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降糖药“复活”胰岛细胞有奥秘 006

降糖药“复活”胰岛细胞有奥秘

白虎加人参汤加减方对2型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用与机制研究

健康报

作者：仰东萍姜雅菲魏蕊

近日，北京大学第三医院内分泌科魏蕊研究员、洪天配教授团队与泌尿外科/生殖医学中心男科张哲副研究员团队合作，在内分泌代谢专业期刊、美国糖尿病学会官方期刊《糖尿病》（Diabetes）在线发表了题为“肠道菌群—色氨酸代谢—GLP-1轴... 详细信息

近日，北京大学第三医院内分泌科魏蕊研究员、洪天配教授团队与泌尿外科/生殖医学中心男科张哲副研究员团队合作，在内分泌代谢专业期刊、美国糖尿病学会官方期刊《糖尿病》（Diabetes）在线发表了题为“肠道菌群—色氨酸代谢—GLP-1轴参与介导达格列净促进胰岛β细胞再生”的?

关键词：胰岛β细胞糖尿病抑制剂达格列净色氨酸代谢肠道菌群胰岛细胞降糖药

来源： cnki报纸评论

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cnki报纸

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中药新药与临床药理 2022年第9期33卷 1189-1196页

作者：王芳王力彬刘清高天慧宋小妹陕西能源职业技术学院医学院陕西咸阳712000 陕西中医药大学药学院陕西咸阳712000

目的观察白虎加人参汤加减方对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛细胞的保护作用,并探讨其作用机制。方法采用高脂高糖饲料联合注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备2型糖尿病大鼠模型,将成模大鼠分为模型组、阳性药组及白虎加人参汤加减方高、低剂量... 详细信息

目的观察白虎加人参汤加减方对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛细胞的保护作用,并探讨其作用机制。方法采用高脂高糖饲料联合注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备2型糖尿病大鼠模型,将成模大鼠分为模型组、阳性药组及白虎加人参汤加减方高、低剂量组,连续给药8周。观察大鼠一般状态及测定体质量,分别检测生化指标糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS),计算胰重比;采用HE染色观察2型糖尿病大鼠胰腺组织病理变化;采用RT-PCR法测定胰腺组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA水平;采用Western Blot技术检测胰腺组织中Cleaved caspase-3、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、胰十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)、细胞核中插头转录因子1(n-FoxO1)、葡萄糖激酶(GCK)蛋白表达,免疫组化方法检测n-FoxO1蛋白表达。结果与模型组相比,白虎加人参汤加减方高、低剂量组能够改善2型糖尿病大鼠的多饮、多尿现象,体质量明显增加(P胰岛β细胞凋亡,增加胰重比,改善胰腺组织的病理变化,对2型糖尿病大鼠胰岛细胞具有保护作用,其作用机制可能与调节PI3K/AKT/FoxO1信号通路上的相关蛋白表达有关。

关键词：白虎加人参汤加减方 2型糖尿病(T2DM) 胰岛细胞 PI3K/AKT/FoxO1信号通路大鼠

睡前加服二甲双胍片对黎明现象频发的2型糖尿病患者胰岛细胞功能的影响

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中国临床研究 2023年第12期36卷 1811-1815页

作者：张圣武杨梅王慧安徽医科大学附属滁州医院滁州市第一人民医院内分泌科安徽滁州239001

目的探讨对黎明现象频发老年2型糖尿病(T2DM)患者睡前加服二甲双胍片的疗效及对胰岛细胞功能的影响。方法选取2018年5月至2021年4月于滁州市第一人民医院就诊的老年T2DM患者160例,随机分为对照组(n=80)和观察组(n=80),对照组给予门冬胰... 详细信息

目的探讨对黎明现象频发老年2型糖尿病(T2DM)患者睡前加服二甲双胍片的疗效及对胰岛细胞功能的影响。方法选取2018年5月至2021年4月于滁州市第一人民医院就诊的老年T2DM患者160例,随机分为对照组(n=80)和观察组(n=80),对照组给予门冬胰岛素强化治疗,观察组在此基础上睡前加服二甲双胍片500 mg。两组均连续治疗12周,对比两组患者治疗前后血糖变化、胰岛细胞功能变化、黎明现象发生率。采用ORACLE 10 g工具构建随机行走模型评价睡前加服二甲双胍片对黎明现象频发T2DM患者胰岛细胞功能的影响。结果治疗后,对照组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)及变异系数(CV)较治疗前降低,观察组FPG、2hPG、睡前血糖及CV较治疗前降低(P胰岛素分泌指数(HOMA-β)较治疗前增高,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较治疗前降低(P胰岛细胞功能改善效果优于对照组。结论在短期强化胰岛素治疗的基础上,睡前加服二甲双胍片可有效控制黎明现象频发T2DM患者的血糖水平,改善胰岛细胞功能。

关键词： 2型糖尿病黎明现象二甲双胍胰岛细胞随机行走模型门冬胰岛素

GLP-1类似物利拉鲁肽对高糖诱导胰岛细胞凋亡及HSP72表达、ERK1/2通路活性的影响

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中国老年学杂志 2023年第20期43卷 5097-5100页

作者：刘璟金燕霞秦丹丹许静荆门市第二人民医院综合病房湖北荆门448000

目的探讨胰高血糖素样多肽(GLP)-1类似物利拉鲁肽对高糖诱导胰岛细胞凋亡及热休克蛋白(HSP)72表达、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2通路的影响。方法体外培养大鼠胰岛INS-1细胞,分为对照组、高糖组、利拉鲁肽低剂量组(1 nmol/L)、利拉鲁肽... 详细信息

目的探讨胰高血糖素样多肽(GLP)-1类似物利拉鲁肽对高糖诱导胰岛细胞凋亡及热休克蛋白(HSP)72表达、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2通路的影响。方法体外培养大鼠胰岛INS-1细胞,分为对照组、高糖组、利拉鲁肽低剂量组(1 nmol/L)、利拉鲁肽中剂量组(3 nmol/L)和利拉鲁肽高剂量组(5 nmol/L)。检测各组INS-1细胞凋亡、HSP72、ERK1、ERK2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达和HSP72、p-ERK1/2、ERK1/2、Bax蛋白表达情况。结果与对照组相比,高糖组INS-1细胞凋亡率、HSP72、ERK1/2、Bax mRNA及HSP72、p-ERK1/2/ERK1/2、Bax蛋白表达水平显著升高(P细胞凋亡率、HSP72、ERK1/2、Bax mRNA及HSP72、p-ERK1/2/ERK1/2、Bax蛋白表达水平均显著降低(P细胞凋亡率、HSP72、ERK1/2、Bax mRNA及HSP72、p-ERK1/2/ERK1/2、Bax蛋白表达水平依次显著降低(P胰岛细胞凋亡反应,并降低HSP72水平及ERK1/2磷酸化水平。

关键词：利拉鲁肽高糖胰岛细胞凋亡热休克蛋白72 细胞外信号调节激酶1/2通路

胰岛细胞联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠胰岛细胞再血管化的实验研究

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中国普外基础与临床杂志 2022年第4期29卷 450-457页

作者：苏力担卡扎·仇曼韩玮魏琴何铁英林海程坤聂晓寒孙永辉陈启龙新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心胰腺外科乌鲁木齐830054 新疆医科大学动物实验中心乌鲁木齐830054 新疆医学动物模型研究重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨大鼠胰腺被膜下胰岛细胞联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)移植能否促进胰岛的再血管化,进而减少移植后胰岛细胞的丢失,提高胰岛细胞移植的成功率。方法40只Sprague-Dawley大鼠建立糖尿病模型。待... 详细信息

目的探讨大鼠胰腺被膜下胰岛细胞联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)移植能否促进胰岛的再血管化,进而减少移植后胰岛细胞的丢失,提高胰岛细胞移植的成功率。方法40只Sprague-Dawley大鼠建立糖尿病模型。待BMSCs及胰岛细胞培养鉴定后开腹,对照组于胰腺被膜下注射等量生理盐水,胰岛细胞组和BMSCs组于相同部位分别移植胰岛细胞和BMSCs,胰岛细胞+BMSCs联合组(联合移植组)同时于相同部位移植胰岛细胞和BMSCs,每组10只大鼠。检测各组大鼠不同时间点血清胰岛素及血糖水平的变化,实时定量PCR方法检测胰腺组织中血管生成相关因子缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、基质细胞衍生因子1α(stromal derived factor 1α,SDF1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子2(basic fibroblast growth factor 2,FGF2)的mRNA表达量。结果(1)胰岛细胞组和联合移植组在术后第15天时血糖水平明显低于对照组和BMSCs组(P胰岛细胞组于第15天后开始升高且与BMSCs组接近(P>0.05)。(2)相较于对照组和BMSCs组,胰岛细胞组和联合移植组在术后第1、3、7、15、29天均表现为较高水平胰岛素释放(P胰岛细胞移植术后可降低糖尿病大鼠血糖水平,但单纯胰岛细胞移植第15天后降糖效果逐渐减弱,而胰岛细胞联合BMSCs移植术后大鼠血糖控制平稳且作用时间更长,而且大鼠血管生成相关因子mRNA相对高表达,结合病理切片提示BMSCs有促进移植胰岛血管再通可能。

关键词：大鼠糖尿病骨髓间充质干细胞胰岛细胞

miR-200a及miR-204对胰岛细胞衰老影响机制的初步研究

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miR-200a及miR-204对胰岛细胞衰老影响机制的初步研究

作者：詹秋凤福建医科大学

学位级别：硕士

目的:严格地说,衰老不是一种疾病,但随年龄增长,机体会逐渐退行性变,多种慢性病发病率呈上升趋势。衰老是一个非常复杂的过程,识别衰老的生物学标志物可以帮助我们更精确地寻找延缓衰老的方法,降低衰老相关疾病的发病率。本研究通过对... 详细信息

目的:严格地说,衰老不是一种疾病,但随年龄增长,机体会逐渐退行性变,多种慢性病发病率呈上升趋势。衰老是一个非常复杂的过程,识别衰老的生物学标志物可以帮助我们更精确地寻找延缓衰老的方法,降低衰老相关疾病的发病率。本研究通过对年轻与老年小鼠胰腺细胞进行单细胞转录组测序,在细胞水平进行初步验证,旨在对比挖掘年轻与老年小鼠胰岛细胞的差异,以期延缓胰岛衰老、精准防治胰岛疾病。方法:1.8周龄和20月龄雌性C57BL/6小鼠胰腺组织免疫荧光验证p16以及mafa基因表达差异情况;2.老年与年轻小鼠胰腺单细胞RNA测序结果,进行生物信息学分析;3.针对测序结果中的β细胞差异基因进行查阅文献筛选,通过Targetscan、miRWalk对差异基因进行miRNA预测取交集;4.脂质体转染miR-200a mimic和miR-204 mimic至MIN6细胞中,RT-q PCR检测miR-200a和miR204的表达水平以及差异基因表达变化情况;5.慢病毒mmu-miR-204-down转染MIN6细胞,透射电子显微镜观察细胞内超微结构变化。结果:1.免疫荧光结果示20月龄老年鼠胰腺组织p16以及mafa的表达量均较8周龄的年轻鼠高。2.取8周龄和20月龄雌性C57BL/6小鼠各3只,成功获得6个胰岛单细胞悬液样本,质检合格,委托上海欧易生物有限公司进行单细胞RNA测序,利用Marker基因进行细胞类型鉴定,除胰腺固有细胞类型外,根据Ins2的表达量进行双峰筛选发现新的细胞亚型——βlike细胞,以Fold Change>1.5,P胰岛β-like细胞中,代谢疾病相关线粒体基因如mt-Co1、mt-Co3、mt-Nd2、mt-Nd3;编码金属硫蛋白基因mt2等基因呈现高表达趋势。编码羧基酯脂肪酶基因Cel;β细胞生长、再生相关基因Reg1、Reg2、Reg3b;脂代谢相关基因Pnlip、Pnliprp1等基因呈现低表达趋势。SCENIC分析发现转录因子Sox4在老年鼠β-like细胞中高表达。***-q PCR证实miRNA mimic转染到MIN6细胞中,miR-204 mimic使MIN6细胞中Cel、Ucn3、Reg1基因表达高于对照组;而miR-200a mimic则使Cel、Reg1表达较对照组下调,与测序结果老年鼠胰岛β细胞表达情况一致。经one-way ANOVA检验,差异具有统计学意义。4.透射电子显微镜观察到转染mmu-miR-204-down慢病毒的MIN6细胞与对照组细胞间损伤程度差异不明显,均为轻度水肿,基质局部溶解、稀疏,细胞器部分肿胀,胞内可见不同数量空泡样结构。结论:1.老年鼠胰岛具有较多成熟的β细胞,但生长以及再生功能较年轻鼠减退。***-200a可能通过cel、reg1基因影响胰岛细胞脂质代谢以及再生。***-204可能通过cel、ucn3和reg1基因影响胰岛细胞基因表达谱。

关键词：单细胞RNA测序衰老胰岛细胞差异基因 miRNA

胰岛细胞抗体阳性的成人隐匿性自身免疫糖尿病患者的胰岛β细胞功能

同方学位论文库评论

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中南大学学报（医学版） 2004年第3期29卷 309-314页

作者：杨琳周智广黄干颜湘中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所长沙410011

目的 :探讨胰岛细胞抗体 (ICA)和谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD Ab)对成人隐匿性自身免疫糖尿病 (LADA)患者胰岛功能的影响和预测价值。方法 :对单独ICA阳性的LADA14例 ,单独GAD Ab阳性的LADA 10例 ,GAD Ab和ICA同时阳性的LADA 7例 ,两抗体均... 详细信息

目的 :探讨胰岛细胞抗体 (ICA)和谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD Ab)对成人隐匿性自身免疫糖尿病 (LADA)患者胰岛功能的影响和预测价值。方法 :对单独ICA阳性的LADA14例 ,单独GAD Ab阳性的LADA 10例 ,GAD Ab和ICA同时阳性的LADA 7例 ,两抗体均阴性的 2型糖尿病 (T2DM) 2 5例 ,每半年随访一次 (第 2年除外 )直至第 5年 ,测定患者空腹C肽 (FCP)和 10 0g馒头餐后 2hC肽 (2°CP)及糖代谢指标。采用放射免疫法测定GAD Ab和C肽 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)测定ICA。结果 :单独GAD Ab阳性和两抗体均阳性组的FCP从随访第 2 .5年开始下降 ,FCP较入组时下降≥ 5 0 %的患者百分比分别从第 3年和第 3.5年升至 6 0 %和 71.4 % ,单独ICA阳性组和抗体阴性的T2DM组则无显著性变化。单独GAD Ab阳性组中 4 / 10例、两抗体均阳性组 1/ 10例出现胰岛功能衰竭 ,前者与单独ICA阳性组 (0 / 14例 )和两抗体均阴性组 (0 / 2 5例 )比较有统计学意义 (均P 胰岛 β细胞功能较ICA阳性的LADA以及T2DM下降更快 ,GAD Ab滴度是预测胰岛功能减退速度的重要因素。

关键词：胰岛细胞抗体阳性隐匿性自身免疫糖尿病 β细胞功能 GAD-Ab ICA

羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖及N-乙酰氨基葡萄糖对大鼠胰岛细胞生长及胰岛素分泌量的影响

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中国生物医学工程学报 2004年第2期23卷 187-191页

作者：韩宝芹刘成圣王绪敏贺君刘晨光刘万顺青岛海洋大学海洋生命学院青岛266003

通过胶原酶消化法获得大鼠胰岛单层细胞 ,并用转板以及碘乙酸处理的方法除去其中的成纤维细胞 ,得到比较纯的胰岛内分泌细胞 ,以此为材料研究了羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖、N 乙酰氨基葡萄糖对大鼠胰岛细胞生长和胰岛素释放的影响。... 详细信息

通过胶原酶消化法获得大鼠胰岛单层细胞 ,并用转板以及碘乙酸处理的方法除去其中的成纤维细胞 ,得到比较纯的胰岛内分泌细胞 ,以此为材料研究了羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖、N 乙酰氨基葡萄糖对大鼠胰岛细胞生长和胰岛素释放的影响。实验结果表明 ,羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖、N 乙酰氨基葡萄糖均能够促进大鼠胰岛细胞的生长。采用放射免疫法测定培养的胰岛细胞分泌胰岛素含量 ,结果表明 ,羧甲基壳聚糖具有刺激大鼠胰岛细胞胰岛素释放的作用。

关键词：盐酸氨基葡萄糖 N-乙酰氨基葡萄糖羧甲基壳聚糖胰岛细胞胰岛素

重组杆状病毒载体介导钠碘转运体基因在胰岛细胞中表达的研究

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上海交通大学学报（医学版） 2013年第3期33卷 263-268页

作者：刘帅潘昱张一帆上海交通大学医学院附属瑞金医院核医学科上海200025

目的探讨以杆状病毒为载体,钠碘同向转运体(NIS)基因作为报告基因监测胰岛细胞的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。分别以不同感染复数(MOI)的Bac-GFP感染大... 详细信息

目的探讨以杆状病毒为载体,钠碘同向转运体(NIS)基因作为报告基因监测胰岛细胞的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。分别以不同感染复数(MOI)的Bac-GFP感染大鼠胰岛细胞,荧光显微镜观察胰岛细胞的感染百分比和荧光表达强度;以MOI为40的Bac-GFP感染胰岛细胞,荧光显微镜下观察荧光表达时间及细胞生存状态。以不同MOI的Bac-NIS感染胰岛细胞,测定感染细胞的碘摄取情况;以MOI为40的Bac-NIS感染胰岛细胞,动态观察感染细胞摄碘能力的变化以及高氯酸钠(NaClO4)对细胞摄碘的影响。结果 Bac-GFP可高效感染SD大鼠胰岛细胞,对细胞无毒性作用;感染的胰岛细胞百分比和荧光强度随MOI的提高而上升,细胞感染百分比可高达95%以上(MOI=40),且荧光表达时间可持续2周左右。Bac-NIS感染的胰岛细胞表现出摄碘功能增强和NaClO4抑制摄碘的特性,且感染细胞摄碘的放射性计数随MOI的提高而增加;MOI为40时,Bac-NIS感染细胞摄碘的放射性计数是空白对照的12倍。结论杆状病毒介导的NIS基因在胰岛细胞中高效表达,有效介导放射性碘摄取,可用对胰岛细胞移植情况的监测。

关键词：杆状病毒钠碘同向转运体胰岛细胞报告基因