检索结果-南通市图书馆

作者：赵勇山西医科大学

学位级别：硕士

目的：通过间歇低氧舱构建慢性间歇低氧大鼠模型，观察慢性间歇低氧对大鼠肝细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-1B (protein tyrosine phosphatase-1B,PTP-1B)及胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)蛋白表达量的影响，并探讨PTP-1... 详细信息

目的：通过间歇低氧舱构建慢性间歇低氧大鼠模型，观察慢性间歇低氧对大鼠肝细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-1B (protein tyrosine phosphatase-1B,PTP-1B)及胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)蛋白表达量的影响，并探讨PTP-1B及IRS-1导致胰岛素抵抗发生发展的可能机制。方法：随机选取由山西医科大学动物实验中心提供的体重相近的成年雄性健康SD大鼠24只，均为清洁级SD大鼠，实验动物按随机数字表法分为3组:正常对照组（NC组）、间歇低氧4周组（CIH4组）、间歇低氧8周组（CIH8组），每组8只。CIH4组及CIH8组于每日9时至17时放置于间歇低氧仓内暴露于间歇低氧环境中，舱内最低氧浓度为6%-8%左右，NC组为正常对照组无间歇低氧暴露正常饲养。实验组大鼠分别于间歇低氧暴露第4周及第8周检测空腹血糖,空腹胰岛素水平，用稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）以及胰岛素敏感指数（insulin sensitive index,ISI）评价胰岛素抵抗，采用免疫组织化学法检测慢性间歇低氧大鼠肝细胞中PTP-1B及IRS-1蛋白表达，以平均灰度值表示PTP-1B及IRS-1的蛋白表达量，并做统计学分析。结果：1.与正常对照组比较，间歇低氧4周组及间歇低氧8周组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素及HOMA-IR升高，ISI降低（差异有统计学意义，P＜0.05）;2.间歇低氧8周组与间歇低氧4周组相比较，大鼠空腹血糖、空腹胰岛素及HOMA-IR升高也均升高，ISI降低，并且差别有统计学意义（P＜0.05）3.与NC组相比较，CIH4组及CIH8组PTP-1B蛋白表达增加，IRS-1蛋白表达减少，（差异有统计学意义，P＜0.05）。***相关分析显HOMA-IR与PTP-1B平均灰度值呈负相关、与IRS-1平均灰度值呈正相关;ISI与PTP-1B平均灰度值呈正相关、与IRS-1平均灰度值呈负相关。结论：1.暴露于慢性间歇低氧环境中的大鼠空腹血糖及空腹胰岛素升高，间歇低氧可致大鼠机体胰岛素的敏感性降低导致胰岛素抵抗发生，并且低氧暴露时间越长胰岛素抵抗程度越重，慢性间歇低氧可能是胰岛素抵抗发生发展的重要原因。2.慢性间歇低氧可致大鼠肝细胞PTP-1B蛋白表达上调，IRS-1蛋白表达下调，PTP-1B及IRS-1可能共同参与了慢性间歇低氧大鼠胰岛素抵抗的发生发展。

关键词：慢性间歇低氧空腹血糖空腹胰岛素胰岛素抵抗 2型糖尿病胰岛素受体底物-1 蛋白酪氨酸磷酸酶-1B

二甲双胍对PCOS患者卵巢颗粒细胞IRS-1及P38磷酸化表达的影响

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二甲双胍对PCOS患者卵巢颗粒细胞IRS-1及P38磷酸化表达的影响

作者：马成凤青岛大学

学位级别：硕士

背景:多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种常见的妇科内分泌疾病,其表现高度异质,往往伴随胰岛素抵抗(Insulin resisitence,IR)和糖脂代谢异常。研究表明60%-70%PCOS存在IR,而IR机制可能是胰岛素受体后信号传导系统... 详细信息

背景:多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种常见的妇科内分泌疾病,其表现高度异质,往往伴随胰岛素抵抗(Insulin resisitence,IR)和糖脂代谢异常。研究表明60%-70%PCOS存在IR,而IR机制可能是胰岛素受体后信号传导系统存在缺陷。胰岛素受体与胰岛素受体底物-1(IRS-l)结合,通过信号级联反应,进一步激活细胞内的丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路和磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)通路。IRS-1具有酪氨酸激酶和丝氨酸激酶活性,在胰岛素受体异常表达时,其磷酸化表达异常,是否影响MAPK通路和PI3K通路导致PCOS患者胰岛素抵抗发生有待深入探讨。研究表明,MAPK促有丝分裂通路异常激活,PI3K糖代谢通路受阻,促进IR的发生。p38作为MAPK通路中重要的信号转导分子,参与胰岛素多种靶向器官的能量代谢。p38参与调节细胞的减数分裂和有丝分裂途径,在MAPK通路中具有重要作用。卵巢颗粒细胞(Granulosa cells,GC)与卵子的发育成熟密切相关,胰岛素抵抗发病机制研究多集中在胰岛素经典靶细胞,如骨骼肌细胞、肝细胞和脂肪细胞,而对卵巢颗粒细胞局部的IR研究甚少,GC局部IR机制仍有待深入探讨。目的:通过研究不同剂量的二甲双胍对PCOS黄素化颗粒细胞中p-IRS-1和p-P38蛋白表达水平的影响,探讨PCOS胰岛素抵抗发生的受体后机制。方法:收集青岛大学医学院附属医院生殖科因不孕行体外受精/卵细胞内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗的助孕患者的颗粒细胞,将PCOS伴胰岛素抵抗非肥胖患者的黄素化颗粒细胞进行分离纯化体外培养(n=30),分别加入不同剂量Met(终浓度分别为0.01m M、0.1m M、1m M),设为PCOS+IN组(n=15),未加Met者为PCOS组(n=15)。非PCOS患者的卵泡黄素化颗粒细胞作为正常对照组(n=15)。用蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测各组颗粒细胞中p-IRS-1和p-P38蛋白的表达情况。同时比较两组患者的不孕年限、血清泌乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、体重指数(BMI)值。结果:(1)t检验统计分析PCOS组的血清促黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、获卵数明显高于正常对照组(P0.05)。结论:PCOS患者的卵巢颗粒细胞中IRS-1和P38磷酸化表达水平升高,增强MAPK通路的活性,是导致PCOS患者IR发生的可能机制之一。Met抑制PCOS伴胰岛素抵抗患者的卵巢颗粒细胞P38和IRS-1磷酸化的表达,抑制P-P38和P-IRS-1对MAPK通路的负反馈作用,激活PI3K通路,改善IR状态。

关键词：多囊卵巢综合症颗粒细胞胰岛素受体底物-1 胰岛素抵抗

枸杞多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究

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枸杞多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究

作者：侯庆宁宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的采用高脂高糖饲料喂养8周加小剂量链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)腹腔注射的方法复制2型糖尿病大鼠模型,通过观察中药提取物枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱及肿瘤坏死因子-α(tumor ne... 详细信息

目的采用高脂高糖饲料喂养8周加小剂量链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)腹腔注射的方法复制2型糖尿病大鼠模型,通过观察中药提取物枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、骨骼肌组织胰岛素信号分子表达的影响,探讨其改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制,为枸杞多糖治疗2型糖尿病的临床应用提供实验依据,也为进一步认识、研究、开发利用枸杞多糖提供理论依据。方法将100只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(20只)和造模组(80只)2组,并分别给予常规饲料和高脂高糖饲料喂养。8周后,造模组的大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30mg/kg以诱导2型糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠成模后再随机分为5组:糖尿病模型组、高剂量LBP干预组、中剂量LBP干预组、低剂量LBP干预组及二甲双胍(Metformin,Met)干预组。高、中、低剂量LBP干预组及二甲双胍干预组的大鼠每只每日分别予以LBP160mg/kg、80mg/kg、40mg/kg及Met 250mg/kg灌胃(Intragastric,ig),正常对照组及糖尿病模型组的大鼠则每只每日予以等量的蒸馏水灌胃。造模成功时处死正常大鼠及糖尿病大鼠各6只,取血清测定空腹血糖、空腹胰岛素、TG及TC水平;计算胰岛素敏感指数(insulin sensitive index,ISI)及胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI);取胰腺组织行HE染色光镜观察。药物干预6周后,处死所有的动物,取血清测定空腹血糖、空腹胰岛素、TG、TC、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)及TNF-α水平;取后肢股四头肌组织,免疫组织化学方法检测骨骼肌组织胰岛素受体(Insulin receptor,InsR)和胰岛素受体底物-1(Insulin receptor substrate,IRS-1)的表达;电子显微镜观察骨骼肌组织超微结构的变化;取胰腺组织行HE染色光镜观察;计算ISI及IRI。结果本实验采用高脂高糖饮食加小剂量STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂、IRI较正常对照组明显升高,ISI显著降低,胰岛β细胞部分损伤,符合2型糖尿病发病特点及生化特征。糖尿病模型组血糖、IRI、TG、TC、血清FFA及TNF-α水平较正常对照组明显升高(P胰岛素水平无统计学差异(P>0.05)。低剂量LBP干预组上述各指标与糖尿病模型组相比均无统计学差异(P>0.05)。中剂量LBP干预组血糖、IRI及TC水平较糖尿病模型组明显降低(P胰岛素、TG、血清FFA及TNF-α水平无统计学差异(P>0.05)。高剂量LBP干预组血糖、IRI、TC、及血清FFA水平较糖尿病模型组明显降低(P胰岛素、TG及血清TNF-α水平无统计学差异(P>0.05)。二甲双胍干预组血糖、IRI、血清FFA及TNF-α水平较糖尿病模型组明显降低(P胰岛素、TG及TC水平无统计学差异(P>0.05)。光镜下,糖尿病模型组大鼠胰岛形态欠规则,胰岛数及岛内分泌细胞数减少,胰岛萎缩,部分细胞空泡变性;低剂量LBP干预组大鼠胰腺病理改变程度仍较重,中剂量LBP干预组、高剂量LBP干预组及二甲双胍干预组大鼠胰腺病理改变程度较糖尿病模型组有所减轻。电镜下,糖尿病模型组大鼠骨骼肌细胞的部分肌原纤维排列紊乱,部分线粒体肿胀、空泡变性,可见嵴断裂、溶解,部分毛细血管内皮细胞肿胀伴管腔狭窄;各药物干预组大鼠骨骼肌超微结构改变的程度较糖尿病模型组有所减轻。结论1、枸杞多糖能通过提高2型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性,实现降低血糖的作用。2、枸杞多糖可能并不通过降低血清TNF-α水平,改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗。3、枸杞多糖可能通过纠正2型糖尿病大鼠脂代谢紊乱,减轻胰岛素信号转导障碍,实现改善胰岛素抵抗,降低血糖的作用。4、枸杞多糖对2型糖尿病大鼠的胰腺有一定的保护作用。

关键词： 2型糖尿病枸杞多糖游离脂肪酸胰岛素受体胰岛素受体底物-1

白藜芦醇及雌二醇延缓STZ所致卵巢切除鼠糖尿病发生的分子机制研究

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白藜芦醇及雌二醇延缓STZ所致卵巢切除鼠糖尿病发生的分子机制研究

作者：李云霞兰州大学

学位级别：硕士

目的:糖尿病是一种复杂的代谢性疾病,近年来发病率明显升高,已成为仅次于肿瘤和心血管疾病的第三大健康杀手,因此糖尿病的防治研究成为目前的热点课题。雌激素与糖尿病发生密切相关,动物实验发现雄性动物比雌性动物更易患糖尿病,如果切... 详细信息

目的:糖尿病是一种复杂的代谢性疾病,近年来发病率明显升高,已成为仅次于肿瘤和心血管疾病的第三大健康杀手,因此糖尿病的防治研究成为目前的热点课题。雌激素与糖尿病发生密切相关,动物实验发现雄性动物比雌性动物更易患糖尿病,如果切除雌性动物卵巢,则患糖尿病的概率明显升高。流行病学调查显示男性比女性更易患糖尿病,绝经期妇女糖尿病的发病率明显升高,雌激素水平下降引起的胰岛素抵抗可能是糖尿病发生的原因之一。一些学者尝试用雌激素来预防和治疗糖尿病,并且取得一定的疗效,但后期的研究发现雌激素会增加乳腺癌和卵巢癌的发病风险,因此寻找副作用小且可延缓糖尿病发生的雌激素天然替代品越来越受到科研工作者的重视。白藜芦醇(Resveratrol,Res)是一种雌激素结构类似物,我室在以往的研究中探讨了白藜芦醇和17β-雌二醇(17β-estradiol,Est)对糖尿病小鼠体重、血糖、血清总抗氧化力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、血清丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、血清胰岛素水平和胰岛细胞的影响,发现白藜芦醇和17β-雌二醇对链脲佐菌素(Streptozotoci,STZ)诱导的卵巢切除小鼠糖尿病的发病有延缓和预防作用。本实验在原有实验的基础上,利用分子生物学技术探讨白藜芦醇和雌二醇对STZ所致糖尿病小鼠骨骼肌和心肌糖转运的影响及相关分子机制。方法:将雌性昆明小鼠卵巢切除后,随机分为8组,每组8只:卵巢切除组;腹腔注射STZ 50mg/kg体重组;注射STZ+0.1mg/kg体重Res组;注射STZ+1mg/kg体重Res组;注射STZ+10mg/kg体重Res组;注射STZ+0.01mg/kg体重Est组;注射STZ+0.1mg/kg体重Est组;注射STZ+1mg/kg体重Est组。Res和Est隔日皮下给药28天,颈椎脱臼处死小鼠,迅速切取骨骼肌和心肌组织。一部分组织放入液氮速冻之后在-80℃冰箱保存,以备进行Western Blot和RT-PCR实验;另一部分放入4%的多聚甲醛中固定,进行免疫组化实验。检测指标主要包括葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)和GLUT4 mRNA的表达。结果:根据免疫印迹和RT-PCR实验显示,与卵巢切除组相比,注射STZ的糖尿病模型组小鼠骨骼肌和心肌GLUT4蛋白和mRNA表达均明显减少(P素天然替代品。

关键词：白藜芦醇 17β-雌二醇 1型糖尿病葡萄糖转运蛋白4 胰岛素受体底物-1 磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶

妊娠期糖尿病患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4的表达及其与胰岛素抵抗的关系

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妊娠期糖尿病患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4的表达及其与胰岛素抵抗...

作者：王纯天津医科大学

学位级别：硕士

背景：妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)是指在妊娠期间首次发生或发现的葡萄糖耐量异常,是糖尿病的一种特殊类型。GDM增加了母儿并发症的发生率,且多数GDM患者最终将会发展为2型糖尿病。目前普遍认为妊娠期胰岛素抵抗... 详细信息

背景：妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)是指在妊娠期间首次发生或发现的葡萄糖耐量异常,是糖尿病的一种特殊类型。GDM增加了母儿并发症的发生率,且多数GDM患者最终将会发展为2型糖尿病。目前普遍认为妊娠期胰岛素抵抗(insulin resistanee, IR)是导致GDM发生、发展的主要机制。而胰岛素信号转导通路异常可以直接引起胰岛素抵抗,是胰岛素抵抗发生的病理基础。胰岛素抵抗在分子水平包括受体前,受体,受体后三个水平,目前研究发现正常足月妊娠和GDM患者在受体前和受体水平不存在差异,在受体后水平存在明显差异,胰岛素受体后缺陷在胰岛素抵抗的发生发展过程中起到关键的作用。胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate1, IRS-1)与葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter4, GLUT4)作为胰岛素信号通路中的重要受体后信号转导分子,在胰岛素抵抗环节中意义十分重要。目的：本实验通过对正常足月妊娠和GDM患者胎盘组织内IRS-1和GLUT4表达水平的研究,分析其与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗的关系,探讨其在GDM患者发病机制中的可能作用。方法：采用免疫组织化学方法(immunohistoehemistry, IHC)检测26例正常足月妊娠患者和30例GDM患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4蛋白的表达情况;生化指标：检测空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)水平;询问孕前体重,计算体质指数(Body mass index, BMI)采用胰岛素稳态模型评估法(homeostasis model assessment, HOMA)计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance, HOMA-IR)、胰岛β细胞功能(homeostasis model assessment of precentp-cell function, HOMA-β%)、胰岛素敏感指数(homeostasis model assessment of insulin sensitivity, HOMA-ISI);并统计分析相关资料。结果：1.两组孕妇年龄、孕周、孕产次、收缩压、舒张压进行比较,差异均无统计学意义(P>0.05),GDM患者孕前BMI高于对照组,差异有统计学意义(P胰岛素、甘油三酯、总胆固醇均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。GDM组GLUT4在细胞膜的表达阳性率为53.3%(16/30),对照组在细胞膜的阳性表达为率84.6%(22/26),差异有统计学意义(χ2=15.62,P胰岛素抵抗,GDM患者较正常妊娠妇女存在更为严重的胰岛素抵抗。IRS-1和GLUT4在正常妊娠胎盘组织的合体滋养层细胞中表达,说明二者参与正常妊娠生理过程。GDM

关键词：妊娠期糖尿病胰岛素抵抗胰岛素信号传导障碍胰岛素受体底物-1 葡萄糖转运蛋白4

长期酒精摄入对高脂喂养大鼠胰岛素敏感性及肝脏胰岛素信号传导关键分子的影响

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长期酒精摄入对高脂喂养大鼠胰岛素敏感性及肝脏胰岛素信号传导关...

作者：田利钺华中科技大学

学位级别：硕士

糖尿病是由于遗传和环境因素相互作用而引起的以血中葡萄糖水平长期增高为基本特征的代谢性疾病。以2型糖尿病发病广泛,对人类危害严重,常引起碳水化合物、蛋白质和脂肪代谢异常,出现血管、神经、心脏、肾脏等组织器官的严重并发症。胰... 详细信息

糖尿病是由于遗传和环境因素相互作用而引起的以血中葡萄糖水平长期增高为基本特征的代谢性疾病。以2型糖尿病发病广泛,对人类危害严重,常引起碳水化合物、蛋白质和脂肪代谢异常,出现血管、神经、心脏、肾脏等组织器官的严重并发症。胰岛素抵抗是2型糖尿病发病机制的重要环节并且是启动因素,贯穿于2型糖尿病的整个发生和发展过程中。胰岛素抵抗的机理已成为研究的热点,胰岛素信号传导被认为与此有关,但是其中的详细机理目前还不清楚。胰岛素与靶细胞膜表面受体结合后发生一系列级联反应,产生生物效应,这一过程中胰岛素信号的有效传导是先决条件,因此胰岛素信号传导途径中关键分子的数量、功能异常已经成为研究的重点。近年来,越来越多的流行病学研究结果提示长期不同剂量饮酒对胰岛素敏感性有着不同的影响:适量饮酒与胰岛素敏感性增强及2型糖尿病发病危险降低有关,而长期过量饮酒与胰岛素抵抗及2型糖尿病发病危险增加有关。我国是酒类生产消费大国,我国常年饮酒者的酒精摄入量占总能量的10%左右。并且随着人们生活水平逐年提高,我国居民膳食模式逐渐向西方发达国家模式转变,长期高脂饮食伴随着长期酒精摄入的现象屡见不鲜,因此,高脂饮食和酒精摄入对胰岛素敏感性影响及与2型糖尿病的相关研究具有现实的重要意义。肝脏是人体最大的内分泌器官,对胰岛素的信号传导、酒精和脂类的代谢起到重要的作用。本研究从探讨在长期高脂饮食状态下不同剂量酒精摄入对胰岛素敏感性影响入手,通过对肝脏胰岛素信号传导途径关键分子影响的探索来揭示其作用机制。目前关于长期高脂饮食状态下不同剂量酒精摄入对肝脏中胰岛素信号传导分子的表达或功能影响未见报道。目的:本实验借鉴2型糖尿病病因学的研究进展,通过整体动物实验,研究长期高脂饮食状态下不同剂量酒精摄入对大鼠胰岛素敏感性及肝脏组织胰岛素信号传导途径关键分子的影响,在肝脏的分子生物学水平揭示长期高脂饲料喂养下不同酒精摄入影响胰岛素敏感性的分子机制,为有效预防2型糖尿病提供科学依据。方法:清洁级雄性Wistar大鼠,随机分为七组:正常对照组、高脂对照组、高脂+5%酒精组、高脂+10%酒精组、高脂+20%酒精组、高脂+30%酒精组、高脂+40%酒精组。每日一次灌胃,每周测体重,13周后,断头处死大鼠,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平;测定空腹血糖(FPG)及血胰岛素(FINS)浓度,计算胰岛素抵抗指数(Homeostasis Model Assessment HOMA-IR)及HOMA-β功能指数(HOMAβ-cell index,HBCI)。提取肝脏总RNA,通过RT-PCR方法,测定肝脏胰岛素受体底物-1(IRS-1),磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)、葡萄糖转运体-2(GLUT-2)的mRNA表达水平。提取肝脏蛋白,通过western blotting的方法,测定PI-3K(p85α)、GLUT-2的蛋白表达水平。结果: 1.生长情况: (1)实验期间,各组大鼠体重呈上升趋势。 (2)高脂对照组与正常对照组相比体重明显增加(P胰岛素浓度、胰岛素抵抗指数、胰岛β细胞功能指数改变: (1)血糖浓度:高脂对照组与正常对照组相比无统计学差异。高脂+各酒精剂量组与正常对照组相比,均升高(P胰岛素浓度:高脂对照组与正常对照组相比明显升高(P胰岛素抵抗指数:高脂对照组与正常对照组相比明显升

关键词：酒精高脂胰岛素抵抗胰岛素受体底物-1 磷脂酰肌醇3激酶葡萄糖转运体-2

罗格列酮调控脓毒症大鼠空肠短肽载体PepT1表达的机制研究

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罗格列酮调控脓毒症大鼠空肠短肽载体PepT1表达的机制研究

作者：张斌兰州大学

学位级别：硕士

目的：研究罗格列酮在调控脓毒症大鼠空肠短肽载体(PepTl)表达中的作用及机制。方法：SD大鼠随机分为盲肠结扎穿刺组(CLP, C组)、假手术组(S组)、罗格列酮组R组)、罗格列酮+胰岛素组(RI组)、CLP+胰岛素组(CI组)和正常组(N组)。C、CI、S... 详细信息

目的：研究罗格列酮在调控脓毒症大鼠空肠短肽载体(PepTl)表达中的作用及机制。方法：SD大鼠随机分为盲肠结扎穿刺组(CLP, C组)、假手术组(S组)、罗格列酮组R组)、罗格列酮+胰岛素组(RI组)、CLP+胰岛素组(CI组)和正常组(N组)。C、CI、S组大鼠术前30分钟灌胃给予等量生理盐水;R、RI组CLP前30分钟灌胃给予罗格列酮;RI、CI组在CLP后152分钟经股静脉注射胰岛素;N组是正常大鼠,不给予任何干预。6组大鼠分别在术前30min和术后每30分钟测空腹血糖,在155分钟时取动脉血和近端空肠待检。测血和肠粘膜TNF-α浓度,同时行肠道组织病理学分析肠道损伤和炎症,用免疫组织化学显示肠道胰岛素受体分别情况,免疫印迹检测胰岛素受(IR-β)蛋白水平,免疫沉淀检测胰岛素受体底物(IRS-1)蛋白表达及其酪氨酸磷酸化水平,并用免疫印发法分析空肠PepTl表达。结果：1、罗格列酮明显降低CLP大鼠呼吸频率、血中性粒细胞;CLP术后血糖明显升高,30min、60min血糖明显高于S、R、N组(P

关键词：盲肠结扎穿刺胰岛素受体胰岛素受体底物-1 罗格列酮短肽载体

体外循环导致兔胰岛细胞胰岛素抵抗的发生及IRS-1的作用

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体外循环导致兔胰岛细胞胰岛素抵抗的发生及IRS-1的作用

作者：綦欣竹重庆医科大学

学位级别：硕士

目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass，CPB)中兔胰岛细胞胰岛素(insulin，INS)信号通路关键蛋白胰岛素受体底物-1(Insulinreceptor substrate-1，IRS-1)的变化，探讨CPB中胰岛细胞自身胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)发生的可能机制。方法健康新西兰兔35只，体重2.8±0.3kg，随机分为假手术组(Sham组，n=5)和体外循环组(CPB组，n=30)。Sham组不行CPB，CPB组行CPB。CPB中维持麻醉平稳。两组分别于麻醉后5min时(T0)、转流开始时(T1)、主动脉阻断时(T2)、主动脉开放5min、35min和75min时(T3)采集左股动脉血液，脱氢酶法测定血糖水平，放免法检测血浆INS和胰高血糖素(glucagon，GLC)水平，并计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index，IRI)评估IR程度。CPB组T0时各处死5只兔，取胰腺标本。采用免疫荧光标记和激光共聚焦技术检测胰岛INS、GLC和IRS-1的表达水平。结果(1)血浆生化指标：与T0比较，两组血糖和HOMA-IR T1时，血浆INS水平T2时显著升高(P胰岛荧光指标：与T0时比较，胰岛IRS-1表达T1时、胰岛GLC表达T3时显著下降(P胰岛INS表达T5时、胰岛IRS-1表达T2时显著增高(P胰岛GLC表达T3时显著下降(P胰岛INS表达T3时、胰岛IRS-1表达T4时，胰岛GLC表达T3时均显著降低(P胰岛INS表达T5时显著增高(P胰岛GLC表达T5时显著下降(P胰岛INS表达T5时显著增高(P胰岛INS/血糖、胰岛IRS-1/血糖和胰岛GLC/血糖T1时显著下降(P胰岛INS/血糖T3时、胰岛IRS-1/血糖T3时和胰岛GLC/血糖T3时显著下降(P胰岛INS/血糖和胰岛IRS-1/血糖T5时显著下降(P胰岛IRS-1/INS比值：与T0时比较，胰岛IRS-1/INS比值T1和T5时显著下降(P胰岛素抵抗，主动脉开放之后胰岛素抵抗程度达到峰值。(2)CPB下胰岛IRS-1表达相对不足，可导致β细胞发生胰岛素抵抗。(3)CPB中高血糖刺激胰高血糖素异常高分泌，可能是胰岛α细胞自身胰岛素抵抗的结果。

关键词：胰岛细胞体外循环胰岛素抗药性胰岛素受体底物-1 血糖

GSK-3抑制剂SB216763对多囊卵巢综合征颗粒细胞GSK-3、IRS-1表达的影响

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GSK-3抑制剂SB216763对多囊卵巢综合征颗粒细胞GSK-3、IRS-1表达...

作者：王圆圆青岛大学

学位级别：硕士

目的:多囊卵巢综合征(Polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一种较常见的女性生殖功能障碍性疾病,其发病相关因素以胰岛素抵抗(IR)为主。本实验通过研究糖原合成酶激酶-3(Glycogen synthase kinese-3,GSK-3)抑制剂SB216763对PCOS卵巢颗... 详细信息

目的:多囊卵巢综合征(Polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一种较常见的女性生殖功能障碍性疾病,其发病相关因素以胰岛素抵抗(IR)为主。本实验通过研究糖原合成酶激酶-3(Glycogen synthase kinese-3,GSK-3)抑制剂SB216763对PCOS卵巢颗粒细胞AKT/GSK-3通路的影响,探讨PCOS卵巢局部IR发生的可能机制。方法:收集本院因不孕而要求行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕,同时伴有PCOS患者的卵泡黄素化颗粒细胞(Granulosa cell,GC),行体外细胞培养(n=20),把每份颗粒细胞样本分别接种在两个培养瓶中,其中一个培养瓶中的细胞用GSK-3抑制剂SB216763处理,记为PCOS+IN组,未加抑制剂者记为PCOS组。另外收集因不孕而要求行IVF/ICSI-ET助孕,非PCOS患者的卵泡黄素化GC作为对照组,记为N-PCOS组(n=16)。采用蛋白免疫印迹试验(Western Blot试验)检测各实验组颗粒细胞中GSK-3、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β(Ser9))以及磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1(Ser312))表达情况。结果:t检验统计分析PCOS组与非PCOS组基本特征提示两组患者平均年龄(28±6)、不孕年限、体重指数(BMI)、基础雌二醇(bE2)、卵泡刺激素(bFSH)、泌乳素(bPRL)、Gn启动量、Gn总用量均无明显差异(P>0.05)。PCOS组的基础促黄体生成激素(bLH)、睾酮(bT)、获卵数明显高于N-PCOS组(P素方差分析示PCOS组患者颗粒细胞中GSK-3、p-GSK-3β(Ser9)表达量较N-PCOS组低,而p-IRS-1(Ser312)表达量较N-PCOS组高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:PCOS患者与非PCOS患者相比,其卵巢颗粒细胞中p-GSK-3β表达量降低,表现为AKT/GSK-3途径活性的增强;卵巢颗粒细胞中IRS-1/MAPK途径与AKT/GSK-3途径存在一定的相互联系,GSK-3抑制剂SB216763使用后可使颗粒细胞中GSK-3的活性减弱,降低p-IRS-1的表达,在一定程度上抑制MAPK通路的活化对糖代谢途径的负反馈作用,改善卵巢局部IR,为临床治疗提供科学的靶向点。

关键词：多囊卵巢综合征颗粒细胞抑制剂糖原合成酶激酶-3 胰岛素受体底物-1

肝细胞脂肪变性模型的建立及TNF-α和胰岛素对该模型的影响机制初探

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肝细胞脂肪变性模型的建立及TNF-α和胰岛素对该模型的影响机制初...

作者：李世清重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:分别应用不同浓度的油酸、软脂酸、前两者混和物、乙醇作用于肝癌细胞HepG2,建立肝细胞脂肪变性的细胞模型。方法:通过MTT比色试验法来确定最适游离脂肪酸(FFA)、乙醇的浓度,作用于HepG2细胞,建立肝细胞脂肪变性的细胞模型。采用油... 详细信息

目的:分别应用不同浓度的油酸、软脂酸、前两者混和物、乙醇作用于肝癌细胞HepG2,建立肝细胞脂肪变性的细胞模型。方法:通过MTT比色试验法来确定最适游离脂肪酸(FFA)、乙醇的浓度,作用于HepG2细胞,建立肝细胞脂肪变性的细胞模型。采用油红O染色观察游离脂肪酸、乙醇处理后细胞内脂肪滴变化情况;利用细胞裂解液裂解细胞,酶偶联比色法测定细胞内的甘油三酯(TG)含量,并应用重氮试剂比色法测定细胞上清液中的γ-GT泄露量。结果: 0.05mM、0.10mM、0.25mM、0.35mM等浓度的油酸,0.10mM油酸+20U软脂酸、0.25mM油酸+10U软脂酸在作用于肝细胞1天后;而5U、10U、20U、30U等浓度的软脂酸,0.6%、1.2%、1.4%、1.6%等浓度的乙醇在作用于肝细胞4天后,均可造成肝细胞内脂质代谢紊乱,油红O染色后光镜下显示,在细胞内出现明显的脂质堆积,橘红色脂肪滴数量明显增多;细胞内TG和细胞上清液中的γ-GT泄露量增加,并随脂肪酸,乙醇浓度升高而递增。结论:用单纯油酸、软脂酸、混和酸、乙醇均可以造成肝细胞脂肪变性,从而成功建立肝细胞脂肪变性的细胞模型。

关键词：游离脂肪酸乙醇脂肪变性体外模型肿瘤坏死因子-α 肥胖性脂肪肝酒精性脂肪肝高胰岛素血症胰岛素受体底物-1 肿瘤坏死因子-α 高胰岛素血症