检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛干细胞研究进展

基础医学与临床 2002年第5期22卷 397-403页

作者：杨锋张世馥中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所北京100005

胰岛干细胞移植是治疗糖尿病的一条新途径 ,它可避免胰岛移植治疗糖尿病所面临的胰腺供体匮乏及长期使用免疫抑制剂而产生严重副作用的问题。本文将对有关胚胎干细胞及成体干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞 ,胰岛干细胞的分子标志。

关键词：胰岛干细胞糖尿病胰岛素分泌细胞临床应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛干细胞的研究现状与展望

西安交通大学学报（医学版） 2005年第5期26卷 409-412页

作者：施秉银西安交通大学第一医院内分泌科陕西西安710061

详细介绍了胚胎干细胞和成体干细胞向胰岛干细胞转化的诱导分化方法及可能途径,用于胰岛干细胞鉴定的基因分子标志及胰岛干细胞促分化因子。并简要介绍了胰岛干细胞治疗糖尿病的研究现状及存在的问题。

关键词：胰岛干细胞胰岛移植糖尿病

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛干细胞分离及诱导分化的实验研究

中国现代医学杂志 2014年第8期24卷 40-45页

作者：陈自力孙诚谊潘耀振陈玲肖宏枝贵阳医学院附属医院肝胆外科贵州贵阳550001

目的①比较两种不同的分离方法在胰岛干细胞分离过程中的效果差异。②探讨维甲酸(Retinoic Acid)联合活化素A(Activin A)在胰岛干细胞诱导分化过程中的价值。方法随机分组比较麻醉状态下消化酶原位灌注法和离体机械消化法在胰岛干细胞... 详细信息

目的①比较两种不同的分离方法在胰岛干细胞分离过程中的效果差异。②探讨维甲酸(Retinoic Acid)联合活化素A(Activin A)在胰岛干细胞诱导分化过程中的价值。方法随机分组比较麻醉状态下消化酶原位灌注法和离体机械消化法在胰岛干细胞分离过程中的效果差异;将分离出的胰岛干细胞进行贴壁培养,培养过程中加入维甲酸及活化素A做为实验组,取不加维甲酸﹑活化素A及加入高糖的培养液作为实验对照组,通过观察细胞生长状态及绘制细胞生长曲线来分析该处理因素对胰岛干细胞的影响,从而了解其在胰岛干细胞分离及分化过程中的价值。结果①麻醉状态下原位灌注消化法消化酶用量小,消化彻底,巢蛋白(Nestin)阳性细胞率高。②维甲酸联合活化素A明显地促进Nestin阳性细胞呈簇状生长,并形成类胰岛样细胞团;通过免疫组织化学染色鉴定发现胰岛样细胞团中心部位胰岛素抗体阳性细胞及周围区域胰高血糖素抗体阳性细胞数明显增多,通过记录类胰岛细胞团形成时间,维甲酸及活化素A组明显短于高糖组及空白组,差异具有统计学意义(P胰岛干细胞分离过程中尽量减少对细胞的机械破坏,分化过程中联合应用维甲酸及活化素A明显地促进Nestin阳性细胞呈簇状生长,形成类胰岛样细胞团,为体外获得大量的胰岛细胞从而解决移植细胞来源的难题提供了可能。

关键词：胰岛干细胞糖尿病诱导分化分离培养

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛移植及胰岛干细胞研究进展

中国医学科学院学报 2003年第1期25卷 83-87页

作者：郭希民王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100850

本文综述了近年来胰岛移植相关研究的进展,包括胰岛的分离、纯化、培养、冷冻保存和免疫隔离;同时还介绍了胰岛组织干细胞以及诱导胚胎干细胞分化为胰岛的最新进展,在对胰岛移植治疗糖尿病的现状及研究发展趋势进行全面分析的基础上,笔... 详细信息

本文综述了近年来胰岛移植相关研究的进展,包括胰岛的分离、纯化、培养、冷冻保存和免疫隔离;同时还介绍了胰岛组织干细胞以及诱导胚胎干细胞分化为胰岛的最新进展,在对胰岛移植治疗糖尿病的现状及研究发展趋势进行全面分析的基础上,笔者认为异体胰岛移植是当前I型糖尿病治疗的重要手段之一,而胰岛干细胞移植则是未来糖尿病治疗的趋势。

关键词：糖尿病胰岛移植胰岛干细胞

血管内皮生长因子基因在人胚胎胰岛干细胞中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2011年第2期28卷 203-205页

作者：吴建臣李胜文关云谦沈海山税朝祥王尧尧管德林清华大学第一附属医院泌尿中心北京100016 北京老年病医疗研究中心清华大学第一附属医院中心实验室北京100016

目的构建含血管内皮生长因子（VEGF）基因的慢病毒载体,转染人胚胎来源的胰岛干细胞（hPSC）,探讨VEGF在胰岛干细胞中的体外表达水平及其影响因素.方法将VEGF基因克隆入慢病毒载体,利用293T细胞包装出病毒,按拷贝数分别为2、5、10转... 详细信息

目的构建含血管内皮生长因子（VEGF）基因的慢病毒载体,转染人胚胎来源的胰岛干细胞（hPSC）,探讨VEGF在胰岛干细胞中的体外表达水平及其影响因素.方法将VEGF基因克隆入慢病毒载体,利用293T细胞包装出病毒,按拷贝数分别为2、5、10转染胰岛干细胞,测定不同转染组VEGF的分泌水平.结果含VEGF的病毒上清可以在体外培养条件下成功转染胰岛干细胞,经潮霉素筛选3 d后,对照组及拷贝数分别为2、5、10的转染组每1×106个细胞每小时VEGF的分泌量分别为（60.3±13.4）、（1622.0±302.0）、（2270.0±340.0）、（3090.0±465.0）ng/L.对照组与转染组间（P＜0.05）以及各转染组之间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论含VEGF的慢病毒载体可以成功转染人胚胎来源的胰岛干细胞,使其持续高表达VEGF,通过改变转染拷贝数可在一定水平上控制VEGF的分泌水平.

关键词：血管内皮生长因子胰岛干细胞转染

大鼠胰岛干细胞和胰腺导管干细胞分化潜能的比较研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠胰岛干细胞和胰腺导管干细胞分化潜能的比较研究

作者：翟岩辉广东海洋大学

学位级别：硕士

胰腺干细根据是一类存在于胎儿和成体胰腺组织中的成体干细胞,能够自我更新,并具有向三胚层细胞分化的潜能。根据在胰腺组织中的存在部位不同,胰腺干细胞分为三类,其中,存在于胰岛部位的干细胞称为胰岛干细胞,存在于导管部位的干细胞称... 详细信息

胰腺干细根据是一类存在于胎儿和成体胰腺组织中的成体干细胞,能够自我更新,并具有向三胚层细胞分化的潜能。根据在胰腺组织中的存在部位不同,胰腺干细胞分为三类,其中,存在于胰岛部位的干细胞称为胰岛干细胞,存在于导管部位的干细胞称为胰腺导管干细胞,存在于腺泡部位的干细胞则称为腺泡干细胞。胰腺干细胞能用于探讨动物和人胰腺组织细胞的生长发育,还能作为种子细胞并诱导分化形成功能性胰岛移植治疗糖尿病,具有重要的意义。但是,有关胰岛干细胞和胰腺导管干细胞分化潜能特别是分化形成功能性胰岛的比较研究未见报道。本实验室已从成年大鼠胰岛、胰腺导管组织分离培养大鼠胰岛干细胞系和胰腺导管干细胞系,并对其形态学特征、生物学表达特性、细胞周期、细胞核型等进行了研究,但是,有关这两个干细胞系的多分化潜能还有待于研究。本研究以实验室现有的大鼠胰岛干细胞系和胰腺导管干细胞系为材料,拟体外定向诱导其分化形成神经细胞、成骨细胞、脂肪细胞及胰岛细胞并进行比较,为证实这两个干细胞系具有多分化潜能,为进一步筛选出易分化形成功能性胰岛的干细胞系提供依据。研究的主要内容包括:(1)诱导大鼠胰岛干细胞、胰腺导管干细胞分化形成神经样细胞的比较研究本研究体外定向诱导大鼠胰岛干细胞、胰腺导管干细胞分化形成神经细胞,并对两种细胞诱导分化能力进行比较。以随机解冻大鼠胰岛干细胞、胰腺导管干细胞为材料,采用RPMI-1640+15%NBS培养液扩增培养,待细胞生长至80%融合,进行诱导试验。试验共分3组,每组胰岛干细胞、胰腺导管干细胞各1块板,各6个重复。试验1组添加β-巯基乙醇诱导液;试验2组添加大鼠全脑组织提取液诱导液;对照组添加H-DMEM+10%NBS,诱导培养8d,每隔4h观察细胞。根据细胞形态变化,筛选诱导效果较好的诱导液。在此基础上,进一步探讨筛选出诱导液不同浓度的诱导效果。随机选择胰岛干细胞、胰腺导管干细胞扩增培养,待细胞生长至80%融合后,开始诱导试验。试验共分4组,每组胰岛干细胞、胰腺导管干细胞各1块板,各6个重复。试验1组添加5mg/m L大鼠全脑组织提取液诱导液;试验2组添加10mg/m L大鼠全脑组织提取液诱导液;试验3组添加15mg/m L大鼠全脑组织提取液诱导液;对照组添加H-DMEM+10%NBS,连续诱导8d,每隔2d观察细胞。根据细胞形态变化,筛选诱导效果较好的浓度。最后,探讨优化诱导液对两种干细胞分化形成神经细胞的影响。随机选择胰岛干细胞、胰腺导管干细胞按照1×105个/cm2密度做细胞爬片,待细胞生长至80%融合,开始诱导试验。每组胰岛干细胞、胰腺导管干细胞各1块板,各6个重复。试验组添加5mg/m L大鼠全脑组织提取液诱导液;对照组添加H-DMEM+10%NBS,连续诱导8d,每隔2d观察细胞。试验结束时,对两种诱导后细胞进行NSE免疫荧光染色。结果显示,不同诱导液诱导结果中大鼠脑组织提取液处理组诱导两种干细胞分化形成神经细胞效果明显。诱导细胞神经元突触明显,相互细胞突触间发生联系;添加β-巯基乙醇处理组诱导细胞未见神经样变化。添加不同浓度大鼠脑组织提取液诱导结果显示5mg/m L脑组织提取液处理组效果最明显,胰岛干细胞诱导阳性率为75%,胰腺导管干细胞阳性率为40%。优化诱导液诱导细胞结果显示胰岛干细胞诱导细胞形态变化更清楚、完整,细胞由多边形向不规则的锥形或是星形转变,干细胞日益成熟,细胞体进行收缩,折光性增强。最后形成完整的神经样结构。NSE免疫荧光反应,两种干细胞胞浆都出现阳性表达,胰岛干细胞阳性表达率更高。综上,胰岛干细胞比胰腺导管干细胞更易分化形成神经样细胞。(2)诱导大鼠胰岛干细胞、胰腺导管干细胞分化形成成骨细胞的比较研究本研究体外定向诱导大鼠胰岛干细胞、胰腺导管干细胞分化形成成骨细胞,并对两种细胞诱导分化能力进行比较。以随机解冻胰岛干细胞、胰腺导管干细胞为材料,采用RPMI-1640+15%NBS培养液扩增培养,待细胞生长至80%融合,开始诱导试验。试验共分3组,每组胰岛干细胞、胰腺导管干细胞各1块板,各6个重复。试验1组添加0.1umol/L地塞米松、10mmol/Lβ-磷酸甘油、50ug/m L抗坏血酸盐组成的诱导液;试验2组添加8mg/m L大鼠脑灰质组织提取液诱导液;对照组添加RPMI-1640+10%NBS,连续诱导28d,每隔2d观察细胞。根据细胞形态的变化,筛选出诱导效果较好的诱导液。在此基础上,进一步探讨优化的诱导液对分化细胞形成骨盐能力的影响。随机选择胰岛干细胞、胰腺导管干细胞扩增培养,待细胞生长至80%融合,开始诱导试验。每组胰岛干细胞、胰腺导管干细胞各1块板,各6个重复,试验组添加由0.1umol/L地塞米松、10mmol/Lβ-磷酸甘油、50ug/m L抗坏血酸盐组成的诱导液;对照组添加RPMI-1640+10%N

关键词：胰岛干细胞胰腺导管干细胞分化神经细胞成骨细胞脂肪细胞 β细胞大鼠

大鼠胰岛干细胞分化形成类胰岛β细胞体外诱导方法的建立

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠胰岛干细胞分化形成类胰岛β细胞体外诱导方法的建立

作者：郎贯存广东海洋大学

学位级别：硕士

胰岛干细胞(Pancreatic islet stem cells,PISC)是一类成体干细胞(Adult stem cells,ASC),在胎儿与成体胰腺组织内分布,其能够自我更新与多向分化,被当做体外β细胞再生的高品质细胞源,并且可提供材料给体外胰岛细胞移植。现今依然存在... 详细信息

胰岛干细胞(Pancreatic islet stem cells,PISC)是一类成体干细胞(Adult stem cells,ASC),在胎儿与成体胰腺组织内分布,其能够自我更新与多向分化,被当做体外β细胞再生的高品质细胞源,并且可提供材料给体外胰岛细胞移植。现今依然存在体外诱导胰腺干细胞分化为功能性胰岛的研究难题,诱导形成的类胰岛细胞对葡萄糖(Glucose,GLU)的反应性低,诱导程序复杂,不足以在临床应用等。本课题组现已自成年大鼠胰岛组织内分离培养得到1例大鼠PISC系,并对其形态、核型、多谱系潜能以及特异性基因表达等方面进行了研究。基于此,本项研究逐一对比NIC、Vit D3与INGAP单因子诱导大鼠PISC分化为胰岛β细胞的表现,并筛选出INGAP、Vit D3和NIC的最适诱导浓度;然后以INGAP、Vit D3和NIC的最适诱导浓度随机组合建立联合诱导方案。通过细胞形态观察、DTZ染色、重要转录因子的表达以及糖刺激试验系统分析INGAP、Vit D3和NIC单独及联合诱导下对大鼠胰岛干细胞分化形成胰岛β细胞的影响,筛选最为适宜的诱导途径。此项研究由下述4部分内容构成:试验一:INGAP体外诱导大鼠胰岛干细胞分化形成胰岛β细胞此项研究经由INGAP对大鼠PISC施以体外定向诱导,使其分化为胰岛β细胞,同时对比各诱导组,筛选INGAP的最适浓度。培养且扩增第20代大鼠PISC,向12孔板内接种(各孔皆为1×10个),所接种的12孔板合计15个,扩增PISC至单层,启动诱导试验。对于此项试验,共安排对照组1个、INGAP诱导组4个,各组12孔板量皆为3个,各组重复皆为36个。对照组使用基础培养液(DMEM-F12+10%FBS+1%青霉素-链霉素);试验组,向基础培养液内加入各浓度水平INGAP,试验1组添加100n M INGAP;试验2组添加150n M INGAP;试验3组添加200n M INGAP;试验4组添加250n M INGAP。连续诱导28d,借助倒置显微镜,每3d查看1次细胞生长情况,同时分别于0d、1w、2w、3w、4w时拍照记录。此外,通过DTZ染色、q PCR、细胞免疫荧光和糖刺激试验检测诱导28d后细胞的特性、Insulin和Pdx1 mRNA的表达水平、细胞内胰岛素和Pdx1的蛋白表达以及胰岛素和C肽的分泌量。结果显示:100n M、150n M、200n M和250n M INGAP均能诱导大鼠胰岛干细胞向胰岛β样细胞分化,其中以150n M INGAP诱导组产生的类胰岛细胞团最多,细胞团的形态更完整;诱导4w时,4个诱导组分化为类胰岛细胞团,经DTZ染色显示阳性;q PCR测定每个处理组Pdx1与Insulin mRNA表达量,发现皆有所提高,就细胞Insulin mRNA表达量而言,与100n M与250n M这2个浓度相比,INGAP(150n M)诱导组皆为极显著升高表现(P细胞Pdx1 mRNA表达量上,相较INGAP 100n M、200n M与250n M这3个浓度,150n M为显著偏高表现(P胰岛β细胞,最适浓度为150n M。试验二:Vit D3体外诱导大鼠胰岛干细胞分化形成胰岛β细胞此项研究经由Vit D3对大鼠PISC施以体外定向诱导,使其分化为胰岛β细胞,同时对比各诱导组,筛选Vit D3的最适浓度。培养且扩增第20代大鼠PISC,向12孔板内接种(各孔皆为1×10个),所接种的12孔板合计15个,扩增PISC至单层,启动诱导试验。对于此项试验,共安排对照组1个、Vit D3诱导组4个,各组12孔板量皆为3个,各组重复皆为36个。对照组使用基础培养液(DMEM-F12+10%FBS+1%青霉素-链霉素);试验组在基础培养液中添加不同浓度的Vit D3,试验1组添加10mol/L Vit D3;试验2组添加10mol/L Vit D3;试验3组添加10mol/L Vit D3;试验4组添加10mol/L Vit D3。连续诱导28d,每3d查看1次细胞生长情况,同时分别于0d、1w、2w、3w、4w时拍照记录。此外,通过DTZ染色、q PCR、细胞免疫荧光和糖刺激胰岛素分泌试验检测诱导28d后细胞的特性、Insulin和Pdx1 mRNA的表达水平、细胞内胰岛素和Pdx1的蛋白表达以及胰岛素和C肽的分泌量。结果显示:10mol/L、10mol/L、10mol/L和10mol/L Vit D3处理组均能诱导胰岛干细胞分化形成胰岛β细胞。诱导4w时,4个处理组DTZ染色皆显示阳性,q PCR测定不同处理组细胞Pdx1与Insulin mRNA表达量,发现皆有所提高。不同处

关键词：胰岛干细胞 β细胞 INGAP Vit D3 NIC 诱导分化大鼠

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛干细胞研究的回顾与进展

河南职工医学院学报 2012年第1期24卷 122-125页

作者：陈建伯郑州市第一人民医院普外科郑州450000

胰岛细胞移植治疗糖尿病已受到供体不足的严重制约。科研人员多年来致力于胰岛干细胞的研究,希望通过胰岛干细胞的体外培养扩增及体内移植来解决胰岛细胞供应不足的问题,开辟了一条治疗糖尿病的新途径。要想进行胰岛干细胞的体外培养扩... 详细信息

胰岛细胞移植治疗糖尿病已受到供体不足的严重制约。科研人员多年来致力于胰岛干细胞的研究,希望通过胰岛干细胞的体外培养扩增及体内移植来解决胰岛细胞供应不足的问题,开辟了一条治疗糖尿病的新途径。要想进行胰岛干细胞的体外培养扩增及体内移植就必须首先明确胰岛干细胞的特异性标志物。其次要掌握将相关干细胞诱导分化为胰岛干细胞或胰岛素分泌细胞的方法和技术。

关键词：干细胞胰岛干细胞诱导分化糖尿病

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛干细胞的体外培养和生长特性

解剖科学进展 2003年第1期9卷 46-48页

作者：姚忠祥秦茂林周德山第三军医大学组胚教研室重庆400038

无论是Ⅰ型还是Ⅱ型糖尿病 ,成功应用组织细胞移植进行治疗的主要障碍之一是能产生胰岛素的胰岛组织来源极其困难。传统观念认为胰岛 β细胞在出生后就不能新生 ,但近年的研究显示 ,胰腺通过胰岛 β细胞功能变化和细胞量的增加或减少来... 详细信息

无论是Ⅰ型还是Ⅱ型糖尿病 ,成功应用组织细胞移植进行治疗的主要障碍之一是能产生胰岛素的胰岛组织来源极其困难。传统观念认为胰岛 β细胞在出生后就不能新生 ,但近年的研究显示 ,胰腺通过胰岛 β细胞功能变化和细胞量的增加或减少来维持血糖浓度局限于一个狭窄的生理范围内。现在的观念认为 ,成年机体的胰岛管组织能在体外培养条件下快速增殖 ,并转变为具有多向分化潜能的胰岛干细胞 ,进而能分化形成胰岛 β细胞。最近 ,特别是在小鼠和人的胰岛干细胞的体外培养、生成分化方面取得了一些进展。

关键词：胰岛干细胞体外培养生长特性细胞培养