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胶质细胞源性神经营养因子及其酪氨酸激酶受体RET在不同胎龄先天性肛门直肠畸形胎鼠直肠末端的表达

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中华实用儿科临床杂志 2016年第23期31卷 1829-1833页

作者：曲颜刘远梅毛羽晨金祝高明娟郑泽兵遵义医学院附属医院小儿普胸泌外科 563000

目的观察胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）及其酪氨酸激酶受体RET在不同胎龄先天性肛门直肠畸形（ARM）胎鼠直肠末端的表达和分布情况，探讨其对ARM胎鼠直肠末端肠神经系统发育的影响。方法SD孕鼠35只按简单随机法分为9 g/L盐水对照组... 详细信息

目的观察胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）及其酪氨酸激酶受体RET在不同胎龄先天性肛门直肠畸形（ARM）胎鼠直肠末端的表达和分布情况，探讨其对ARM胎鼠直肠末端肠神经系统发育的影响。方法SD孕鼠35只按简单随机法分为9 g/L盐水对照组（10只）和乙烯硫脲实验组（25只），2组孕鼠在孕16 d、孕18 d、孕20 d取出胎鼠，肉眼及解剖显微镜下将胎鼠分为9 g/L盐水对照组、乙烯硫脲对照组（未产生ARM胎鼠）、乙烯硫脲畸形组（ARM胎鼠）。应用HE染色观察各组胎鼠直肠末端肠神经节细胞形态并计数。应用免疫组织化学染色、Western blot法观察3组胎鼠在孕16 d、孕18 d、孕20 d直肠末端GDNF及受体RET分布情况。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测3组胎鼠在孕16 d、孕18 d、孕20 d直肠末端GDNF mRNA的表达情况。结果HE染色：3组胎鼠在孕16 d时肛门直肠末端各层发育不清晰，肌层见少量散在神经丛，细胞核小，分布稀疏，轴突及胞质少；在孕18 d和孕20 d时9 g/L盐水对照组、乙烯硫脲对照组胎鼠直肠末端浆膜层、肌层、黏膜下层、黏膜层及其腺体逐渐清晰可见，肌间及黏膜下神经丛逐渐增多（孕18 d：11.400±3.134、11.200±3.425；孕20 d：66.100±4.954、67.600±5.481），而乙烯硫脲畸形组层次不清，神经丛少（孕18 d：7.800±1.989；孕20 d：25.200±3.048），与2个对照组比较差异均有统计学意义（F＝7.591、271.833，P均〈0.05）。免疫组织化学染色结果：孕16 d时3组胎鼠GDNF及RET在肠壁各层表达尚不清晰，仅观察到极少量弱阳性细胞；在孕18 d和孕20 d时9 g/L盐水对照组和乙烯硫脲对照组直肠末端黏膜层、黏膜下及肌间神经丛中均有表达，随胚胎不断发育，表达强度逐渐增强，与2个对照组比较，差异均有统计学意义（P均〈0.05）。qRT-PCR：在孕16 d 3组GDNF mRNA比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；在孕18 d 9 g/L盐水对照组和乙烯硫脲对照组GDNF mRNA分别为103.624±27.533和105.184±19.634；孕20 d时9 g/L盐水对照组和乙烯硫脲对照组GDNF mRNA分别为151.496±33.622和150.738±21.423，与乙烯硫脲畸形组比较（孕18 d为79.169±11.697，孕20 d为94.873±11.309），差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论GDNF及其酪氨酸激酶受体RET在不同胎龄正常胎鼠与ARM胎鼠直肠末端表达均有一定的时间相关性；GDNF及其酪氨酸激酶受体RET在ARM胎鼠直肠末端表达的异常可能影响其肠神经系统发育。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子 RET 信号通路肠神经系统先天性肛门直肠畸形

胶质细胞源性神经营养因子对股骨头缺血坏死的保护作用

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中国骨质疏松杂志 2017年第6期23卷 701-706页

作者：喻钧伦唐曦肖文黄雨罗天友吴少平重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016 成都医学院第一附属医院放射科四川成都610500

目的探究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的保护作用。方法采用改良技术建立早期激素性股骨头坏死兔模型,随机分成实验组(n=12)和对照组(n=12)。实验组给予髋周臀大肌注射GDNF(8.0μg/只),对照组相同部位注射等体积生理盐水,干预1周。分别于第5、10、15、20天进行股骨头多排螺旋CT、显微CT及苏木素-伊红(H&E)染色检测。结果影像学观察示,GDNF注射后第15天开始,实验组股骨头骨小梁逐渐丰富、密集,间距变窄,骨皮质厚度及密度增加;对照组股骨头骨小梁分布稀疏,间距增宽,部分断裂,骨质密度减低。第15、20天,实验组与对照组股骨头骨矿物质密度、组织骨矿物质密度及骨体积分数,比较差异具有统计学意义(P细胞分布广泛,细胞核着色深,脂肪细胞分布较少;对照组骨小梁分布稀疏,形态不完整,部分断裂,骨细胞空陷窝和脂肪细胞增多,骨细胞和造血细胞减少。第15、20天,实验组与对照组股骨头骨细胞空陷窝率分别为:13.3±3.2%、10.6±2.4%和71.0±7.5%、78.6±5.3%,两组比较,实验组骨细胞空陷窝率显著减低(P细胞坏死,保持骨小梁的完整性。

关键词：激素性股骨头坏死胶质细胞源性神经营养因子显微CT 骨密度

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后前角神经元的保护作用

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中华创伤杂志 2002年第4期18卷 225-228页

作者：鲁凯伍陈哲宇侯铁胜傅强曹莉金大地第一军医大学附属南方医院脊柱骨病科广州510515 第二军医大学基础医学部神经生物教研室第二军医大学附属长海医院骨科

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经... 详细信息

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经蛛网膜下腔局部注射GDNF(1μg μl,10 μg d) 1周。伤后 1,2 ,4周应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元存活数目及胆碱酯酶 (CHE)和酸性磷酸酶 (ACP)的变化。　结果　脊髓损伤后第 1,2周 ,GDNF组前角运动神经元存活数目 [(2 1.4± 3.8,2 0 .7± 3.6 )个前角视野 ]明显多于等渗盐水对照组的 (17.3± 2 .8,16 .5± 3.0 )个前角视野 (P 神经元中CHE灰度值 (6 5 .2± 2 3.8,98.7±31.6 )低于等渗盐水组 (94 .5± 35 .2 ,12 5 .6± 4 1.6 ) (P 源性GDNF能保护脊髓不完全性损伤后引起的运动神经元损害。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子大鼠脊髓损伤前角神经元保护作用

胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植治疗大鼠脑损伤

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中华创伤杂志 2007年第12期23卷 894-897页

作者：王飞潘庆刚邓东风刘宁涛海舰沈峰同济大学附属同济医院神经外科上海200065

目的探索移植转染胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因的大鼠神经干细胞（NSCs）能否促进脑损伤大鼠的神经功能修复。方法利用阳离子脂质体转染GDNF基因到大鼠NSCs，在脑立体定向仪引导下分别将PBS、NSCs、转基因NSCs移植到脑损伤大... 详细信息

目的探索移植转染胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因的大鼠神经干细胞（NSCs）能否促进脑损伤大鼠的神经功能修复。方法利用阳离子脂质体转染GDNF基因到大鼠NSCs，在脑立体定向仪引导下分别将PBS、NSCs、转基因NSCs移植到脑损伤大鼠局部损伤灶边缘，通过观察记录大鼠行为能力的变化，评价移植细胞后大鼠神经功能的修复情况。结果转染后72h，荧光蛋白大量表达。转基因细胞移植后可以在14d时仍表达GDNF基因，各实验组于移植后3d时行为学指标差异无统计学意义（P〉0．05），而在移植后7d，移植转基因NSCs组和NSCs组即与对照组在行为学指标上差异有统计学意义（P〈0．05）；在移植后14d，移植转基因NSCs组与其余两组在行为学指标上差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论转基因NSCs移植后可以分泌GDNF并促进脑外伤大鼠神经功能的恢复。

关键词：脑损伤神经干细胞基因转移胶质细胞源性神经营养因子

胶质细胞源性神经营养因子在成年大鼠三叉神经节及三叉神经核团中的分布

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解剖学报 2004年第1期35卷 26-29页

作者：冯士生周长满鄂玲玲杨松北京军医学院解剖学教研室北京100071

目的　观察胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)在成年大鼠三叉神经节及三叉神经核团内的分布 ,探讨其对三叉神经感觉神经元及运动神经元的作用。　方法　抗GDNF多克隆抗体免疫组织化学ABC法。　结果　成年大鼠三叉神经运动核、三叉神经感... 详细信息

目的　观察胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)在成年大鼠三叉神经节及三叉神经核团内的分布 ,探讨其对三叉神经感觉神经元及运动神经元的作用。　方法　抗GDNF多克隆抗体免疫组织化学ABC法。　结果　成年大鼠三叉神经运动核、三叉神经感觉核簇及三叉神经节中出现GDNF免疫反应阳性。　结论　成年大鼠三叉神经运动核、三叉神经感觉核簇及三叉神经节中存在GDNF神经元。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子大鼠三叉神经节三叉神经核团分布免疫组织化学

胶质细胞源性神经营养因子及受体在Alzheimer病模型大鼠脑组织中的表达

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中国老年学杂志 2003年第8期23卷 534-536页

作者：胡丽葵任艳鞍山钢铁公司铁西医院神经内科辽宁鞍山114034 中国医科大学附属第一临床医学院神经内科

目的　探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)在 Alzheimer病 (AD)的发病机制中的作用。方法　应用免疫组化方法检测神经营养因子 (GDNF)及其受体 GFRα- 1、Ret在正常及 AD模型大鼠脑组织中的表达。结果　实验组 (手术侧 )海马 CA1区神... 详细信息

目的　探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)在 Alzheimer病 (AD)的发病机制中的作用。方法　应用免疫组化方法检测神经营养因子 (GDNF)及其受体 GFRα- 1、Ret在正常及 AD模型大鼠脑组织中的表达。结果　实验组 (手术侧 )海马 CA1区神经细胞数目较对侧 (非手术侧 )及正常对照组明显减少 (P性表达 ;阳性免疫反应产物定位于神经细胞浆内 ;阳性反应程度对照组、实验组 (非手术侧 )、实验组 (手术侧 )依次减弱 ,但差别无统计学意义。结论　在单侧隔 -穹窿海马伞切断制成的 AD大鼠脑组织中 ,手术损伤侧海马 CA1区神经元数目减少 ,但减少的神经元的种类不明 ,机制亦不明。在该模型大鼠脑组织中没有确切的 GDNF合成减少及 /或受体 (GFRα- 1、Ret)表达障碍 ,不能确定 GDNF在 AD发病机制中的作用以及在 AD治疗上的应用价值。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子受体 Alzheimer病大鼠脑组织发病机制免疫组织化学

胶质细胞源性神经营养因子治疗帕金森病研究进展

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国际神经病学神经外科学杂志 2015年第1期42卷 89-92页

作者：王思刘菲李秀华潍坊医学院山东省潍坊市261000 山东大学附属千佛山医院神经内科山东省济南市250014

帕金森病是一种中枢神经变性疾病,除了目前的基本药物治疗外,胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)是黑质纹状体系统中重要的靶源性神经营养因子,被作为一种新的治疗药物备受学术界关注。近年来,国内外相继开展了大量GDNF治疗帕金森病的动物... 详细信息

帕金森病是一种中枢神经变性疾病,除了目前的基本药物治疗外,胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)是黑质纹状体系统中重要的靶源性神经营养因子,被作为一种新的治疗药物备受学术界关注。近年来,国内外相继开展了大量GDNF治疗帕金森病的动物实验和临床研究,取得了一定的进展,更多的临床实验有待进一步开展。如何通过采用安全恰当的给药途径及方式,既能使GDNF在体内持续高效稳定地发挥作用,又能将不良反应降到最低,是未来研究GDNF治疗帕金森病的努力方向。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子帕金森病载体治疗

胶质细胞源性神经营养因子重组腺病毒载体穿梭质粒的构建及鉴定

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神经解剖学杂志 2006年第2期22卷 199-202页

作者：马春明杨朝鲜闫乃红袁琼兰高小青邓莉泸州医学院神经生物学研究室泸州646000 四川大学华西医院眼科实验室成都610041

构建含大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)cDNA的重组腺病毒穿梭载体。提取新生大鼠纹状体总RNA,RTPCR克隆大鼠GDNFcDNA,产物回收后经HindⅢ和KpnⅠ双酶切,插入重组腺病毒穿梭载体pAdTrackCMV中,氯化钙法转染入大肠杆菌DH5α中,酶切、... 详细信息

构建含大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)cDNA的重组腺病毒穿梭载体。提取新生大鼠纹状体总RNA,RTPCR克隆大鼠GDNFcDNA,产物回收后经HindⅢ和KpnⅠ双酶切,插入重组腺病毒穿梭载体pAdTrackCMV中,氯化钙法转染入大肠杆菌DH5α中,酶切、PCR及测序分析对重组质粒做进一步鉴定。结果显示大鼠GDNFcDNA被成功克隆,所克隆的GDNFcDNA与基因库注册的相同,以上结果说明本实验成功构建了GDNFcDNA重组腺病毒载体。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子重组腺病毒穿梭载体基因重组大鼠

胶质细胞源性神经营养因子在肠神经系统中的作用

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中华实用儿科临床杂志 2014年第5期29卷 384-386页

作者：曲颜刘远梅遵义医学院附属医院小儿普胸泌外科贵州遵义563003

胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）是一类调节肠神经系统存活、分化、定植及损伤修复的蛋白因子，在小儿先天性巨结肠、肛门直肠畸形等肠神经系统发育异常疾病中的研究已得到证实，但其具体调控机制不详；有研究发现GDNF／GFRa1／RET和G... 详细信息

胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）是一类调节肠神经系统存活、分化、定植及损伤修复的蛋白因子，在小儿先天性巨结肠、肛门直肠畸形等肠神经系统发育异常疾病中的研究已得到证实，但其具体调控机制不详；有研究发现GDNF／GFRa1／RET和GDNF／GFRa1／NCAM通路可能参与肠神经系统发育与成熟，它们的异常将影响肠神经干细胞的分化、增殖及移行，引起肠神经元解剖结构和功能的异常，导致疾病发生。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子肠神经系统信号通路