一步确定了3种脂肽类化合物的分子结构。实验证明ESI-MS是一种鉴定脂肽类化合物及其同系物的可靠方法。

关键词：高效液相色谱-电喷雾质谱法枯草芽孢杆菌脂肽类化合物

海洋青铜小单孢菌FIM 02-523产生的脂肽类化合物FW523的分离鉴别和生物学活性

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中国抗生素杂志 2006年第5期31卷 267-270,277页

作者：江红林如郑卫程元荣福建医科大学福州350004 福建省微生物研究所福州350007

在筛选新免疫抑制剂的过程中,从海洋青铜小单孢菌***02-523发酵液提取到脂肽类化合物FW523,经纯化得到5个组分。组分3(FW523-3)与抗肿瘤抗生素rakicidinB同质,但它具有与紫杉醇相当的抗肿瘤活性和与环孢菌素相当的免疫抑制活性。组分1和... 详细信息

在筛选新免疫抑制剂的过程中,从海洋青铜小单孢菌***02-523发酵液提取到脂肽类化合物FW523,经纯化得到5个组分。组分3(FW523-3)与抗肿瘤抗生素rakicidinB同质,但它具有与紫杉醇相当的抗肿瘤活性和与环孢菌素相当的免疫抑制活性。组分1和2(FW523-1,2)与rakicidinA分子量相同,组分4(FW523-4)比rakicidinB多1个-CH2,组分5(FW523-5)比rakicidinA少1个-CH2,它们是rakicidins的两个新同系物。

关键词：青铜小单孢菌脂肽类化合物免疫抑制抗肿瘤活性

内生解淀粉芽胞杆菌BEB33脂肽类化合物分析及对香蕉枯萎病菌拮抗作用研究

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中国生物防治学报 2019年第5期35卷 785-792页

作者：王宝杨扬蔡吉苗陈奕鹏黄贵修华中农业大学植物科学技术学院武汉430070 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室/海南省热带作物病虫害生物防治工程技术研究中心海口571101

为解析内生解淀粉芽胞杆菌BacillusamyloliquefaciensBEB33的生防机理,检测了该菌株脂肽类化合物合成相关基因,利用基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱分析了该菌株脂肽类化合物的种类,评价了脂肽类粗提物对香蕉枯萎病菌(FOC4)形态... 详细信息

为解析内生解淀粉芽胞杆菌BacillusamyloliquefaciensBEB33的生防机理,检测了该菌株脂肽类化合物合成相关基因,利用基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱分析了该菌株脂肽类化合物的种类,评价了脂肽类粗提物对香蕉枯萎病菌(FOC4)形态、镰刀菌酸合成的影响,以及粗提物对香蕉枯萎病的生防潜力分析。结果显示,BEB33基因组中编码有surfactin、fengycin、iturin和bacillomycin D 4种脂肽类物质合成酶基因。使用M9培养基发酵能产生surfactin、fengycin和bacillomycin D 3种脂肽类物质;脂肽类粗提物可导致香蕉枯萎病菌菌丝细胞膨大,细胞膜穿孔,镰刀菌酸产量降低70%;并发现脂肽类粗提物对香蕉枯萎病具有明显的防治效果。在不同处理中,枯萎病发病率分别降低47.67%、23.22%和36.56%,病情指数分别降低38.09、28.56和35.87。本文所获研究结果为进一步利用该菌株进行香蕉枯萎病生防制剂的研发提供理论基础。

关键词：内生细菌解淀粉芽胞杆菌脂肽类化合物香蕉枯萎病菌

一株萎缩芽胞杆菌YL3的鉴定及其脂肽类化合物分析

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中国生物防治学报 2017年第1期33卷 142-150页

作者：刘邮洲陈夕军梁雪杰钱亚明乔俊卿刘永锋江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014 扬州大学园艺与植保学院扬州220009 江苏省农业科学院园艺研究所南京210014

本研究通过生理生化特征、16S rDNA基因和gyrB基因序列分析对菌株YL3进行种属鉴定,采用室内平板对峙生长法测定其抑菌活性,对草莓枯萎病的田间防效。以选择性培养基检测其分泌的多种胞外酶,以结晶紫染色法检测生物膜的形成,采用酸沉淀... 详细信息

本研究通过生理生化特征、16S rDNA基因和gyrB基因序列分析对菌株YL3进行种属鉴定,采用室内平板对峙生长法测定其抑菌活性,对草莓枯萎病的田间防效。以选择性培养基检测其分泌的多种胞外酶,以结晶紫染色法检测生物膜的形成,采用酸沉淀法提取菌株YL3脂肽类化合物并进行高效液相色谱串联质谱分析(LC-MS)。研究表明,菌株YL3被鉴定为萎缩芽胞杆菌Bacillus atrophaeus,其对多种植物病原真菌菌丝生长和细菌都具有明显的抑制作用,稀释10和100倍的发酵液对"宁玉"草莓枯萎病的防效分别为82.86%和67.62%。菌株YL3能产生蛋白酶、几丁质酶和嗜铁素,培养3 d后形成大量生物膜。菌株YL3发酵液中脂肽类粗提物对草莓枯萎病菌菌丝生长有抑制作用,随着剂量加大,抑制效果显著。LC-MS检测到菌株YL3脂肽类粗提物中含有表面活性素和泛革素。因此,菌株YL3是一株具有较好生防应用潜力的拮抗菌株。

关键词：萎缩芽胞杆菌草莓枯萎病脂肽类化合物

23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性比较

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江苏农业学报 2017年第3期33卷 533-542页

作者：刘邮洲陈夕军尹小乐梁雪杰乔俊卿刘永锋江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 扬州大学园艺与植保学院江苏扬州225009

为了比较9个种23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性差异,本研究以选择性培养基检测各菌株胞外酶分泌物,采用酸沉淀法提取各菌株脂肽类化合物,用对峙生长法分别测定芽胞杆菌及其脂肽类化合物的抑菌活性,高效液相色谱串联质谱(LC-MS)进... 详细信息

为了比较9个种23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性差异,本研究以选择性培养基检测各菌株胞外酶分泌物,采用酸沉淀法提取各菌株脂肽类化合物,用对峙生长法分别测定芽胞杆菌及其脂肽类化合物的抑菌活性,高效液相色谱串联质谱(LC-MS)进行脂肽类化合物种类分析。结果表明:23株芽胞杆菌均能产生蛋白酶,枯草芽胞杆菌PTS-394等9个菌株抑菌能力显著,对尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、胶孢炭疽病菌和油菜菌核病菌的抑菌带宽分别为33.4~42.0 mm、34.6~58.2 mm、34.6~40.0 mm和30.1~39.2 mm。枯草芽胞杆菌JND等6个菌株的脂肽类粗提物抑菌作用显著,对尖孢镰刀菌和立枯丝核菌的抑菌带宽分别为26.2~39.4 mm和30.5~34.2 mm。LC-MS检测到有抑菌作用的15株芽胞杆菌的脂肽类化合物种类包括表面活性素家簇、伊枯草素家簇和泛革素家簇。

关键词：芽胞杆菌胞外酶脂肽类化合物抑菌活性

植物内生枯草芽孢杆菌E1R-j脂肽类化合物的分离鉴定及抑菌作用

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农药学学报 2015年第2期17卷 172-178页

作者：姬婧媛杨洁高小宁黄丽丽康振生西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 西北农林科技大学植物保护学院陕西杨凌712100

植物内生枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株E1R-j分离自小麦根部。以小麦全蚀病菌作为靶标菌,采用酸沉淀、快速蛋白液相色谱(FPLC)和基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDITOF/TOF-M S)技术,对该菌发酵液中的抗真菌活性物质进行分离鉴... 详细信息

植物内生枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株E1R-j分离自小麦根部。以小麦全蚀病菌作为靶标菌,采用酸沉淀、快速蛋白液相色谱(FPLC)和基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDITOF/TOF-M S)技术,对该菌发酵液中的抗真菌活性物质进行分离鉴定和抑菌活性研究。结果表明:菌株E1R-j产生的抗菌活性物质由P1、P2、P3和P4 4类组分组成,其中P3起主要抑菌作用。M ALDI-TOF/TOF-M S分析结果显示,P3为fengycins。经试验发现,P3对温度稳定,121℃下放置30 min仍可保持抑菌活性。电子显微境观察发现,P3对小麦全蚀病菌菌丝生长有强烈的抑制作用,同时还可造成菌丝细胞畸形、细胞壁溃解、细胞质外渗等。

关键词：植物内生细菌枯草芽孢杆菌脂肽类化合物分离鉴定抑菌活性

解淀粉芽孢杆菌G9R-3脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌机理及防效评价

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西南农业学报 2019年第8期32卷 1810-1816页

作者：周维田丹丹杨扬韦弟李朝生覃柳燕刘挺燕黄素梅广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所香蕉抗病种质创制与病虫害防控联合实验室广西南宁530007 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南省热带作物病虫害生物防治工程技术研究中心海南海口571101

[目的]G9R-3是从抗病香蕉品种“桂蕉9号”健康植株根部中分离得到的一株具有较强抑制香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum *** race 4,Foc4)活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。开展其脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌活... 详细信息

[目的]G9R-3是从抗病香蕉品种“桂蕉9号”健康植株根部中分离得到的一株具有较强抑制香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum *** race 4,Foc4)活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。开展其脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌活性机理及防效评价研究,为利用该菌株大田防控香蕉枯萎病提供参考。[方法]结合基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析脂肽类化合物类型,采用Landy培养基发酵并使用大孔树脂抽提法提取菌株脂肽类物质,结合室内平板、台盼蓝染色、盆栽灌根接种进行活性检测与防效评价。[结果]该菌株产生的脂肽类化合物种类包括表面活性素Surfactin、泛革素Fengycin和伊枯草菌素iturins 3个种类。活性检测表明,当粗提物浓度为300μg/mL时对香蕉枯萎病菌Foc4菌丝生长抑制率达58.91%,孢子萌发抑制率达69.80%。室内盆栽防效评价试验表明,浓度为1 mg·mL-1 G9R-3脂肽类粗提物香蕉枯萎病防效可达76.53%。[结论]G9R-3产生的脂肽类化合物具有防控香蕉枯萎病的潜力,其生防基质为破坏Foc4细胞膜并引起菌丝肿大和畸形,并抑制其孢子萌发。

关键词：内生解淀粉芽孢杆菌G9R-3 脂肽类化合物抑菌机理防效评价

芽胞杆菌产生的脂肽类化合物在防治油菜菌核病中的作用

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东北农业大学学报 2012年第7期43卷 84-88页

作者：伍辉军王帅湛江马玲莉高学文南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室南京210095

从解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)B3菌株和枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)G4菌株中分别提取脂肽类化合物,配制成脂肽类生物农药乳油。平板拮抗活性检测试验表明,脂肽类生物农药乳油B3和G4能显著抑制油菜菌核病菌(Sclerot... 详细信息

从解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)B3菌株和枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)G4菌株中分别提取脂肽类化合物,配制成脂肽类生物农药乳油。平板拮抗活性检测试验表明,脂肽类生物农药乳油B3和G4能显著抑制油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)生长。油菜离体叶片接种试验中,脂肽类生物农药乳油B3和G4能显著抑制核盘菌在油菜叶片上的侵染和扩展。田间试验表明,脂肽类生物农药乳油B3和G4对油菜菌核病具有很好的防治效果,最高防效分别达55.8%和46.3%,并能够促进油菜生长。

关键词：脂肽类化合物油菜菌核病芽胞杆菌生物防治

白酒中生物活性物质脂肽类化合物的鉴定及其功能的研究

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酿酒科技 2014年第12期 1-4,7页

作者：徐岩张荣吴群郅岩江南大学酿酒科学与酶技术中心食品安全与营养协同创新中心食品科学与技术国家重点实验室江南大学教育部工业生物技术重点实验室

白酒是中国独特的微生物固态酿造与蒸馏的产物,白酒风味是决定其品质的重要特征。江南大学在白酒中首次发现了不挥发性脂肽类化合物。该类化合物对白酒的风味、生物活性功能都具有重要作用。研究围绕白酒中脂肽类化合物的发现、鉴定及... 详细信息

白酒是中国独特的微生物固态酿造与蒸馏的产物,白酒风味是决定其品质的重要特征。江南大学在白酒中首次发现了不挥发性脂肽类化合物。该类化合物对白酒的风味、生物活性功能都具有重要作用。研究围绕白酒中脂肽类化合物的发现、鉴定及其功能进行了综述。

关键词：脂肽类化合物非挥发性成分挥发性白酒生物活性