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饲料磷水平对吉富罗非鱼肠道磷和脂肪酸转运及甘油三酯沉积的影响

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水产学报 2022年第10期46卷 1950-1956页

作者：刘香元赵涛郭雨诗何杨刘光辉罗智华中农业大学水产学院

为了探究饲料中不同磷水平对吉富罗非鱼肠道磷和脂肪酸转运及甘油三脂沉积的影响，实验配制了3组不同磷水平的饲料[1.21%(LPD)、1.75%(MPD)和2.66%(HPD)]，投喂吉富罗非鱼10周。结果显示，与LPD组相比，HPD组显著增加吉富罗非鱼肠道钠... 详细信息

为了探究饲料中不同磷水平对吉富罗非鱼肠道磷和脂肪酸转运及甘油三脂沉积的影响，实验配制了3组不同磷水平的饲料[1.21%(LPD)、1.75%(MPD)和2.66%(HPD)]，投喂吉富罗非鱼10周。结果显示，与LPD组相比，HPD组显著增加吉富罗非鱼肠道钠磷协同转运体SLC34A2基因(95.7%)和蛋白(200.1%)的表达，增加肠道组织总磷含量(79.2%);HPD组上调脂肪酸吸收基因cd36、fabp1、fabp2和fatp1及甘油三酯合成基因dgat1的表达(11.2%～54.0%)，下调脂肪酸转运基因apob-100的表达(37.7%)，增加游离脂肪酸(NEFA)的含量(241.1%)。与LPD组相比，HPD组显著增加吉富罗非鱼肠道组织甘油三酯(TG)的含量(42.9%)。研究表明，饲料中高磷水平可增加肠道组织TG的含量，上调脂肪酸吸收途径和抑制脂肪酸排出途径。

关键词：吉富罗非鱼磷脂肪酸转运甘油三酯磷转运

藜麦脂肪酸转运基因家族FAX的鉴定与表达分析

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基因组学与应用生物学 2020年第12期39卷 5652-5659页

作者：时小东孙梦涵吴琪田银帅徐莺成都大学药学与生物工程学院农业农村部杂粮加工重点实验室成都610106 四川大学生命科学学院成都610064

藜麦是唯一一种单体植物即可满足人体基本营养需求的食物,其籽粒脂肪酸含量丰富、组成合理。植物脂肪酸转运蛋白FAX对介导质体中脂肪酸向外运输过程中发挥着重要的作用。本研究基于藜麦基因组序列信息,对藜麦FAX基因家族进行全基因组鉴... 详细信息

藜麦是唯一一种单体植物即可满足人体基本营养需求的食物,其籽粒脂肪酸含量丰富、组成合理。植物脂肪酸转运蛋白FAX对介导质体中脂肪酸向外运输过程中发挥着重要的作用。本研究基于藜麦基因组序列信息,对藜麦FAX基因家族进行全基因组鉴定,并对该家族成员的基因结构、染色体定位、蛋白结构和表达模式等进行了全面分析,为进一步了解该家族功能和培育油用藜麦品种提供理论支撑。结果表明,藜麦FAX基因家族包含10个成员,分布在8条染色体上,8个CqFAX基因包含内含子和外显子;蛋白序列对比结果显示藜麦CqFAX蛋白之间氨基酸序列保守性较低,只有少数氨基酸残基具有保守性,可能对于FAX蛋白功能发挥关系密切;大多数CqFAX含有4个α螺旋,与其三级空间结构相似;进化树分析表明CqFAX蛋白分为4枝,与基因结构关系基本保持一致。对转录组表达数据分析表明,CqFAX基因在藜麦不同组织中均存在表达,其中AUR62006421、AUR62017596、AUR62026084和AUR62029770在种子中表达水平较高,可能在种子脂肪酸形成和积累中发挥着重要作用。

关键词：藜麦脂肪酸转运基因家族

甘蓝型油菜（Brassica napus）脂肪酸转运蛋白Bn3662的功能研究

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甘蓝型油菜（Brassica napus）脂肪酸转运蛋白Bn3662的功能研究

作者：王欢华中师范大学

学位级别：硕士

脂肪酸(FAs)是构成大多数细胞脂质的基本成分,在生物体的整个生命过程中都是必不可少的。在高等植物中,脂肪酸生物合成发生在质体中,随后大部分被转运至内质网进行进一步修饰及脂质组装。然而,质体脂肪酸的运输机制尚未阐明。油菜是世... 详细信息

脂肪酸(FAs)是构成大多数细胞脂质的基本成分,在生物体的整个生命过程中都是必不可少的。在高等植物中,脂肪酸生物合成发生在质体中,随后大部分被转运至内质网进行进一步修饰及脂质组装。然而,质体脂肪酸的运输机制尚未阐明。油菜是世界范围内重要的油料作物,植物油脂是重要的食用油,也是潜在的可再生生物质能源。质体产生以及转运脂肪酸的含量限制着油料作物种子中三酰甘油(TAG)的组装,通过增加脂肪酸生物合成的通量可能对植物组织TAG的积累产生较大的影响。因此,研究揭示油菜脂肪酸转运的分子调控机制有着重要的理论意义和经济价值。本文从甘蓝型油菜(Brassica napus L.)中分离鉴定了一个拟南芥脂肪酸转运蛋白AtFAX1的同源蛋白基因,命名为Bn3662。通过对该基因表达、蛋白定位及功能等方面的研究,试图探讨揭示Bn3662在油菜脂肪酸转运中的作用及其相关的分子调控机制。所取得的主要研究结果概述如下:***3662分子鉴定及在油菜组织中的表达分析序列比对和系统进化分析表明,甘蓝型油菜脂肪酸转运蛋白Bn3662与拟南芥AtFAX1具有高度同源性。通过拓扑学预测分析Bn3662为跨膜蛋白,具有四个跨膜结构域,且含有一个由55个氨基酸残基组成的叶绿体转运肽前导序列,初步推测其可能定位于叶绿体。构建35S-eGFP-Bn3662表达载体,转化农杆菌细胞,注射烟草叶片下表皮细胞,在激光共聚焦显微镜下观察GFP荧光信号,证实Bn3662蛋白定位于细胞的叶绿体中。利用实时定量RT-PCR技术对Bn3662在油菜组织中的表达情况进行分析,结果显示,Bn3662在开花授粉后25天的种子中表达量最高。分析Bn3662在亲缘关系较近但含油量有显著差异的两个油菜品种(HFA和LFA)发育15、20、25、30、40和50天(DAP)的种子中的表达情况,结果表明Bn3662在油脂合成高峰期的25 DAP种子中高表达。而且,该基因在高含油量品种HFA中的表达量更高,这说明Bn3662可能影响油菜种子及其他组织器官的油脂合成。***3662促进油菜叶片中脂肪酸合成构建了35S-Flag-Bn366 过量表达载体,通过农杆菌介导的油菜下胚轴遗传转化法获得转基因油菜植株。分析表明,过量表达Bn3662转基因油菜叶片中脂肪酸含量明显高于野生型。而且,脂肪酸组分分析发现,Bn3662转基因油菜叶片中软脂酸C16:0、硬脂酸C18:0和油酸C18:1等不饱和度低的脂肪酸比率增加,而C16:1、亚油酸C18:2和亚麻酸C18:3等不饱和度高的脂肪酸比率下降。这说明过量表达Bn3662会促进质体内脂肪酸运输,导致脂肪酸从质体合成后向外流动增快,因而叶片总脂肪酸含量明显增加。***3662影响糖酵解和脂肪酸及油脂合成途径相关酶基因的表达植物油脂合成涉及到一系列多环节生化反应,包括糖酵解途径、脂肪酸合成及脂质组装等过程。为探讨Bn3662对油菜细胞油脂合成过程的影响,利用荧光实时定量RT-PCR技术分析了糖代谢途径中的关键酶基因、脂肪酸合成相关基因和三酰甘油组装相关酶基因的表达水平。结果表明,相比野生型油菜,在过量表达Bn3662转基因油菜中这些关键酶基因的表达量均上调,说明过量表达Bn3662影响脂肪酸合成及三酰甘油组装过程相关酶基因的表达,从而促进油菜细胞内的脂肪酸和油脂的生物合成和积累。***366 参与调控油菜开花诱导相关基因的表达对Bn3662过量表达转基因油菜表型观察发现,与野生型相比,Bn3662过量表达转基因油菜表现出明显的早花表型(提前30-45天开花)。而且,组织表达分析也显示,Bn3662在油菜植株的花器官中高水平表达。分析了调控植物开花相关基因的表达,结果表明,在Bn3662过量表达转基因油菜中,调控开花时间的基因FT、TSF、LFY、SOC1、AG和AP3的表达量明显上升。这些基因皆属于开花整合基因,是多条成花诱导信号调控途径的下游靶基因,其表达是通过何种方式被直接影响或是间接影响的,还需要进一步的探究分析。同时,为排除因开花时间差异影响生育期,从而对种子含油量的研究产生影响,构建了种子特异启动子BnNapinP-Bn3662进行油菜转化,相关的研究还在进行中。***3662与BnPP2C相互作用构建了pGBKT7-Bn3662载体,转化酵母Y187菌株,利用酵母双杂交技术,在油菜开花授粉后25天(25DAP)种子的cDNA文库中筛选其相互作用蛋白。获得一些Bn3662的互作蛋白,其中一个为蛋白磷酸酶BnPP2C。通过酵母双杂交回转验证,pull-down和Co-IP实验证明BnPP2C能够与Bn3662在油菜细胞中发生相互作用。推测BnPP2C与Bn3662相互作用,可能影响Bn3662的磷酸化水平,从而影响Bn3662在油菜中的生物学功能。

关键词：甘蓝型油菜脂肪酸转运蛋白脂肪酸转运油脂合成基因表达调控蛋白质相互作用

PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响

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中国生物制品学杂志 2016年第7期29卷 690-695页

作者：罗春海张雷刘健莹刘瑶邹晓郑程远付世新黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

目的探讨PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响。方法构建PTEN过表达的重组腺病毒载体,病毒扩增后,感染犊牛原代肝细胞,并设空白对照组(加入PBS)和阴性对照组(感染阴性对照腺病毒AD-GFP),感染48 h后,荧光定量PCR检测细胞中PTEN... 详细信息

目的探讨PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响。方法构建PTEN过表达的重组腺病毒载体,病毒扩增后,感染犊牛原代肝细胞,并设空白对照组(加入PBS)和阴性对照组(感染阴性对照腺病毒AD-GFP),感染48 h后,荧光定量PCR检测细胞中PTEN、脂肪酸氧化代谢转运主要基因CPTⅠ、CPTⅡm RNA的表达水平,Western blot检测相应蛋白表达水平。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确。过表达PTEN基因后,可升高CPTⅠ和CPTⅡ基因m RNA和蛋白的表达量(P脂肪酸氧化酶转录和翻译水平,对脂肪酸在肝细胞内的氧化代谢过程进行调节,其有望作为临床有效的生物调控药物,用于治疗奶牛脂肪肝。

关键词： PTEN 肝细胞脂肪酸转运肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅰ 肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅱ

孕前肥胖影响胎鼠长链多不饱和脂肪酸营养的研究

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孕前肥胖影响胎鼠长链多不饱和脂肪酸营养的研究

作者：姚卉卉安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究选用高脂饲料喂养建立孕前肥胖鼠模型,通过观察母鼠肝脏去饱和酶的表达情况和胎盘的发育情况及胎盘脂肪酸转运蛋白的表达情况,探讨孕前肥胖如何影响胎鼠长链多不饱和脂肪酸营养及相关机制。方法:选用4周龄C57BL/6J小鼠,适应... 详细信息

目的:本研究选用高脂饲料喂养建立孕前肥胖鼠模型,通过观察母鼠肝脏去饱和酶的表达情况和胎盘的发育情况及胎盘脂肪酸转运蛋白的表达情况,探讨孕前肥胖如何影响胎鼠长链多不饱和脂肪酸营养及相关机制。方法:选用4周龄C57BL/6J小鼠,适应性喂养一周。设普通饲料喂养的对照组(CON)和高脂饲料喂养的高脂组(HFD),10周后,根据小鼠体重的增长情况将高脂饲料喂养组分为肥胖组(DIO)、超重组(DIW)和肥胖抵抗(DIR)组。小鼠受孕后,高脂组继续喂养高脂饲料,对照组继续喂养普通饲料,记录各组小鼠孕期食物摄入情况。于孕18天给予小鼠麻醉处理,取母鼠血液、肝脏,记录母鼠肝重;剥离胎鼠和胎盘并干燥,测量胎鼠身长和胎盘直径,称量胎鼠体重和胎盘重;收集胎血。血液离心后分离为血浆和红细胞。采用qRT-PCR检测母肝组织中去饱和酶(FADS1,FADS2)的mRNA表达情况和胎盘组织中炎性因子IL-1β和TNF-α及胎盘转运蛋白(CD36、FATP4和FABPpm)的mRNA表达水平。采用Western Blot的方法检测母肝组织中去饱和酶(FADS1,FADS2)的蛋白表达情况和胎盘组织中炎性因子IL-1β和TNF-α及胎盘转运蛋白(CD36、FATP4和FABPpm)的蛋白表达水平。采用GC-MS测量母血及胎血红细胞膜中长链多不饱和脂肪酸水平。结果:CON组与HFD组小鼠体重在高脂饲料喂养两周后出现差异(t=2.248,P=0.01)。高脂喂养10周后,根据小鼠体重增长情况,将HFD组小鼠体重高于CON组(n=12)小鼠平均体重20%、10%0%之间和10%以内的小鼠分别记为DIO组(n=12)、DIW组(n=15)和DIR组(n=12)。四组小鼠体重差异具有统计学意义(F=58.090,P0.05);与CON组相比,DIW组和DIO组FADS2蛋白表达水平显著下调(P脂肪酸转运体(CD36,FATP4和FABPpm)的蛋白表达水平下调及胎盘炎性因子(IL-1β和TNF-α)的蛋白表达水平上调进而影响子代LC-PUFAs营养水平。因此,我们推测孕前肥胖影响子代LC-PUFAs营养的原因为肥胖促进胎盘炎性因子IL-1β及TNF-α的表达水平上调,引发胎盘组织结构及功能紊乱,进而引起胎盘脂肪酸转运体(CD36,FATP4,FABPpm)表达水平的下调。

关键词：孕前肥胖长链多不饱和脂肪酸炎症脂肪酸转运

血管内皮细胞脂肪酸代谢调控及其病理生理意义

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生理科学进展 2022年第3期53卷 229-234页

作者：林桐罗文威张丽丽刘培庆李卓明中山大学药学院广州510006

血管内皮细胞功能障碍伴随着细胞内代谢紊乱,并与动脉粥样硬化、糖尿病等多种疾病密切相关。脂肪酸代谢作为细胞能量代谢的主要形式之一,在调节内皮细胞稳态、调节内皮细胞增殖和血管新生等方面发挥重要作用,具有重要的病理生理意义。... 详细信息

血管内皮细胞功能障碍伴随着细胞内代谢紊乱,并与动脉粥样硬化、糖尿病等多种疾病密切相关。脂肪酸代谢作为细胞能量代谢的主要形式之一,在调节内皮细胞稳态、调节内皮细胞增殖和血管新生等方面发挥重要作用,具有重要的病理生理意义。本文将综述内皮细胞的脂肪酸转运、氧化、脂质合成等脂肪酸代谢的调控机制,以及内皮细胞脂肪酸代谢的病理生理意义,为内皮功能障碍相关疾病的干预和治疗提供参考。

关键词：内皮细胞脂肪酸转运脂肪酸氧化脂肪酸合成

利拉鲁肽减轻高脂诱导的成肌细胞脂质沉积机制的研究

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中国糖尿病杂志 2021年第6期29卷 457-462页

作者：孔莫维高宇邢恩鸿孙立新马慧娟邢邯英承德医学院内分泌科 067000 承德医学院附属医院内分泌科承德医学院附属医院中心实验室河北省人民医院内分泌科

目的探讨胰升血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂利拉鲁肽减少棕榈酸(PA)诱导成肌细胞(L6)脂质沉积,改善IR的作用机制。方法传代培养L6细胞系,经诱导分化后将细胞分为正常对照(Con)组、高脂(HF)组、利拉鲁肽10 nmol/L干预组(10 Lir组)、100 n... 详细信息

目的探讨胰升血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂利拉鲁肽减少棕榈酸(PA)诱导成肌细胞(L6)脂质沉积,改善IR的作用机制。方法传代培养L6细胞系,经诱导分化后将细胞分为正常对照(Con)组、高脂(HF)组、利拉鲁肽10 nmol/L干预组(10 Lir组)、100 nmol/L干预组(100 Lir组)和1000 nmol/L干预组(1000 Lir组)。CCK-8法检测各组细胞活性,GPO-PAP酶法检测各组细胞内TG含量,RT-PCR和Western blot法检测各组脂肪酸转运蛋白(FAT/CD36)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖转运蛋白4(GluT4)mRNA和蛋白表达。结果HF组细胞活性低于Con组(P脂肪酸转运和内质网应激相关因子FAT/CD36、FABP4、GRP-78表达相关,促进葡萄糖转运减轻IR。

关键词：成肌细胞利拉鲁肽脂肪酸转运葡萄糖调节蛋白78 葡萄糖转运子4

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脂肪酸转位酶在动物分子育种中的应用前景

畜牧兽医杂志 2018年第5期37卷 31-34页

作者：王燕燕董和徐建峰高博石福岳张艳丽容维中甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000 平凉市农产品质量安全检测检验中心

脂肪酸转位酶(FAT/CD36)是一种广泛分布于不同组织或细胞表面的糖蛋白,参与长链脂肪酸的转运,在很多生物效应中发挥着相当重要的作用。因此本综述通过介绍FAT/CD36的分子结构、表达调控、生物功能,阐述其与动物肌内脂肪沉积的关系,并就F... 详细信息

脂肪酸转位酶(FAT/CD36)是一种广泛分布于不同组织或细胞表面的糖蛋白,参与长链脂肪酸的转运,在很多生物效应中发挥着相当重要的作用。因此本综述通过介绍FAT/CD36的分子结构、表达调控、生物功能,阐述其与动物肌内脂肪沉积的关系,并就FAT/CD36在动物分子育种中的应用前景作一展望。

关键词：脂肪酸转位酶脂肪酸转运肌内脂肪沉积分子育种

日粮添加丁酸钠对母体及子代脂代谢的影响及机制研究

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日粮添加丁酸钠对母体及子代脂代谢的影响及机制研究

作者：周佳彬南京农业大学

学位级别：硕士

母体的营养供给对胎儿及出生后发育至关重要,在畜牧生产中母猪日粮添加粗纤维具有提高产仔数、泌乳量、存活率等作用。相关报道认为粗纤维主要通过在肠道发酵产生短链脂肪酸来发挥其生理功能,丁酸的营养作用较强,因此对于丁酸的作用机... 详细信息

母体的营养供给对胎儿及出生后发育至关重要,在畜牧生产中母猪日粮添加粗纤维具有提高产仔数、泌乳量、存活率等作用。相关报道认为粗纤维主要通过在肠道发酵产生短链脂肪酸来发挥其生理功能,丁酸的营养作用较强,因此对于丁酸的作用机制研究报道较多,但其具有挥发性,常以其稳定的钠盐形式(丁酸钠)被广泛应用。根据之前的报道,丁酸钠能够改善肠道功能、提供能量、并与机体的脂质代谢密切相关。尽管目前关于丁酸作用的研究很多,但是关于母体日粮添加丁酸对子代脂质代谢影响的研究比较少,并且对于其作用的机制鲜有报道。因此,本试验旨在研究妊娠期及泌乳期日粮添加丁酸钠对母代及子代脂代谢的影响及其作用机制。1妊娠期日粮添加丁酸钠对母体及胎鼠肝脏脂代谢的影响及机制母源性丁酸钠能够通过多种途径调控脂代谢,但关于其对胎儿时期作用机理研究关注较少。本实验选用妊娠期母鼠作为动物模型,平均分为对照组(CON:饲喂正常日粮)及丁酸钠组(SB:含1%丁酸钠的实验日粮),实验周期为整个妊娠期,在妊娠期18.5天采取组织样及血样。母代鼠肝脏油红切片结果显示,丁酸钠组肝脏脂质显著减少,并且母代鼠肝脏中甘油三酯(Triglyceride,TG)及总胆固醇(Total cholesterol,Tch)含量显著降低(P酸钠处理后,母代鼠血浆中非酯化脂肪酸(Non-esterified fatty acid,NEFA)含量显著增多(P酸化蛋白激酶 A 催化亚基(Phosphor-protein kinase A catalytic subunit,p-PKA)(Thr197)蛋白表达水平显著升高(P酸化的激素敏感酯酶(Phosphorylated hormone sensitive lipase,p-HSL)(Ser855)蛋白表达水平显著升高(P脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FASN),乙統辅酶A羧化酶(acetyl-COA carboxylase,ACC),长链脂酰辅酶A合成酶(Long-chain acyl-COA synthetase,ACSL1)以及酰基辅酶 A 合成酶(Acyl-COA synthetase,ACSS1)的蛋白表达水平在母代鼠及胎鼠中均没有发生显著变化。丁酸钠组胎盘组织及胎鼠肝脏中的脂肪酸转运蛋白(Fatty acids transport protein 1,FATP1)及脂肪酸转位酶(Fatty acidtranslocase,CD36)蛋白表达水平升高(P酸钠能够促进母代鼠肝脏脂质动员,循环血液中NEFA显著上升,促进胎盘对脂肪酸的转运,增强了胎鼠肝脏摄取脂肪酸的能力,从而引起胎鼠肝脏脂质含量升高。2妊娠期及泌乳期日粮添加丁酸钠对母体及断奶仔鼠脂代谢的影响及机制本试验选用妊娠期SD大鼠,分为CON组及SB组(SB:含1%丁酸钠的实验日粮),实验周期为妊娠期及泌乳期。子代鼠断奶时采取组织样及血样。与CON相比,母源性丁酸钠提高了母代鼠及断奶仔鼠血浆中NEFA的水平(P酸钠处理后,母代鼠脂肪组织中GPR43,p-PKA,ATGL以及HSL的蛋白表达量显著上升(P酸钠对母代鼠脂肪组织中参与脂质合成的关键蛋白ACSSI,ACSLI以及硬脂酰辅酶A去饱和酶(Stearoyl-CoAdesaturase,SCD)的表达没有影响。与对照组相比,SB组断奶仔鼠肝脏中的TG水平显著升高(P脂肪酸摄取的FABP1及CD36在断奶仔鼠肝脏中蛋白表达显著升高(P酸钠处理后断奶仔鼠肝脏中Tch极显著升高(P酸钠能够促进母代鼠脂肪组织的脂解作用,循环血液中的NEFA显著增多,断奶仔鼠肝脏摄取脂肪酸能力增强,引起肝脏中脂质增多。3妊娠期及泌乳期日粮添加丁酸钠及粗纤维对断奶仔猪肝脏脂代谢的影响及机制在畜牧生产中,丁酸以及粗纤维在促进生产等方面有积极作用。然而,关于两者在母体营养与子代生长发育的关注较少。因此,本试验

关键词：母源性丁酸钠脂代谢脂肪酸转运短链脂肪酸受体