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脂肪酸合成相关的固醇调节元件结合转录因子1在肿瘤中的研究进展

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中国肿瘤临床 2018年第8期45卷 418-421页

作者：王红刘静关海霞中国医科大学附属第一医院内分泌科、内分泌研究所、辽宁省内分泌疾病重点实验室沈阳市110001

脂肪酸合成增加是肿瘤细胞的第三大代谢表型,固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBP1)是脂质代谢,尤其是脂肪酸合成相关的重要核转录因子。SREBP1在多种肿瘤中有异常高表达,并在... 详细信息

脂肪酸合成增加是肿瘤细胞的第三大代谢表型,固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBP1)是脂质代谢,尤其是脂肪酸合成相关的重要核转录因子。SREBP1在多种肿瘤中有异常高表达,并在肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、耐药性及能量代谢等方面发挥着重要作用。本文就SREBP1的结构、功能,在肿瘤细胞中SREBP1的表达、作用及相关通路进行综述。

关键词：固醇调节元件结合转录因子1 脂肪酸合成肿瘤

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细菌不饱和脂肪酸合成研究进展

微生物学报 2024年第1期64卷 14-29页

作者：余永红马建荣张源寅鄢明峰张文彬广东食品药品职业学院广东广州510520 华南农业大学生命科学学院广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室广东广州510642

脂肪酸不仅是细菌细胞膜组分,还是许多生物活性物质的合成原料。不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acid,UFA)具有更低的相变温度,是细菌调节细胞膜流动性的重要分子,因此UFA合成途径是重要的抗菌药物筛选靶点。细菌可利用厌氧途径合成UFA... 详细信息

脂肪酸不仅是细菌细胞膜组分,还是许多生物活性物质的合成原料。不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acid,UFA)具有更低的相变温度,是细菌调节细胞膜流动性的重要分子,因此UFA合成途径是重要的抗菌药物筛选靶点。细菌可利用厌氧途径合成UFA,其中模式生物大肠杆菌利用经典的FabA-FabB途径合成UFA,但不同细菌中UFA合成的厌氧途径具有多样性,相关催化酶类也不尽相同;细菌还可以利用需氧途径合成UFA,利用脂肪酸脱饱和酶直接将饱和脂肪酸(saturated fatty acid,SFA)转化为不饱和脂肪酸,而不同脱饱和酶会生成不同结构的UFA,在逆境耐受、致病力等多方面发挥重要作用;细菌还可以利用单加氧酶,将脂肪酸合成途径中癸酰酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)转化为顺-3-癸烯酰ACP,并最终合成UFA。细菌脂肪酸合成相关的其他酶类在UFA合成或不同种类UFA调节中也发挥着重要作用。本文系统地总结了细菌UFA合成途径与相关酶类的多样性研究进展,旨在为进一步了解细菌UFA合成机制,并以此为靶点开发抗菌药物等方面提供理论支撑。

关键词：脂肪酸合成不饱和脂肪酸厌氧途径需氧途径

咖啡AP2基因家族鉴定及其与脂肪酸合成相关基因表达

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分子植物育种 2024年

作者：杨婧李学俊张宝琼陈治华王步天施学东葛宇云南农业大学热带作物学院

通过系统分析卡尼弗拉咖啡AP2/ERF基因家族，阐明其结构特征及潜在的调控功能，为后续深入解析卡尼弗拉咖啡种子脂肪酸生物合成机制及其积累模式奠定基础。采用生物信息学方法，从卡尼弗拉咖啡基因组测序数据中鉴定AP2/ERF基因家族，对... 详细信息

通过系统分析卡尼弗拉咖啡AP2/ERF基因家族，阐明其结构特征及潜在的调控功能，为后续深入解析卡尼弗拉咖啡种子脂肪酸生物合成机制及其积累模式奠定基础。采用生物信息学方法，从卡尼弗拉咖啡基因组测序数据中鉴定AP2/ERF基因家族，对其理化性质和蛋白基序进行分析；根据卡尼弗拉咖啡AP2/ERF与拟南芥AP2/ERF蛋白的序列比对，构建系统进化树；基于转录组数据分析卡尼弗拉咖啡AP2/ERF基因家族在卡尼弗拉咖啡种子发育期中的表达模式，并结合卡尼弗拉咖啡种子发育期脂肪酸成分含量变化，确定潜在的可能与卡尼弗拉咖啡种子脂肪酸合成有关的高表达AP2/ERF基因家族成员，最后采用RT-qPCR技术对上述AP2/ERF基因家族成员进行验证。结果表明，从卡尼弗拉咖啡基因组中鉴定出99个AP2/ERFs。理化信息分析发现，卡尼弗拉咖啡AP2/ERF蛋白长度为92～724氨基酸，分子质量为10.47～79.33 kD，理论等电点为4.15～10.93。根据系统发育关系，99个CcAP2/ERFs分属于4个亚家族，各亚家族成员各自聚为一簇，数量分别为30 (DREB)、51 (ERF)、2 (RAV)和16 (AP2)个。蛋白保守基序分析显示，CcAP2/ERF蛋白家族成员具有1～6个不等的保守基序，其中基序1、2、3和5在大多数CcAP2/ERF蛋白序列中均有分布。基因结构分析表明，DREB、REF和RAV亚家族的外显子与内含子数量均较少，基本均为1～3个，而AP2亚家族的外显子与内含子数量较多，在3～11个。在卡尼弗拉咖啡种子发育过程中，总脂肪酸含量在前期迅速积累，然后逐渐减少。基于转录组和脂肪酸检测结果，8个高表达的CcAP2/ERFs在种子发育阶段的表达趋势与脂肪酸含量变化趋势相似，并通过采用RT-qPCR技术验证了上述基因在种子发育阶段的表达。鉴定出99个CcAP2/ERFs，根据转录组和脂肪酸检测结果，预测其中8个高表达的CcAP2/ERFs可能参与了卡尼弗拉咖啡种子脂肪酸的合成调控。本研究对于CcAP2/ERFs家族基因深入了解和促进脂肪酸合成的相关基因资源挖掘具有积极意义。

关键词：卡尼弗拉咖啡 AP2/ERF基因家族脂肪酸合成基因表达

BnaWRKY6.A9影响花器官发育、种子含油量和脂肪酸合成的初步研究

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BnaWRKY6.A9影响花器官发育、种子含油量和脂肪酸合成的初步研究

作者：徐诺浙江大学

学位级别：硕士

油菜作为我国第一大油料作物,在我国广泛种植。植物油作为一种重要的人类食品和动物饲料,含有不饱和脂肪酸和各种维生素,具有很高的营养价值。近年来,植物油对国产食用油的贡献率也在逐步提高。在植物中,脂肪酸是植物种子脂质的主要成分... 详细信息

油菜作为我国第一大油料作物,在我国广泛种植。植物油作为一种重要的人类食品和动物饲料,含有不饱和脂肪酸和各种维生素,具有很高的营养价值。近年来,植物油对国产食用油的贡献率也在逐步提高。在植物中,脂肪酸是植物种子脂质的主要成分,包括饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。其中,油菜籽油的不饱和脂肪酸含量约占脂肪酸总量的94%,而其中富含的油酸作为一种单不饱和脂肪酸,化学性质稳定易于被人体吸收,这也使得油菜成为一种十分优质的油料资源。因此深入挖掘甘蓝型油菜中参与脂肪酸合成的重要功能基因,能为油菜高含油量高品质育种,提供重要的理论依据和基因资源,进而提高我国食用油的品质和自给率。本研究以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)为实验材料,探究了在油菜BnaWRKY6.A9基因在油菜花器官形态建成、种子生长发育及不饱和脂肪酸积累过程中的作用。而且本论文通过RNA-seq技术筛选了BnaWRKY6.A9转录因子下游参与脂肪酸合成的差异表达基因,初步揭示了BnaWRKY6.A9通过直接结合下游靶基因BnaFAD3.C4和BnaFAE1.C8的启动子区域转录抑制其表达来调控脂肪酸的合成的功能。这些结果能够为甘蓝型油菜品质育种提供重要的理论依据和基因资源,有重要的应用价值。本研究所取得的主要结果如下:1)BnaWRKY6.A9基因功能预测。通过分析BnaWRKY6.A9启动子区域的顺式作用元件的功能,推测BnaWRKY6.A9可能调控种子生长发育进程。多序列比对结果显示WRKY6在各十字花科植物中的同源基因都具有WRKY保守结构域及CH型锌指结构。通过构建双子叶植物中WRKY6同源基因进化树,发现甘蓝型油菜BnaWRKY6.A9与拟南芥WRKY6亲缘关系很近,可能具有相似或相同的功能。2)BnaWRKY6.A9影响花器官的发育。GUS组织染色结果显示BnaWRKY6.A9主要在花器官尤其是花药和柱头中表达。本文构建了BnaWRKY6.A9的过表达和CRISPR/Cas9基因编辑载体,并通过遗传转化技术获得转基因材料。表型观察发现,过表达Bn WRKY6 OE株系的花朵变小,花苞数量减少且柱头外露。3)BnaWRKY6.A9影响种子生长发育及脂肪酸合成。本文在甘蓝型油菜中过表达BnaWRKY6.A9的种子干瘪变小,而bnwrky6的种子圆润饱满且含油量显著上升。可溶性糖作为脂肪酸合成的碳源,在bnwrky6中含量显著降低;而可溶性蛋白质与脂肪酸的合成具有底物竞争关系,在bnwrky6中含量也有显著下降,说明在bnwrky6中底物更多转化为了脂肪。此外,利用近红外法对油酸和芥酸含量进行测量,结果显示Bn WRKY6 OE含油量相比于野生型虽略有下降但油酸含量显著上升,芥酸含量极显著下降并接近为零。4)BnaWRKY6.A9参与脂肪酸合成过程。本文通过选取BnaWRKY6.A9纯合敲除株系与野生型的花芽分化时期样品进行转录组测序,GO及KEGG注释中显著差异基因在脂肪酸合成通路上均有显著富集。同时对富集在脂肪酸合成通路上的潜在下游靶基因进行分析,发现催化油酸转化为芥酸的脂肪酸碳链延长酶BnaFAE1.C8和催化亚油酸转化为亚麻酸的脂肪酸去饱和酶BnaFAD3.C4的编码基因在bnwrky6中显著上调。而植物中的脂肪酸合成处于动态可逆平衡,BnaFAD3.C4酶活性受到抑制会积累大量亚油酸,从而促使平衡向积累油酸的方向移动导致油酸含量上升。5)BnaWRKY6.A9通过直接结合在下游靶基因BnaFAE1.C8和BnaFAD3.C4启动子区域的W-box元件转录抑制其表达。荧光定量PCR结果显示在过表达株系中BnaFAE1.C8表达量显著降低,且在敲除株系中BnaFAD3.C4表达量显著增加。通过扩增含W-box元件的BnaFAE1.C8启动子区域进行双荧光素酶报告实验验证了BnaWRKY6.A9直接结合在BnaFAE1.C8的W-box元件。此外通过酵母单杂交实验,双荧光素酶报告实验及Ch IP-q PCR实验共同验证了BnaWRKY6.A9在BnaFAD3.C4的W-box元件和起始密码子前500bp区域内均有结合。综上所述,本文挖掘了甘蓝型油菜中影响花器官及种子脂肪酸合成关键基因BnaWRKY6.A9的功能,同时发现了过表达BnaWRKY6.A9能够获得高油酸低芥酸的高品质油菜种质资源。此外,我们还进一步筛选了BnaWRKY6.A9在脂肪酸合成通路上的下游关键靶基因,首次发现了BnaWRKY6.A9转录因子在脂肪酸代谢网络中的功能。这些研究成果可为我国油菜高品质育种提供理论基础和重要的基因资源,对提升国家食用油自给率具有重要的实际应用价值。

关键词：甘蓝型油菜 BnaWRKY6.A9 BnaFAE1.C8 BnaFAD3.C4 种子生长发育脂肪酸合成

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西伯利亚杏种仁脂肪酸合成的分子调控机制

西伯利亚杏种仁脂肪酸合成的分子调控机制

作者：郜文雅沈阳农业大学

学位级别：硕士

西伯利亚杏(Armeniaca sibirica)具有生产高油脂的能力,是亚洲特有的优良木本油料植物,可作为食用油和生物柴油的重要原料。利用代谢组学和转录组学深入研究西伯利亚杏种仁脂肪酸合成的分子调控机制,筛选脂肪酸合成的关键酶基因并进行... 详细信息

西伯利亚杏(Armeniaca sibirica)具有生产高油脂的能力,是亚洲特有的优良木本油料植物,可作为食用油和生物柴油的重要原料。利用代谢组学和转录组学深入研究西伯利亚杏种仁脂肪酸合成的分子调控机制,筛选脂肪酸合成的关键酶基因并进行功能鉴定,为西伯利亚杏种仁脂肪酸含量的提高和品质的改善打下基础。主要研究结果如下:西伯利亚杏种仁脂肪酸合成的代谢组分析:(1)分析了西伯利亚杏种仁发育过程中各种脂肪酸(FAs)组分及其含量的动态变化。随着西伯利亚杏种仁的发育,总脂肪酸含量迅速增加,特别是从SⅡ到SⅣ阶段增加迅速。(2)在发育成熟阶段(SV)的西伯利亚杏种仁中,饱和脂肪酸的含量仅占总脂肪酸的10.65%,不饱和脂肪酸的含量占总脂肪酸含量的89.35%,不饱和脂肪酸是西伯利亚杏成熟种仁中的主要脂肪酸。(3)在成熟的西伯利亚杏种仁中,不饱和脂肪酸中油酸和亚油酸的含量远远高于其他不饱和脂肪酸的总量。(4)在饱和脂肪酸中,在西伯利亚杏种仁发育的所有阶段,棕榈酸和硬脂酸的含量都高于其他饱和脂肪酸的总量。(5)尽管棕榈酸和硬脂酸的含量在西伯利亚杏种仁发育过程中逐渐增加,但与油酸和亚油酸的含量相比,棕榈酸和硬脂酸的含量要低得多;油酸和亚油酸这两种脂肪酸是西伯利亚杏种仁脂肪酸(FAs)中主要的脂肪酸。西伯利亚杏种仁脂肪酸合成的转录组分析:(1)在Nt、Nr、KOG、GO和KEGG数据库中,共匹配到10024、9803、6004、6719和9688个unigenes。(2)在脂类代谢中,228个差异表达基因(DEGs)被注释到13个KEGG通路中。(3)鉴定了脂肪酸生物合成中相关的12个关键酶基因ACC(BC、BCCP2、CT)、MAT、KAS(KASI、KASII、KASIII)、KAR、HAD、EAR、FATB、SAD6、FATA、LACS8、LPCAT和FAD2。(4)共表达网络分析鉴定出11个转录因子(WRI1、b HLH14、b HLH71、NF-YA3、NF-YA5-1、NF-YA5-2、NF-YB6、AREB3、Bzip67、ABI3、TCP15)和13个长链非编码RNA(lnc RNAs)可能参与脂肪酸生物合成的调控。(5)13个lnc RNAs与16个基因共表达,其中6个与其正调控相关,7个与其负调控相关。西伯利亚杏种仁脂肪酸合成关键酶基因克隆及其遗传转化:(1)克隆并分析了西伯利亚杏种仁发育过程中催化油酸和亚油酸合成的关键基因SAD6和FAD2。(2)开展了SAD6基因的遗传转化研究,与野生型植株相比,转基因植株油酸和棕榈油酸占脂肪酸总量的比值提高13.13%。可见转SAD6基因拟南芥能够提高油酸和棕榈油酸占比,验证了SAD6基因具有改善油脂组成的功能。

关键词：西伯利亚杏种仁脂肪酸合成分子调控机制 SAD6和FAD2基因克隆与鉴定

黄粉虫不同发育阶段脂肪酸合成关键基因的表达分析

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动物营养学报 2020年第7期32卷 3439-3450页

作者：吴玲丽郑天祥王圣印张大羽浙江农林大学农业与食品科学学院杭州311300 浙江农林大学林业与生物技术学院杭州311300

本试验旨在研究黄粉虫不同发育阶段脂肪酸合成关键基因的表达,分析脂肪酸合成相关通路关键基因的特性及表达特征。利用Illumina HiSeqTM2000高通量测序平台对不同发育阶段的黄粉虫个体进行转录组测序,并将测序结果与Uniprot以及KEGG数... 详细信息

本试验旨在研究黄粉虫不同发育阶段脂肪酸合成关键基因的表达,分析脂肪酸合成相关通路关键基因的特性及表达特征。利用Illumina HiSeqTM2000高通量测序平台对不同发育阶段的黄粉虫个体进行转录组测序,并将测序结果与Uniprot以及KEGG数据库进行分析,利用定量PCR检测黄粉虫脂肪酸合成关键基因在不同发育阶段的表达特征。结果显示:本次测序共获得156761个转录子与104937条unigenes。将unigenes与Uniprot数据库进行比对,成功注释了32806条unigenes,并同时鉴定了14条乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、75条脂肪酸合成酶(FAS)、101条脂酰辅酶A还原酶(FAR)以及75条脂肪酸去饱和酶(FAD)基因。通过KEGG数据库进行注释,共有44586条unigenes可成功匹配到331条代谢通路中。定量分析发现黄粉虫的ACC与FAS基因在雄成虫期的相对表达量显著高于其他发育阶段(P脂肪酸的合成。本研究结果表明,黄粉虫脂肪酸合成与发育阶段相关,低龄幼虫代谢强度高,脂肪酸合成相关基因相对表达量高。黄粉虫ACC、FAS、FAR及FAD基因在不同发育阶段表达量具有龄期特异性,揭示这些基因与各龄期的特定生理功能相关。

关键词：黄粉虫转录组分析脂肪酸合成基因表达

FABP5通过调节脂肪酸合成促进非小细胞肺癌迁移、侵袭的研究

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FABP5通过调节脂肪酸合成促进非小细胞肺癌迁移、侵袭的研究

作者：林晓东吉林大学

学位级别：硕士

研究背景:目前癌症依然是严重威胁人类健康的主要病症,尤其是肺癌的发病率居首位,并且还伴随着极高的死亡率,肺癌又分为非小细胞肺癌和小细胞肺癌,而非小细胞肺癌患者居多,非小细胞肺癌又大概分为两个亚型,分别是肺腺癌和肺鳞癌,肺腺癌... 详细信息

研究背景:目前癌症依然是严重威胁人类健康的主要病症,尤其是肺癌的发病率居首位,并且还伴随着极高的死亡率,肺癌又分为非小细胞肺癌和小细胞肺癌,而非小细胞肺癌患者居多,非小细胞肺癌又大概分为两个亚型,分别是肺腺癌和肺鳞癌,肺腺癌是发病率较高且研究居多的亚型。目前,对于肺癌的治疗主要采用手术以及术前或术后结合放疗或者化疗为主,但治疗效果并不理想,这其中就包括,癌症的转移以及患者的耐药,还有化疗或者放疗给病人带来的不良反应和痛苦。因此寻找新的药物作用靶点对于提高肺癌患者的生存率和改善病人的预后具有重要意义。肿瘤微环境的代谢主要有葡萄糖、脂质及谷氨酰胺等物质的代谢异常,而脂质作为细胞能量主要储存形式及生物膜重要构成成分,其代谢的改变对肿瘤进程有着重大影响,也是近年来的研究热点。目前已有文献证明脂肪酸合成的增加是肿瘤细胞一种重要代谢表型,其中重要的调控因子FABP5可上调内源性脂肪酸的合成,目前已在胰腺癌、前列腺癌及肝细胞癌等多种恶性肿瘤中可检测到其表达增加。然而在非小细胞肺癌中FABP5是否可以通过调节脂肪酸合成影响肿瘤的进展,尚未见报道。研究目的:本研究旨在观察FABP5与非小细胞肺癌发展的关系,探讨FABP5是否可以通过调节癌症患者的脂肪酸合成,进一步影响非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭,为寻找非小细胞肺癌治疗的新靶点提供理论依据。研究方法:一、体内动物实验1、裸鼠20只,雄性,7-8周龄,体重20±2 g,根据体重大小随机分为2组,10只/组。分别为A组:高脂饲料+非小细胞肺癌H1975;B组:正常饲料+非小细胞肺癌H1975;一周称重2次看体重变化,一周2次测量肿瘤大小,做肿瘤生长曲线。2、小鼠每周取血一次,测血浆中FFA、TC、TG含量。3、28天后动物取材,将肿瘤剥离出来摆放整齐拍照,测量各组肿瘤体积。4、通过Western Blot及RT-q PCR实验检测小鼠肿瘤FABP5、脂肪酸合成关键酶SREBP1、ACC1、ACC2的含量,以及FABP5下游蛋白PPARβ/δ(Peroxisome prolife Rator-activated receptorβ/δ)的含量。二、体外细胞实验1、通过划痕实验比较FABP5+H1975组与单独H1975组的迁移能力。2、通过Transwell小室侵袭实验观察FABP5对H1975侵袭能力的影响。3、通过Western Blot及RT-PCR实验检测H1975+OA、H1975+PA、H1975三组之间FAPB5、脂肪酸合成关键酶SREBP1、ACC1、ACC2、FABP5下游蛋白PPARβ/δ的表达情况。4、通过酶联免疫吸附试验检测FABP5+H1975组、单独H1975组、FABP5抑制剂+H1975组的细胞上清中脂肪合成产物TC、TG含量,脂肪酸合成关键酶SREBP1、ACC1、ACC2;FABP5下游蛋白PPARβ/δ的含量。研究结果:一、体内动物实验1、高脂饲料+H1975组的小鼠肿瘤体积及瘤重明显大于普通饲料+H1975组(P脂肪酸合成关键酶SREBP1、ACC1、ACC2的含量,以及FABP5下游蛋白PPARβ/δ的含量明显高于其他组(P脂肪酸合成关键酶SREBP1、ACC1、ACC2、FABP5下游蛋白PPARβ/δ的表达明显增加(P脂肪合成产物TC、TG含量,脂肪酸合成关键酶SREBP1、ACC1、ACC2;FABP5下游蛋白PPARβ/δ的含量发现FABP5+H1975组上述指标含量明显高于单独H1975组(P脂肪酸的过度合成导致的;2、SREBP1是脂肪酸合成的上游生物细胞因子,FABP5可能通过SREBP1进而调节脂肪酸的合成;3、体内体外实验均证实了FABP5能够促进脂肪酸的异常上

关键词：非小细胞肺癌 FABP5 脂肪酸合成迁移侵袭

RACK1通过Akt/mTOR/SREBP1介导脂肪酸合成影响宫颈癌细胞增殖和凋亡的研究

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RACK1通过Akt/mTOR/SREBP1介导脂肪酸合成影响宫颈癌细胞增殖和凋...

作者：李金秋新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨RACK1对宫颈癌细胞脂肪酸合成关键酶的表达调控,及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:(1)应用q RT-PCR和免疫组织化学方法检测宫颈鳞癌(CSCC)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及正常宫颈(NC)组织中rack1 m RNA和RACK1蛋白表达水平... 详细信息

目的:探讨RACK1对宫颈癌细胞脂肪酸合成关键酶的表达调控,及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:(1)应用q RT-PCR和免疫组织化学方法检测宫颈鳞癌(CSCC)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及正常宫颈(NC)组织中rack1 m RNA和RACK1蛋白表达水平(2)病毒转染技术沉默宫颈癌细胞C33a、SiHa中RACK1表达;根据不同处理分为3组:sh RACK1-1(RACK1沉默组1),sh RACK1-2(RACK1沉默组2)和sh-NON(RACK1沉默空载组),q RT-PCR结合Western blotting方法验证基因沉默效率。(3)MTT、平板克隆试验、流式细胞术检测沉默RACK1后细胞增殖能力和凋亡水平;Western Blot和q RT-PCR方法检测Cylin D1、caspase-3、caspase-9、Bax和Bcl-2的表达情况;应用q RT-PCR检测25例CSCC组织中上述指标m RNA的表达,结合Spearman秩相关分析其相关性。(4)BODIPY染色检测经过转染sh RACK1后细胞内脂质含量;Western Blot方法检测ACC1、FASN的表达。(5)sh RACK1-1组添加油酸处理后,观察细胞增殖和凋亡水平的变化。(6)采用Western Blot检测转染sh RACK1后,AKT/m TOR/SREBP1信号通路相关蛋白表达;染色质免疫共沉淀技术(Ch IP)验证SREBP1是否与ACC1、FASN的启动子结合。(7)免疫共沉淀(Co-IP)结合免疫荧光技术检测胞内RACK1与AKT是否结合及两者共定位情况。结果:(1)宫颈癌组织和宫颈癌细胞C33a、SiHa的rack1 m RNA、RACK1蛋白的表达水平高于正常宫颈组织和正常宫颈上皮细胞H8(P=0.000);RACK1过表达与宫颈癌病理分级(χ=5.239,P=0.002)、临床分期(χ=9.552,P=0.009)、淋巴结转移(χ=4.688,P=0.030)相关(2)相比于sh-NON组,sh RACK1-1组和sh RACK1-2组的细胞增殖能力降低,凋亡水平显著增高(P脂肪酸水平明显降低(P酸含量下降约1.56倍(C33a)、1.47倍(SiHa);油酸处理后,与sh RACK1-1组相比sh-RACK1-1+OA组细胞增殖能力显著上升,凋亡水平显著下降(P脂肪酸合成,促进脂质积累;但沉默RACK1未影响宫颈癌C33a、SiHa细胞对外源性脂肪酸的摄取。

关键词：宫颈癌脂肪酸合成 RACK1 增殖凋亡

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脂肪酸合成系统潜能的挖掘与释放

生命科学 2013年第10期25卷 966-977页

作者：王艺璇柳志杰刘天罡武汉大学药学院组合生物合成与新药发现教育部重点实验室武汉430071

在全球石油资源不断减少和温室气体不断积累的情况下,急需发展可再生燃料能源及各种生物化工原料和产品。基于该目的,能够生产高能量密度液体生物燃料和高附加值化工品的微生物脂肪酸合成系统备受关注。首先介绍了大肠杆菌脂肪酸代谢系... 详细信息

在全球石油资源不断减少和温室气体不断积累的情况下,急需发展可再生燃料能源及各种生物化工原料和产品。基于该目的,能够生产高能量密度液体生物燃料和高附加值化工品的微生物脂肪酸合成系统备受关注。首先介绍了大肠杆菌脂肪酸代谢系统的组成,然后详细总结了通过改造脂肪酸代谢途径生产脂肪酸以及脂肪酸衍生物的最新研究进展,并介绍了利用体外重建体系来研究脂肪酸合成途径对该系统进行深入挖掘,以及根据得到的信息指导体内脂肪酸途径的改造来释放脂肪酸合成系统的潜能。

关键词：脂肪酸合成无细胞体系体外重建体系合成生物学