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胰腺干细胞

国外医学（内分泌学分册） 2003年第5期23卷 351-353页

作者：鹿斌史虹莉复旦大学华山医院内分泌科，上海200040

近来发现胰腺干细胞可分化成产胰岛素细胞,从而为糖尿病治疗提供一个新的途径,但是具体哪种细胞为胰腺干细胞仍未明确。目前关注较多的有胰腺Nestin阳性细胞,但由于存在部位及数量多而存在较多争议。还有一些细胞如基底细胞、表达葡萄... 详细信息

近来发现胰腺干细胞可分化成产胰岛素细胞,从而为糖尿病治疗提供一个新的途径,但是具体哪种细胞为胰腺干细胞仍未明确。目前关注较多的有胰腺Nestin阳性细胞,但由于存在部位及数量多而存在较多争议。还有一些细胞如基底细胞、表达葡萄糖转运子2细胞等也被研究。另外有研究提示胰管细胞可能为一种功能干细胞,可以暂时分化成胰腺干细胞。目前由于缺乏唯一的标志物和可信的评价指标,要最终明确胰腺干细胞还需进一步研究。

关键词：胰腺干细胞胰腺巢蛋白阳性细胞基底细胞胰管细胞

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胰腺干细胞

国外医学（消化系疾病分册） 2004年第1期24卷 15-17页

作者：吴宁肖家诚金晓龙上海第二医科大学附属瑞金医院病理科 200025

胰腺干细胞是胰腺存在和更新的基础 ,与许多胰腺疾病有着密切的联系。胰腺干细胞的研究对于深入了解胰腺疾病的发生机制及指导治疗有重要意义。胰岛干细胞移植是治疗糖尿病的一条新途径。本文对胰腺干细胞的来源。

关键词：胰腺干细胞导管细胞胰岛巢素胰十二指肠同源异型盒基因

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胰腺干细胞的重要标志物——巢蛋白

生理科学进展 2007年第1期38卷 81-82页

作者：冯伯森王松辽宁师范大学生命科学学院大连116029

胰腺干细胞移植可以用来治疗糖尿病,巢蛋白(nestin)是胰腺干细胞的重要标志物。本文主要介绍巢蛋白的结构与功能,巢蛋白与胰腺干细胞的关系,以及以胰腺十二指肠同源异型盒基因蛋白(PDX-1)为代表的胰腺干细胞的其它标志物。

关键词：巢蛋白胰腺干细胞胰岛素

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胰腺干细胞的研究进展

中国兽医科学 2007年第11期37卷 1000-1007页

作者：吴杭格李碧春王丽梅宋海龙兰海楠赵小丽郑鑫吉林农业大学动物科学与技术学院吉林长春130118 扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 吉林农业科技学院吉林吉林132109

概述了胰腺干细胞的分布、胰腺的发生、胰腺干细胞的相关标记物以及胰腺干细胞的体外分离培养、增殖、分化等领域的研究进展,并对胰腺干细胞的生物学特征、体外分离培养时遇到的困难等进行了探讨,针对所遇到的困难提出了一些改进意见。

关键词：胰腺干细胞糖尿病功能胰腺细胞

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应用蛋白质组学的方法筛选胰腺干细胞标记物

生物化学与生物物理进展 2006年第6期33卷 540-547页

作者：杨明王春友刘涛汪洋刘炜黎明涛华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科中心武汉430022 中山大学医学院蛋白质组学实验室广州510089

探索利用蛋白质组学的方法筛选胰腺干细胞的标记物.通过大鼠胰腺大部分切除(Px)的方法建立胰腺增生模型,采用双向电泳(2DE)分离比较Px术后第3天大鼠增生胰腺组织与假手术(Sx)非增生胰腺组织蛋白质的表达谱差异,用基质辅助激光解吸离子... 详细信息

探索利用蛋白质组学的方法筛选胰腺干细胞的标记物.通过大鼠胰腺大部分切除(Px)的方法建立胰腺增生模型,采用双向电泳(2DE)分离比较Px术后第3天大鼠增生胰腺组织与假手术(Sx)非增生胰腺组织蛋白质的表达谱差异,用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和肽质量指纹图谱(PMF)的方法对差异蛋白进行鉴定,进一步经生物信息学检索,筛选与胚胎发育和细胞分化相关的蛋白质分子.蛋白质印迹分析蛋白质HSP47、Vimentin在Px大鼠胰腺组织中的表达,以验证2DE的结果.2DE显示Sx和Px大鼠胰腺组织平均蛋白质点数分别为(1369±31)和(1315±28)个,其中共有91个蛋白质点出现1.5倍以上的表达差异.所有差异蛋白质点PMF鉴定出53种蛋白质,其中Vimentin,cytokeratin8(CK8),lymphocytecytosolicprotein1(L-plastin),heterogeneousnuclearribonucleoproteinA2/B1(hnRNPA2/B1)和L-arginine:glycineamidinotransferase(AGAT)与胚胎发育和细胞分化有关,这些蛋白质可能是胰腺干细胞潜在的候选标记物.总之,蛋白质组学的方法利用其高通量的特点能有效发现潜在的胰腺干细胞生物学标记物.

关键词：蛋白质组学胰腺干细胞胰腺增生分子标记物 Vimentin

胰腺干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞及对1型糖尿病模型鼠的治疗作用(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第29期12卷 5768-5772页

作者：蔡寒青葛焕琦门秀丽许世清娄晋宁北京协和医学院研究生院吉林大学第二医院内分泌科吉林省长春市130041 卫生部中日友好医院临床医学研究所北京市100029

背景：有实验证实人和动物起源的胚胎干细胞或成体干细胞可分化为胰岛素分泌细胞，但其分泌胰岛素的功能及对实验性糖尿病的治疗价值尚需要验证。目的：观察从大鼠的胰腺组织分离纯化干细胞在体外将诱导分化胰岛素分泌细胞后胰岛素mRNA... 详细信息

背景：有实验证实人和动物起源的胚胎干细胞或成体干细胞可分化为胰岛素分泌细胞，但其分泌胰岛素的功能及对实验性糖尿病的治疗价值尚需要验证。目的：观察从大鼠的胰腺组织分离纯化干细胞在体外将诱导分化胰岛素分泌细胞后胰岛素mRNA的表达、分泌胰岛素的能力及对1型糖尿病模型鼠的治疗作用。设计：随机对照观察。单位：中日友好医院临床医学研究所。材料：实验于2004-08／2007—12在北京中日友好医院临床医学研究所病理生理研究室完成。选用8—10周龄雄性SD大鼠及雌性裸鼠各10只，均购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。尼克酰胺、链脲菌素均为Sigma公司产品，nestin抗体为BD Biosciences产品。大鼠胰岛素放射免疫检测试剂盒购自Linco research。胰岛素抗体及胰高糖素抗体为Santa Cruz产品。方法：应用nestin结合的免疫磁珠从SD大鼠胰腺导管细胞中分离和纯化干细胞，经体外扩增及诱导分化形成胰岛素分泌细胞。①采用RT-PCR法检测细胞分化过程中胰岛素mRNA的表达。②将干细胞经诱导分化形成的胰岛进行冰冻切片，采用免疫荧光染色观察胰岛素及胰高糖素阳性细胞表达。③对干细胞分化胰岛的胰岛素释放功能进行评价，放射免疫法测定上清中胰岛素检测干细胞分化形成的胰岛分泌胰岛素的能力。④鼠按220mg／kg链脲菌素腹腔注射法制备为1型糖尿病模型，造模后随机摸球分为天然胰岛组及干细胞胰岛组，每组5只。将大鼠天然胰岛（SD大鼠分离）及干细胞分化形成的胰岛分别移植于糖尿病裸鼠左肾包膜下，观察移植后鼠尾静脉血糖变化。主要观察指标：①细胞分化过程胰岛素mRNA表达。②胰岛样结构中胰岛素及胰高糖素阳性细胞表达。③干细胞分化形成的胰岛分泌胰岛素情况。④移植后鼠尾静脉血糖变化。结果：①RT-PCR检测结果表明胰岛素mRNA的表达随诱导时间延长而明显升高。②免疫荧光染色结果显示胰岛结构的中间存在大量胰岛素阳性细胞，胰高糖素阳性细胞主要分布于胰岛样结构的周边。③干细胞分化的胰岛在高浓度葡萄糖刺激后明显缺乏快速相的胰岛素释放，而是表现细胞外上清中胰岛素浓度的缓慢升高。④天然胰岛组移植后3d使血糖降低到10mmol／L以下，至观察到60d仍维持在正常水平；干细胞胰岛在移植后8d使血糖降低至10mmol／L以下，且在移植35d后血糖逐渐升高并恢复到胰岛移植前的水平。结论：大鼠胰腺干细胞经体外扩增和诱导分化后可分化胰岛素分泌细胞，但对葡萄糖的刺激没有快速相的胰岛素分泌。将胰岛素分泌细胞移植到1型糖尿病模型裸鼠后可一定程度地改善糖代谢的紊乱。

关键词：胰腺干细胞胰岛素糖尿病1型诱导分化胰岛移植

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胰腺干细胞负向筛选分子的鉴定

中国组织工程研究 2013年第10期17卷 1785-1792页

作者：冯锐成郎延贺梁洋吴莹滕春波东北林业大学生命科学学院黑龙江省哈尔滨市150040

背景:利用胰腺干/祖细胞体外增殖分化形成β细胞是细胞替代疗法治疗糖尿病的潜在细胞来源之一。由于缺少有效的筛选分子,胰腺干细胞的分离及特性研究进展缓慢。目的:观察植物凝集素花生凝集素、菜豆凝集素和热稳定抗原对胰腺细胞的标记... 详细信息

背景:利用胰腺干/祖细胞体外增殖分化形成β细胞是细胞替代疗法治疗糖尿病的潜在细胞来源之一。由于缺少有效的筛选分子,胰腺干细胞的分离及特性研究进展缓慢。目的:观察植物凝集素花生凝集素、菜豆凝集素和热稳定抗原对胰腺细胞的标记情况,以期找到胰腺干细胞的负向筛选分子。方法:采用荧光组织化学方法对植物凝集素(花生凝集素、菜豆凝集素)和细胞表面分子热稳定抗原抗体在成体小鼠胰腺、胚胎胰腺及切除后再生胰腺组织中进行化学及荧光组织化学检测;流式细胞仪分析负向筛选分子对胰腺细胞分群情况的影响;应用细胞培养方法对不同群细胞进行体外培养和观察。结果与结论:花生凝集素对胚胎胰腺中分化的腺泡细胞能较好标记,但不标记未分化的胰腺干/祖细胞及前体细胞;菜豆凝集素对未分化和分化的胚胎期胰腺细胞均有标记,热稳定抗原能标记正在分化的胚胎胰腺祖细胞、前体细胞和已分化胰腺细胞。在成体胰腺中,花生凝集素和菜豆凝集素均能标记胰腺腺泡和部分导管细胞,但不能标记胰岛细胞;热稳定抗原能特异标记腺泡细胞、导管细胞、血管内皮细胞、血细胞及再生胰腺新生区的导管样结构。PNA-/lowHSA-/low细胞占总细胞量的1.6%,对其培养观察发现,其中富含体积较小、三角形或多角形的上皮细胞,这些细胞可连续传代。提示协同使用花生凝集素与热稳定抗原可以筛除大部分分化的胰腺细胞及部分非胰腺细胞,从而富集胰腺干细胞。

关键词：干细胞干细胞培养与分化植物凝集素花生凝集素菜豆凝集素热稳定抗原胰腺干细胞负向筛选标志分子荧光组织化学省级基金干细胞图片文章

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胰腺干细胞的研究进展

中华内科杂志 2003年第9期42卷 665-667页

作者：蒋业贵李兆申第二军医大学长海医院消化内科上海200433

胰岛移植是治疗糖尿病的一个热点，但供体的缺乏和存在免疫排斥反应限制了其应用。胰腺干细胞能定向分化成胰岛细胞，这为胰岛移植提供新的材料来源。胰腺干细胞能向外分泌腺组织定向诱导，对于急、慢性胰腺炎的发生、发展及治疗的研究... 详细信息

胰岛移植是治疗糖尿病的一个热点，但供体的缺乏和存在免疫排斥反应限制了其应用。胰腺干细胞能定向分化成胰岛细胞，这为胰岛移植提供新的材料来源。胰腺干细胞能向外分泌腺组织定向诱导，对于急、慢性胰腺炎的发生、发展及治疗的研究有重要作用；并能修复胰腺外伤导致的胰腺功能不全。研究表明，胰腺干细胞对胰腺癌的发生、发展、调控和治疗具有重要的研究价值。

关键词：胰腺干细胞研究进展胰岛细胞胰岛移植胰腺癌

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单克隆人胰腺干细胞分化特性的研究

分子细胞生物学报 2008年第6期41卷 457-464页

作者：效梅安立龙窦忠英广东海洋大学农学院动物医学系广东湛江524088 西北农林科技大学国家干细胞工程技术中心陕西分中心陕西杨凌712100

研究1例来源于4月龄男性流产胎儿胰腺组织的单克隆人胰腺干细胞(monoclonal hu- man pancreatic stem cell,mhPSC)系的体内外分化特性。将mhPSCs接种在铺有0.1%明胶的培养皿内,扩增培养3 d后,加高糖DMEM诱导液诱导培养25 d。相差显微镜... 详细信息

研究1例来源于4月龄男性流产胎儿胰腺组织的单克隆人胰腺干细胞(monoclonal hu- man pancreatic stem cell,mhPSC)系的体内外分化特性。将mhPSCs接种在铺有0.1%明胶的培养皿内,扩增培养3 d后,加高糖DMEM诱导液诱导培养25 d。相差显微镜下,观察细胞生长状况。采用双硫腙染色法、RT-PCR及葡萄糖刺激释放胰岛素和C肽实验.对体外定向诱导mhPSCs分化为功能性胰岛进行检测。将mhPSCs悬液注射在成年雄性裸鼠腹股沟皮下。注射30 d时。取出移植物,采用SP法进行免疫组织化学反应。以检测mhPSCs的体内自然分化潜能。体外扩增培养。mhPSCs贴壁生长,呈多角形上皮样。生长至单层,呈"铺路石"状。体外定向诱导,细胞逐渐由多角形变成圆形,并聚集成类胰岛。诱导培养15 d时。形成的类胰岛中少数细胞分化为β细胞,双硫腙染色阳性。诱导培养25 d时,多数细胞分化为β细胞。双硫腙染色阳性,转录表达胰岛素的mRNA。用不同浓度葡萄糖刺激,诱导胰岛不仅释放胰岛素和C肽。而且其释放量随糖刺激浓度升高显著增加(0.01胰腺干细胞系体外定向诱导分化为包含大量β细胞的功能性类胰岛,在体内自然分化为胰岛、上皮及神经组织细胞。

关键词：胰腺干细胞单克隆分化人