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血小板胆固醇、脂筏与功能间关系的初步探究

中国动脉硬化杂志 2024年

作者：郑家宝周璇何兆芬王安妮唐朝君赵颖苏州大学苏州医学院病理与病理生理学系苏州大学苏州医学院免疫学系苏州大学唐仲英血液学研究中心

目的探究胆固醇对血小板脂筏含量和血小板功能的调控作用。方法利用体外孵育甲基β环糊精（MβCD）和体内提升外周血总胆固醇水平来分别移除和负载血小板的胆固醇。霍乱毒素B染色联合流式细胞术检测血小板的脂筏含量；荧光抗体染色结... 详细信息

目的探究胆固醇对血小板脂筏含量和血小板功能的调控作用。方法利用体外孵育甲基β环糊精（MβCD）和体内提升外周血总胆固醇水平来分别移除和负载血小板的胆固醇。霍乱毒素B染色联合流式细胞术检测血小板的脂筏含量；荧光抗体染色结合流式细胞术检测P-selectin和活化型整合素αⅡbβ3的表达的水平；Annexin V标记结合流式细胞术检测磷脂外翻水平；体外实验体系及鼠尾出血实验检测血小板的聚集能力。结果尽管B淋巴细胞上脂筏的含量随着胆固醇的移除而降低，体外孵育MβCD去除血小板胆固醇反而显著地提高了其脂筏水平（P脂筏含量却降低了血小板的脂筏含量（P脂筏并不利于血小板的活化与聚集功能。相反，体内胆固醇的负载尽管下调了血小板上脂筏含量（P脂筏含量及血小板功能的关键调节子，它可负向调节脂筏，促进血小板的活化并增强其凝血功能。

关键词：胆固醇血小板脂筏活化与聚集

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脂筏微区超分子聚集体结构的稳定性

高等学校化学学报 2011年第9期32卷 2071-2086页

作者：孙润广张静郝长春陈莹莹杨谦陕西师范大学物理学与信息技术学院生物物理与生物医学工程研究室食品工程与营养科学学院西安710062

脂筏微区结构的动态特征与稳定性决定着细胞膜的功能.脂筏在体分离形态观测呈现出烧瓶状凹陷、球状及椭球状结构.体外模拟实验表明,鞘磷脂(SM)/胆固醇(Chol)/1,2-二油酸甘油-3-磷脂酰胆碱(DOPC)呈现出明显的液态有序相和液态无序相共存... 详细信息

脂筏微区结构的动态特征与稳定性决定着细胞膜的功能.脂筏在体分离形态观测呈现出烧瓶状凹陷、球状及椭球状结构.体外模拟实验表明,鞘磷脂(SM)/胆固醇(Chol)/1,2-二油酸甘油-3-磷脂酰胆碱(DOPC)呈现出明显的液态有序相和液态无序相共存的相分离膜结构.1,2-二油酸甘油-3-磷脂酰乙醇胺(DOPE)和神经酰胺(Ceramide)促使SM/Chol液态有序相发生重排.单层膜分析表明过量分子面积决定分子间的相互作用,过量吉布斯自由能决定膜的稳定性.通过动物细胞提取脂筏与体外模拟脂筏相结合的方法,从超分子水平阐述了脂筏微区结构与功能的生物学意义,为生物膜的研究提供了理论依据和实验支持.

关键词：脂筏微区结构超分子聚集体动态特征稳定性

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流感病毒在脂筏上组装与出芽

生物化学与生物物理进展 2015年第6期42卷 495-500页

作者：马坤王玉娟王俊峰中国科学院合肥物质科学研究院强磁场科学中心合肥230031

流感病毒造成的季节性流行性疾病给全世界带来沉重的健康负担.近年来,甲型流感病毒的变种H5N1、H7N9给各国带来了很大危害.流感病毒属于正黏附病毒科,它的遗传物质由多个节段的负链RNA组成,其组装和出芽剪切生殖是一个涉及到多种病毒因... 详细信息

流感病毒造成的季节性流行性疾病给全世界带来沉重的健康负担.近年来,甲型流感病毒的变种H5N1、H7N9给各国带来了很大危害.流感病毒属于正黏附病毒科,它的遗传物质由多个节段的负链RNA组成,其组装和出芽剪切生殖是一个涉及到多种病毒因子,多步骤、复杂的生化过程.流感病毒会使用宿主的细胞膜上的"脂筏"区域作为病毒出芽位点.首先病毒的两种糖蛋白NA蛋白、HA蛋白会在脂筏区域聚集,造成脂筏区膜变形弯曲,并且发动出芽的过程.接着,流感病毒基质蛋白M1的C端与HA、NA结合,其自身在脂筏区域开始多聚化并使膜向外弯曲形成原始病毒体的内部结构,接着招募病毒的核糖核蛋白复合物(VRNP)与M2蛋白,使组装的过程进一步完成.最后,M2蛋白会富集在原始病毒体的底部,完成膜的剪切和病毒体的释放.

关键词：流感病毒脂筏病毒组装膜出芽膜剪切 M2蛋白

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生物膜的生物物理观——从微区到脂筏

生物化学与生物物理进展 2004年第11期31卷 969-974页

作者：王景雪张兴堂蒋晓红李蕴才黄亚彬杜祖亮河南大学特种功能材料省重点实验室开封475001

大量的实验表明 ,在细胞质膜中 ,由于不同成分具有不同的生物化学特性 ,发生相分离而局部形成微区 .不同的微区可行使不同的功能 .近年来一种富含胆固醇、鞘脂类以及大量的受体和信号分子的液态有序相的微区 ,即脂筏 (lipidrafts) ,由... 详细信息

大量的实验表明 ,在细胞质膜中 ,由于不同成分具有不同的生物化学特性 ,发生相分离而局部形成微区 .不同的微区可行使不同的功能 .近年来一种富含胆固醇、鞘脂类以及大量的受体和信号分子的液态有序相的微区 ,即脂筏 (lipidrafts) ,由于被发现参与信号转导和一些物质的生理循环过程而备受关注 .随着实验手段的提高 ,人们对生物膜在分子水平上认识的不断深化 ,脂筏结构和功能的物理、化学基础研究方面也取得了初步的进展 .

关键词：微区相分离脂筏

衍生于咔唑的双氰基二苯代乙烯型双光子荧光脂筏探针

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高等学校化学学报 2021年第8期42卷 2443-2449页

作者：黄池宝康帅潘淇吕国岭遵义师范学院信息工程学院遵义563002 韶关大学英东生物与农业学院韶关512005

制备了一个衍生于咔唑的双氰基二苯代乙烯型双光子荧光脂筏探针——(E)-2-甲基-5-{2-[9-正辛基(3-咔唑基)]乙烯基}对苯二甲腈(DLR),并对其结构进行了表征.结果表明,DLR属于推-拉电子结构(供体-桥-受体,D-π-A),其最大发射波长随介质极... 详细信息

制备了一个衍生于咔唑的双氰基二苯代乙烯型双光子荧光脂筏探针——(E)-2-甲基-5-{2-[9-正辛基(3-咔唑基)]乙烯基}对苯二甲腈(DLR),并对其结构进行了表征.结果表明,DLR属于推-拉电子结构(供体-桥-受体,D-π-A),其最大发射波长随介质极性递增,而其荧光强度却随极性递减.DLR在二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)中的发射强度是在二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)中的20倍,其对DPPC,模拟脂筏[n(DOPC)∶n(鞘磷脂)∶n(胆固醇)=1∶1∶1]和DOPC的荧光强度比为20∶12.8∶1,在DPPC中的荧光寿命是在DOPC中的2.2倍以上,表明DLR能很好地区分DPPC与***在DPPC和DOPC中的双光子发射截面(Φδ)分别为1350和67 GM,表明DLR能够很好地识别脂筏,成像脂筏在细胞与组织中的分布动态.

关键词：双光子脂筏探针脂筏极性生物成像

脂筏在细胞信号特异性调节钾离子通道功能中的作用

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中国药理学通报 2010年第11期26卷 1401-1404页

作者：张会然张海林河北医科大学药理学教研室河北石家庄050017

钾离子通道在稳定细胞膜电位和调节细胞兴奋性等方面发挥重要作用,目前的研究主要集中在其信号转导通路的上下游的参与分子方面。细胞在接受刺激后,众多的信号通路同时在在一片很小的细胞膜上发生,此间必然存在着一个空间上的调节来协... 详细信息

钾离子通道在稳定细胞膜电位和调节细胞兴奋性等方面发挥重要作用,目前的研究主要集中在其信号转导通路的上下游的参与分子方面。细胞在接受刺激后,众多的信号通路同时在在一片很小的细胞膜上发生,此间必然存在着一个空间上的调节来协调不同通路的"特异性"转导。脂筏即是其中参与信号转导的平台之一。该文即对脂筏在钾离子通道调节中的作用及目前研究进展进行综述。

关键词：脂筏钾通道信号转导调节特异性平台

脂筏募集蛋白分析针刺对阿尔茨海默病小鼠跨膜细胞信号途径的影响

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中国中西医结合杂志 2014年第8期34卷 991-996页

作者：聂坤张雪竹赵岚贾玉洁韩景献天津中医药大学第一附属医院针灸研究所天津300193

目的揭示针刺治疗阿尔茨海默病(AIzheimers disease,AD)中参与神经元功能调控的跨膜细胞信号途径。方法以SAMP8小鼠为AD动物模型,用液质联用蛋白质组学方法检测益气调血扶本培元针法对早老化痴呆小鼠SAMP8海马脂筏募集的跨膜细胞信号蛋... 详细信息

目的揭示针刺治疗阿尔茨海默病(AIzheimers disease,AD)中参与神经元功能调控的跨膜细胞信号途径。方法以SAMP8小鼠为AD动物模型,用液质联用蛋白质组学方法检测益气调血扶本培元针法对早老化痴呆小鼠SAMP8海马脂筏募集的跨膜细胞信号蛋白数量和种类的影响。结果与对照组比较,针刺组小鼠SAMP8海马脂筏募集的细胞信号类蛋白质数量增多39种,其中,离子通道蛋白14种,G蛋白8种,跨膜信号受体8种,激酶9种,共涉及包括G蛋白偶联受体信号、酶耦联受体信号和离子通道介导3类主要的细胞信号途径;与非穴组比较,针刺组海马脂筏募集的激酶类信号蛋白数量显著增加,增加的激酶从功能上看,以调节神经元细胞骨架相关的突触功能和神经递质分泌为主。结论针刺治疗AD的细胞生物学机制,可能是通过多种跨膜细胞信号改善神经元突触的功能和促进神经递质分泌,达到改善AD患者大脑认知功能的效果。

关键词：脂筏液质联用蛋白质组学阿尔茨海默病跨膜细胞信号转导

脂筏在柯萨奇病毒A组16型感染RD细胞中的作用

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中国病原生物学杂志 2019年第6期14卷 665-670页

作者：李兴志李鹏飞刘昕旸程丽鑫郑亮张雅婷沈玉江武雪宁徐嘉欣王显赫张华曹宏伟黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学附属第五医院肾内科

目的探究脂筏在柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染RD细胞中的作用。方法使用胆固醇抑制剂甲基-β-环糊精(MβCD)驱散细胞膜胆固醇并破坏脂筏,分别采用RT-PCR和Western blot技术,在mRNA以及蛋白质水平检测MβCD处理对于CA16病毒感染RD细胞的... 详细信息

目的探究脂筏在柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染RD细胞中的作用。方法使用胆固醇抑制剂甲基-β-环糊精(MβCD)驱散细胞膜胆固醇并破坏脂筏,分别采用RT-PCR和Western blot技术,在mRNA以及蛋白质水平检测MβCD处理对于CA16病毒感染RD细胞的影响。在RD细胞感染不同时间使用MβCD处理,并检测其对CA16病毒感染的影响。MβCD处理后,使用添加外源胆固醇的方式对细胞膜胆固醇进行补充,观察CA16病毒感染的变化。通过Western blot检测CA16感染后宿主细胞Akt磷酸化水平的变化,以及MβCD处理对宿主细胞Akt磷酸化的影响。结果 MβCD以剂量依赖方式抑制CA16病毒对RD细胞的感染,MβCD处理浓度为2.5、5、7.5、10 mmol/L时CA16 VP1的mRNA水平和蛋白质水平表达均出现降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论脂筏在CA16病毒感染RD细胞与激活PI3K/Akt通路中起重要作用。

关键词：柯萨奇病毒A组16型脂筏胆固醇

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脂筏在人类疱疹病毒6型装配中的作用

病毒学报 2008年第4期24卷 295-299页

作者：黄红兰李凡吉林大学白求恩医学院病原生物学教研室

为了探讨脂筏在人类疱疹病毒6型(HHV-6)装配中的作用,用HHV-6 GS株感染HSB2细胞,用非离子去污剂Triton X-100提取脂筏成分,利用Western blot分析HHV-6包膜糖蛋白与脂筏的相关性。并用免疫荧光双标记的方法,从分子共定位的角度研究HHV-6... 详细信息

为了探讨脂筏在人类疱疹病毒6型(HHV-6)装配中的作用,用HHV-6 GS株感染HSB2细胞,用非离子去污剂Triton X-100提取脂筏成分,利用Western blot分析HHV-6包膜糖蛋白与脂筏的相关性。并用免疫荧光双标记的方法,从分子共定位的角度研究HHV-6糖蛋白B(gB)与GPI(glycosyl-phosphatidyl inosital)锚固蛋白CD59分子以及神经节苷脂GM1(monosialotetrahexosyl ganglioside)分子之间的表达与分布关系。结果发现HHV-6包膜糖蛋白B、H、L、Q1和Q2(gB、gH、gL、gQ1和gQ2)分布在脂筏部位。激光共聚焦显微镜可观察到CD59分子及GM1均与HHV-6包膜糖蛋白B有着相同的分布,即脂筏提供HHV-6装配的平台。关于脂筏在人类疱疹病毒6型装配中的作用,这是第一次报道。

关键词：人类疱疹病毒6型脂筏装配